全 文 ：中国药房 2013年第24卷第11期 China Pharmacy 2013Vol.24No.11
荔枝草，又名雪见草、蛤蟆草、过冬青等，为唇形科鼠尾草
属植物荔枝草 Salvia plebeia R. Br. 的全草。其性凉，味辛，具
有清热解毒、凉血散瘀、利水消肿之功效。现代药理学研究表
明，荔枝草有平喘、抑菌以及抗氧化等作用[1]，其主要含有二萜
类、三萜类和黄酮类等活性成分。目前，有关荔枝草含量测定
的方法有薄层扫描法[1]，但该法是一种离线分析技术，测定过
程复杂、准确性差；曾有报道利用高效液相色谱（HPLC）法对
荔枝草颗粒剂[2]和荔大前合剂中高车前苷含量进行分析[3]。本
试验建立了以RP-HPLC法测定荔枝草中高车前苷和高车前素
含量的方法，并在此基础上对不同产地荔枝草中2种成分的含
量进行了测定。试验结果表明，本方法简单、准确、精密度高、
重复性好，可用于荔枝草药材的质量控制。
1 材料
1.1 仪器
LC-20A HPLC仪、SPD-20AC检测器（日本Shimadzu公司）。
1.2 试剂
乙腈（色谱纯，山东禹王实业有限公司）；水为超纯水；高
车前苷和高车前素对照品由上海医药工业研究院提供，经核
磁共振光谱（NMR）确证，HPLC归一化确定纯度＞98％。
1.3 药材
荔枝草购自北京仟草中药饮片有限公司，由总后勤部司
令部管理保障局第一门诊部傅中先副主任药师鉴定为唇形科
鼠尾草属植物荔枝草S. plebeia R. Br.的全草。
2 方法与结果
2.1 对照品溶液的制备
精密称取2种对照品各适量，置50ml量瓶中，加甲醇溶解
并定容，摇匀，制成高车前苷质量浓度为1.0220mg/ml和高车
前素质量浓度为0.2520mg/ml的单一成分对照品贮备液。精
密吸取2种贮备液各3.0ml，置于同一10ml量瓶中，用甲醇定
容，摇匀，制成高车前苷质量浓度为306. 0μg/ml和高车前素
质量浓度为75.60μg/ml的混合对照品溶液。
2.2 供试品溶液的制备
精密称取药材粉末（过60目筛）1.0g，置100ml三角瓶中，
加入50％乙醇50ml，精密称定，回流提取3h，冷却至室温，再
次称定，用50％乙醇补足失质量，摇匀，经0.45μm滤膜滤过，
取续滤液，即得。
2.3 色谱条件与系统适用性试验
色谱柱：Discovery C18（250mm×4.6mm，5μm）；流动相：
乙腈-0.1％磷酸水（27∶73，V/V，pH2.4）；检测波长：335nm；流
速：1.0ml/min；柱温：35℃；进样量：10µl。取供试品溶液在此色
RP-HPLC法测定不同产地荔枝草药材中高车前苷和高车前素的含量
孙 海1＊，李红磊1，郑 蕊2，傅中先1（1.总后勤部司令部管理保障局第一门诊部，北京 100842；2. 中国中医科
学院附属北京西苑医院药剂科，北京 100091）
中图分类号 R284.1；R927.2 文献标志码 A 文章编号 1001- 408（2013）11- 031-02
DOI 10.6039/j.issn.1001- 408.2013. 1.26
摘 要 目的：建立测定不同产地荔枝草药材中高车前苷和高车前素含量的方法。方法：采用反相高效液相色谱法。色谱柱为
Discovery C18（250mm×4.6mm，5μm），流动相为乙腈-0.1％磷酸水（27∶73，V/V，pH2.4），流速为1.0ml/min，检测波长为335nm。
结果：高车前苷和高车前素的质量浓度分别在20.44～204. 0和5.04～50.40μg/ml范围内与各自峰面积积分值呈良好线性关系（r
分别为0.9997、0.9991）；平均加样回收率分别为98. ％和98.9％，RSD分别为2.62％和2.20％（n均为9）。以山东所产荔枝草质量
为佳。结论：本方法简单、准确、精密度高、重复性好，可用于荔枝草药材的质量控制。
关键词 荔枝草；高车前苷；高车前素；反相高效液相色谱法；含量测定
Content Determination of Homoplantaginin and Hispidulin in Salvia plebeia from Different Habitats by
RP-HPLC
SUN Hai1，LI Hong-lei1，ZHENG Rui2，FU Zhong-xian1（1.First Clinic Department，Security Management Bureau
of GLD，Beijing 100842，China；2.Dept. of Pharmacy，Xiyuan Hospital Affiliated to China Academy of Chinese
