全 文 ：东南大学学报 (医学版 )JSoutheastUniv(MedSciEdi)　2008 , Jan;27(1):10-12
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[收稿日期 ] 2007-08-29
PromotermethylationandexpressionofDLC-1gene
inhumancoloncellines
JINYue-ling, TIANXiao-qiang, SHANGYan-fang, HUANGPei-lin
(DepartmentofPathologyandPathophysiology, SchoolofBasicMedicalScience, SoutheastUniversity, Nanjing210009, China)
Abstract:Objective Todeterminewhetheraberantmethylationisacontributionfactortotranscriptionalinactiva-
tionofDLC-1 incoloncellines.ViatheinvestigationoftheexpressionandmethylationstatusofDLC-1(deletedinliver
cancer, DLC-1)geneinhumancoloncellineswereinvestigated.Methods　ReversetranscipatasePCRwasusedtoex-
ploremRNAexpressionoftheDLC-1gene.Methylationspecificpolymerasechainreaction(MSP)andsodiumbisulfite
genomicsequencing(BSP)wereusedtotestpromotermethylationofDLC-1 geneinCaCo-2 , LoVoandHT-29.Thehy-
permethylationstatuswasreversedbyaddingvariousconcentration(0, 5, 10 μmol·L-1)of5-aza-2 -deoxycytidine(5-
Aza-CdR), ademethylatingagent.Results　DLC-1 genewasobviouslyexpressedinCaCo-2andLoVocellines, both
cellinesshowednomethylation.Onthecontrary, lossofDLC-1 mRNAexpressionwasdetectedinHT-29 duetothe
methylationofCpGislandofDLC-1gene.Afterthetreatmentof5-Aza-CdRinhypermethylationcellineHT-29, theex-
pressionofDLC-1mRNAwasincreasedobviously.Conclusion　ThispromoterhypermethylationiscorelatedwithDLC-
1 geneexpressioninhumancoloncancerHT-29cellineandplaysakeyroleinDLC-1 silencing.
Keywords:DLC-1gene;methylation;coloncancerlines;methylationspecificpolymerasechainreaction
　　[基金项目 ] 江苏省中医药管理局资助项目(H05027)。
　　[作者简介 ] 王训乐(1963-),男 ,江苏连云港人 ,主管药师。 E-mail:wxljsqf@tom.com
银荆感冒颗粒解热作用的实验研究
王训乐 1 ,邱召娟 2 ,朱萱萱2 ,严士海 2
(1.南京医科大学附属第二医院 药剂科 ,江苏 南京　210029;2.江苏省中医院 , 江苏 南京　210029)
[摘要 ] 目的:研究银荆感冒颗粒的解热作用。方法:将 54只 SD大鼠随机分成模型组 ,正柴胡颗粒组 ,扑热息痛组及银荆感冒
颗粒小 、中 、大剂量组 , 每组 9只。末次给药后 ,大鼠背部皮下注射 2, 4-二硝基苯酚 , 测量大鼠体温的变化情况;大鼠后脚两爪
脚跖皮下注射角叉莱胶悬液 ,测量其肛温的变化情况。结果:(1)银荆感冒颗粒小 、中 、大剂量组对 2, 4-二硝基苯酚所致大鼠发
热解热作用的持续时间分别为 120、150、180 min以上;(2)银荆感冒颗粒小 、中 、大剂量组对角叉莱胶所致大鼠发热的解热作用
的持续时间分别为 4、5、6 h。结论:银荆感冒颗粒具有较好的解热作用。
[关键词 ] 银荆感冒颗粒;2, 4-二硝基苯酚;角叉莱胶;解热
[中图分类号 ] R285.5　　[文献标识码 ] A　　[文章编号 ] 1671-6264(2008)01-0010-03
　　银荆感冒颗粒由金银花 、连翘 、荆芥 、板蓝根 、防风
和薄荷等组成 ,是银翘散结合临床经验化裁而成 ,主治
风热感冒的发热 、咽痛 、周身酸痛 、咳嗽等症。我们已
