全 文 ：Comparative Study on Determination of Fenfluramine
Hydrochloride Tablets by RP-HPLC and GC
Xu Hongxiang and Han Weidong
(Zhej iang Jia xing Insti tute for Drug Control , Jia xing　314001)
Abstract　Objective:To establish an accurate method for determination of fenf luramine hydrochloride tablets
by RP-HPLC , and it w as quant itatively studied in comparison wi th of ficial GC method.Methods:the RP-
HPLC method using Alltima C18 column as analy tical column , 0.05 mol·L-1 phosphoric acid solution (adjusted
pH to 2.5 w ith t riethylamine)-methanol (50∶50)as the mobile phase.Detection wavelength was 254 nm.
Flow rate w as 1.0 mL·min-1.Column temperature w as 30℃.Results:There was a good linear w ithin the
range of 0.20 ～ 1.0 mg·mL-1 fo r fenfluramine hydrochloride w ith r =0.999 9.The average recovery was
99.4%(RSD=1.0%, n =5).The precision wi thin -day RSD was 0.9% (n =4)and betw een-day
RSD was 0.7%(n=6).The detection limi t w as less than 2.5 μg·mL -1.Conclusion:Comparing w ith the
GC method , the proposed RP-HPLC method has no interference in the assay by excipients and is mo re conve-
nient , rapid , accurate and precise.
Key words　fenfluramine hydrochloride , RP-HPLC , GC , comparative study
高效液相色谱法测定复方荔枝草颗粒剂中高车前苷含量
吴正红　裴云萍　方　芸　陈志一
(南京大学医学院附属鼓楼医院临床药理室　210008)
摘要　目的:建立测定复方荔枝草颗粒剂中高车前苷含量的高效液相色谱法。方法:以 KF-C18 (250 mm×4.6
mm , 10μm)为分析柱 , 流动相为甲醇-水-pH 3.5 的 1.0 mol·L-1磷酸盐缓冲液 (40∶55∶5);柱温为 45℃;
检测波长为 335 nm;流速为 1.0 m L·min-1 , 采用面积外标法。结果:线性范围 3.12×10-3 ～ 0.20 μg , 平均回
收率为 96.96%～ 101.5%, RSD<0.69%(n =3)。结论:本法简便 、 灵敏 、 重现性好 , 可用于测定该颗粒剂
高车前苷的含量和质量标准的控制。
关键词　高车前苷　复方荔枝草颗粒剂　高效液相色谱
　　复方荔枝草颗粒剂主要由荔枝草 (Salv ia ple-
beia R.Br.)、 车前草 (Plantago asiatica L.)和
六月雪 [ Serissa serissoides (DC.)Druce] 等多味
中药组成 , 具有清热解毒 、利尿通淋之功效 。方中
主药荔枝草和车前草具有利尿 、 清热和消肿等作
用[ 1 ,2] , 且都含有黄酮苷类化合物高车前苷[ 3 ,4] 。
为了控制制剂质量 , 对高车前苷进行定量分析 , 本
文采用反相高效液相色谱法测定 , 该法准确 、 灵
敏 、 稳定性好。
1　仪器与试药
　　岛津 LC-10A 高效液相色谱仪 , SPD-10A
紫外检测器 , C-R7A数据处理机。
高车前苷对照品 (含量 98%以上 , 上海医药
工业研究院提供);复方荔枝草颗粒剂 (南京大学
医学院附属鼓楼医院生产);甲醇为色谱纯 , 磷酸 、
磷酸二氢钾等均为分析纯。
2　实验方法与结果
2.1　色谱条件 　色谱柱:KF -C18 (4.6 mm ×
250 mm , 10 μm);紫外检测波长:335 nm ;流动
