全 文 ：收稿日期:2008-11-09
文章编号:1002-2724(2009)01-0033-02
红花山玉兰组织培养研究
王　奇 ,邓莉兰 ,王　丽
(西南林学院 , 云南 昆明 650224)
摘要:对红花山玉兰组织培养中的启动培养 、增殖培养进行了研究。结果表明:最佳启动培养配方为 MS +6-BA2.0mg/
L+IAA0.01mg/ L+KT1.0 , 最佳诱导不定芽分化的培养基为 MS+6-BA0.5mg/ L+NAA0.01mg/ L。
关键词:组织培养;红花山玉兰;培养基
中图分类号:S685.15　　　　　　　　　　文献标识码:A
Study on Tissue Culture of Magnolia delavayi var.rubra(f .rubra)
Wang Qi , Deng Lilan ,Wang Li
(Southw est Fo restry Unive rsity , Kunming Yunnan 650224 , China)
Abstract:This pape r deals w ith star t culture , pro liferation culture.The re sults show that the best medium o f start culture
is MS+6-BA2.0mg/ L+IAA0.01mg/ L+KT1.0 , the be st medium o f axillary shoo t pro lifer ation is MS+6-BA0.5mg/ L+
NAA 0.01mg/ L.
Key words:tissue Culture;Magnolia delavayi va r.rubra(f.r ubra);study
　　红花山玉兰 Magnolia delavay i var.rubra(f.
rubra)是木兰科木兰属山玉兰一变种。常绿阔叶小
乔木 ,高 10 ～ 12m ,胸径达 80cm 。树冠圆形 ,小枝具
环状托叶痕;单叶互生 ,革质 ,全缘 ,卵形 ,阔卵形或
卵状椭圆形 ,先端圆钝 ,基部分圆形 , 上面无毛 , 绿
色 ,光亮 ,中脉平或凹下 ,幼叶下面密被交织长柔毛 ,
成年叶下面被白粉 ,脉上疏被长柔毛;花两性 ,单生
枝顶 ,红色 ,芳香 ,大 ,花期 4 ～ 6月 ,果熟 8 ～ 12月 。
中性 ,稍耐阴;喜温暖湿润的气候。产于云南 ,生于
海拔 1600 ～ 2850m 的阔叶林中;四川南部﹑贵州西
南部亦产。红花山玉兰树冠圆整 ,叶大枝密 ,荫浓 ,
花大 、芳香 ,清雅 ,初夏盛开 ,为优良观赏树种 ,孤植 ,
丛植 ,列植均能营造优美景观 。
1　材料与方法
1.1　材料
取西南林学院校园所植生长旺盛﹑健壮的红花
山玉兰的茎尖或茎段及带腋芽的茎段 ,用于启动﹑
增殖 。
1.2　方法
将外植体在水中浸泡 12小时后 ,经消毒处理 ,
分幼嫩与较幼嫩两部分 ,分别接种于启动培养基(1)
MS+6 -BA2.0mg/L(单位下同)+IAA 0.01 +
KT1.0 ,(2)B5+6-BA0.5+IBA0.3 各 5 瓶 ,(3)
MS+6-BA2.0+IAA0.2。然后将培养基放置到
培养架上 ,适宜的培养温度为(25±2)℃,光照 16h/
d ,光照强度为 2000lx ,观察并记录现象。
诱导侧芽的生成 ,从启动培养基上剪切已萌动
的嫩梢 ,转入分化培养基(1)MS+6-BA2.0mg/L
(单位下同)+NAA0.3 , (2)MS +6-BA2.0mg/L
+NAA0.3+K T1.0 , (3)MS +6-BA0.5+NAA
0.01。将培养基放置到培养架上 ,在适宜的培养温
度和光照下培养 ,观察并记录现象 。
2　结果与分析
2.1　外植体的表面灭菌
在红花山玉兰的启动培养过程中 ,对外植体使
用 75%的酒精进行表面灭菌时 ,时间不能太长 ,幼
嫩的应在 30秒左右 ,较幼嫩的应在 15秒左右 ,不然