有实验显示其对甲型流感病毒和乙型流感病毒有良好
·10·
的抑制作用 ,并具有较好的抗菌 、抗炎 、镇痛作用且安
全性大 。本研究旨在探讨其对 2, 4-二硝基苯酚和角
叉莱胶所致大鼠发热的解热作用。
1　材料与方法
1.1　材料
1.1.1　药品及试剂　银荆感冒颗粒:江苏省中医院制
剂部 ,批号 040603;扑热息痛:江苏永大药业有限公
司 ,批号 050804;正柴胡颗粒:南通精华制药有限公
司 ,批号 051222;2, 4-二硝基苯酚:上海化学试剂总厂 ,
批号 041016;角叉莱胶:江苏省药物研究所 。
1.1.2　仪器　电子测温仪 , FA1004电子分析天平 。
1.1.3　动物　SD大鼠 ,雄性 ,体质量 180 ～ 200 g,由
南京青龙山饲养厂提供 ,合格批号 SCXK2001-0018。
1.2　方法
1.2.1　2, 4-二硝基苯酚致热法 [ 1-3] 　取 SD大鼠 54
只 ,随机分 6组 ,每组 9只 。(1)模型组:等量 NS, 10
ml·kg-1;(2)正柴胡颗粒组:0.5 g·kg-1;(3)扑热息痛
组:0.2 g·kg-1;(4)银荆感冒颗粒小剂量组:4g·kg-1;
(5)银荆感冒颗粒中剂量组:8 g·kg-1;(6)银荆感冒颗
粒大剂量组:16g·kg-1。以上动物均灌胃给药 ,给药容
量 10ml·kg-1 , 1次·d-1 ×7 d,末次给药后即于背部皮
下注射 2, 4-二硝基苯酚 1ml·(100g)-1 [ 15mg·(10ml·
kg)-1 ] ,每隔 30min测肛温 1次 ,连续测定 3 h(动物给
药前测定 2次平均体温 ,温差 <0.3℃者用于实验)。
1.2.2　角叉莱胶致热法[ 4-5] 　取 54只 SD大鼠 ,随机
分 6组 ,每组 9只 。(1)模型组:等量 NS, 10 ml·kg-1;
(2)正柴胡颗粒组:0.5 g·kg-1;(3)扑热息痛组:0.2
g·kg-1;(4)银荆感冒颗粒小剂量组:4 g·kg-1;(5)银
荆感冒颗粒中剂量组:8 g·kg-1;(6)银荆感冒颗粒大
剂量组:16 g·kg-1。以上动物均灌胃给药 ,给药容量
10 ml·kg-1 , 1次·d-1 ×7 d,末次给药 , 1 h后于大鼠后
脚两爪脚跖皮下注射 1%角叉莱胶悬液 0.1 ml·爪 -1 ,
此后每小时测定肛温 ,共测定 6次 ,即连续测定 6 h
(动物给药前测定 2次平均体温 ,温差 <0.3℃者用于
实验)。
2　结　　果
2.1　银荆感冒颗粒对 2, 4-二硝基苯酚所致大鼠发热
的影响
注入 2, 4-二硝基苯酚 0.5 h后 ,体温明显升高 ,与
实验前比较具有显著性差异(P<0.05),提示 2, 4-二
硝基苯酚造模成功。银荆感冒颗粒小剂量组解热作用
持续 120 min,中剂量持续 150 min,大剂量持续 180
min以上 ,提示银荆感冒颗粒对 2, 4-二硝基苯酚致热
具有较好的解热作用 。银荆感冒颗粒各剂量组与正柴
胡颗粒组和扑热息痛组比较 , 均无显著性差异 。见
表 1。
2.2　银荆感冒颗粒对角叉莱胶所致大鼠发热的影响
对角叉莱胶所致大鼠发热 ,银荆感冒颗粒 3个剂
量组在给药 2 h后开始体温下降 ,与模型组比较具有
显著性差异(P<0.05)。小剂量组和中剂量组分别持
续 4 h和 5 h,大剂量组持续 6h,提示银荆感冒颗粒对
角叉莱胶所致大鼠发热具有较好的解热作用。银荆感
冒颗粒各剂量组与正柴胡颗粒组和扑热息痛组比较 ,
均无显著性差异 。见表 2。
表 1　银荆感冒颗粒对 2.4-二硝基苯酚所致大鼠发热的影响
组　别 剂量 /(g·kg-1)
实验前
体温 /℃
注入 2, 4-二硝基苯酚后体温 /℃
30min 60min 90 min 120 min 150 min 180min
模型组 等量 NS 36.52±0.25 38.16±0.30 38.31±0.27 38.37±0.20 37.94±0.35 37.52±0.30 37.22±0.37
正柴胡颗粒组 5 36.76±0.36 38.04±0.41) 37.42±0.551), 2) 37.43±0.663), 2) 36.92±0.462) 36.93±0.694) 37.01±0.36
扑热息痛组 0.2 36.52±0.57 37.48±0.581), 2) 37.79±0.321), 2) 37.24±0.221), 2) 37.18±0.532) 36.77±0.572) 36.62±0.664)
银荆感冒颗粒
　　小剂量组 4 36.75±0.27 37.56±0.311), 2) 37.75±0.291), 2) 37.56±0.391), 2) 37.15±0.42) 37.07±0.70 37.11±0.583)
　　中剂量组 8 36.73±0.36 37.64±0.641) 37.91±0.321), 4) 37.63±0.631), 2) 37.16±0.582) 36.94±0.222) 36.95±0.35
　　大剂量组 16 36.78±0.36 37.62±0.531), 4) 37.25±0.682) 37.04±0.502) 37.04±0.522) 36.92±0.472) 36.53±0.422)