Medical Sciences，Beijing 100091，China）
ABSTRACT OBJECTIVE：To establish the method for the content determination of homoplantaginin and hispidulin in Salvia ple-
beia from different habitats. METHODS：RP-HPLC method was adopted. The separation was performed on Discovery C18（250mm×
4.6mm，5μm）column with mobile phase consisted of acetonitrile-0.1％ phosphoric acid（27∶73，V/V，pH 2.40）at the flow rate of
1.0ml/min. The detection wavelength was set at 335nm. RESULTS：The linear ranges of homoplantaginin and hispidulin were
20.44-204. 0μg/ml（r＝0.9997）and 5.04-50.40μg/ml（r＝0.9991）respectively. The mean recoveries were 98. ％（RSD＝2.62％，
n＝9）and 98.9％（RSD＝2.20％，n＝9）. The optimal S. plebeian came from Shandong province. CONCLUSION：The method is
simple，accurate，precise and reproducible for the quality control for S. plebeia.
KEY WORDS Salvia plebeia；Homoplantaginin；Hispidulin；RP-HPLC；Content determination
＊药师。研究方向：药物分析与制剂。电话：010-66887392。
E-mail：allan840128@hotmail.com
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China Pharmacy 2013Vol.24No.11 中国药房 2013年第24卷第11期
谱条件下进样分析，理论板数按高车前素峰计算应不低于
5000；分离度＞1.5；拖尾因子在0.95～1.05之间。色谱见图1。
2.4 标准曲线的制备
分别取高车前苷和高车前素的对照品贮备液0.5、1.0、2.0、
3.0、4.0、5.0ml，置于25ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，
制得系列对照品溶液。取上述溶液各10μl进样，按上述色谱
条件进行分析。以对照品质量浓度（x）为横坐标，峰面积积分
值（y）为纵坐标，进行线性回归，得高车前苷和高车前素的回归
方程分别为y＝635463x－24613（r＝0.9997，n＝6）、y＝47657x－
322770（r＝0.9991，n＝6）。结果表明，高车前苷和高车前素
的质量浓度分别在20.44～204. 0、5.04～50.40μg/ml范围内与
各自峰面积积分值呈良好线性关系。
2.5 精密度试验
精密量取混合对照品溶液适量，在上述色谱条件下连续
进样6次，测定峰面积。结果，高车前苷和高车前素峰面积的
RSD分别为0.11％和0.15％（n均为6），表明仪器精密度良好。
2.6 重复性试验
精密称取同一批样品6份，每份1.0g，分别按“2.2”项下方
法制备供试品溶液，在上述色谱条件下进样分析。结果，高车
前苷和高车前素平均含量的RSD分别为1.69％和1.78％（n均
为6），表明本方法重复性良好。
2.7 稳定性试验
取同一供试品溶液适量，室温下放置，分别于0、2、4、6、8、
10、12、24h进样测定，记录峰面积。结果，高车前苷和高车前
素平均含量的RSD分别为0.15％和0.16％（n均为8），表明供
试品溶液在24h内稳定性良好。
2.8 加样回收率试验
取已知含量的荔枝草药材9份，每份约为0.5g，精密称
定，每3份为一组，按高、中、低质量浓度分别精密加入高车
前苷和高车前素的对照品溶液，照“2.2”项下方法制备供试
品溶液，在上述色谱条件下进样分析，计算加样回收率，结果
见表1。
2.9 样品含量测定
精密称取不同产地的干燥荔枝草药材粉末各1.0g，分别
