全 文 ：ExperimentalStudiesofAnti-proliferativeEfectsofMarinespongeExtracts
S1 ～ S3 onHumanLungAdenocarcinomaandHepatocarcinomaCels
YangWenhao1 , Lǜ Junhua1 , XuShihai2
(1.PharmacyCollegeofJinanUniversity, Guangzhou510632;2.LifeScienceColegeofJinanUniversity, Guangzhou510632)
Abstract Objective:Tostudytheanti-proliferativeefectsofmarinespongeextract-S1 ～S3onhumanlungadenocarcinomaGLC-
82, hepatocarcinoma7402andgastriccarcinomaMCG-803 celsinvitro.Methods:TheparametersweregotbyMTTassay.Results:
AfterhumanlungadenocarcinomaGLC-82, hepatocarcinoma7402 andgastriccarcinomaMCG-803 cellsweretreatedbymarinesponge
extract-S1 ～ S3 for48h, thegrowthoflungadenocarcinomaGLC-82 andhepatocarcinoma7402 celswereinhibitedsignificantlybythe
S3andtheIC50 were2.714 μg/mland2.598 μg/mlrespectively;butnosignificantefectonthegastriccarcinomaMCG-803 cels.
ThemarinespongeextractsS1 andS2 don tshowinhibitiveefectontheproliferationofthosethreetumorcells.Conclusion:Marine-
spongeextractS3 caninhibittheproliferationoflungadenocarcinomaGLC-82 andhepatocarcinoma7402 cellssignificantly.
Keywords Marinespongeextracts;Tumorcels;Anti-neoplasm;Cellculture
药用大黄叶泻下 、止血作用的实验研究
兰志琼 卢先明 蒋桂华 苏筱琳 邓晶晶 张晓南
(成都中医药大学药学院 ,成都 610075)
摘要 目的:研究药用大黄叶的泻下 、止血作用。方法:①采用炭末法(正常小鼠)和自身粪便实热模型法 ,观
察药用大黄叶片及叶柄水煎液对小鼠排便时间的缩短情况 、排便数量的增加情况以及对粪便形状的影响。 ②分别
采用毛细玻管法和小鼠断尾法观察药用大黄叶对小鼠凝血时间和出血时间的影响。结果:①药用大黄叶柄 、叶片
的水煎液能明显缩短正常及自身粪便实热模型小鼠首次排黑便时间 、增加其排便数量。 ②药用大黄叶柄 、叶片醇
提水沉液的止血作用与空白组相比 ,均具有明显缩短出血时间的作用(P<0.001)。结论:①药用大黄叶具有与药
用大黄相似的泻下作用 。对正常小鼠和实热型模型小鼠均有明显的致泻作用 , 其中以大黄叶柄的作用最为明显。
②药用大黄叶柄 、叶片有明显的止血作用。且叶柄低剂量的作用最为明显 , 相当或略优于于阳性组与大黄组。
关键词 大黄叶;水提物;醇提水沉物;泻下;止血
大黄为蓼科植物掌叶大黄 RheumpalmatumL.、
唐古特大黄 R.palmatumL.var.tanguticumMaxim.