外植体会被烧死。在使用升汞灭菌时 ,幼嫩的应在
15分钟左右 ,较幼嫩的应在 6 ～ 8分钟左右。
2.2　不同配方启动培养基对红花山玉兰的效果
在培养室内培养 ,培养基(1)第 9天外植体有变
绿的现象 ,第 16 天开始抽芽 ,第 21天芽长至 2cm 。
在培养过程中 ,没有出现褐化现象 ,但有污染现象。
培养基(2)外植体一直无抽芽现象 ,但有褐化和污染
现象 。
从表 1可以看出 ,红花山玉兰适宜在 MS 培养
基中培养。在 MS+6-BA2.0mg/L +IAA0.01+
K T1.0培养基上 ,茎段的抽芽现象很明显 ,但其根
·33·
山东林业科技　　2009 年第 1期　　总 180 期　　SHANDONG FORESTRY SCIENCE AND TECHNOLOGY　　2009.No.1
部与枝梢茎段的抽芽也有很大的差别 ,在观察中发
现在培养基(1)中 ,较嫩的外植体比嫩的外植体萌动
早。在 MS 培养基(1)中根部的茎段抽芽的较多 ,而
且长势也较好。枝梢的茎段抽芽率相对低 ,长势也
一般 。主要原因是:根部的茎段分生能力较枝梢部
位强 。在 B5+6-BA0.5+IBA0.3培养基中 ,根部
和枝梢的茎段均未出现任何现象 ,由此可知:红花山
玉兰不适合用该培养基进行启动培养 。在培养基
MS+6-BA2.0+IAA0.2中 ,放入的外植体在观察
期间 ,除了褐化现象 ,再无其他现象发生。
表 1　不同培养基对不同部位茎段的影响
培养基及附加的成分(mg/ L) 接种的幼苗生长部位 数量 获得幼苗数量
(1)MS+6-BA2.0+IAA0.01+KT1.0 幼嫩 5 3
较幼嫩 5 4
(2)B5+6-BA0.5+IBA0.3 幼嫩 5 0
较幼嫩 5 0
(3)M S+6-BA2.0+IAA0.2 不计 10 0
2.3　不同配方培养基诱导不定芽的情况
由观察可知 ,外植体在培养室中培养 6 ～ 7天后
芽萌动 ,10天开始分化不定芽 ,21天时 ,每个接种的
嫩稍可以分化出大于 0.5cm 的有效不定芽 4 个左
右 ,不定芽长势较好 。
由表 2可以看出 , 6-BA 与 NAA 一起使用可
以促进不定芽的生长 。而且 6-BA 的用量对诱导
不定芽影响极大。6 -BA 的实验用量是 0.05 ～
10mg/ L ,在实验中随机选择了 0.5mg/L ,从观察的
现象中可以看到 ,试验成功地诱导出了不定芽 。
表 2　不同配方培养基诱导不定芽
培养基及附加的成分(m g/ L) 接种的数量 长丛芽的瓶数
(1)MS+6-BA2.0+NAA0.3 10 1
(2)MS+6-BA2.0+NAA0.3+K T1.0 10 0
(3)MS+6-BA0.5+NAA0.01 10 6
3　小结
适合红花山玉兰启动培养的培养基为 MS +6
-BA2.0mg/L+IAA0.01+KT1.0 ,适合红花山玉
兰不定芽分化的培养基为 MS +6 -BA0.5 +
NAA0.01 。木兰科植物在组织培养过程中褐化现
象较严重 ,主要原因是剪切来的外植体会分泌丹宁。
丹宁会堵塞导管运输营养成分 ,导致外植体由于营
养供应不足 。所以在接种前 ,要将外植体在水中浸
泡至少 12小时 ,减少丹宁的量 ,这样不仅可以减少
外植体褐化现象 ,也可以减少由于褐化导致的污染
现象 。
参考文献:
[ 1] 刘玉壶.中国木兰.北京科学技术出版社 , 2004:370 ～
371.
[ 2] 陈正华.木本植物组织培养及其应用.高等教育出版社 ,
1986.
[ 3] 刘清林 , 马翼 , 郑玉梅.花卉组织培养.中国农业出版社 ,
2002.11.
[ 4] 中国花卉协会.花卉快速繁殖.上海科学技术出版社 ,
1989.
[ 5] 杜凤国 , 刁绍起 , 王欢.等.天女木兰的组织培养.东北林
业大学学报 , 2006.3(2):42 ～ 43.
[ 6] 陈芳 ,陈强 , 陈娟.云南拟单性木兰的组织培养.植物生理
学通信 , 2005.8:494.
·34·
山东林业科技　2009 年第 1 期