全 文 ：浙江农业学报 Acta Agriculturae Zhejiangensis，2016，28(7):1108 － 1114 http:/ /www． zjnyxb． cn
华晓琴，刘高亮，张庆辉，等． 大巴山粉葛组织培养技术［J］． 浙江农业学报，2016，28(7):1108 － 1114．
DOI:10. 3969 / j． issn． 1004-1524. 2016. 07. 03
收稿日期:2015-09-30
基金项目:四川省育种攻关项目(2011NA0098-10)
作者简介:华晓琴(1988—)，女，甘肃武威人，硕士研究生，研究方向为林木遗传育种。E-mail:278689104@ qq． com
* 通信作者，钟宇，E-mail:zhongyu315@ 163． com
大巴山粉葛组织培养技术
华晓琴1，刘高亮2，张庆辉2，张 鲁1，章 婷1，钟 宇1，*
(1．四川农业大学 林学院，四川 成都 611130;2．四川省三台县林业局，四川 三台 621100)
摘 要:为了实现大巴山粉葛 Pueraria lobata (wild)Ohwi Dabashan种苗的规模化快速繁殖，以大巴山粉葛茎
段为外植体，研究了灭菌时间、MS培养基大量元素、植物生长调节剂对大巴山粉葛组织培养过程中消毒、初
代培养、增殖培养及生根培养的影响。结果表明，(1)先用 75%乙醇消毒 20 s，再用 0. 1%氯化汞消毒 10 min，
成活率达 67. 56%。(2)初代培养基为 1 /2 MS + 0. 5 mg·L －1 6-BA + 0. 3 mg·L －1 IBA，腋芽萌发率可达
92. 2%;(3)增殖培养基为 1 /2 MS + 1. 0 mg·L －1 6-BA + 0. 05 mg·L －1 IBA，增殖系数约 5. 0;(4)生根培养基为
1 /2 MS + 0. 01 mg·L －1 NAA + 0. 1 mg·L －1 IBA，生根率达 96. 03%。
关键词:大巴山粉葛;组织培养;腋芽萌发;植物生长调节剂
中图分类号:S567. 239 文献标志码:A 文章编号:1004-1524(2016)07-1108-07
Tissues culture of Pueraria lobata (wild)Ohwi Dabashan
HUA Xiao-qin1，LIU Gao-liang2，ZHANG Qing-hui2，ZHANG Lu1，ZHANG Ting1，ZHONG Yu1，*
(1． College of Forestry，Sichuan Agricultural University，Chengdu 611130，China;2． Forestry Bureau of Santai
County，Santai 621100，China)
Abstract:In order to realize the rapid propagation of Pueraria lobata(wild)Ohwi Dabashan，the effects of steriliza-
tion time，macroelement in MS medium and plant growth regulators on disinfection，initial culture，multiplication
culture and rooting culture of Pueraria lobata(wild)Ohwi Dabashan were studied by tissues culture，using its stem
with axillary bud as explants． The results showed that:(1)The explants were sterilized in 75% alcohol and 0. 1%
HgCl2 for 20 s and 10 min，the survival rate reached to 67. 56% ． (2)The medium for the initial culture was 1 /2 MS +
0. 5 mg·L －1 6-BA + 0. 3 mg·L －1 IBA，the percentage of axillary bud was up to 92. 2% ． (3)The optimum multipli-
cation medium was 1 /2 MS + 1. 0 mg·L －1 6-BA + 0. 05 mg·L －1 IBA，multiplication coefficient reached to 5. 0． (4)
The rooting medium was 1 /2 MS + 0. 01 mg·L －1 NAA + 0. 1 mg·L －1 IBA，with rooting rate 96. 03% ．
