全 文 ：农药学学报 2014，16(1) :102 － 105
Chinese Journal of Pesticide Science http:/ /www ． nyxxb． com． cn
收稿日期:2013-11-17;修回日期:2014-01-04．
作者简介:张余杰，男，硕士研究生，E-mail:yujie840704@ 126． com;* 秦小萍，通信作者(Author for correspondence) ，女，博士，副教授，主要
从事生物农药研究，E-mail:qxp99@ 163． com
基金项目:云南省教育厅科学研究基金(2013Z029)．
·研究简报·
坡柳皂苷对大菜粉蝶生长发育的抑制活性
张余杰1， 张 亚2， 董丁铭1， 秦小萍* 1， 孟 霞1
(1．云南农业大学 植物保护学院，昆明 650201;2．湖南农业大学 植物保护学院，长沙 410128)
摘 要:采用浸渍叶碟饲喂法测定了坡柳皂苷对大菜粉蝶的生物活性。结果表明:用 500、1 625、
2 750、3 875 和 5 000 μg /mL 的坡柳皂苷处理 24 h 后，对大菜粉蝶 4 龄幼虫生长发育的抑制率分
别为 14. 47%、31. 54%、49. 70%、62. 48% 和 79. 94%，处理 48 h 后的抑制率分别为 2. 72%、
39. 26%、54. 82%、70. 53%和 86. 39%;坡柳皂苷对大菜粉蝶 4 龄幼虫具有显著的拒食活性，供试
5 种浓度下处理 24 h后，拒食率分别为 30. 21%、40. 62%、54. 33%、72. 47%和 84. 84%，48 h 后的
拒食率为 4. 4% ～ 86. 67%;5 000 μg /mL 处理 14 d 后，幼虫化蛹率为 32%，显著低于对照组
(72%) ;供试 5 种浓度坡柳皂苷处理 23 d后，蛹的羽化率分别为 56%、44%、44%、36%和 32%，均
低于对照组(64%)。研究表明，坡柳皂苷对大菜粉蝶生长发育、取食及化蛹均有明显的抑制作用。
关键词:坡柳;皂苷;大菜粉蝶;生物活性;拒食活性
DOI:10. 3969 / j． issn． 1008-7303. 2014. 01. 17
中图分类号:S481． 9;S482． 39 文献标志码:A 文章编号:1008-7303(2014)01-0102-04
Inhibitory activity of Dodonaea viscosa saponin on the growth and
development of Pieris brassicae
ZHANG Yujie1， ZHANG Ya2， DONG Dingming1， QIN Xiaoping* 1， MENG Xia1
(1． College of Plant Protection，Yunnan Agricultural University，Kunming 650201，China;
2． College of Plant Protection，Hunan Agricultural University，Changsha 410128，China)
Abstract:The biological activity of Dodonaea viscosa saponin to Pieris brassicae was determined by
leaf dipping method． The results showed that the growth inhibition rates of 500，1 625，2 750，3 875
and 5 000 μg /mL D． viscosa saponin treatments on the 4th instar larvae of P． brassicae were 14. 47%，
31. 54%，49. 70%，62. 48% and 79. 94% respectively，at 24 h，and were 2. 72%，39. 26%，
54. 82%，70. 53% and 86. 39% respectively，at 48 h. D． viscosa saponin had significantly antifeedant
activity on the 4th instar larvae of P． brassicae，and the antifeedant rates of the 5 treatments of
D． viscosa saponin mentioned above were 30. 21%，40. 62%，54. 33%，72. 47% and 84. 84%