exRegel或药用大黄 R.oficinaleBail.的根茎 。大
黄为传统中药 ,使用历史悠久 ,疗效确切。具有泻热
通便 、凉血解毒 、逐瘀通经的功效。现代药理学研究
表明其具有导泻 、利胆 、保肝 、抗菌 、抗病毒 、抗炎 、止
血 、降脂 、抗肿瘤等多种生理活性 〔1〕。在大黄的有
效成分中 ,起泻下作用的主要是番泻苷;起止血作用
的主要是鞣质 ,其中 d-儿茶素和没食子酸的作用最
为明显 〔2〕。大黄地上部分也含有与根及根茎类似
的生理活性物质 , 但这方面的药理研究报道很
少 〔3、 4〕。在采挖季节 ,地上部分生物资源大量被浪
费 。本文选择药用大黄叶 ,对其泻下作用和止血作
用进行了初步的实验研究 ,并将其与药用大黄进行
对比 ,以探索大黄叶是否具有与大黄等同的药理作
用 ,旨在为大黄药用植物的地上部分资源的利用提
供理论基础 。
1 实验材料
1.1 动物 昆明种小鼠(一级),成都中医药大学
医学动物实验中心提供 ,合格证号:川实动管字 6
号。
1.2 药品 药用大黄 、药用大黄叶均采自绵阳市
平武县平通镇 ,经成都中医药大学卢先明副教授鉴
定其原植物为蓼科植物药用大黄 Rheumoficinale
Bail.。药用大黄水煎液:称取大黄粗粉 100 g,加 8
倍量水浸泡 30 min,煎煮 ,煮沸 15 min后 ,过滤。于
40 ～ 50℃浓缩至 1 g/ml。药用大黄叶片水煎液 、药
用大黄叶柄水煎液:制备方法同大黄水煎液 ,用时以
蒸馏水稀释成不同浓度 。药用大黄醇提水沉液:称
取大黄粗粉 150 g,加 8倍量 95%乙醇浸泡 2 h,过
滤。减压回收乙醇 ,使成浸膏 。浸膏用 60 ml蒸馏
水溶解 ,微加热 ,趁热过滤 ,然后再定容为 60 ml,使
其浓度为 2.5g/ml,用时以蒸馏水稀释成不同浓度。
药用大黄叶柄醇提水沉液:称取大黄叶柄粗粉 150
g,加 8倍量 95%乙醇浸泡 2 h,过滤。减压回收乙
醇 ,使成浸膏 。浸膏用 60 ml蒸馏水溶解 ,微加热 ,
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DOI :10.13863/j.issn1001-4454.2005.03.020
趁热过滤 ,然后再定容为 67ml,使其浓度为 2.25 g/
ml。用时以蒸馏水稀释成不同浓度。药用大黄叶片
醇提水沉液 ,制备方法同叶柄醇提水沉液 ,用时以蒸
馏水稀释成不同浓度 。云南白药胶囊 ,由云南白药
集团股份有限公司生产 ,批号:20030403;醋酸地塞
米松由浙江仙琚制药股份有限公司生产 ,批号:
040138。
1.3 试剂 活性炭末:由重庆北碚精细化工厂生
产 ,批号:20030901;所用化学试剂均为分析纯 。
1.4 仪器 7530G分光光度计(安捷伦科技上海
分析仪器有限公司);内径 1 mm,长 100 mm玻璃毛
细管(四川成都华西医科大学仪器)。
2 方法与结果
2.1 泻下作用
2.1.1 对正常小鼠排便时间和数量的影响(炭末
法)〔5、6〕:取健康小鼠 60只 , ♀ 各半 ,随机分 6组 ,
每组 10只(见表 1)。除空白组灌胃(ig)蒸馏水外 ,
其余各组按表 1剂量 ig相应药液 ,每天 1次 ,连续 2
天 。然后禁食不禁水 20 ～ 24 h后 , ig相应炭末混悬
药液(含炭末 0.1g/ml),空白组 ig炭末溶液(0.1g/
ml)。此时开始计时 ,将各鼠分置于铺有滤纸的小
鼠笼内进行观察 。记录其出现黑便的时间 ,排黑便
的数量 、性状以及稀粪沾染肛门的情况 ,连续观察 5
h,将结果进行统计学处理 。结果见表 1。
结果显示大黄及叶柄 、叶片水煎液与空白组相
比均具有致泻作用 ,能明显缩短首次排黑便的时间
及增加排便数量 ,其中大黄的作用最明显 。
2.1.2 对自身粪便实热模型小鼠排便时间和数量
的影响〔5 ～ 8〕:取健康小鼠 60只 , ♀ 各半 ,随机分为
6组 ,每组 10只(见表 2)。用自身粪便制成 10%的
相应混悬液 ,连续给各组小鼠灌胃 2日 ,日灌胃量按
表 2。然后禁食不禁水 12 h后再灌胃。 30 min后 ,
给以相应炭末混悬药液 ,含炭末 0.1 g/ml。然后将
各鼠分置于小鼠笼内进行观察。记录其出现黑便的