Key words:Pueraria lobata(wild)Ohwi Dabashan;tissues culture;axillary bud sprouting;plant growth regulator
葛根是豆科(Leguminosae)葛属(Pueraria)植
物的俗称。葛根含有较多食用和药用成分，在治
疗心脑血管疾病及延迟衰老方面作用明显［1］。
同时，葛根淀粉含量高，发酵时乙醇生产率仅次
于玉米，是开发生物质能源的优良原料［2］。此
外，葛还具有良好的水土保持和土壤改良等功
效［3］。大巴山粉葛 Pueraria lobata(wild)Ohwi
Dabashan是四川省达州市林业科技推广站从野
生种中驯化的良种(2010 年通过四川省林木品种
审定委员会审定，登记编号:川 Ｒ-WTS-PL-023-
2009)，具有适生范围广、生长快、富含淀粉、产量
高、耐干旱瘠薄等特点，栽培价值高，是四川省葛
产业发展主推品种。近年来，随着大巴山粉葛人
工栽培面积的逐步扩大，对其种苗的需求也稳步
增长，如何提供足够的优良种苗成为目前大巴山
粉葛扩大栽培的瓶颈问题。
葛根的主要繁殖方式为压条繁殖［4］、块茎
苗、扦插繁殖等传统方式［5 － 6］，这些方法存在幼
苗长势不一致、繁殖受季节限制、繁殖周期长等
缺点，难以满足规模化生产。利用组织培养技术
进行植物繁殖具有培养条件可控、繁殖效率高、
生长周期短等特点［7］，是实现葛规模化繁殖的重
要途径。目前，已有组织培养技术在葛属植物上
应用成功的报道，但这些研究主要通过愈伤组织
途径诱导产生不定芽［8］，而愈伤组织途径易诱发
无性系变异［9］，难以保持品种的优良特性。此
外，针对培养基、外植体消毒和灭菌后外植体存
活率低等问题［10 － 12］的研究较少;同时，由于品种
间的生理特性差异，建立无性繁殖体系的培养
基、生长调节剂均不同［13 － 14］，难以套用到其他品
种。因此，本研究以保持品种遗传稳定性为前
提，以大巴山粉葛带腋芽茎段为外植体，研究消
毒方式、MS培养基大量元素含量、生长调节剂质
量浓度等关键技术环节对腋芽萌发、增殖、生根
的影响，以期建立既能保持遗传稳定又能快速繁
殖的大巴山粉葛组织培养技术体系，为大巴山粉
葛工厂化育苗提供技术参考。
1 材料与方法
1. 1 试验材料
供试材料为四川省达州市林业科技推广站
提供的大巴山粉葛，2012 年 12 月挖取大巴山粉
葛优良单株块根在四川农业大学林学院温室栽
植，在春季生长初期，每隔 3 d 对盆栽材料喷洒
0. 1%多菌灵进行灭菌，至取材结束。
1. 2 试验方法
1. 2. 1 灭菌处理
选取生长健壮无病虫害的幼嫩枝条，剪去叶
柄叶片，剪成 1. 5 cm 左右带腋芽茎段，在自来水
下冲洗 30 min，后浸泡于洗衣粉液中用软毛刷刷
洗干净，再用自来水冲洗 2 h。
在超净工作台中用 75%乙醇和 0. 1% HgCl2
依次浸泡消毒，处理时间分别为 15、20 s 和 6、8、
10 min，共 6 个处理(表 1)。每个处理接种 30 个
茎段，重复 3 次。
1. 2. 2 初代培养
用最佳消毒方法获得的带芽茎段进行初代
培养，以 MS 培养基大量元素含量(MS、1 /2MS、
1 /4MS)、6-BA(0. 5、1. 0、1. 5 mg·L －1)、IBA(0. 1、
0. 3、0. 5 mg·L －1)进行正交设计，共 9 个处理(表
2)。每个处理接种 30 个茎段，重复 3 次。
1. 2. 3 增殖培养
用初代培养获得的萌发腋芽进行增殖培养，
采用 1 /2MS 培养基，以不同质量浓度的 6-BA
(0. 5、1. 0、1. 5 mg·L －1)、NAA(0、0. 01、0. 03 mg·
L －1)和 IBA(0、0. 05、0. 10 mg·L －1)进行正交设
计，共 9 个处理(表 3)。每个处理接种 30 个茎
段，重复 3 次。
1. 2. 4 生根培养
用增殖培养获得的苗高大于 2 cm 的苗进行
生根培养，以 MS培养基中大量元素含量(MS、1 /
2MS、1 /4MS)、NAA(0、0. 01、0. 03 mg·L －1)、IBA
(0、0. 01、0. 05 mg·L －1)进行正交设计，共 9 个处
理(表 4)。每个处理接种 30 个芽苗，重复 3 次。
1. 2. 5 培养基与培养条件
各培养基均添加蔗糖 30 g、琼脂 7 g、pH 5. 6，
培养温度(25 ± 1)℃，光强 2 500 lx，湿度 75%，光
周期 16 h(昼)∕ 8 h(夜)。
1. 2. 6 数据处理
观测污染率、死亡率、萌发率、增殖系数、生
根率，所有指标统计均在每阶段培养 30 d 时测
定，用 SPSS 软件进行方差分析和多重比较。相
关指标计算公式如下:
污染率(%)=外植体污染数 /接种外植体总
数 × 100;
