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培养基激素组成对华盖木腋芽萌发的影响



全 文 :第 33卷 第 2期 林 业 科 技 Vol.33 No.2
2 0 0 8年 3月 FORESTRYSCIENCE& TECHNOLOGY Mar.  2 0 0 8
文章编号:1001-9499 (2008)02-0001-03
培养基激素组成对华盖木腋芽萌发的影响*
马 均 马明东**
(四川农业大学都江堰分校, 都江堰  611830)
摘要:以华盖木嫁接植株当年生枝为外植体 , 以 1/2MS为基本培养基 , 添加不同浓度的 6-BA、 KT、 NAA进行
3因素 3水平正交试验 , 筛选诱导华盖木腋芽萌发的适宜培养基。结果表明 , 培养基的激素组成和浓度对外植体
的萌发率和褐化率都有极显著影响 , 1/2 MS+6-BA1.0mg/L+KT0.5mg/L是筛选出的诱导腋芽萌发的适宜培
养基 , 萌芽率为 53.33%, 褐化率为 13.33%。
关键词:华盖木;组织培养;萌芽率;褐化率
中图分类号:S723.2    文献标识码:A
  华盖木 (Manglietiastrumsinicum)为木兰
科单种属植物 [ 1] , 与木兰科木莲属近缘 , 被认
为是最原始的木兰科植物 [ 2, 3] 。目前 , 仅有 7
株分布于中国三大特有中心之一的滇东南古特
有中心的文山国家级自然保护区小桥沟内 [ 4] ,
为国家 Ⅰ级保护的极度濒危物种 [ 5] 。由于华盖
木生境的脆弱性和自身的繁殖障碍以及人为破
坏 [ 6] , 依靠天然资源保存该物种已经不可能 ,
所以进行华盖木繁育技术的研究尤为迫切 。目
前 , 华盖木的人工繁育主要采用嫁接法 , 但该
方法繁殖率较低 , 不能满足扩大种群和保存物
种的需要 。组织培养快繁是高效快速繁殖植物
的有效方法 , 迄今还未见华盖木组织培养育苗
的报道 , 因此 , 对华盖木进行组织培养育苗的
研究具有较高的科研和应用价值 。
1 材料与方法
1.1 试验材料
试验材料为四川农业大学都江堰分校苗圃华
盖木 4年生嫁接苗。
1.2 试验方法
1.2.1 材料的采集与处理
于晴天的下午采集健壮无病虫害母株上生长
良好的当年生枝 , 采回后去除多余叶片 , 用洗衣
粉水浸泡清洗 30 min, 然后流水冲洗过夜 。
将冲洗过夜的枝段在超净工作台上用 75%的
酒精消毒 30s, 无菌水清洗 3次;2%的次氯酸钠
浸泡 10 min, 无菌水清洗 3次;0.1%的升汞消毒
15min, 无菌水清洗 5次。切除断面褐化部分后 ,
切成约 2cm长的带芽茎段作为外植体接种到培养
基上。
1.2.2 试验设计
以 1/2MS(大量元素减半)为基本培养基 ,
添加不同浓度的 6-BA、 KT、 NAA进行 3因素 3
水平 L9 (34)正交试验 , 筛选出华盖木适宜的培
养基激素组成 (表 1)。
表 1 华盖木启动培养正交试验因素水平
水  平 因    素
6-BA/mg· L-1 KT/mg· L-1 NAA/mg·L-1
1 0.5 0.1 0.0
2 1.0 0.2 0.1
3 2.0 0.5 0.2
  将接种后的培养瓶置于光照培养箱内培养 。
先暗培养 1周 , 然后转入光照培养 , 光照强度为
1 500 ~ 2 000Lx, 光照时间 12h/d, 培养温度 (25
±1)℃, 培养期 30d。
培养期结束后 , 统计外植体的萌芽率 、 褐化
率 。统计结果采用 DPS数据处理系统进行方差分
* 四川农业大学都江堰分校科技基金项目 “华盖木生物学特性及繁育技术研究 ”, 项目编号 N200702;四川省科技厅应用基础研究项目
“红色警报级几乎绝迹种华盖木人工繁育技术体系研究 ”
林 业 科 技 第 33卷
析 。
萌芽率 =萌芽外植体数 / (接种外植体数 -污
染外植体数) ×100%
褐化率 =褐化外植体数 / (接种外植体数 -污
