全 文 ：实验研究 49中国医药指南 2010 年 12 月第 8 卷 第 34 期 Guide of China Medicine, December 2010, Vol.8, No.34
NSAIDs具有强大的抗炎作用和免疫抑制作用，其作用包括阻止
炎症细胞向炎症部位集中、抑制炎性因子的释放，抑制T、B淋巴细胞
的增殖和分化。Song等[10]研究认为低剂量的糖皮质激素用来治疗类风
湿性关节炎很少引起严重的不良反应如骨质疏松等。糖皮质激素对类
风湿性关节炎可能还具有“调修”作用。Biancone等[11]的研究表明，
糖皮质激素有两种受体：Ⅰ型和Ⅱ型。糖皮质激素与受体的结合情况
视其类型和浓度不同而有差异，同一种糖皮质激素与不同类型的受体
结合可产生完全相反的作用，如生理浓度的糖皮质激素与Ⅰ型受体的
亲和力是与Ⅱ型受体亲和力的10倍，故主要占领Ⅰ型受体，当血中糖
皮质激素呈生理节律性升高或处于应激状态下，Ⅰ型受体结合饱和后
才结合Ⅱ型受体。Keil等[12]的研究表明，不同免疫组织受体的分布也
不同，脾细胞上同时存在Ⅰ、Ⅱ型受体，而胸腺细胞上仅存在Ⅱ型受
体。给肾上腺切除的大鼠补充皮质酮以维持其生理浓度（主要占领Ⅰ
型受体），可促进刀豆球蛋白 A（concanaValin A，ConA）诱导的 T
细胞增殖反应，而在应激状态下，皮质酮产生增加，同时占领Ⅱ型受
体；则抑制了ConA诱导的 T细胞增殖反应[13]。
3 松果腺与炎症免疫
为拓晨抗炎免疫药理学的研究领域，揭示炎症免疫反应及药物作
用的机制，20世纪80年代末正当国际上刚刚开始对松果腺及褪黑素的
免疫作用进行研究时，Lin等[13]开展了此项研究，提出“松果腺可能是
炎症和免疫的高位调节点之一”的观点讲在实验方法上取得了一些突
破。大鼠急、慢性炎症模型说明松果腺切除后角叉菜胶诱导的大鼠足
爪肿胀及大鼠佐剂柱关节炎的继发性炎症加剧，褪黑素可使其恢复。
参考文献
[1] Nübel T,Dippold W,Kleinert H,et al.Lovastatin inhibits Rho-
regulated expression of E-selectin by TNF-α and attenuates
tumor cell adhesion[J].FASEB J,2004,18(1):140-142.
[2] Firenzuoli F,Gori L,Lombardo G.The Medicinal Mushroom
Agaricus blazei Murrill : Review of Literature and Pharmaco
Toxicological Problems [J].Evid Based Complement Alternat
Med,2008,5 (1):3-15.
[3] Lee DK,Kang JE,Park HJ,et al.FBI-1 enhances transcription of
the nuclear factor-kappaB (NF-kappaB)-responsive E-selectin
gene by nuclear localization of the p65 subunit of NF-kappaB [J].
J Biol Chem,2005,280(30):27783-27791.
[4] Akiyama H,Kondo K.Agaritine and phenylhydrazine derivatives
in Agaricus bisporus and Agaricus blazeiMurrill[J].Shokuhin
Eiseigaku Zasshi,2007,48 (6): 397- 401.
[5] Kimura Y,Takaku T,Sumiyoshi M,et al.Isolation of an anti-
angiogenic substance from Agaricus blazei Murill:its antitumor
and antimetastatic actions[J].Cancer Sci,2004,95(9):758-764.
[6] Gao L,Y Sun,C Chen,et al.Primary mechanism of apoptosis
induction in a leukemia cell line by fraction FA-2-b-? prepared
from the mushroom Agaricus blazei Murill[J].Brazilian J Med
Biological Res,2007,40(11): 1545-1555.
[7] Naohito OHNO,Mai FURUKAWA,Noriko N,et al.Antitumor
b-Glucan from the Cultured Fruit Body of Agaricus blazei[J].Biol
Pharm Bull,2001,24(7): 820-828.
[8] Bittoun P,Avramoglou T,Vassy J,et al.Low-molecular-weight
dextran derivatives (f-CMDB) enter the nucleus and are better
cell-growth inhibitors compared with parent CMDB polymers[J].