死亡率(%)=外植体死亡数 /接种外植体总
数 × 100;
存活率(%)= 100 － 污染率(%)－ 死亡
率(%);
萌发率(%)=腋芽萌发的外植体数 /接种外
植体总数 × 100;
·9011·华晓琴，等． 大巴山粉葛组织培养技术
增殖系数 =芽长大于 0. 5 cm 的芽数 /接种
外植体总数;
生根率(%)= 生根苗数 /接种生根苗总数
× 100。
2 结果与分析
2. 1 消毒方式对外植体灭菌效果的影响
用 75%乙醇浸泡时间不变时，随着 0. 1%氯
化汞浸泡时间的延长，污染率均降低，死亡率均
升高(表 1)。其中处理 5、处理 6 存活率最高，分
别为 65. 00%和 67. 34%，而处理 5、处理 6 的污
染率、死亡率差异均不显著(P ＞ 0. 05)。消毒效
果相同时，以消毒时间短为优，所以选择 75%乙
醇 20 s + 0. 1%氯化汞 8 min的外植体消毒方式。
2. 2 不同大量元素含量的 MS 培养基、6-BA 及
IBA质量浓度对初代培养的影响
将茎段接种至初代培养基上，4 d 后腋芽开
始萌发，外植体基部膨大(图 1-A)，15 d 后腋芽
长至 1 cm 左右(图 1-B)，30 d 后长至 2 ～ 3 cm
(图 1-C)，部分茎段长出 2 ～ 3 个腋芽。经培养，
表 1 消毒时间对大巴山粉葛外植体污染率和死亡率的
影响
Table 1 Effects of sterilization time on contamination rate
and dead rate of Pueraria lobata (wild)Ohwi Dabashan ex-
plant
编号
No．
处理
Treatment
污染率
Contamination
rate /%
死亡率
Dead
rate /%
1 75%乙醇 15 s + 0. 1%氯化汞 6 min
75% Ethanol 15 s +0. 1% HgCl2 6 min
47. 77 a 3. 33 d
2 75%乙醇 15 s + 0. 1%氯化汞 8 min
75% Ethanol 15 s +0. 1% HgCl2 8 min
34. 44 b 8. 22 c
3 75%乙醇 15 s + 0. 1%氯化汞 10 min
75% Ethanol 15 s +0. 1% HgCl2 10 min
31. 11 bc 12. 89 bc
4 75%乙醇 20 s + 0. 1%氯化汞 6 min
75% Ethanol 20 s +0. 1% HgCl2 6 min
26. 78 c 10. 0 c
5 75%乙醇 20 s + 0. 1%氯化汞 8 min
75% Ethanol 20 s +0. 1% HgCl2 8 min
18. 33 d 16. 67 ab
6 75%乙醇 20 s + 0. 1%氯化汞 10 min
75% Ethanol 20 s +0. 1% HgCl2 10 min
14. 55 d 18. 11 a
同列数据后无相同小写字母的表示差异显著(P ＜ 0. 05)，下同。
Data without the same letter within a column indicated significant
difference at the 5% level． The same as below．
外植体萌发率为 56. 63% ～ 92. 20%(表 2)。方
差分析表明，大量元素含量不同的 MS培养基(因
A，初代培养 7 d;B，初代培养 15 d;C，初代培养 30 d;D，增殖培养 30 d;E，增殖培养 45 d;F，生根培养 10 d
A，Primary culture for 7 d;B，Primary culture for 15 d;C，Primary culture for 30 d;D，Proliferation culture for 30 d;E，Proliferation culture
for 45 d;F，Ｒooting culture for 10 d
图 1 大巴山粉葛腋芽组织培养和植株再生
Fig． 1 Tissue culture of axillary buds and plant regeneration of Pueraria lobata(wild)Ohwi Dabashan
·0111· 浙江农业学报 第 28 卷 第 7 期
表 2 不同质量浓度的大量元素、6-BA 及 IBA 对大巴山
粉葛初代培养的影响
Table 2 Effects of different concentration of macroelement，
6-BA and IBA on initial culture of Pueraria lobata (wild)
Ohwi Dabashan
编号
No．
A:培养基
Medium