染外植体数) ×100%
2 结果与分析
接种 1周后 , 外植体叶柄处开始出现愈伤组
织 , 然后叶基部的腋芽开始膨大萌动 。培养期结
束后 , 对外植体的萌芽率 、褐化率进行统计 , 并
采用 DPS数据处理系统进行方差分析 (表 2和表
3)。
表 2 华盖木组织培养外植体萌芽情况
编号 6-BA/mg· L-1
KT
/mg· L-1
NAA
/mg· L-1
萌芽率
/%
1 0.5bB 0.1bAB 0.0aA 25.0cdCD
2 0.5 0.2bB 0.1aA 15.38dD
3 0.5 0.5aA 0.2aA 33.33bcBC
4 1.0aA 0.2 0.2 32.0bcBCD
5 1.0 0.5 0.0 53.33aA
6 1.0 0.1 0.1 46.15aAB
7 2.0aA 0.5 0.1 50.0aAB
8 2.0 0.1 0.2 43.75abAB
9 2.0 0.2 0.0 47.62aAB
表 3 华盖木组织培养外植体褐化情况
编号 6-BA/mg· L-1
KT
/mg· L-1
NAA
/mg· L-1
褐化率
/%
1 0.5aA 0.1bA 0.0bA 25.0bcdeABC
2 0.5 0.2aA 0.1aA 36.52abAB
3 0.5 0.5abA 0.2abA 35.71abcAB
4 1.0bB 0.2 0.2 24.0cdeBC
5 1.0 0.5 0.0 13.33cC
6 1.0 0.1 0.1 23.08dcBC
7 2.0aA 0.5 0.1 41.67aA
8 2.0 0.1 0.2 31.25abcdAB
9 2.0 0.2 0.0 40.25aAB
2.1 培养基激素组成对外植体萌芽的影响
华盖木接种约 2周后 , 腋芽开始膨大萌动 ,
继而抽出嫩芽。由表 2可以看出 , 培养基的激素
组成和配比对腋芽的萌动有极显著影响。其中 5
号培养基 (1 /2 +6 -BA1.0mg/L+KT0.5mg/L)
为筛选出的最适培养基 , 萌芽率为 53.33%, 极
显著地高于其它培养基。细胞分裂素对诱导腋芽
的萌发是必需的 , 同时要配以适宜的生长素 。试
验结果表明 , 细胞分裂素 6-BA和 KT的不同浓
度对萌芽率有极显著影响。其中 , 6-BA1.0mg/L
和 2.0mg/L之间的萌芽率没有显著差异 , 但都极
显著地高于 0.5mg/L。添加 KT0.5mg/L萌芽率显
著地高于 0.2mg/L和 0.1mg/L。说明较高的细胞
分裂素浓度对诱导华盖木腋芽的萌发有效 。而生
长素 NAA的浓度对萌芽率没有显著影响 , 这说明
华盖木腋芽的萌发不需要添加外源生长素 , 可能
是由于其内源生长素含量较高的缘故。
2.2 培养基激素组成对外植体褐化的影响
培养过程中发现 , 褐化能够严重影响外植体的生
长 , 使外植体从上部开始变褐 , 继而全部变褐死
亡 。培养基的激素组成对外植体的褐化率有极显著
影响 , 6 -BA0.5mg/L和 2.0mg/L的褐化率都较
高 , 极显著地高于 1.0mg/L, 说明外植体的正常生
长要求适宜的 6-BA浓度 , 过高或过低都会促进外
植体的褐化。 KT的浓度对褐化有显著影响 ,
0.1mg/L 的 褐 化 率 显 著 地 低 于
0.2mg/L和 0.5mg/L。生长素 NAA对褐化率有显
著影响 , 不添加 NAA的褐化率显著低于添加 NAA
的褐化率。试验结果表明 , 5号培养基 (1/2MS+6
-BAmg/L+KT0.5 mg/L)外植体的褐化率最低 ,
极显著地低于其它培养基 , 有利于华盖木的组织培
养 。
3 结 论
3.1 细胞分裂素 6-BA、 KT的不同浓度对华盖
木组织培养腋芽的萌动都有极显著影响。添加 6
-BA1.0mg/L和 2.0mg/L的萌芽率都极显著地高
于 0.5mg/L。添加 KT0.5mg/L萌芽率显著地高于
0.2mg/L和 0.1mg/L。NAA的浓度对萌芽率没有