相:甲醇-水-pH 3.5的 1.0 mol·L-1磷酸盐缓冲
液 (磷酸二氢钾 68.05 g , 加水适量 , 溶解 , 再加
入磷酸 1.6 mL , 然后用水稀释至 500 mL) (40∶
55∶5);柱温:45 ℃;流量:1.0 mL·min-1;纸
速:2 mm·min-1 。
·388·　 药物分析杂志　
DOI :10.16155/j.0254-1793.2000.06.011
2.2　高车前苷标准曲线　精密称取高车前苷对照
品适量 , 加入甲醇溶解后 , 稀释成 0.2 mg·mL-1
的溶液 , 再用流动相将此溶液稀释 , 配制浓度为
10.00 , 5.00 , 2.50 , 1.25 , 0.625 , 0.312 , 0.156
μg·mL-1的对照品溶液 , 精密量取 20 μL 进样 , 按
上述条件测定。用色谱峰面积 (Y)对高车前苷浓
度 (X)作图 , 得到工作曲线 , 其回归方程:
Y =33 082.50X -1 026.33　r=1.000 0
在0.156 ～ 10.00 μg·mL-1范围内呈良好的线性关
系。
2.3　样品测定　取复方荔枝草颗粒剂研碎 , 精密
称取约 1.0 g , 置于磨口锥形瓶中 , 精密加入 60%
乙醇 10 mL , 称重 , 置超声振荡器中超声 1.5 h ,
冷却后 , 再称重 , 补加 60%乙醇至原重 , 过滤 ,
弃去初滤液 , 收集续滤液 , 精密量取滤液 1.0 mL
置于 25 mL量瓶中 , 用流动相稀释至刻度 , 摇匀 ,
进样分析。按外标法 , 以峰面积计算高车前苷含
量 , 结果 3 批样品含量分别为 0.451 , 0.512 ,
0.711 mg ·g-1 , RSD 分别为 0.84%, 0.81%,
0.75%(n=3)。色谱图见图 1。
图 1　高效液相色谱图
A.高车前苷对照品　B.复方荔枝草颗粒剂提取液
C.复方荔枝草颗粒剂提取液+高车前苷对照品
1.高车前苷 (16.6 min)
2.4　回收率试验　取已知高车前苷含量的复方荔
枝草颗粒剂研碎 , 精密称取约 1.0 g , 共 3份 , 于
每份中分别加入 0.5 , 1.0 , 3.0 mL 浓度为 221.2
μg·mL-1的高车前苷对照品溶液 (溶媒为 60%乙
醇), 再分别补加 60%乙醇 9.5 , 9.0 , 7 mL , 按
样品测定项下操作 , 制成 3种不同浓度的供试液 ,
每一浓度重复 3 次 , 计算高车前苷含量和回收率 ,
结果回收率为 96.96%～ 101.5%, RSD <0.69%。
2.5　精密度试验　以高 、中 、 低 3种不同浓度的
高车前苷对照品溶液 , 按标准曲线测定项下操作 ,
考察 1 d内和 1周日间峰面积变异性 (n =5), 结
果日内 RSD<3.3%, 日间 RSD <4.7%。
2.6　重复性考察　取复方荔枝草颗粒剂研碎 , 精
密称取约 1.0 g , 按样品测定项下操作 , 制取供试
液 5份 , 进样测定 , 每一份重复 3次 , 计算复方荔
枝草颗粒剂中高车前苷含量 , 结果平均含量为
0.507 mg·g-1 , RSD 为 2.3%(n=15)。
2.7　不同提取法对高车前苷提取率的影响　取复
方荔枝草颗粒剂研碎 , 称取适量 , 共 3 份 , 以
60%乙醇为溶媒 , 分别采用索氏法 、 超声法和回流
提取法 , 提取 1.5 h , 然后测定 , 并计算复方荔枝
草颗粒剂中高车前苷含量 , 结果表明采用超声法提
取效果最佳 。
2.8　不同溶媒对高车前苷提取率的影响　取复方
荔枝草颗粒剂研碎 , 精密称取约 1.0 g , 共 7 份 ,
分别以甲醇 、 水及 50%, 60%, 65%, 70%,
95%乙醇为溶媒超声提取 , 然后按样品测定项下操
作 , 制取供试液 , 进样测定 , 计算复方荔枝草颗粒
剂中高车前苷含量 , 结果表明以 60%乙醇为溶媒
超声提取效果最佳 。
3　讨论
3.1　本文采用超声法对高车前苷提出率最佳 , 并
简化了提取操作过程。超声波振动的空化 、机械粉
碎 、搅拌等作用 , 有利于化学溶媒渗入被提物质内
部 , 加速有效成分进入溶媒中 , 促进有效成分的提
取 , 从而提高了有效成分的提出率。
3.2　用不含荔枝草和车前草提取物制成的空白样
品 , 按本法进行测定 , 在高车前苷色谱图相应的位
置上无峰 , 对高效液相色谱测定结果没有干扰 。
参考文献
1 　中国医学科学院药用植物资源开发研究所 , 中国医学科学院药
物研究所等编.中药志.第二版 (第四册).北京:人民卫生
出版社 , 1988.542
2 　中国药典.1995.一部:53
3 　蒋毅 , 罗思齐 , 郑民实.荔枝草活性成分的研究.医药工业 ,
1987 , 18 (8):349
4 　肖崇厚主编.中药化学.第一版.上海:上海科学技术出版