B:6-BA
/(mg·L －1)
C:IBA
/(mg·L －1)
萌发率
Germination rate /%
1 MS 0. 5 0. 1 66. 67 c
2 MS 1. 0 0. 3 68. 90 c
3 MS 1. 5 0. 5 56. 63 d
4 1 /2MS 0. 5 0. 3 92. 20 a
5 1 /2MS 1. 0 0. 5 78. 87 b
6 1 /2MS 1. 5 0. 1 77. 73 b
7 1 /4MS 0. 5 0. 5 76. 67 b
8 1 /4MS 1. 0 0. 1 83. 33 b
9 1 /4MS 1. 5 0. 3 78. 90 b
素 A)(F = 74. 80＊＊)、6-BA(因素 B)(F =
12. 63＊＊)、IBA(因素 C)(F = 17. 67＊＊)对萌发率
的影响较显著(P ＜ 0. 05)，3 个因素对萌发率的
影响大小顺序为 MS 培养基大量元素含量(因素
A)＞ IBA(因素 C)＞ 6-BA(因素 B)。多重比较
表明，因素 A 中 A2 萌发率显著高于 A1 和 A3
(P ＜ 0. 05)，因素 B 中 B1 萌发率显著高于 B2 和
B3(P ＜ 0. 05)，因素 C 中 C2 萌发率显著高于 C1
和 C3(P ＜ 0. 05)。因此，大巴山粉葛初代培养最
佳处理组合为处理 4，即 1 /2 MS + 0. 5 mg·L －1
6-BA + 0. 3 mg·L －1 IBA (A2B1C2)，其萌发率高
达 92. 2%，显著高于其他处理(P ＜ 0. 05)。
2. 3 不同质量浓度 6-BA、NAA、IBA对增殖培养
的影响
将初代培养 30 d 的大巴山粉葛腋芽转接至
适宜的增殖培养基上，15 d 左右基部膨大，产生
少量表面泛白的淡绿色愈伤组织，但愈伤组织没
有分化出不定芽，30 d 左右愈伤组织褐化死亡，
腋芽基部萌发大量簇生、密集的丛生芽(图 1-
D)，45 d后一部分丛生芽高于 0. 5 cm，叶片展开
(图 1-E)，增殖系数为 2. 07 ～ 5. 00(表 3)。其中
处理 4、处理 5、处理 6 长势最好，丛生芽质量最
好，处理 7、处理 8、处理 9 丛生芽萌发数量多但长
势弱。
方差 分 析 表 明，6-BA (因 素 A)(F =
124. 96＊＊)、NAA(因素 B)(F = 5. 42* )、IBA(因
素 C)(F = 7. 46＊＊)对增殖系数的影响均达到显
著水平(P ＜ 0. 05)，3 个因素对增殖系数影响的顺
表 3 不同质量浓度 6-BA、NAA、IBA 对大巴山粉葛增殖
培养的影响
Table 3 Effects of different concentration of 6-BA，NAA，
IBA on multiplication culture of Pueraria lobata (wild)Ohwi
Dabashan
编号
No．
A:6-BA
/(mg·L －1)
B:NAA
/(mg·L －1)
C:IBA
/(mg·L －1)
增殖系数
Multiplication
1 0. 5 0 0 3. 43 b
2 0. 5 0. 01 0. 05 3. 63 b
3 0. 5 0. 03 0. 10 2. 37 c
4 1. 0 0 0. 05 4. 97 a
5 1. 0 0. 01 0. 10 5. 00 a
6 1. 0 0. 03 0 4. 87 a
7 1. 5 0 0. 10 2. 07 c
8 1. 5 0. 01 0 2. 73 c
9 1. 5 0. 03 0. 05 2. 53 c
序为 6-BA ＞ IBA ＞ NAA。多重比较结果表明，A2
增殖系数显著高于 A1 和 A3(P ＜ 0. 05);B1 与
B2、B1 与 B3 之间差异均不显著(P ＞ 0. 05);B2 增
殖系数显著高于 B3(P ＜ 0. 05);C1 与 C2 之间差
异不显著(P ＞ 0. 05)，增殖系数均显著高于 C3(P
＜0. 05)。最佳增殖培养组合为 1 mg·L －1 6-BA +
0 mg·L －1 NAA +0 mg·L －1 IBA (A2B1C1)或 1 mg·
L －1 6-BA + 0. 01 mg·L －1 NAA + 0 mg·L －1 IBA
(A2B2C1)或 1 mg·L
－1 6-BA + 0 mg·L －1 NAA +
0. 05 mg·L －1 IBA (A2B1C2)或 1 mg·L
－16-BA +
0. 01 mg· L －1 NAA + 0. 05 mg· L －1 IBA
(A2B2C2)，该组合只有 1 个出现在正交设计表
中，即处理 4，增殖系数达 4. 97，所以本研究中最
佳增殖培养基配方为 1 /2 MS +1. 0 mg·L －1 6-BA +
0. 05 mg·L －1 IBA。
