全 文 ：新 疆 医科大 学学报 J( )U RN A I ( F X I N )J I A N G M EI )I A C工 U N IV E RS I飞’ Y Z 。( )3 r )。 e ., 2 6 〔 6 ) 6 〔) 3
H P I
一
C 法测定天山大黄中大黄酚和大黄素含量
张 炬 ’ , 常军民 ’ , 刘 涛 2
(新疆医 科大学 `药学院分析 /药分教研室 , 2教 务处 . 新疆 乌鲁木齐 83 。。 5 4 )
中图分类号 : R 9 1 7 ; Q 9 4 9 . 7 1 8 . 2 3 文献标识码 : B 文章编号 : 1 0 0 9 一 5 5 5 1 ( 2 0 0 3 ) 0 6 一〔)6 0 3 一 0 1
大黄是 闻名世界 的传统中药 , 它 的应用 已有 2 0 。 。年 的
历 史 , 具 有 泻热通 肠 、 凉血 解毒 、 逐癖 通经 等多方 面 的 功
能 〔`」 , 临床 上还广泛 用于治疗各 种疑 难病 症 。 有关大黄的研
究多集中于药典收载 的品种 , 对 同属其它植物 的研究较少 。
天 山大黄是唯独生长在新疆 天山山脉附近 的一种 品种 , 资源
较丰富 , 但有关其生药学和化学成分 尚未见报道 本研究采
用 R P 一H P I一C 法测 定天山大黄中大黄酚 和大黄素的含量 , 现
报道如下 。
1 仪器与试剂
美国W a t e r 、 2 6 9 0 型高效液相色谱仪 , W a t e r S 2 4 8 7 型紫
外检测 器 , W : , t e r 、 M l l _ I_ E N N I U M 3 2色谱工作站 ; 甲醇 (优级
纯 ) , 水 (乐百 氏纯净水 ) , 磷酸 (优级纯 ) ;大黄酚 、 大黄素对照
品均从枝穗大黄中分离得到 (波谱数据和理化常数均符合文
献值 ) 。 以 上所有试剂均用 。 . 4 5 拌m 滤膜过滤 。 天 山大黄生药
采自新疆新源县那拉提平原 , 采集和 品种鉴定均由中国医学
科学院药用植物研究所李君山博士完成 。
2 方法与结果
2
.
1 色谱条件 仁` 1 美 国 s y m m e t r y s h ie l d R P 18柱 ( 3 . 9 m m 又
1 5 0 m
n l , 5 子, m ) ;柱温 : 3 O c ;流动 相 : 甲醇一 0 . 1%磷酸 ( 9 :
1 ) ;流速 1 . 0 m l /m ; n ;检 测波 长 2 5 4 n m 。 应用上述条件 , 取
。 . ()2 m g /m l 大 黄酚溶液 、 。 . O O4 m g /m l 大黄素溶 液 和样 品
供试液进行 H P L C 测 定 , 理论塔板数均可达 5 0 0 以上 , 结果
见图 1 。
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…
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;
了拼
图 1 H P L C 色谱图
大黄酚 (左 ) 、大黄素 (右 ) ; 2 . 天山大黄
2
.
2 标 准 曲线制备 精密称 取大 黄酚 、 大黄素 对 照品 各
10
. 。 。 1 9 , 分别置 S O nl 容量瓶中 , 加 甲醇溶解至 刻度 , 摇匀 ,
配成 0 . 2 m g / n 飞! 的贮备溶液 。 精密吸取上述大黄素溶液 。 . 10
n
l
, 置 污 m l 容量瓶中 , 加甲醇稀 释至刻度 , 摇匀 ;精密吸取 上
述 大黄酚溶液 。 . s o m l , 置 s m ! 容 量瓶中 , 加 甲醇稀释至 刻
度 ,摇匀 , 制得对 照品溶液 。 按上述色谱条件分别进 样测定 ,
对 照品进样量 X (l 堪 ) 与峰面积 Y 呈 良好 的线性关系 , 线性
范围分别为 : 大黄素 0 . 0 0 8 一 0 . 0 56 ,垠 , 大黄酚 0 . ()8 一 。 . 3 2
陀 。 回归方程分别为 : 大黄素 Y 一 2 . 572 丫 l() 一 7X + 5 . 9 09 又
10 一 屯 , r 一 0 . 9 9 9 9 ; 大黄酚 Y ~ 2 . 56 7 又 1。 了X + 3 . 8 3 1 /
10
` , r 一 0 . 9 9 9 9 。
2
.
3 样 品测定 精密称取天 山大黄粉 末 l o o n飞g , 置 1() m l
容量瓶中 , 加 甲醇约 g m ! , 超声提取 30 m in , 取出放置至室温
后加 甲醇至刻度 , 摇匀 。 用 0 . 斗5 “ m 微孔滤膜过滤 , 取续滤 液
5 川 进样 。 以外标法计算得本 品含大黄素 0 . 3 13 m g / g , 大 黄
酚 3 . 3 8 m g / g , R S D 分别为 3 . 5 %和 2 . 3 % ( 、 一 5 ) 。
2
.
4 精密度试 验 精密吸取上述对照品溶液 1 0 1 , 重 复进
样 5 次 , 大黄素 、 大黄酚 峰 面 积 的 R S D 分别 为 。 . 73 % 和
0
.
9 5%
。
2
.
5 稳定性试验 取同一份样 品测定液 , 分别在 。 、 1 、 2 、 3 、 4
h 进样 5 川 , 记录峰 面积 , 5 次进样峰面积 的 R SD 分别为 : 大
黄素 1 . 34 % , 大黄酚 。 . 67 % 。
2
.
6 加标 回收率试验 精密称取 已 知含量 的天 山大黄粉
末 , 加人 一定量 的大黄素和大黄酚对照 品 , 按样 品测定项 下
所述方法处理 , 测定含量 ,计算大黄素 、 大黄酚 的平均 回收率
分 别为 9 7 . 5 1% 和 9 8 . 7 5 % , R S D 分别为 2 . 1 2 %和 1 . 9 7乡5 ( , `
一 6 ) 。
3 讨论
3
.
1 大黄酚和大 黄素属于游离葱醒类化 合物 , 在低极性有
机溶媒中有较好的溶解度 , 但考虑到 甲醇对生药组织有较强
的穿透能 力 , 故选 用甲醇超声提取的方法 , 超声时 间经实验
比较以 3 o m , n 为宜 。
3
.
2 天 山大黄中大黄酚的含量高达 3 . 3 8 n l g / g , 其含 量仅次
于大黄属波叶组 中的藏边大黄 、 波叶大黄 L 3 ) 。 有关大黄酚 的
含量与植 物生长 海拔 高度有 无关系还有待于进 一步探讨 。 而
天 山大 黄中大黄素 含量也与藏 边大黄接近 , 而 高于波 叶大
黄 , 提示天 山大黄的药用价值相 当于在藏药中列为 _ L 品的藏
边大黄和波叶大黄 。
参考文献 :
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分的 H IP 一 C 定 员分析 〔J口. 北京 医科大学学报 , l ” 3 , 2 5 ( 5 ) : 飞。 -
4 2
.
[收稿 日期 : 2 (川 3 (, 3一 5刁