社 , 1988.194
(本文于 1999年 8月 26日收到)
·389·　20 (6), 2000 　
Determination of Homoplantaginin
in Compound Salvia plebeia Granules by HPLC
Wu Zhenghong , Pei Yunping , Fang Yun and Chen Zhiyi
(The Clinical Pharmacological Depar tment o f the Drum Tower Hospi tal Attached to the
Med ical Col lege of Nanj ing Univer si ty , Nanj ing　210008)
Abstract　Objective:To establish a HPLC method for the determination of homoplantaginin in compound
Salv ia plebeia granules.Methods:Chromatog raphic conditions w ere as follow s:analy tical column of KF-C18
(250 mm×4.6 mm , 10 μm), mobile phase of methanol-water-1.0 mol·L-1 , pH 3.5 phosphate buffer
(40∶55∶5), column temperature at 45℃, detective w avelength at 335 nm , 1.0 mL·min-1 of flow rate.The
ex ternal standard method w as used.Results:The standard curve w as linear in the range of 3.12×10-3 ～ 0.20
μg , the average recovery w as 96.96%～ 101.5%, and RSD was less than 0.69%(n =3).Conclusion:The
method is simple , sensitive , and highly reproducible.The content of homoplantaginin in the granules w as de-
termined by the method and quali ty standard of the granules w as formulated.
Key words　homoplantaginin , compound Salvia plebeia g ranules , HPLC
冬凌草叶和茎中冬凌草甲素含量的对比研究
鲁彦毫　刘国俊＊　李梅荣　李大超　余晓立＊＊
(河南省平顶山市药品检验所　467000)
摘要　目的:建立了冬凌草叶及茎中冬凌草甲素的高效液相色谱测定法。方法:采用 Hypersil ODS 2 C18色谱柱 ,
以甲醇-水 (50∶50)为流动相 , 在 238 nm 波长处检测。结果:叶和茎中冬凌草甲素的含量分别约为 0.55%和
0.025%, 平均回收率为 97.45%。结论:该方法准确 、 灵敏 、 简便 。
关键词　冬凌草叶　冬凌草茎　冬凌草甲素　高效液相色谱法
＊　河南省平顶山市医药公司第一分公司
＊＊　河南省华利制药厂
　　冬 凌草 为唇形 科植 物碎米 桠 Rabdosia
rubescens (Hemsl.)Hara.的干燥地上部分。其主
要抗癌有效成分为冬凌草甲素 , 药理实验证
明[ 1 ～ 3] , 它对 Hela 细胞 , 人体食管癌 109 细胞及
肝癌 BEL -7402细胞有明显抗肿瘤作用 。自 1972
年从民间发现后[ 4]一直未见有采用 HPLC 法直接
测定药材中冬凌草甲素含量的报道 。本文采用高效
液相色谱法测定了冬凌草叶及茎中冬凌草甲素的含
量 , 发现茎中含甲素量较少 , 约相当于叶中含量的
1/20 , 为了保证冬凌草的质量 , 应当控制药材中叶
的量 。
1　仪器与试药
　　冬凌草药材:3份药材样品分别收集于河南济
源 、信阳 、 安阳三地 , 另 1份购于平顶山市神农大
药房 , 由本所副主任药师吴卫新鉴定 。
冬凌草甲素 (HPLC 法测定 , 峰面积归一化法
测得含量为 99.4%)由河南医科所提供 。
SSI400D高效液相色谱仪 、 UV -525 紫外检
测器 、 KYKY-SPS Ⅱ型色谱工作站均为天津凯德
公司生产;Hypersil ODS 2 C18色谱柱 (4.6 mm ×
150 mm , 柱号 10906152), 7125 型 20 μl进样阀 ,
大连依利特科学仪器有限公司。水为重蒸水 , 甲醇
·390·　 药物分析杂志