2. 4 不同大量元素含量的 MS 培养基、NAA 及
IBA质量浓度对生根培养的影响
接入生根培养基的大巴山粉葛芽苗在 3 ～ 4
d后均长出白色根尖，10 d后根长达 2 ～ 3 cm(图
1-F)，生根率为 83. 83% ～96. 03%(表 4)。
方差分析表明，培养基(因素 A)(F =
4. 57* )、IBA(因素 C)(F = 5. 96* )对生根率的影
响显著(P ＜ 0. 05)，NAA(因素 B)对生根率的影
响不显著(P ＞ 0. 05)，培养基对生根率的影响大
于 IBA。多重比较结果表明，A 因素中 A1 和 A2
之间差异不显著(P ＞ 0. 05)，A1 和 A2 的生根率
显著高于 A3(P ＜ 0. 05);C 因素中 C3 的生根率
显著高于 C1 和 C2(P ＜ 0. 05)，而 C1 和 C2 之间差
·1111·华晓琴，等． 大巴山粉葛组织培养技术
表 4 不同质量浓度的大量元素、NAA 及 IBA 对大巴山
粉葛生根培养的影响
Table 4 Effects of different concentration of macroelement，
NAA and IBA on rooting culture of Pueraria lobata (wild)
Ohwi Dabashan
编号
No．
A:培养基
Medium
B:NAA
/(mg·L －1)
C:IBA
/(mg·L －1)
生根率
Ｒooting rate /%
1 MS 0 0 83. 83 d
2 MS 0. 01 0. 05 85. 57 cd
3 MS 0. 03 0. 10 91. 47 ab
4 1 /2MS 0 0. 05 88. 17 bcd
5 1 /2MS 0. 01 0. 1 96. 03 a
6 1 /2MS 0. 03 0 89. 30 bcd
7 1 /4MS 0 0. 10 92. 23 ab
8 1 /4MS 0. 01 0 90. 60 abc
9 1 /4MS 0. 03 0. 05 93. 43 ab
异不显著(P ＞ 0. 05);NAA(因素 B)对生根率影
响不显著，所以，最佳生根培养基组合为处理 3
或处理 5，最高生根率达 96. 03%，处理间差异不
显著。考虑降低成本等因素，最佳生根培养基为
处理 5，其配方为 1 /2 MS + 0. 01 mg·L －1 NAA +
0. 1mg·L －1 IBA。
3 讨论
葛植株全身被毛，外植体消毒困难，消毒时
间短则污染率高，消毒时间长外植体表面细胞易
被杀死，致外植体死亡。京西葛茎段使用 2. 2%
NaClO消毒 20 ～ 30 min，污染率达 50%［11］，采用
0. 1%氯化汞处理 3 min对泰国葛嫩枝进行消毒，
成功率仅为 3%［15］。本试验采用 75%乙醇 20 s +
0. 1%氯化汞 8 min 的消毒模式，存活率达
67. 34%，灭菌效果较其他研究好，这与适宜时间
的乙醇处理杀死了附着在外植体表面的微生物，
并增大了外植体表面张力使下一步氯化汞灭菌
更彻底有关，同时得益于将植株在温室中进行预
栽培，营造了较清洁的生长环境，减少了灰尘、微
生物等污染，并且取材前对植株喷洒多菌灵杀死
外植体表面及体内的一部分微生物［16］。
本试验中初代培养最适宜培养基为 1 /2 MS
培养基，萌发率为 92. 2%，而三裂叶葛、野葛［8］、
粉葛［11］、泰国葛［15］等在初代培养时均在 MS 培
养基上生长效果较好;生根培养适宜培养基为
1 /2 MS 培养基，生根率最高达 96. 03%，有研究
表明，野葛在 MS 培养基上生根率达 100%［8，17］，
而泰国葛在 1 /2 MS 培养基上生根率最高
66. 8%［15］，但大巴山粉葛在 MS 培养基上平均生
根率为 86. 96%。表明同属的不同植物在相同培
养基上的效果不尽相同，这可能是因为 MS 培养
基中硝酸盐、铵盐、氮、钾含量高，使植物体内酚
类物质外溢，引起褐化［18］，抑制细胞分裂［19］，而
减半处理后则适宜大巴山粉葛。
植物生长调节剂调控植物生长发育，在组织
培养中起关键作用，不同植物对生长调节剂的种
类、质量浓度需求不同［20］。本试验初代培养的
最佳植物生长调节剂组合为 0. 5 mg·L －1 6-BA +
0. 3 mg·L －1 IBA，IBA对萌发率的影响大于6-BA，
与黄宁珍等［15］对泰国葛茎段初代培养的结果一
致，但与京西葛茎段诱导不定芽发生时 6-BA 占
主导作用的结论相反［11］。一般认为，细胞分裂
素对萌发率的影响大于生长素，但不同品种植物
体内的激素水平不同［21］，此外，培养基中的外源
激素对外植体内源激素有调节作用［22］，大巴山
粉葛初代培养中 IBA对萌发的作用大于 6-BA这
一现象可能是该品种体内本身含有较多的细胞