显著影响 。 5号培养基 (1 /2MS+6-BA1.0mg/L
+KT0.5mg/L)为筛选出的最适培养基 , 极显著
地高于其它培养基。
3.2 6 -BA1.0mg/L的褐化率极显著地低于
0.5mg/L和 2.0mg/L;KT0.1mg/L的褐化率显著
地低于 0.2mg/L和 0.5mg/L;不添加 NAA的褐化
率显著低于添加 NAA的褐化率;5号培养基 (1/
2
第 2期 马 均等:培养基激素组成对华盖木腋芽萌发的影响
2MS+6-BA1.0mg/L+KT0.5mg/L)外植体的褐
化率极显著地低于其它培养基 。
3.3 综合考虑 , 5号培养基 (1/2MS+6 -
BA1.0mg/L+KT0.5mg/L)是华盖木组织培养诱
导腋芽萌芽的适宜培养基 , 萌芽率为 53.33%,
褐化率为 13.33%。
参 考 文 献
[ 1]  LiuYH.Apreliminarystudyonthetaxonomyofthefamily
Magnoliaceae[ J] .ActaPhytotaxsin, 1987, 22 (2): 89-
109.
[ 2]  吴征镒.中国种子植物属的分布区类型 [ J].云南植物研
究, (增刊Ⅳ):1991, 1-139.
[ 3]  吴征镒.中国种子植物的分布区类型的增订和勘误 [ J] .
云南植物研究, (增刊Ⅳ):1993: 14-178.
[ 4]  张茂钦.云南珍稀濒危树种生态生物学研究 [ M] .昆明:
云南大学出版社 , 1998.
[ 5]  傅立国.中国植物红皮书 -稀有濒危植物 (第 1册)
[M].北京:科学出版社 , 1992.
[ 6]  田昆 , 张国学, 程小放 , 等.木兰科濒危植物华盖木的生
境脆弱性 [ J] .云南植物研究 , 2003, 25 (5): 551-
556.
第 1作者简介:马均 (1975 -), 女 , 硕士研究生 ,
讲师 , 研究方向为林木生物技术。
通讯作者简介:马明东 (1958-), 男 , 副教授 , 硕
士生导师 , 从事森林培育的教学和研究工作 , 发表论文
40余篇。
收稿日期:2007-09-23
EfectoftheHormoneComponentoftheCultureMediumonthe
GerminationofAxilaryBudforManglietiastrumsinicum
MAJun
(SichuanAgricultureUniversity, Dujiangyan 611830)
Abstract Takethetissueculturewiththe1 year-oldbranchofManglietiastrumsinicumasexplant.
Andtake1/2 MSastheculturemedium, withdiferentconcentrationof6 -BA、 KT、 NAAforL9
(34)perpendicularityexperiment.Theresultsshowedthatthecomponentandconcentrationofhormone
oftheculturemediumhadextrememarkedefectonthegerminationandbrowningoftheexplants.The
suitableculturemediumfortheinductionofthegerminationoftheaxilarybudswas1 /2 MS+6-BA
1.0mg/L+KT0.5mg/L.Thegerminationrateis53.33%, andthebrowningrateis13.33%.
Keywords Manglietiastrumsinicum;Tissueculture;Germinationrate;Browningrate
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