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灰毛豆种子甲醇提取物对黑肩绿盲蝽成虫的安全性



全 文 :
第 37 卷第 5期 湖南农业大学学报(自然科学版) Vol.37 No.5
2011年 10月 Journal of Hunan Agricultural University (Natural Sciences) Oct.2011
DOI:10.3724/SP.J.1238.2011.00503
灰毛豆种子甲醇提取物对黑肩绿盲蝽成虫的安全性
李冠华 1, 2,刘双清 2,曹杨 1,曾东强 3,李有志 1*
(1.湖南农业大学 生物安全科学技术学院,湖南 长沙 410128;2.植物病虫害生物学与防控湖南省重点实验室,湖
南 长沙 410128;3.广西大学 农药与环境毒理研究所,广西 南宁 530005)

摘 要:为评价灰毛豆种子甲醇提取物对白背飞虱天敌黑肩绿盲蝽的安全性,比较了提取物对黑肩绿盲蝽成虫
和白背飞虱 3龄若虫的杀虫毒力,测定了提取物对黑肩绿盲蝽成虫存活时间和捕食功能的影响。结果表明,提取
物对黑肩绿盲蝽成虫的毒力远低于对白背飞虱 3龄若虫的毒力,处理后 48 h 的 LC50值分别为 298.8和 16.3 mg/L;
用 10 mg/L的提取物处理后,黑肩绿盲蝽成虫对白背飞虱 3龄若虫密度变化的功能反应符合 Holling−II功能反应
模型,处理后第 1 天的捕食能力增强,第 2、3 天捕食能力逐日下降;黑肩绿盲蝽成虫接触提取物后,存活时间
为 13.3 d,显著低于未接触提取物的存活时间 21.3 d。综合试验结果,灰毛豆种子甲醇提取物对黑肩绿盲蝽成虫
不安全。
关 键 词:灰毛豆种子;甲醇提取物;黑肩绿盲蝽;功能反应;安全性评价
中图分类号:S482.3+9 文献标志码:A 文章编号:1007−1032(2011)05−503−04

Safety evaluation of the methanol extracts from Tephrosia purpurea seeds
on the adults of Crytorrhinus levidipennis
LI Guan-hua1, 2, LIU Shuang-qing2, CAO Yang1, ZENG Dong-qiang3, LI You-zhi1*
(1.College of Biosafety Science and Technology, Hunan Agricultural University, Changsha 410128,China; 2. Hunan
Provincial Key Laboratory for Biology and Control of Plant Diseases and Insect Pests, Changsha 410128, China; 3. Institute
of Pesticide and Environmental Toxicology, Guangxi University, Nanning 530005, China)

Abstract: In order to evaluate the safety of the methanol extracts from Tephrosia purpurea seeds on Crytorrhinus
levidipennis adult, the insecticidal toxicity of the extracts were determined against C. levidipennis adult and the third
instar nymph of Sogatella furcifera, the surviving period and function response to the third instar nymph of S.furcifera
of C. levidipennis adult after exposure to the extracts at the dosage of 10.0 mg/L were studied. The results showed that
the insecticidal activity of the extracts against the C. levidipennis adult was lower than that against the third instar
nymph of S. furcifera, with respective LC50 value being 298.8 and 16.3 mg/L at 48 h after exposure to the extracts. The
function response model belonged to Holling-II type. After exposure to the extracts, the parameters of model changed,
in the first day the predatory capacity of the natural enemy was enhanced, and then gradually declined in the second
and the third day; the surviving time of the natural enemy after exposure to the extracts was significantly shortened
from 21.3 d to 13.3 d. Thus the extract is not safe to C. levidipennis.
Key words: Tephrosia purpurea seeds; the methanol extracts; Crytorrhinus levidipennis; functional response; safety
evaluation


收稿日期:2011−02−25
基金项目:国家自然科学基金项目(31071715);教育部博士点新教师基金项目(20094320120002);湖南省教育厅青年基金项目(09B048,
CX2010B297)
作者简介:李冠华(1976—),女,湖南耒阳人,硕士研究生,农艺师,主要从事植物源杀虫剂研究,lgh202@126.com;*通信作者,
liyouzhi2008@sina.com


