全 文 ：南洋楹组织培养技术研究
*
胡新颖1 罗 锐2 黄少伟3 刘天颐3 魏 龙1
(1． 广东省林业科学研究院 广东广州 510520;2． 嘉汉林业(广州)有限公司;3． 华南农业大学林学院)
摘要 以南洋楹(Paraserianthes falcataria (L．)Nielsen)优树萌芽条幼嫩枝条的顶芽、腋芽为外植体，研
究了不同浓度植物生长调节剂对南洋楹组培苗增殖及生根的影响。结果表明:南洋楹组培苗适宜增殖培养
基为 MS +6-BA(1． 0 mg /L)+ NAA(0． 075 mg /L) ，月增殖率为 2． 65;适宜生根培养基为 1 /3MS + IBA(0． 1
mg /L)+ NAA(0． 01 mg /L) ，生根率达到 54． 6%;生根苗移栽成活率 95． 8%。
关键词 南洋楹 组织培养 增殖培养 外植体
中图分类号:S722． 3 + 7 文献标识码:A 文章编号:1006 － 4427(2011)06 － 0032 － 05
Study on Tissue Culture and Rapid Propagation of
Paraserianthes falcataria (L．)Nielsen
Hu Xinying1 Luo Rui2 Huang Shaowei3
Liu Tianyi3 Wei Long1
(1． Guangdong Forestry Research Institute，Guangzhou，510520;
2． Sino-Forest (Guangzhou)Corporation;3． South China Agricultural University)
Abstract With young branches as explants，the effects of plant growth regulators on proliferation and roo-
ting of Paraserianthes falcataria (L．)Nielsen were studied． The result showed:the best proliferating medium was
MS + 6-BA at 1． 0 mg /L + NAA at 0． 075 mg /L，with the proliferation rate up to 2． 65;The optimum rooting medi-
um was 1 /3 MS + IBA at 0． 1 mg /L + NAA at 0． 01 mg /L，and the rooting rate reached 54． 6%;The survival rate
after transplantation was 95． 8% ．
Key words Paraserianthes falcataria (L．)Nielsen，tissue culture，proliferation，explant
南洋楹(Paraserianthes falcataria(L．)Nielsen)属含羞草科，原产于马来西亚的马六甲和印度尼西亚的马
鲁古群岛，是世界上最著名的热带速生用材树种之一［1］。南洋楹是常绿乔木，花期 4 ～ 5 月，果期 7 ～ 9 月［2］。
我国于 1940 年前后引种南洋楹，主要种植在热带地区。南洋楹对气候和土壤有较大的适应性［3-4］，具有丰富
根瘤［5］。其生长速度快，寿命短，树龄约为 25 年便进入衰老期;其木材木质素含量较低，纤维含量丰富且质
量好，适于做一般家具、室内建筑、箱板、农具、火柴杆，也是制浆造纸以及制造胶合板、刨花板、硬质纤维板的
优质原料［6-7］。树皮可提炼栲胶［8］，也是培养银耳的优良段木。南洋楹是速生用材、改良土壤、风景园林、绿
荫、行道及四旁绿化的优良树种，具有较高的经济价值和生态价值。
国内外对南洋楹的研究主要集中在种源家系的生长表现、遗传变异、抗寒性及其栽培、造林技术等方面。
目前，有关南洋楹的组培报道都是从无菌种子苗取得外植体进行初代培养，没有选取野外优良母树的材料作
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* 基金 /项目:国家林业局“沿海抗台风植物材料选育技术研究 2009BADB2B0101”项目和广东省林业局科技计划“南洋楹无性快繁技术
研究”项目资助。
第一作者简介:胡新颖(1980-) ，女，硕士，现主要从事森林培育和林业生态研究工作。E-mail:linyinghd1981@ 163． com。