分裂素，或者培养基中添加的外源激素发挥调节
作用造成的，这有待于进一步研究。本试验生根
培养中，NAA对生根率的影响不显著，这与对三
裂叶野葛［23］和野葛［17］进行生根培养时只使用
NAA做植物生长调节剂的结果不一致，可能是因
为不同植物生根对 NAA 需求不同［24］。尽管
NAA对生根率影响不显著，但在预试验中发现添
加少量 NAA 能使根多且粗壮。因此，大巴山粉
葛最适宜生根培养基为 1 /2 MS + 0. 01 mg·L －1
NAA + 0. 1 mg·L －1 IBA，炼苗后用 0. 1%的多菌
灵浸泡，再移栽至湿润河沙上，待新叶长出后移
栽至苗圃地，成活率较高。
综上分析，大巴山粉葛经预栽培后取其茎段
诱导腋芽萌发，灭菌后的成活率高达 67. 34%，初
代培养腋芽萌发率高达 92. 2%，增殖倍数最高为
5 倍，生根率高达 96. 03%。利用本研究建立的
组织培养技术体系通过腋芽萌发获得的试管苗，
可以在保持大巴山粉葛优良性状的同时实现较
高增殖倍数，达到快速繁殖的目的，为大巴山粉
葛产业化发展提供技术支持。
·2111· 浙江农业学报 第 28 卷 第 7 期
参考文献(Ｒeferences):
［1］ 陆小静，黄洁，李开绵，等． 葛藤的综合开发与利用［J］．
热带农业科学，2006，26(1):60 － 63．
LU X J，HUANG J，LI K M，et al． Exploitation and utiliza-
tion of Pueraria DC［J］． Chinese Journal of Tropical Agricul-
ture，2006，26(1) :60 － 63． (in Chinese with English ab-
stract)
［2］ 龙汉利，鄢武先，闵安民，等． 四川粉葛生物能源产业化
发展调研报告［J］． 四川林业科技，2008，29(2):40 － 45．
LONG H L，LIAN W X，MIN A M，et al． Investigation report
of the industrialization development of Pueraria lobata in Si-
chuan［J］． Sichuan Forestry Science ＆ Technology，2008，29
(2) :40 － 45． (in Chinese)
［3］ 丁艳芳． 葛藤的价值及其开发前景［J］． 西北林学院学报，
2003，18(3):86 － 89．
DING Y F． Value and development of Pueraria lobata［J］．
Journal of Northwest Forestry University，2003，18(3) :86 －
89． (in Chinese)
［4］ 张川黔，龙秀琴，罗充． 葛藤繁殖技术的研究［J］． 种子，
2012，31(2):94 － 96．
ZHANG C Q，LONG X Q，LUO C，Study on propagation
technology of Pueraria DC［J］． Seed，2012，31(2) :94 －
96． (in Chinese)
［5］ 刘建林，夏明忠，袁颖，等． 葛藤的繁殖方法及其栽培技
术［J］． 西昌农业高等专科学校学报，2003 (4):25 － 26．
LIU J L，XIA M Z，YUAN Y，et al． Ｒeproduction methods
and cultivating technique for Pueraria lobata Ohwi［J］． Joural
of Xichang Agricultural College，2003 (4) :25 － 26． (in Chi-
nese with English abstract)
［6］ 周敏，胡平通． 葛的育苗及栽培技术［J］． 吉林农业，2011
(4):147．
ZHOU M，HU T P． Breeding and cultivation techniques of
Pueraria lobata［J］． Agriculture of Jilin，2011 (4) :147． (in
Chinese)
［7］ 王姝，赵玉桥，罗国坤，等． 组织培养技术在药用植物中
的应用研究进展［J］． 贵州农业科学，2010，38(12):26 －
29．
WANG S，ZHAO Y Q，LUO G K，et al． Application progress
of tissue culture in medicinal plants［J］． Guizhou Agricultural
Sciences，2010，38(12) :26 － 29． (in Chinese with English
abstract)
［8］ 刘红昌，杨文钰，陈兴福． 野葛组织培养的研究进展［J］．
