全 文 ：华西药学杂志
W C J P S　2007, 22(5):564 ～ 565 　　
基金项目:教育部科学技术重点研究项目(项目编号:205167)
作者简介:宋萍(1965 -),女 ,山东长岛 ,教授 ,从事药物及食品的分析研究工作。
RP -HPLC测定藏药川西獐芽菜中的龙胆苦苷
宋　萍 ,康志强 ,于　军
(青海民族学院化学系 , 青海 西宁 810007)
摘要:目的　建立了测定不同地区川西獐芽菜中的龙胆苦苷。方法　采用 RP -HPLC法 , Krom asil C18色谱柱 (250 mm ×4. 6
mm , 5 μm),流动相为甲醇 - 0. 04%磷酸水溶液(23：77), 流速 1. 0 m l m in- 1 ,检测波长 238 nm ,柱温 35℃。结果　龙胆苦苷
的线性范围为 0. 026 ～ 1. 048 μg ( r=0. 9996),平均回收率为 99. 6%, RSD =1. 54%。 结论　所建方法简便 、准确 、重复性好 ,
适用于川西獐芽菜及其他药用植物中的龙胆苦苷。
关键词:藏药;川西獐芽菜;龙胆苦苷;反相高效液相色谱法
中图分类号:R917　 文献标识码:A　 　文章编号:1006 - 0103(2007)05 -0564 - 02
Determ ination of gentiop icroside in T ibetan drug Swertia mussotii Franch by RP -HPLC
SONG P ing, KANG Zhi- qiang, YU Jun
(Departmen t of Chem istry, Qinghai Nationa lities Institute, X ining 810007, Ch ina)
Abstrac t:OBJECTIVE　 To estab lish a me thod to determ ine gentiopic roside in Swertia mussotii F ranch in differen t distric ts.
METHOD S　RP -HPLC was used for the dete rm ina tion of gentiopicroside in Swertia mussotii F ranch. The sam ples we re separated on
the co lum n of K rom sil C18(250 mm ×4. 6 mm, 5μm) a t the co lumn tem pe ra ture a t 30℃, w ith me thano l -w ater(0. 04% phospho ric
acid)(23：77)as them obile phase at a flow ra te of 1. 0 m l m in -1. The peaks we re de tect a t 238 nm. RESULTS　The gen tiop icro-
side had a good linearity in the range o f 0. 026 - 1. 048 μg (r=0. 9996) and the average recovery w as 99. 6% w ith RSD o f 1. 54%.
CONCLUSION　The m ethod is sim ple, accu ra te and repea table . It can be suitab le fo r the de term ination o f gen tiopicro side in Swertia
m ussotii F ranch and o the r plants.
K ey words:T ibe tan drug;Swertia mussotii F ranch;Gentiopic roside;Reve rsed - phase high pe rform ance liquid chrom a tog raphy
CLC num ber:R917 Docum ent code:A　 　Artic le ID:1006 - 0103(2007)05 -0564 - 02
　　川西獐芽菜 Swertia mussotii Franch为龙胆科獐
芽菜属的植物 ,主要分布在西藏 、四川以及青海省的
海西 、海北 、黄南 、玉树 、果洛等海拔 3.6 ～ 3.8 km的
高寒地区 ,一年生草本 ,全草入药 ,亦称 “藏茵陈” ,
性寒 、味苦 ,具有清热利湿 、舒肝利胆之功效 ,多用于
消化不良 、骨髓炎 、肝胆系统疾病的治疗。川西獐芽
菜主要含三萜类 (如齐墩果酸)、酮类 、芒果苷 、龙胆
苦苷 、当药素等成分 [ 1] 。药理实验表明 ,龙胆苦苷
具有促进胃液分泌 、抗菌 、利胆和杀微生物等作
用 [ 2] 。文中建立了适用于川西獐芽菜及其他药用
植物中龙胆苦苷的测定方法 ,具有较好的应用价值 。
1　实验部分
1. 1　仪器与试剂
1100型高效液相色谱仪 , 包括 DAD检测器 ,
Ag ilent 1100色谱工作站(美国 Ag ilent);SZ - 97自
动三重蒸馏水器 (上海亚荣生化仪器厂);KQ超声
波清洗器 (昆山市超声仪器有限公司 )。龙胆苦苷
对照品 (中国药品生物制品检定所 );甲醇为色谱
纯;磷酸为分析纯。
1.2　方法与结果