respectively，at 24 h，and were 4. 4% － 86. 67% at 48 h． The P． brassicae larvae pupate rate of
5 000 μg /mL treatment was 32% after 14 d，which was significantly lower than that of the control
(72%)． And the P． brassicae emergence rate of the 5 treatments of D． viscosa saponin mentioned
above were 56%，44%，44%，36% and 32% respectively，after 23 d，which was lower than that of
the control (64%)． The results showed that D． viscosa saponin had significant inhibitory activity on
growth，development，feeding and pupation of P． brassicae ．
No． 1 张余杰等:坡柳皂苷对大菜粉蝶生长发育的抑制活性 103
Key words:Dodonaea viscosa;saponin;Pieris brassicae;biological activity;antifeedant
坡柳 Dodonaea viscosa (Linn．)Jacq 具有解
毒、消炎、镇咳等多种功效［1–2］。我国坡柳资源丰
富，且已在金沙江干热河谷、秦岭等地进行大规模人
工种植，因此用于研究和开发的原料较为充足［3］。
国外对坡柳研究较早，主要集中在其活性成分
的分离鉴定方面。1982 年，Sachdev 等［4］从坡柳中
分离出了黄酮类化合物;2009 年，Shugeng 等［5］利用
高效液相色谱从坡柳根部分离出了具有抗卵巢癌活
性的新三萜类化合物。杨美林等［6］的研究表明，坡
柳种子乙醇提取物对小菜粉蝶 3 龄幼虫具有很强的
拒食活性;秦小萍等［7］研究发现，坡柳种子乙醇提
取物对菜青虫 4 龄幼虫有较好的拒食和生长发育抑
制活性。因此，坡柳提取物在生物源农药的开发利
用方面具有很好的研究价值。
大菜粉蝶 Pieris brassicae 是十字花科蔬菜上的
主要害虫之一，目前对其仍以化学农药防治为主，不
合理的施用方式以及大剂量、多次施药，造成了害虫
抗性逐年升高及农药残留等问题。
坡柳皂苷为本实验室自主分离、鉴定的拒食活
性物质，目前国内外尚未见有关其在病虫害防治应
用方面的研究，对其作用机制的研究更是鲜有报道。
笔者在前人工作［8］的基础上，进一步分离纯化了坡
柳中的活性物质，以较纯的坡柳皂苷为供试药剂，初
步测定了其对大菜粉蝶的拒食活性及对不同虫态的
抑制作用。
1 材料与方法
1． 1 供试材料
坡柳皂苷(Dodonaea viscosa saponin) ，粉末状，
纯度为 82%，由云南农业大学植物保护学院提供。
大菜粉蝶 Pieris brassicae，于云南农业大学后山
农场油菜地采集 1 ～ 2 龄幼虫，在该校植物保护学院
养虫室内用甘蓝植株和保湿油菜嫩叶扩繁至 4龄。
SZM-7045TＲ体视显微镜(标准放大倍率 7 ～
45 倍) ;FA2004 电子天平(精确到 0． 000 1 g)。
1． 2 试验方法
1． 2． 1 抑制活性测定 采用浸渍叶碟饲喂法［9］。
准确称取坡柳皂苷，用蒸馏水分别配制成 500、
1 625、2 750、3 875 和 5 000 μg /mL 的药液。打取
直径 1． 4 cm 的甘蓝叶碟，分别在各浓度药液中浸渍
1 s，每个培养皿中放入 2 片叶碟，接入 1 头饥饿 4 h
的 4 龄大菜粉蝶幼虫，每处理 25 头试虫，重复 3 次，
以蒸馏水处理的叶碟作为对照。将培养皿放入
25 ℃ ±1 ℃，相对湿度70% ±5%的温室内培养，分
别于 0、24 及 48 h 逐个称量试虫质量，并于 24 及
48 h 后测量其取食面积。48 h 后，将不同浓度处理
组试虫分别放入不同的养虫箱内，用新鲜无毒甘蓝
叶片饲养，每日更换新鲜叶片至化蛹。将蛹置于温
湿度适宜的环境中等待羽化。
分别按公式(1)～ (4)计算拒食率、发育抑制
率、化蛹率及羽化率。
拒食率 /% = ［(对照组取食量 － 处理组取食
量)/对照组取食量］× 100 (1)
发育抑制率 /% =［(对照组体重增加量 －处理
组体重增加量)/对照组体重增加量］× 100 (2)
化蛹率 /% =(蛹数 /试虫总数)× 100 (3)
羽化率 /% =(羽化的蛹数 /试虫总数)× 100
(4)