Carbohydr Res,1999,322(3/4):247-255.
[9] Kannagi R,Izawa M,Koike T,et al.Carbohydrate-mediated cell
adhesion in cancer metastasis and angiogenesis[J].Cancer Sci,
2004,95(5):377-384.
[10] Song G,Ohashi T,Sakamoto N,et al.Adhesive force of human
hepatoma HepG2 cells to endothelial cells and expression of
E-selectin[J].Mol Cell Biomech,2006,3(2):61-68.
[11] Biancone L,Araki M,Araki K,et al.Redirection of tumor metastasis
by expression of E-selectin in vivo[J].J Exp Med,1996,183(2):
581-587.
[12] Keil C,Zeisig R,Fichtner I.Effect of surface modified liposomes
on the aggregation of platelets and tumor cells[J].Thromb Haemost,
2005,94(2): 404-411.
[13] Lin CW,Chen LJ,Lee PL,et al.The inhibition of TNF-α-induced
E-selectin expression in endothelial cells via the JNK/NF-kB
pathways by highly N-acetylated chitooligosaccharides[J].
Biomaterials,2007,28(7):1355–1366.
实验研究
不同采收期杠板归药材茎叶含量测定
刘 青1,2 薛 静2 王维珍2 谭济苍2 左安琴2
【摘要】目的 对不同采收期杠板归药材的茎和叶中槲皮素含量分别进行测定。方法 采用高效液相色谱法。结果 不同采收期的药材中槲皮
素含量差异较大，药材叶的槲皮素含量明显高于茎的含量。结论 杠板归药材宜于 8 月采收且采收时应保证叶的完整存在。
【关键词】杠板归药材；槲皮素；茎；叶
中图分类号：R282.710.3 文献标识码：B 文章编号：1671-8194（2010）34-0049-02
1 贵阳医学院药学院（550004）
2 贵州远程制药有限公司（550018)
杠板归为蓼科植物杠板归poly gonum perfoliatum L.的干燥地上部
分，俗称蛇倒退。原收载于《贵州省中药材、民族药材质量标准》[1]，
现为《中国药典》2010年版新增品种。《中国药典》[2]对其采收炮制规
基金项目：国家支撑计划项目“半夏、何首乌、金钗石斛等8种药材规范
化种植和野生保护抚育关键技术研究及应用示范”（2009BAI74B02-4）；
贵州省科技计划项目“半夏、淫羊藿、金钗石斛等七种药材规范化种
植和野生保护抚育关键技术研究及应用示范”（黔科合重大专项字
（2008）6022）
DOI:10.15912/j.cnki.gocm.2010.34.047
实验研究50 中国医药指南 2010 年 12 月第 8 卷 第 34 期 Guide of China Medicine, December 2010, Vol.8, No.34
定为夏季开花时采割，晒干。其“含量测定”项采用高效液相色谱法测
定槲皮素含量。贵州各地采收杠板归时间多在6月至9月，贵州远程制药
有限公司在药材收购中发现同一产地，不同采收期和茎叶比例不同的药
材，其槲皮素含量有较大差异，为进一步研究杠板归药材中的槲皮素含
量与采收期和药材茎、叶比例之间的关系，本试验对不同采收期的药材
茎、叶含量分别进行了测定。
1 仪器与试药
岛津LC-10ATVP高效液相色谱仪，SPD-10AVP紫外检测器，威玛
龙色谱工作站，电子天平[梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司]；槲
皮素（中国药品生物制品检定所，批号100081-200406），甲醇为色
谱纯，其他试剂均为分析纯；杠板归药材采自贵州省贵阳市乌当区，
经贵阳医学院药学院生药学教研室龙庆德老师鉴定为蓼科植物杠板归
poly gonum perfoliatum L.。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱为Diamonsil C18 5μm 200×4.6mm，流动相为甲醇-0.4%
磷酸溶液（50∶50），流速1.0mL/min，柱温35℃， 检测波长为