时珍国医国药，2005，16(10):1037 － 1039．
LIU H C，YANG W Y，CHEN X F． Callus induation and pla-
ntlet regeneration of Pueraria lobata in tissue culture ［J］．
Journal of Southwest Agricultural University，2005，16(10) :
1037 － 1039． (in Chinese)
［9］ 胡建斌，柳俊． 魔芋属植物组织培养与遗传转化研究进展
［J］． 植物学通报，2008，25(1):14 － 19．
HU J B，LIU J． Progress in tissue culture and genetic transfor-
mation of Amorphophallus blume［J］． Chinese Bulletin of Bota-
ny，2008，25 (1) :14 － 19． (in Chinese with English ab-
stract)
［10］ 魏世清，张磊，张琴，等． 野葛(Pueraria lobata)愈伤组
织诱导及组织培养［J］． 西南大学学报(自然科学版)，
2006，28(3) :422 － 424．
WEI S Q，ZHANG L，ZHANG Q，et al． Callus induation
and plantlet regeneration of Pueraria lobata in tissue culture
［J］． Journal of Southwest Agricultural University，2006，28
(3) :422 － 424． (in Chinese with English abstract)
［11］ 周堂英，李惠波，向素琼，等． 粉葛组织培养及同源四倍
体诱导［J］． 中草药，2005，36(8):1230 － 1233．
ZHOU T Y，LI H B，XIANG S Q，et al． Tissue culture and
induction of autotetraploid of Pueraria thomsonii［J］． Chinese
Traditiongal and Hebal Drugs，2005，36(8) :1230 － 1233．
(in Chinese with English abstract)
［12］ 张晓霞，丁友芳，史玲玲，等． 京西葛组织培养及快速繁
殖研究［J］． 北京林业大学学报，2010，32(5):138
－ 142．
ZHANG X X，DING Y F，SHI L L． et al． Tissue culture and
rapid propagation of Pueraria lobata［J］． Journal of Beijing
Forestry University，2010，32(5) :138 － 142． (in Chinese
with English abstract)
［13］ 钱迎倩． 植物组织培养的培养基［J］． 湖南林业科技，
1978 (4):36 － 41．
QIAN Y Q． The medium of plangt tissue culture［J］． Jour-
nal of Hunan Forestry and Technology，1978 (4) :36 － 41．
(in Chinese)
［14］ 叶小曲，沈效东，张新宁，等． 植物激素对菊花试管苗快
速繁殖的影响［J］． 宁夏农林科技，1999 (3):32 － 33．
YE X Q，SHEN X D，ZHANG X N，et al． Effect of plant
hormone on in vitro rapid propagation of Dendranthema
morifolium［J］． Ningxia Agriculture and Forestry Science ＆
Technology，1999 (3) :32 － 33． (in Chinese)
［15］ 黄宁珍，唐凤鸾，何金祥，等． 泰国葛组织培养和快速繁
殖体系优化研究［J］． 中国中药杂志，2008，33(19):
2175 － 2179．
HUANG N Z，TANG F L，HE J X，et al． Ｒesearch on opti-
mization system on tissue culture and rapid propagation of Pu-
eraria mirifica［J］． China Journal of Chinese Materia Medi-
ca，2008，33(19) :2175 － 2179． (in Chinese with English