504 湖南农业大学学报(自然科学版) http://www.hnndxb.com 2011年 10月

植物源杀虫剂为植物次生代谢产物,易降解为无
毒化合物,被认为对天敌等非靶标生物影响较小[1−2],
但对于数量庞大且结构复杂多样的植物次生代谢产
物尚无可靠的、全面的试验数据证明其对害虫天敌
是安全的。灰毛豆(Tephrosia purpurea)含有鱼藤酮类
杀虫化合物[3−6],笔者研究灰毛豆种子甲醇提取物对
稻田害虫天敌黑肩绿盲蝽(Crytorrhinus levidipennis
Reter)成虫捕食能力的影响,探讨植物源成分对天
敌的安全性,以期为灰毛豆植物的合理开发利用提
供依据。
1 材料与方法
1.1 材 料
灰毛豆种子采集自湖南省江永县。
白背飞虱(Sogatella furcifera)于室内用水稻苗
继代饲养(温度(28±1) ℃,相对湿度(75±5)%),以 3
龄若虫作试虫;采集田间黑肩绿盲蝽若虫,于室内
饲养,用进入成虫期 24~48 h的成虫作试虫。
1.2 方 法
1.2.1 灰毛豆种子甲醇提取物的制备
灰毛豆种子阴干后烘干(温度(55±1)℃),粉碎
后过孔径 635 µm筛,称取干粉,用约 5倍质量的
甲醇冷浸 72 h过滤。共浸提 3次,合并滤液后减
压浓缩。蒸干溶剂,得种子稠膏提取物。保存于冰
箱备用。
1.2.2 灰毛豆种子甲醇提取物生物活性的测定
1) 对白背飞虱和黑肩绿盲蝽的触杀作用。 采
用药膜法[7],每处理 30头虫,重复 3次,分别于处
理后 48 h统计活虫数。
2) 对黑肩绿盲蝽成虫捕食白背飞虱功能反应
的影响。将黑肩绿盲蝽成虫分为 2组,一组未接触
提取物,另一组接触 10.0 mg/L的提取物(采用药膜
法)。用吸虫管将羽化 24~48 h 的黑肩绿盲蝽成虫
吸入直径为 3 cm 的玻璃管内,玻璃管两端用纱布
密封。待黑肩绿盲蝽成虫在 26 ℃的环境条件下饥
饿 4 h后,将 1株孕穗期的水稻苗(根部包棉花蘸水
保湿)放入玻璃管内,再将发育一致的白背飞虱 3
龄若虫转入玻璃管内,飞虱量分别为 1、3、5、8、
15、30和 40头[8−9]。接入飞虱后 1、2、3 d后统计
每管飞虱活虫数,并及时补充到原来的虫口密度。
重复 3次。
3) 对黑肩绿盲蝽成虫存活时间的影响。分别统
计各玻璃管内黑肩绿盲蝽成虫的存活天数,在存活
期内每天及时补充饲料和保湿的水分。
1.3 数据处理
生物测定毒力回归方程的拟合使用 DPS 软件
(Version 9.5);功能反应数据参照文献[9−10],对功
能反应的结果用最小二乘法拟合Holling圆盘方程,
拟合结果用 F和 χ2检验;两组数据之间的比较通过
t测验。 Holling圆盘方程 Na=a×N0/(1+a×Th×N0),
式中:Na为捕食量,N0为猎物密度,a为瞬时攻击
率,Th为处理猎物时间。
2 结果与分析
2.1 灰毛豆种子甲醇提取物对白背飞虱和黑肩绿
盲蝽的触杀活性
灰毛豆种子甲醇提取物处理白背飞虱 3龄若虫
和黑肩绿盲蝽成虫,48 h的 LC50值分别为 16.4和
298.8 mg/L,提取物对黑肩绿盲蝽成虫的毒力较白
背飞虱低。选择毒力系数为 18.1,说明提取物在黑
肩绿盲蝽和白背飞虱之间有较好的选择作用。
表 1 灰毛豆种子甲醇提取物对白背飞虱和黑肩绿盲蝽的毒力
Table 1 Toxicity of the methanol extracts of T. purpurea seeds against C. levidipennis adult and the third instar nymph of
S. furcifera at 48 h after treatment
试 虫 毒力回归方程 LC50及其 95%置信限/(mg·L−1) 卡方值
白背飞虱 y=2.98+1.66x 16.3(11.6~21.4) 0.793 7
黑肩绿盲蝽 y=-1.07+2.45x 298.8(196.8~376.0) 0.990 6


第 37卷第 5期 李冠华等 灰毛豆种子甲醇提取物对黑肩绿盲蝽成虫的安全性 505

2.2 灰毛豆种子甲醇提取物对黑肩绿盲蝽成虫捕
食白背飞虱功能反应的影响
图 1结果显示,黑肩绿盲蝽成虫捕食白背飞虱
3 龄若虫的数量与白背飞虱的密度呈负加速曲线关
系,符合 Holling−II 功能反应模型:即在本试验设
计密度范围内,黑肩绿盲蝽的捕食量随白背飞虱密
度的增大而增大,当白背飞虱密度达到一定限度
时,捕食量会趋于稳定,提取物能刺激黑肩绿盲蝽
兴奋,使其捕食能力增强。
0
2
4
6
8
1 8 15 22 29 36 43 50
每管白背飞虱的虫口密度/头