360nm。
2.2 溶液配制
对照品贮备溶液：将槲皮素对照品在120℃干燥4h后，称取约
15mg，精密称定，置50mL的量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇
匀，制得0.28mg/mL对照品贮备溶液。
对照品溶液：精密量取对照品贮备溶液1mL至10mL的量瓶中，甲
醇稀释至刻度，摇匀，即得。
供试品溶液：取药材适量，粉碎过药典3号筛，取约0.7g，精密称
定，置100mL具塞锥形瓶中，精密加入甲醇-盐酸（4∶1）50mL，称
定重量，置90℃水浴中加热回流1h，取下，放冷，再称定重量，用甲
醇补足减失的重量，摇均，用微孔滤膜（0.45μm）滤过，滤液作为
槲皮素测定供试品溶液。
2.3 线性关系考察
精密量取对照品贮备液0.5、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0mL至10mL量
瓶中，甲醇定容，得线性系列溶液，按上述色谱条件测定，以峰面积
为纵坐标（Y），槲皮素进样量（μg）为横坐标（X），绘制标准曲
线，计算回归方程。Y=3.8536×103X -12.8654，r =0.9998。 表明槲皮
素在0.14~2.24μg的质量范围内具有良好的线性关系。
2.4 进样精密度试验
取浓度为28μg/mL的对照品溶液10μL，连续进样6次，计算槲皮
素峰面积的RSD为0.18%，表明方法精密度良好。
2.5 稳定性试验
取同一供试品溶液10μL，分别于0、2、4、6、8、10h内各测定一
次，计算槲皮素峰面积的RSD为0.26%，表明样品在10h内稳定性良好。
2.6 重复性试验
取同一批号杠板归样品，制备供试品溶液6份，按上述色谱条件
进行测定，计算含量，测定结果RSD为0.24%，表明方法重现性良好
2.7 回收率试验
取6份已知含量（槲皮素含量2.2mg/g）的样品约0.6g，置具
100mL塞锥形瓶中，精密称定，精密加入用甲醇-盐酸（4∶1）制备的
28μg/mL的槲皮素对照品溶液50mL，置90℃水浴中加热回流1h，取
下，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇均，用微孔滤膜
（0.45μm）滤过，滤液按上述色谱条件进行测定，测定结果RSD为
0.21%，表明方法回收率良好。
2.8 测定法
取不同产地的杠板归适量，按供试品溶液制备方法分别制备杠
板归药材茎和叶样品溶液，分别量取对照品溶液和供试品溶液各
10μL，注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定。色谱图见图1~3，含
量测定结果见表1
从表1可以看出，不同采收时间，同株杠板归药材茎和叶中槲皮
素含量差异较大；叶中槲皮素含量均远大于茎中槲皮素含量。
3 讨 论
本实验采用高效液相色谱法对不同采收期杠板归的叶和茎分别进
行含量测定。结果表明6~10月采收的同株药材中叶的槲皮素含量均
高于茎的槲皮素含量。6~7月药材叶生长很茂盛，但此时种子尚未成
熟，若此时采收，可能对来年药材生长产生影响。9~10月虽然叶茎含
量较高，但此时大多数茎叶已枯萎，产量低，综合考虑药材有效成分
含量及野生资源可持续利用等因素，我们认为就杠板归槲皮素含量而
言[3-5]，贵州杠板归药材采收时间为8月较合理，且采收过程中最好保
证叶的完整存在。
参考文献
[1] 贵州省药品监督管理局.贵州省中药材、民族药材质量标准
[S].贵阳:贵州科技出版社,2003:198.
[2] 国家药典委员会.《中国药典》(2010年版)[M].北京:中国医药
科技出版社,2010.
[3] 张荣林.杠板归的化学成分研究[J].沈阳药科大学学报,2007,4
(4)204:.
[4] 黄鹤飞,张长城,袁丁等.杠板归抗炎及抑菌部位研究[J].安徽医
药,2008,20(7):8.
[5] 扶亚祥,何湘蓉,李俊超等.杠板归化学成分分析及抗菌效果研
究[J].动物医学进展,2008,29(9):45-49.
表1 茎、叶中槲皮素测定含量结果
药材编号 采收时间 茎含量 叶含量 二者比较（年月日） （%） （%） （倍）
1 2009.6.3 0.16 0.46 2.9
2 2009.7.3 0.11 0.22 2.0
3 2009.7.20 0.10 0.31 3.1
4 2009.8.3 0.10 0.42 4.2
5 2009.8.19 0.18 0.69 3.8
6 2009.9.2 0.11 0.44 4.0
7 2009.9.17 0.21 0.60 2.9
8 2009.10.9 0.26 1.50 5.8
9 2009.10.23 0.12 0.15 1.6
图1 槲皮素对照品HPLC图 图2 杠板归药材茎样品HPLC图 图3 杠板归药材叶样品HPLC图