为外植体。南洋楹种子繁殖，变异大，造林容易分化［9］，并且该繁殖方法已经满足不了迅速发展的种植南洋
楹的需求。通过组织培养技术可使经过专项选优的单株得以繁殖育苗，既可解决林分分化的问题，又能在短
期内将少量优良单株繁殖出大量苗木。笔者以野外南洋楹优树为外植体，用组织培养技术对其进行快速繁
殖研究，以期为南洋楹组织培养实现育苗工厂化等方面提供参考。
1 材料与方法
1． 1 材料
对华南农业大学林学院苗圃 2 ～ 3 年生优树嫁接苗进行截冠处理，2、3 月份取当年萌生的幼嫩枝条的顶
芽、腋芽为外植体。
1． 2 方法
1． 2． 1 外植体灭菌 剪取新鲜半木质化及幼嫩枝条的顶芽和腋芽，在自来水下用毛刷洗去表面尘土，然后
用流水冲洗 2 ～ 3 h，于超净工作台上，用 75%的酒精浸泡 1 min，无菌水冲洗 1 ～ 2 次，再用 0． 1%HgCl2 灭菌，
然后用无菌水冲洗 5 ～ 6 次后切成 1． 0 ～ 1． 5 cm的茎段，每段带 1 个顶芽或腋芽，接种于已灭菌的诱导培养
基上。
1． 2． 2 增殖培养基初探 无污染的外植体在不添加激素的 MS 培养基上经过一段时间的培养，芽保持嫩
绿，并有不定芽开始萌动(图 1) ，待其萌发的不定芽长至 0． 5 cm以上时，将其切下转移到增殖培养基上进行
培养，增殖培养基为 MS，并附加了 NAA(0． 01 ～ 0． 10 mg /L)+ 6-BA(0． 5 ～ 2． 0 mg /L) ，蔗糖 30 g /L，肌醇 100
mg /L，琼脂粉 7． 0 g /L(pH 5． 8)。每个处理 30 ～ 40 个材料，30 d后，记录芽数和芽长度。
1． 2． 3 增殖培养基优化 根据前面的实验结果，确定 6-BA 的量，设定 5 个不同的 NAA 浓度梯度(0． 025，
0． 050，0． 075，0． 100，0． 125 mg /L)对增殖培养基进行优化。每个处理 30 ～ 40 个材料，30 d后，记录芽数和芽
长度。
图 1 外植体诱导出芽 图 2 MS + 6-BA0． 5 mg /L + NAA 图 3 MS + 6-BA1． 0 mg /L + NAA
0． 01 mg /L配方处理不定芽 0． 05 mg /L配方处理不定芽
1． 2． 4 生根培养 将芽体从增殖培养基产生的芽丛上单个切下，转入生根培养基。生根培养基为 MS(1 /3
倍大量元素 ～ 1 倍大量元素) ，并且附加 NAA(0． 01 ～ 0． 50 mg /L)+ IBA(0． 1 ～ 1． 0 mg /L) ，蔗糖 30 g /L，肌醇
100 mg /L，琼脂粉 7． 0 g /L(pH 5． 8)。每个处理 30 ～ 40 个材料，30 d后，记录生根率。
1． 2． 5 培养条件 植入后的材料置于 25 ± 2℃光照培养，每天日光灯照明 12 h，光照强度 1 000 Lux。
1． 2． 6 移栽苗生长条件 已诱导生根的小苗，移栽到进口泥炭土基质中，在温室培养 30 d。温室温度保持
在 25 ± 2℃，湿度保持 65%以上。移栽苗每天浇水，保证基质湿润，每周喷一次叶面肥，肥料的成分为 MS 大
量元素溶液。前 20 d用 1 个透明塑料盖罩住小苗，保持内部湿润，20 d后除去塑料盖。经过温室培养 30 d，
观察记录幼苗生长情况。
1． 2． 7 数据分析 试验采用 SAS软件对试验结果进行方差分析，用 Duncans 多重比较法对试验内各因子
作差异显著性检验［10］。主要指标包括:
不定芽月增殖倍率 =(培养 1 个月获得的茎段和顶芽数 /接入茎段和顶芽数)× 100% (1)……………
高度增长平均值 =一个月后芽平均高 －初接入时芽平均高 (2)…………………………………………
生根率 =(生根芽数 /接入总芽数)× 100% (3)……………………………………………………………
33胡新颖等: 南洋楹组织培养技术研究
生根苗成活率 =(成活的幼苗 /移栽总苗数)× 100% (4)…………………………………………………
2 结果与分析
2． 1 增殖培养
表 1 6-BA和 NAA配合使用对不定芽增殖影响的试验结果
试验号
6-BA浓度
(mg /L)
NAA浓度
(mg /L)
增殖倍率
平均值
高度增长平
均值(cm)
苗木生长情况
1 0． 5 0． 01 2． 64 a 0． 58 ab 绿色、壮、基部少量愈伤
2 0． 5 0． 05 2． 18 a 0． 49 ab 淡绿、一般、愈伤较多
3 0． 5 0． 10 2． 24 a 0． 27 b 淡绿、玻璃化、愈伤较多