绿











/头
接触灰毛豆甲醇提取物
未接触灰毛豆甲醇提取物

图 1 灰毛豆种子甲醇提取物对黑肩绿盲蝽成虫捕食白背
飞虱 3龄若虫功能反应的影响
Fig.1 Effect of the methanol extracts from T. purpurea seeds on
function response of C.levidipennis adult to the third instar
nymph of S. furcifera (24 h)
从第 1天的结果(表 2)来看,未接触提取物的黑
肩绿盲蝽成虫捕食 1头白背飞虱 3龄若虫的处理时
间为 0.065 d,瞬时攻击率为 0.167,而接触提取物
的黑肩绿盲蝽成虫捕食 1头白背飞虱的处理时间为
0.042 d,瞬时攻击率为 0.283。由于接触提取物的
黑肩绿盲蝽处理 1头白背飞虱的处理时间缩短,瞬
时攻击率提高,接触提取物的黑肩绿盲蝽成虫在处
理后第 1 天的日最大捕食量理论值(23.8 头)大于未
接触提取物的日最大捕食量理论值(15.3头)。
综合第 1、2、3 天结果来看,接触提取物后,
黑肩绿盲蝽成虫的瞬时攻击率逐日下降,处理 1头
飞虱的时间逐日延长,日最大捕食量理论值逐日下
降;未接触提取物的黑肩绿盲蝽的日最大捕食量理
论值、瞬时攻击率和处理时间均变化不大。造成这
种结果的原因可能是接触提取物后,提取物刺激黑
肩绿盲蝽短时间(第 1 天)内兴奋度提高,捕食能力
增强,随后由兴奋变为抑制,捕食能力逐渐降低。
表 2 黑肩绿盲蝽成虫接触 10.0 mg/L 灰毛豆种子甲醇提取物后捕食白背飞虱 3龄若虫的功能反应模型
Table 2 Function response models of C. levidipennis adult to the third instar nymph of S. furcifera after exposure to the extracts
from T. purpurea seeds at the dosage of 10 mg/L
时 间 捕食者是否接触药剂
模拟方程
Na=a×N0/(1+a×Th×N0)
模型检验 回归系数检验 日最大 捕食量/头 Th/d a
未接触 Na=0.167×N0/(1+0.167×0.065N0) F=173.12 (P<0.01) T=57.3 (P<0.01) 15.3 0.065 0.167第 1天
接触 Na=0.283×N0/(1+0.283×0.042N0) F=78.26 (P<0.01) T=61.2 (P<0.01) 23.8 0.042 0.283
未接触 Na=0.164×N0/(1+0.164×0.067N0) F=113.47 (P<0.01) T=58.7 (P<0.01) 14.9 0.067 0.164第 2天
接触 Na=0.132×N0/(1+0.132×0.091N0) F=119.11 (P<0.01) T=54.6 (P<0.01) 10.9 0.091 0.132
未接触 Na=0.172×N0/(1+0.172×0.063N0) F=107.24 (P<0.01) T=52.2 (P<0.01) 15.8 0.063 0.172第 3天
接触 Na=0.531×N0/(1+0.531×0.061N0) F=106.65 (P<0.01) T=51.6 (P<0.01) 1.8 0.061 0.531

2.3 灰毛豆种子甲醇提取物对黑肩绿盲蝽成虫存
活时间的影响
统计数据表明,接触 10.0 mg/L提取物后, 黑肩
绿盲蝽的存活时间为(13.3±2.1) d,而未接触提取物
的黑肩绿盲蝽成虫的存活时间为(21.3±1.7) d。t 测
验结果表明,两者间差异显著,说明黑肩绿盲蝽成
虫接触提取物后存活时间显著缩短。
3 讨 论
黑肩绿盲蝽是稻田飞虱类和叶蝉类害虫的重
要天敌[11]。以往对该虫的研究主要集中于寄主范
围、抗性品种、Bt水稻、稻株挥发性物质以及稻株
伤液流等方面[12−15]。对它与猎物关系的研究着重于
捕食选择性、捕食能力、功能反应以及与环境的关
系[8−11]。本研究结果表明,黑肩绿盲蝽成虫捕食白



/头



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背飞虱 3 龄若虫符合 Holling−II 功能反应模型(表
2),与以往的研究结果[9−10,15]基本一致。灰毛豆种
子甲醇提取物对白背飞虱若虫和黑肩绿盲蝽成虫
的选择性较好;可短期内刺激黑肩绿盲蝽成虫兴
奋,捕食能力增强;能刺激黑肩绿盲蝽短时间内兴
奋,但随后由兴奋变为抑制。黑肩绿盲蝽成虫接触
提取物后存活时间显著缩短。如果仅考虑该植物种
子提取物对黑肩绿盲蝽毒力远低于白背飞虱(表 1)
和第 1 天该天敌捕食能力增强的结果(表 2),该植
物提取物似乎对黑肩绿盲蝽成虫是安全的。但综合
黑肩绿盲蝽成虫接触提取物后存活时间明显缩短
和表 2 中第 2、3 天的结果,表明低剂量的提取物
对黑肩绿盲蝽成虫并不安全。
有关杀虫剂对天敌安全性评价,通常是比较杀
虫剂对害虫及其天敌毒力值的大小,或者测定其功
能反应[7, 16−17]后,据此评估杀虫剂对天敌是否安全。
从本研究的结果来看,在研究杀虫活性成分对天敌
安全性评价时,仅仅观察 1~2个指标是不够的;因
此,如何建立合理的杀虫活性成分对天敌安全的评
价体系值得进一步深入研究。
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责任编辑:罗慧敏