　　与实验前比较 , 1)P<0.01, 3)P<0.05;与模型组比较 , 2)P<0.01, 4)P<0.05
·11·王训乐 ,等.银荆感冒颗粒解热作用的实验研究
表 2　银荆感冒颗粒对角叉莱胶致大鼠发热的影响
组　别 剂量 /(g·kg-1)
实验前
体温 /℃
注入角叉莱胶悬液后体温 /℃
1h 2h 3h 4 h 5 h 6h
模型组 等量NS 36.92±0.49 36.44±0.71 37.59±0.44 37.54±0.30 37.62±0.30 37.78±0.26 37.84±0.37
正柴胡颗粒组 5 36.91±0.38 36.68±0.66 37.06±0.471) 37.13±0.361) 37.12±0.332) 37.33±0.361) 37.45±0.44
扑热息痛组 0.2 36.62±0.25 36.76±0.36 36.74±0.402) 36.95±0.422) 37.04±0.272) 37.04±0.322) 37.32±0.292)
银荆感冒颗粒
　　小剂量组 4 36.82±0.28 36.58±0.54 36.79±0.502) 36.81±0.582) 37.02±0.432) 37.43±0.631) 37.61±0.66
　　中剂量组 8 36.72±0.47 36.53±0.42 36.81±0.402) 37.28±0.241) 37.05±0.252) 37.26±0.192) 37.56±0.24
　　大剂量组 16 36.89±0.30 36.45±0.66 36.67±0.372) 36.65±0.382) 37.07±0.372) 37.22±0.432) 37.25±0.382)
　　与模型组比较 , 1)P<0.05, 2)P<0.01
3　讨　　论
中医认为感冒分为风寒与风热感冒。风热感冒患
者发热较明显 ,轻微怕风 ,汗出不畅 ,头痛 ,流黄鼻涕 ,
痰黏 ,咽喉红肿疼痛 ,口渴;该型感冒是一种外感表邪
之患 ,治疗是让其从体表发散出去。
银荆感冒颗粒是经江苏省中医院专家拟定的感冒
处方。方中金银花味甘 、性寒 、连翘味苦 、性微寒 ,甘苦
相合为君药 ,既有辛凉透邪清热之效 ,又有芳香辟秽解
毒之功;荆芥味辛 、性温 ,助君药辛开皮毛而散邪 ,板蓝
根苦寒助君药清热解毒 ,共为臣药;防风 、薄荷加强辛
散泄热 。
通过两种不同化学物质所致大鼠发热的解热研究
可以发现 ,银荆感冒颗粒对化学物质导致发热具有较
好的解热作用 ,这为该药的临床应用提供了进一步的
药效学基础 。
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[收稿日期 ] 2007-09-25
StudyontheeffectofYinjingganmaograinsonreliefingfever
WANGXun-le1 , QIUShao-juan2 , ZHUXuan-xuan2 , YANShi-hai2
(1.PharmaceuticalDepartment, theSecondAffiliatedHospitalofNanjingMedicalUniversity, Nanjing210029, China;
2.PharmaceuticalDepartment, JiangsuHospitalofTraditionalChineseMedicine, Nanjing210029, China)
Abstract:Objective　TostudytheefectofYinjingganmaograinstorelievefever.Methods　(1)Theratswere
givenYinjingganmaograinsfor7 days.Onthelastday, theratswereinjectedsubcutaneoulyontheirbackwithdinitro-
phenolandthebodytemperatureofratwasmeasured.(2)TheratsweregivenYinjingganmaograinsfor7 days.Onthe
lastday, theratswereinjectedsubcutaneoulyonthefootplateofcruscurvilineumwithSN-263andtheanustemperature
ofratwasmeasured.Results　Yinjingganmaograinsrelievedfevercausedbydinitrophenollasting120, 150and180min
respectivelyinthethreegroups, whilefevercausedbySN-263 wasrelievedfor4, 5, 6 hrespectively.Conclusion　Yin-
jingganmaogainssignificantlyrelievefever.
Keywords:Yinjingganmaograins;dinitrophenol;SN-263;feverrelief
·12· 东南大学学报(医学版)　2008年 1月 , 27(1)