4 1． 0 0． 01 2． 31 a 0． 60 ab 淡绿、一般、愈伤较多
5 1． 0 0． 05 2． 15 a 0． 71 a 绿色、芽较壮、少量愈伤
6 1． 0 0． 10 2． 46 a 0． 63 ab 浅黄、一般、愈伤较多
7 2． 0 0． 01 2． 68 a 0． 49 ab 绿色、芽较壮、少量愈伤
8 2． 0 0． 05 2． 22 a 0． 50 ab 浅黄、芽弱、玻璃化、愈伤多
9 2． 0 0． 10 2． 42 a 0． 24 b 淡黄、芽弱、玻璃化、愈伤多
注:相同字母表示 α = 0． 05 水平无显著差异。
由表 1 看出，6-BA和 NAA配合使用对苗木的增殖影响不显著，各水平之间苗木的增殖倍率无明显差
异。而当 6-BA浓度为 1． 0 mg /L时，苗木的高度增长高于其它浓度，相同 6-BA浓度时，NAA浓度从 0． 01 逐
步增加为 0． 10 mg /L，苗木的高度增长表现为一个先增加后减少的趋势。苗木生长情况以 1、5、7 处理较为
正常，综合评价初步获得南洋楹增殖培养基激素使用为 6-BA(1． 0 mg /L)+ NAA(0． 05 mg /L)。图 2 和图 3
为两种不同增殖培养基配方处理的不定芽生长状况。
2． 2 增殖培养基的优化
选定 6-BA浓度为 1． 0 mg /L，设定 5 个不同的 NAA浓度(0． 025，0． 050，0． 075，0． 100，0． 125 mg /L)对增
殖培养基进行进一步的优化，实验结果见表 2。
表 2 增殖培养基优化试验结果
试验号
6-BA浓度
(mg /L)
NAA浓度
(mg /L)
增殖倍率
平均值
高度增长
平均值(cm)
苗木生长情况
1 1． 0 0． 025 2． 59 a 0． 54 cd 淡绿、基部少量愈伤
2 1． 0 0． 050 2． 72 a 0． 69 ab 绿色、愈伤较多
3 1． 0 0． 075 2． 65 a 0． 78 a 绿色、愈伤较多
4 1． 0 0． 100 2． 57 a 0． 62 bc 绿色、愈伤较多
5 1． 0 0． 125 2． 62 a 0． 45 d 淡绿、愈伤多
注:相同字母表示 α = 0． 05 水平无显著差异。
由表 2 可知，当 6-BA浓度为 1． 0 时，不同 NAA浓度对增殖倍率的影响无差异，而对继代苗高度增长的
影响达到极显著(P ＜ 0． 01)。随着 NAA浓度从 0． 025 ～ 0． 125 mg /L的逐渐加大，苗木高增长表现为先缓慢
增长后快速下降的趋势，在 0． 075 mg /L 时到达最高，因此可得 NAA 浓度小于 0． 050 mg /L 和大于
0． 075 mg /L都不利于苗木高生长，最佳增殖培养基为:MS +6-BA(1． 0 mg /L)+ NAA(0． 075 mg /L)。
2． 3 生长调节剂和大量元素浓度对生根培养的影响
生长调节剂和大量元素浓度对生根培养的综合影响试验数据方差分析结果列于表 3 和表 4。
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表 3 生长调节剂和大量元素浓度对生根培养方差分析
变异来源 自由度 平方和 均方差 F值 Pr ＞ F
IBA 2 0． 1866 0． 0933 10． 48 0． 0004
NAA 2 0． 4164 0． 2082 23． 38 ＜ 0． 0001
MS浓度 2 0． 0817 0． 0409 4． 59 0． 0183
IBA × NAA 4 0． 2402 0． 0601 6． 75 0． 0005
误差 30 0． 2671 0． 0089
表 4 生长调节剂和大量元素浓度对生根培养各因子 Duncans检验结果
因子 浓度(mg /L) Duncans检验结果 生根率(%)
0． 1 a 31． 4
IBA 0． 5 a 27． 3
1． 0 b 16． 2
0． 01 a 38． 1
NAA 0． 25 b 21． 1
0． 50 b 15． 5
MS a 29． 0
MS浓度 1 /3MS a 26． 8
2 /3MS b 19． 1
注:相同字母表示 α = 0． 05 水平无显著差异。
表 3 表明，IBA浓度、NAA浓度和 IBA与 NAA互作对生根率的影响在 0． 01 水平上差异极显著，MS大量
元素浓度对生根率的影响在 0． 05 水平上差异显著。由表 4 可知，当 IBA的浓度为 0． 1 mg /L和 0． 5 mg /L时
差异不显著，两种浓度显著优于 1． 0 mg /L。IBA 浓度为 1． 0 mg /L 时生根率最低。因此，IBA 浓度可选择