时间 ,排黑便的数量 、性状以及稀粪沾染肛门的情
况。连续观察 4h,将结果进行统计学处理。结果见
表 2。
结果显示大黄及叶柄 、叶片的药液与模型组相
比较均有明显致泻作用 。且叶柄 、叶片高剂量的排
便时间缩短率皆高于大黄组 ,对实热模型具有明显
致泻作用 ,以叶柄作用较佳。叶柄低剂量 、叶片低剂
量的作用则均不如大黄 。叶柄 、叶片均为高剂量组
的作用优于低剂量组。
2.2 止血作用
2.2.1 对小鼠凝血时间的影响 (毛细玻管
法)〔6、9〕:取健康小鼠 70只 , ♀ 各半 ,随机分为 7
组 ,每组 10只(见表 3)。除空白组 ig蒸馏水外 ,其
余各组按表 3剂量 ig相应药液 ,每天 1次 ,连续 5
天。末次灌胃 2 h后 ,用毛细玻管插入小鼠眼内眦
后静脉丛 ,深 5 mm,自血液流进玻管开始记时 ,待血
液注满玻管后 ,取出平放于桌面上 。每隔 30 s,折断
玻管约 5 mm,并缓慢向左右拉开观察折断处是否有
血凝丝出现 ,直至有血凝丝出现所需时间即为凝血
时间 。计算药物对凝血时间的缩短百分率(变化
表 1 大黄叶对正常小鼠排便时间和数量的影响(n=10, x±s)
组别 剂量(g/kg) 排便时间(min) 4h内排便次数 粪便性状
空白组 - 198.83±114.70 3.16±1.21 -
药用大黄水煎液 20.0 144.17±3.76＊＊＊ 11.00±1.26＊＊＊ 第 3粒开始稀软
叶柄水煎液 2.0 157.67±24.34＊＊ 5.50±0.50＊＊＊△△ 第 5粒开始稀软
20.0 124.67±41.21＊＊＊ 9.83±2.61＊＊＊ 第 4粒开始稀软
叶片水煎液 20.0 43.50±22.39＊＊＊△△ 4.50±0.76＊△△ 第 4粒开始稀软
20.0 126.11±42.79＊＊ 9.22±3.64＊＊ 第 6粒开始稀软
注:与空白对照组相比较 , ＊＊＊P<0.001, ＊＊P<0.01, ＊P<0.05;与大黄组相比较 , △△P<0.001
表 2 大黄叶对自身粪便实热模型小鼠排便时间和数量的影响(n=10, x±s)
组别 剂量(g/kg) 排便时间(min) 4h内排便次数 粪便性状
模型组 - 149.25±41.31 3.75±1.79 -
大黄水煎液 20.0 115.33±3.59＊＊ 9.43±1.40＊＊＊ 第 5次开始变稀软
叶柄水煎液 2.0 122.40±8.55＊△ 4.50±1.71△△△ 第 5次开始变稀软
20.0 81.60±10.76＊＊＊△△△ 6.71±1.91＊＊△△ 第 5次开始变稀软
叶片水煎液 2.0 165.17±15.54△△△ 3.17±0.69△△△ 第 5次开始变稀软
20.0 104.17±12.51＊＊△ 6.00±1.63＊△△△ 第 3次开始变稀软
注:与模型组相比较 , ＊＊＊P<0.001, ＊＊P<0.01, ＊P<0.05;与大黄组相比较 , △△△P<0.001, △△P<0.01, △P<0.05
·205·中药材第 28卷第 3期 2005年 3月
率)。结果见表 3。
凝血时间缩短百分率=空白组凝血组时间-药物组凝血时间空白组凝血时间 ×100%
表 3 对小鼠凝血时间的影响(n=10, x±s)
组别 剂量(g/kg) 凝血时间(min) 变化率(%)
空白组 - 2.71±0.45 -
云南白药组 1.00 1.50±0.35＊＊＊ 44.65
药用大黄醇提水沉液 50.00 1.93±0.32＊＊＊ 28.78
叶柄醇提水沉液 15.00 1.07±0.49＊＊＊△△ 60.52
45.00 2.28±0.45＊ 15.87
叶片醇提水沉液 15.00 2.25±0.25＊△ 16.97
45.00 2.06±0.50＊ 23.99
注:与空白对照组相比较 , ＊＊＊P<0.001, ＊＊P<0.01, ＊P<
0.05;与大黄组相比较 , △△△P<0.001, △△P<0.001, △P<0.05
表 4 对小鼠出血时间的影响(n=10, x±s)
组别 剂量(g/kg) 凝血时间(min) 变化率(%)
空白组 - 6.80±1.08 -
云南白药组 1.00 3.80±0.40＊＊＊ 44.12