abstract)
［16］ 徐忠传，何俊蓉，周静亚，等． 多菌灵在黄精根茎无菌培
养中的应用［J］． 生物技术通报，2006 (增刊):400
－ 402．
XU C Z，HE J Ｒ，ZHOU J Y，et al． Application of carben-
dazim in sterile culture of Polygonatum cyrtonema Hua roots
［J］． Biotechnology Bulletn，2006 (S) :400 － 402． (in Chi-
·3111·华晓琴，等． 大巴山粉葛组织培养技术
nese with English abstract)
［17］ 于树宏，李 玲． 野葛的组织培养和植株再生［J］． 植物资
源与环境，1999，8(1):63 － 64．
YU S H，LI L． Tissue culture of Pueraria lobata (Wild．)
Ohwi and plantlet regeneration ［J］． Journal of Plant Ｒe-
sources and Environment，1999，8(1) :63 － 64． (in Chi-
nese with English abstract)
［18］ 陈珍，孙骏威，许海，等． 天台乌药的组织培养与快速繁
殖［J］． 浙江农业学报，2012，24(2):243 － 246．
CHEN Z，SUN J W，XU H，et al． Tissue culture and propa-
gation of Lindera aggregate(sims)Kosterm［J］． Acta Agri-
culturae Zhejiangensis，2012，24(2) :243 － 246． (in Chi-
nese with English abstract)
［19］ 谭文澄，戴策刚． 观赏植物组织培养技术［M］． 北京:中
国林业出版社，1997:150 － 156．
［20］ 于亚军，代汉萍，李宝江． 植物激素和生长调节剂在果
树组织培养中的应用［J］． 北方园艺，2002 (6):68 － 70．
YU Y J，DAI H P，LI B J． The effects of plant hormone and
plant growth gegulators on tissue culture of fruit［J］． North-
ern Horticulture，2002 (6) :68 － 70． (in Chinese)
［21］ 周宜君，周生闯，刘玉，等． 植物生长调节剂对植物愈伤
组织的诱导与分化的影响［J］． 中央民族大学学报(自然
科学版)，2007，16(1) :23 － 28．
ZHOU Y J，ZHOU S C，LIU Y，et al． Influences of plant
growth regulations on induction and differentiation of plant
callus［J］． Journal of Central University for Nationalities，
2007，16(1) :23 － 28． (in Chinese with English abstract)
［22］ 宋莉英，高峰． 苦瓜离体培养过程中内源激素含量的变
化［J］． 植物学报，2006，23(2):192 － 196．
SONG L Y，GAO F． Changes of endogenous hormones in
Momordica charantia during in vitro culture ［J］． Chinese
Bulletin of Botany，2006，23(2) :192 － 196． (in Chinese
with English abstract)
［23］ 施和平，潘瑞炽． 三裂叶野葛的组织培养和植株再生
［J］． 植物生理学通讯，1998 (6):444．
［24］ 洪森荣，尹明华，夏瑾华． 植物生长调节剂对黄独试管
苗微型块茎诱导形成的影响［J］． 中草药，2014，45
(13):1928 － 1937．
HONG S Ｒ，YIN M H，XIA J H． Effects of plant growth reg-
ulators on induction formation for plantlet microtuber of Di-
oscorea bulbifera［J］． Chinese Traditiongal and Hebal Drugs，
2014，45(13) :1928 － 1937． (in Chinese with English ab-
stract)
(责任编辑 侯春晓)
·4111· 浙江农业学报 第 28 卷 第 7 期