1． 2． 2 数据分析 采用 Excel 2003 和 DPS V6． 55
软件进行处理。
2 结果与讨论
2． 1 坡柳皂苷对大菜粉蝶幼虫生长发育的抑制率
及拒食率
表 1 数据表明，24 及 48 h 内，坡柳皂苷对大菜
粉蝶幼虫生长发育的抑制作用方差分析均达到差异
显著水平，且随处理浓度的增大活性增强;高浓度
下，则随处理时间的延长而增强。表明坡柳皂苷对
大菜粉蝶 4 龄幼虫生长发育具有较好的抑制活性。
由表 2 可看出:24 及 48 h 内，坡柳皂苷对大菜
粉蝶幼虫的拒食活性方差分析结果差异显著，且均
随处理浓度的升高活性依次增强;随处理时间延长，
低浓度处理组拒食活性降低，高浓度处理组则表现
为增强。
本研究中，随处理时间延长，坡柳皂苷低浓度处
理组对大菜粉蝶 4 龄幼虫生长发育的抑制率及拒食
率均有不同程度的降低，这可能是由于试虫对坡柳皂
苷逐渐产生了适应性。据报道，昆虫能很快适应拒食
剂，从而对其变得不敏感，这也是目前拒食剂应用中
所特有的问题之一［10］。但高浓度坡柳皂苷处理组则
一直表现出较强的拒食活性及生长抑制活性。
回归分析结果及拒食中浓度(AFC50)见表 3。
相关系数 r 分别为 0． 913 5 和 0． 994 6，回归方程线
性关系良好。
104 农 药 学 学 报 Vol． 16
表 1 坡柳皂苷对大菜粉蝶 4 龄幼虫生长发育的抑制率
Table 1 Growth inhibition rate of D． viscosa saponin on larvae of P． brassicae
处理
Treament /
(μg /mL)
处理前平均体重
Average weight
before treatment /g
24 h 48 h
平均体重
Average weight /g
发育抑制率
Growth inhibition rate /%
平均体重
Average weight /g
发育抑制率
Growth inhibition rate /%
CK 0． 197 2 ± 0． 015 7 a 0． 297 4 ± 0． 022 4 a － 0． 406 5 ± 0． 028 3 a －
500 0． 181 1 ± 0． 013 1 a 0． 266 8 ± 0． 019 3 ab 14． 47 0． 364 3 ± 0． 020 6 a 2． 72
1 625 0． 182 0 ± 0． 010 9 a 0． 250 7 ± 0． 010 4 bc 31． 54 0． 309 3 ± 0． 010 4 b 39． 26
2 750 0． 179 5 ± 0． 013 7 a 0． 229 9 ± 0． 012 8 bcd 49． 70 0． 274 1 ± 0． 010 3 bc 54． 82
3 875 0． 181 1 ± 0． 036 1 a 0． 218 7 ± 0． 012 8 cd 62． 48 0． 242 8 ± 0． 012 5 cd 70． 53
5 000 0． 160 6 ± 0． 014 3 a 0． 180 6 ± 0． 016 8 d 79． 94 0． 189 1 ± 0． 017 0 d 86． 39
注:表中数据为平均值 ±标准误差(n = 100)。同列数据后不同小写字母表示经 Duncans新复极差法检验在 0． 05 水平差异显著。
Note:Data in the table are expressed as mean ± SE(n = 100)． Data in the same column followed by different lowercase letters are significantly
different at the 0． 05 level by DMＲT．
表 2 坡柳皂苷对大菜粉蝶 4 龄幼虫的拒食率
Table 2 Antifeedant rate of D． viscosa saponin on larvae of P． brassicae
处理
Treatment /
(μg /mL)
24 h 48 h
取食叶面积
Area of leaf consumption /mm2
拒食率
Antifeedant rate /%
取食叶面积
Area of leaf consumption /mm2
拒食率
Antifeedant rate /%
CK 973． 85 ± 92． 10 a － 1 303． 39 ± 130． 21 a －
500 679． 62 ± 88． 05 b 30． 21 1 246． 00 ± 107． 59 a 4． 40
1 625 578． 27 ± 68． 02 bc 40． 62 843． 55 ± 69． 06 b 35． 28