药用大黄醇提水沉液 50.00 3.33±0.55＊＊＊ 51.03
叶柄醇提水沉液 15.00 3.50±0.63＊＊＊ 48.53
45.00 4.20±0.51＊＊＊△△ 38.24
叶片醇提水沉液 15.00 4.50±0.32＊＊＊△△△ 33.82
45.00 5.14±0.64＊＊＊△△△ 24.41
注:与空白对照组相比较 , ＊＊＊P<0.001, ＊＊P<0.01, ＊P<
0.05;与大黄组相比较 , △△△P<0.001, △△P<0.001, △P<0.05
结果显示各给药组与空白组相比较均有明显缩
短凝血时间的作用 ,均具有显著意义。以云南白药
组 、大黄组 、叶柄低剂量组的凝血作用最强 ,能明显
缩短凝血时间 ,且叶柄低剂量的凝血作用优于大黄
组(P<0.01)。而叶柄高剂量的作用则不如低剂量
与大黄组。叶片的作用不如阳性组 、大黄组及叶柄
组 。
2.2.2 对小鼠出血时间的影响 (出血时间)〔6、9〕:
取健康小鼠 70只 , ♀ 各半 ,随机分为 7组 ,每组
10只(见表 4)。除空白组 ig蒸馏水外 ,其余各组按
表 4剂量 ig相应药液 ,每天 1次 ,连续 3天。末次灌
胃 2 h后 ,将小鼠置于固定器内验时 ,暴露其尾部 ,
用剪刀剪去其尾巴尖部(约在距尾尖 4 mm处),此
时启动秒表 ,这时有血液自尾巴末端流出 ,每隔 30 s
左右用滤纸轻沾出血处 ,直至血管断端处无血液被
滤纸所沾取 ,此时所用时间为出血时间及变化率 ,结
果见表 4。
出血时间缩短率 =空白组出血时间 -药物组出血时间空白组出血时间 ×100%
由表 4结果可知 ,各给药组与空白组相比 ,均具
有明显缩短出血时间的作用(P<0.001),其中阳性
药 、大黄组 、叶柄低剂量组的作用特别明显。叶片的
作用较弱 ,缩短出血时间的作用不如前三者 。叶柄 、
叶片低剂量组的作用分别优于高剂量组 。
参 考 文 献
1 中华本草(精选本).上海:上海科学技术出版社 ,
1998∶355 ～ 363
2 沈映君.中药药理学.北京:人民卫生出版社 , 2000∶330
3 熊辉岩 ,等 .青藏高原唐古特大黄地上部分提取物抗炎
活性的研究 .高原医学杂志 , 2002, 12(4)∶24
4 熊辉岩 ,等 .唐古特大黄叶柄的营养成分分析 .天然产
物研究与开发 , 2003, 15(6)∶515
5 徐叔云 ,等 .药理实验方法学 .北京:人民卫生出版社 ,
2003∶1344, 1356
6 张大方 ,等 .药理与中药药理实验 .上海:上海科学技
术出版社 , 2002∶134 ～ 135, 127, 83 ～ 84
7 陈古荣 ,等 .山嵛菜药理作用的初步研究 .重庆中草药
研究 , 2003, 6(1)∶40
8 李仪奎 ,等 .中药新药研制开发技术与方法 .上海:上
海科学技术出版社 , 2001∶522
9 陈奇 .中药药理研究方法学 .北京:人民卫生出版社 ,
1993∶484 ～ 485
(2004-09-14收稿)
国际菊科艾蒿类植物系统演化与资源利用学术研讨会征文
艾蒿类植物包括菊科蒿属及邻近属植物 ,全世界约有 500多种 ,其中约 1/3种可以药用 , 有消炎 、清热 、解毒 、活血 、止血之
功效。中药中的艾叶 、青蒿 、茵陈蒿及著名的青蒿素均是来自于艾蒿类植物。为了系统总结艾蒿类植物的研究进展 , 交流研
究心得 , 经中国科学院批准 ,由中国科学院华南植物园等主办 , 广东中山市药学会 、广东省中医药学会 、中华中医药学会李时
珍研究会等协办的这次国际学术研讨会将于 2005年 11月在广东中山市召开。现正在征集有关艾蒿类植物的药用历史 、品种
考证 、生药学及本草学研究 、制剂与炮制工艺研究 、化学成分 、药理作用与临床应用(包括艾灸)研究 、资源开发利用与新产品
开发方面的研究以及有关艾蒿类植物其他方面的研究文章。征文截止日期为 2005年 8月 31日 ,征文请寄本次大会学术委员
会副主席梅全喜教授收 , 地址:广东省中山市南安路 2号中山市中医院 , 邮编:528400, 电话:0760-8561715, 13802668925,
E-mail:meiquanxi@ 163.com。
·206· 中药材第 28卷第 3期 2005年 3月