0． 1 ～ 0． 5 mg /L。当 NAA浓度为 0． 01 mg /L时显著优于浓度为 0． 25 和 0． 10 mg /L时，当 NAA浓度为 0． 01
mg /L时，达到最大生根率为 38． 1%，由此可知，低浓度的 NAA有利于南洋楹的生根。
MS培养基和 1 /3MS培养基显著优于 2 /3MS培养基。用 MS 培养基时生根率最大为 29． 0%。因此，生
根基本培养基可以选用 MS或 1 /3MS培养基。
表 5 生长调节剂和大量元素浓度对生根培养的影响
排名 IBA浓度(mg /L) NAA浓度(mg /L) 大量元素用量(倍) 生根率(%) 生根情况
1 0． 1 0． 01 1 /3MS 54． 6 须根多 根长且粗壮
2 0． 5 0． 25 MS 35． 8 须根多、根部有愈伤
3 0． 5 0． 01 2 /3MS 31． 9 须根多、根部有愈伤
4 1． 0 0． 01 MS 27． 9 须根少、根部有愈伤
5 0． 1 0． 50 MS 23． 3 须根多、根部有愈伤
6 0． 1 0． 25 2 /3MS 16． 2 须根多、根部有愈伤
7 0． 5 0． 50 1 /3MS 14． 1 须根少、根部有愈伤
8 1． 0 0． 25 1 /3MS 11． 5 落叶严重、有枯落物
9 1． 0 0． 50 2 /3MS 9． 0 落叶严重、枯落物多
由表 5 可得，1 /3MS + IBA(0． 1 mg /L)+ NAA(0． 01 mg /L)配方生根率最高，达到 54． 6%。各生根配方
诱导生根时均有愈伤组织产生，这可能与 NAA和 IBA的量有关。随着 IBA、NAA浓度的提增，生根率降低，
高浓度的 IBA和 NAA配合不利于根的诱导及生长，试验 8 和 9 配方培养时幼苗严重落叶，甚至出现整株枯
黄和死亡现象。因此，选择 1 /3MS + IBA(0． 1 mg /L)+ NAA(0． 01 mg /L)配方有利于生根(图 4)。
53胡新颖等: 南洋楹组织培养技术研究
图 4 1 /3MS + IBA(0． 1 mg /L)+ NAA(0． 01 mg /L)配方生根情况 图 5 南洋楹瓶苗移栽一个月
2． 4 瓶苗移栽
移栽 72 株根长大于 1． 5 cm的南洋楹小苗，经过 30 d的生长有 3 株枯萎、死亡，其余生长健壮，成活率达
到 95． 8%。成活的幼苗苗高平均增加 1． 04 cm。叶数平均增加了 3 片;叶片颜色正常，为深绿色;没有病虫
害。因此，此移栽基质及培育环境有利于南洋楹组培苗的出苗生长(图 5)。
3 结论与讨论
南洋楹最佳增殖培养基为 MS + 6-BA(1． 0 mg /L)+ NAA(0． 075 mg /L)+蔗糖 30 g /L，pH 值为 5． 5 ～
5． 8，光照强度在 1 000 Lux左右，继代周期以 4 周为宜。最高增殖倍数可达 2． 65，高度增长均值达到 0． 78
cm。其最适宜的生根培养基为 1 /3MS + IBA(0． 1 mg /L)+ NAA(0． 01 mg /L)+蔗糖 30 g /L。生根时间为 15
d左右，生根率达到 54． 6%。
在南洋楹组织培养试验过程中选用室外优树嫁接苗的幼嫩枝条做为外植体，表面消毒很难杀死组织内
部的菌类而导致接种材料的污染，使得南洋楹的无菌体系很难建立。同时，从进瓶诱导到稳定增殖所需的时
间较长，通常需要 4 次以上的继代周期，这些严重影响了实验的进程。并且，南洋楹芽苗多次继代后表现出
黄化、玻璃化、矮小等现象，这可能是由于基因型决定有些无性系难以组培［11］，所以开展组培研究时应尽可
能扩大无性系规模，筛选适合组培繁殖的优良无性系应用于生产。
南洋楹的增殖方式以分段切割为主，分株为辅，即采用芽分化增殖结合芽伸长增加腋芽数量的方法能比
较好地提高不定芽的增殖率，这与奚伟鹏等［11］的研究结论一致，试验中选取不定芽增殖和伸长效果都较理
想的范围作为激素的最佳浓度范围。此方法省去了单独进行不定芽伸长培养的步骤，能够减化培养流程，缩
短培养时间，提高经济效益。试验发现，南洋楹继代苗在多次继代培养过程中能够对激素进行积累作用，防
碍正常继代。当芽增殖倍率高时，幼苗容易产生玻璃化现象，且丛生芽的伸长受到抑制，幼苗易产生细弱、黄
化、落叶枯萎等现象。适当降低分裂素 6-BA 的浓度，既可以减少玻璃化现象的产生，又降低了激素的累积
对幼苗产生的细弱、黄化和落叶枯萎的毒害作用。
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