按“2.2”项下方法制备供试品溶液，在上述色谱条件下进样分
析，测定峰面积，计算样品中高车前苷和高车前素的含量，结
果见表2。
3 讨论
3.1 流动相的选择
在流动相筛选过程中，曾尝试甲醇-水、甲醇-磷酸水、乙
腈-水、乙腈-磷酸水系统。结果显示，甲醇系统分离效果较差；
而乙腈-水、乙腈-磷酸水系统都有较好的分离度，相比之下乙
腈-0.1％磷酸水的基线更稳定、峰形更好，因此选用乙腈-0.1％
磷酸水（27∶73，V/V）为本试验流动相。
3.2 检测波长的选择
采用二极管阵列检测器对荔枝草化学成分的紫外吸收波
长进行考察，并选择210、250、300、335、380nm5个波长进行
比较。结果表明，335nm波长处的高车前苷色谱峰强度大、特
征性强，而高车前素在此波长下亦能很好的检出，故最终选择
335nm为检测波长。
3.3 结果分析
上述测定结果表明，以高车前苷为指标计算荔枝草含量
由高到低的顺序为：4号、6号、1号、7号、5号、3号、2号；以高车
前素为指标计算荔枝草含量由高到低的顺序为：1号、3号、7
号、4号、2号、6号、5号。综合考虑，以山东产荔枝草（1号）质
佳。不同产地荔枝草中高车前苷和高车前素含量差异较大，
可能是产地气候、土壤、采集时间、贮藏时间长短不同造成的，
因此需要建立统一的药材质量标准。
参考文献
[1] 赵丽，娄红祥，钟蒙，等. 荔枝草的化学成分及制剂质量
标准的研究[J]. 山东医科大学学报，1996，34（3）：258.
[2] 吴正红，裴云萍.高效液相色谱法测定复方荔枝草颗粒剂
中高车前苷含量[J].药物分析杂志，2000，20（6）：388.
[3] 吴正红，裴云萍，方云，等. 高效液相色谱法测定荔大前
合剂中的高车前苷含量[J].中药新药与临床药理，2001，
12（6）：435.
（收稿日期：2012-03-12修回日期：2012-04-27）
175
125
75
25
00 5 10 15 20 25 30
时间，min
A
150
100
50
0
0 5 1015 20253035
时间，min
B
电压
，mV
电压
，mV
1
2 2
1
图1 高效液相色谱图
A.混合对照品；B.供试品；1.高车前苷；2.高车前素
Fig 1 HPLC chromatograms
A.mixed control；B.test sample；1.homoplantagenin；2.hispidulin
表1 加样回收率试验结果（n＝9）
Tab 1 Results of recovery test（n＝9）
成分
高车前苷
高车前素
称样量，g
0.50
0.50
0.51
0.52
0.52
0.50
0.50
0.49
0.51
0.50
0.51
0.51
0.50
0.51
0.49
0.52
0.50
0.51
样品含量，mg
2.480
2.503
2.499
2.536
2.531
2.506
2.498
2.406
2.530
0.802
0.805
0.810
0.798
0.802
0.797
0.800
0.805
0.811
加入量，mg
1.265
2.530
3.785
1.265
2.530
3.785
1.265
2.530
3.785
0.400
0.800
1.200
0.400
0.800
1.200
0.400
0.800
1.200
测得量，mg
3.674
4.973
6.422
3.805
5.000
6.277
3.725
4.936
6.296
1.197
1.583
1.994
1.200
1.604
2.037
1.190
1.571
1.983
回收率，％
94.4
97.6
103.7
100.3
97.6
99.3
97.0
100.0
99.5
98.8
97.2
98.7
100.6
100.2
103.3
97.6
95.8
97.7
x，％
98.8
98.9
RSD ，％
2.62
2.20
表2 不同产地荔枝草中高车前苷和高车前素的含量（mg/g）
Tab 2 Contents of homoplantagenin and hispidulin in S. ple-
beian from different habitats（mg/g）
编号
1
2
3
4
5
6
7
产地
山东
江苏
湖北
浙江
浙江
安徽
安徽
批号
200902
200903
200901
200902
200903
200901
200902
高车前苷
5.060
3.724
4.524
5.595
4.657
5.156
4.689
高车前素
1.600
1.011
1.482
1.028
0.882
0.953
1.394
··1032