2 750 444． 76 ± 62． 63 cd 54． 33 538． 44 ± 65． 46 c 58． 69
3 875 268． 10 ± 52． 63 de 72． 47 399． 10 ± 57． 06 c 69． 38
5 000 147． 60 ± 29． 06 e 84． 84 173． 68 ± 33． 71 d 86． 67
注:表中数据为平均值 ±标准误差(n = 100)。同列数据后不同小写字母表示经 Duncans新复极差法检验在 0． 05 水平差异显著。
Note:Data in the table are expressed as mean ± SE(n = 100)． Data in the same column followed by different lowercase letters are significantly
different at the 0． 05 level by DMＲT．
表 3 坡柳皂苷对大菜粉蝶 4 龄幼虫的拒食作用回归分析
Table 3 Ｒegression analysis of D． viscosa saponin against larvae of P． brassicae
时间
Time /h
回归方程
Ｒegression equation
相关系数
Correlation coefficient，r
拒食中浓度(95%置信限)
AFC50(95% CL)/(μg /mL)
24 y = 1． 44x + 0． 40 0． 913 5 1 553． 71(1 000． 57 ～ 2 412． 62)
48 y = 2． 69x － 3． 99 0． 994 6 2 216． 33(2 012． 32 ～ 2 441． 02)
2． 2 坡柳皂苷对大菜粉蝶幼虫化蛹率及羽化率的
影响
从表 4 中可看出:随坡柳皂苷处理浓度升高，试
虫化蛹率及羽化率均依次降低，其中 5 000 μg /mL
处理组化蛹率及羽化率与对照相比均下降了约
50%。表明坡柳皂苷对大菜粉蝶幼虫化蛹及蛹的羽
化均具有一定的抑制活性，且抑制作用随药剂处理
浓度的升高而增强。
据报道，植物源农药不仅具有破坏害虫信息
传递的作用［11］，而且具有干扰昆虫内分泌系统分
泌蜕皮激素的作用［12］。因此，坡柳皂苷有可能抑
制了大菜粉蝶幼虫的信息传递，或者干扰到其蜕
皮激素的分泌，亦或是拒食致使试虫后期营养不
良，从而造成经坡柳皂苷处理过的大菜粉蝶幼虫
化蛹进程受阻，化蛹率下降。具体作用机制有待
进一步研究确定。
2． 3 对照与处理组试虫消化道解剖比较
处理 48 h后，迅速取对照和 5 000 μg /mL 坡柳
皂苷处理组试虫各 1 头，分别在 40 倍体视显微镜下
进行解剖拍照(图 1)。由图中可见，5 000 μg /mL
No． 1 张余杰等:坡柳皂苷对大菜粉蝶生长发育的抑制活性 105
坡柳皂苷处理组试虫的消化道内仅有少量食物，与
对照形成鲜明对比，证明坡柳皂苷对大菜粉蝶 4 龄
幼虫的拒食效果明显。
表 4 坡柳皂苷对大菜粉蝶化蛹率及羽化率的影响
Table 4 Effects of D． viscosa saponin on pupation
and emergence rate of P． brassicae
处理 Treatment /
(μg /mL)
化蛹率
Pupation rate /%
羽化率
Emergence rate /%
CK 72 64
500 68 56
1 625 52 44
2 750 48 44
3 875 40 36
5 000 32 32
图 1 对照与 5 000 μg /mL坡柳皂苷处理组大菜粉蝶
4 龄幼虫取食(48 h)后消化道解剖图比较(40 ×)
Fig． 1 Comparison of the alimentary tract anatomy
graph of 4th instar larvae of P． brassicae between
CK and 5 000 μg /mL treatment after
feeding 48 h(40 ×)
3 结论
本文中只研究了坡柳皂苷对大菜粉蝶的拒食
活性及对其几种虫态的抑制作用，后续还需进行
温室内小区试验及坡柳皂苷对其他鳞翅目害虫作
用效果的研究。试验表明，坡柳皂苷对大菜粉蝶
幼虫具有较好的拒食效果，但其究竟是影响到大
菜粉蝶幼虫的味觉系统还是嗅觉系统，尚有待进
一步研究。此外，坡柳皂苷对大菜粉蝶化蛹及羽
化亦有较好的抑制活性。因此，未来进一步对坡
柳皂苷进行结构改造和加工，有望得到活性更好
的新型植物源农药。
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(责任编辑:唐 静)