1. 2. 1　色谱条件　K romasil C18色谱柱 (250 mm ×
4. 6 mm , 5 μm);流动相为甲醇 - 0.04%磷酸的水溶
液(23：77);流速 1. 0m l m in-1;检测波长 238 nm;
柱温 35℃。色谱图见图 1。
t /m in　　
图 1　龙胆苦苷对照品(A)和样品(B)溶液的色谱图
F ig 1　HPLC chrom atogram s of gentiopicros contro l so lution (A)
and sam ple solution (B)
1. 2. 2　溶液的配制　准确称取 5mg龙胆苦苷对照
品 ,置 10m l量瓶中 ,加甲醇溶解并定容 ,摇匀 ,即得
DOI牶牨牥牣牨牫牫牱牭牤j牣cnki牣wcjps牣牪牥牥牱牣牥牭牣牥牥牨
龙胆苦苷对照品贮备液 ,使用时稀释成所需浓度 。
准确称取 1 g不同地区川西獐芽菜细粉 ,置干燥圆
底瓶中 ,加甲醇 10m l,超声处理 30m in,将提取液滤
入 50m l量瓶中 ,再加 10 m l甲醇于圆底瓶中 ,超声
提取 ,重复操作 ,滤渣再用甲醇洗涤(2m l×3),合并
两次滤液和洗涤液 ,摇匀 ,定容至 50m l,过 0.45μm
微孔滤膜 ,即得样品溶液。
1. 2. 3　线性关系及范围 　按 “1. 2. 1”项下色谱条
件 ,分别吸取 0. 5、1. 0、2. 0、6. 0、10. 0、14. 0、20. 0 μl
的对照溶液进样 ,以对照品的进样量 (C , μg)为横坐
标 ,峰面积积分值 (A)为纵坐标作图 ,绘制工作曲
线 。线性回归方程为:A =2.723 ×103C +8. 958
(r=0.9996)。结果表明 ,进样量 0. 026 ～ 1. 048 μg
与峰面积的积分值线性关系良好。
1. 2. 4　精密度试验　准确吸取对照品 5 μl,重复进
样 6次测定 ,在 “ 1. 2. 1”项色谱条件下分别测定色
谱峰面积 ,计算峰面积的 RSD =1. 04 %(n =6),表
明仪器的精密度良好 。
1. 2. 5　重复性试验　准确称取 1 g川西獐芽菜 (玉
树 )样品 5份 ,按 “ 1. 2. 2”项下方法处理 ,并在 “ 1. 2.
1”项的色谱条件下测定药材中的龙胆苦苷 , RSD =
1. 6%(n =5),表明方法的精密度良好。
1. 2. 6　回收率试验　准确称取川西獐芽菜 (果洛 )
样品 5份 ,依次加入不同量的龙胆苦苷对照品 。按
“ 1. 2. 2”项下方法处理样品 ,并在 “1. 2. 1”项色谱条
件下测定龙胆苦苷 ,方法的平均回收率为 99.6%,
RSD =1. 54%。
1. 2. 7　样品的测定　称约 1 g不同地区川西獐芽
菜细粉 ,按 “ 1. 2. 2”项下方法制备样品溶液 ,并按
“ 1.2.1”项下色谱条件分析测定样品中的龙胆苦
苷 ,结果见表 1。
2　讨论
对龙胆苦苷对照品溶液在 200 ～ 300 nm进行扫
描 ,最大吸收峰在 220 nm处 ,但此波长下溶剂干扰
较大 ,故以 238 nm 作为检测波长 , 结果稳定 、可
靠 [ 3] 。用甲醇 - 0. 04%磷酸水溶液 (23：77)作为
表 1　不同地区川西獐芽菜中龙胆苦苷的测定(n=3)
Tab le 1　D eterm ina tion of gen tiop icroside in different d istricts of
Swertiamusso tii Franch (n=3)
H ab itats Average con tents /%
QinghaiH aix i 2. 70
　　　Yu shu 4. 01
　　　H aibei 2. 02
　　　Guoluo 3. 99
　　　H aidong 3. 38
　　　Huzhu 3. 47
　　　Huangnan 3. 49
Qinghaiplan ting 3. 34
Xizang 4. 04
S ichuan 3. 85
流动相 ,在 14. 3 m in内样品能达到很好的基线分
离。该方法简便 、灵敏 、干扰少 、重复性好[ 4] 。对于
龙胆苦苷成分的提取 ,考虑其热敏感性 ,同时比较了
用甲醇作溶剂采用热回流 、Soxhie t提取器 、超声波
振荡 3种提取方法。结果表明 ,超声波振荡方法最
好;实验用超声波分别提取 30、45、60、75、90 m in,超
声 30 m in时已将有效成分提取完全 。故实验采用
超声提取法 ,提取时间为 30m in[ 5] 。
　　龙胆苦苷是广泛存在于川西獐芽菜属植物的一
种活性成分 ,具有较强的生理活性 。由于受海拔 、土
壤 、地域等因素的影响 ,药材中有效成分的含量会有
所不同 ,因此 ,研究不同地区川西獐芽菜中龙胆苦苷
的含量 , 对优选药材、开发新药具有非常重要的意义。
参考文献:
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[ J] . 华西药学杂志 , 2007, 22(2):206 - 207.
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[ J] . 中国林副特产 , 2004, 73(6):5 - 7.
收稿日期:2006 - 09
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