全 文 ：悬钩子木对实验性慢性支气管炎的影响
*
吴香杰1，红 艳1，朝鲁门2
(1内蒙古民族大学蒙医药学院;2内蒙古民族大学蒙医药学院研究生，通辽 028000)
摘 要 目的:探讨蒙药材悬钩子木治疗慢性支气管炎的药理作用。方法:用香烟熏法建立慢性支气管炎小鼠模型后灌胃
给悬钩子木的水提取物 14 天，测定体重变化、计算肺指数及肺组织病理学改变。结果:模型对照组支气管上皮细胞变形、坏死、脱
落，支气管管腔内见有渗出物，肺泡扩张，呈肺气肿变化。悬钩子木大剂量组、中剂量组及阳性对照组肺宁颗粒都明显减轻小鼠肺
组织病理改变。结论:悬钩子木水提取物的高剂量组( 8． 56g /kg) 、中剂量组( 4． 28g /kg) 、小剂量组( 2． 14g /kg) 均不同程度减轻小鼠
肺组织病理改变，可能具有治疗慢性支气管炎的作用。
关键词 悬钩子木;慢性支气管炎
悬钩子木为蔷薇科(Rosaceae)悬钩子属(Rubus L．)植物库
页悬钩子 Rubus sachalinensis Leveille的干燥茎枝，蒙药名博格
日乐吉根［1］，汉语名为珍珠杆(珍珠干)或悬钩子木［1，2］。《认
药白晶鉴》［3］、《无误蒙药鉴》［4］等蒙医药历代文献以干达嘎
日名称记载，治风热病、巴达干病、浮肿，治肺病特效，也治热
性时疫。悬钩子木具有解表、调元、止咳的功效;用于未熟热，瘟
疫，讧热，感冒，肺热咳嗽，气喘，赫依热［1，5］。依据蒙药功效，本
课题组经多次药理实验证实了该药对呼吸系统疾病有较好的
治疗作用。如具有止咳、化痰、平喘和体内外抗菌作用［6］，为进
一步探讨该药对慢性支气管炎的治疗作用，阐明其机理，进行
了以下实验。
1 材料
1． 1 试验药物 悬钩子木(批号:20111016) ，购于内蒙古民族
大学附属医院，为蔷薇科植物库页悬钩子 Rubus sachalinensis
Leveille的干燥茎枝［7］。肺宁颗粒(批号:110512) ，修正药业集
团有限公司生产。
1． 2 动物 ICR 种小鼠，体重为 18 ～ 22g，雌雄各半，长春市亿
斯实验动物技术有限公司提供。
1． 3 试剂 苏木精(Hematoxylin，批号:20100321) ，上海益力实
业有限公司生产;伊红(批号:20111005) ，北京贝斯湃生物技术
有限责任公司;TO生物切片透明剂(批号:110705)广州市中南
化工仪器有限公司;红双喜牌香烟 ，上海卷烟有限公司。
1． 4 仪器 KD-3358 型切片机，浙江市科迪仪器设备有限公
司。型奥康新型生物显微镜及显微分析系统;EXRE 型旋转蒸
发仪，巩义英峪仪器厂;MDF-U2086 型超低温冰箱。
1． 5 方法 小鼠随机分为 6 组，每组 16 只，分为正常对照组、
模型组对照组、肺宁颗粒对照组、悬钩子木大、中、小剂量组等 6
组。除了正常对照组小鼠外，其它各组小鼠均进行造实验性慢
性支气管炎的模型，小鼠被置于 4000 ml的玻璃瓶内，将玻璃瓶
的中间留个直径为 0． 5 cm 的通气口，在口连接三通管的一端，
另外两端分别连接 100 ml 的注射器和点燃的香烟。用注射器
通过三通管连续吸注香烟烟雾，这样烟熏 21d，前 14 d每天上下
午各一次、每次烟熏 20 min，后 7d 每天一次烟熏 30min。正常
对照组小鼠灌胃给予生理盐水(0． 2ml /10g)。烟熏 21 d后处死
5只小鼠取肺组织做病理切片观察造模情况，如果模型没成功，
继续烟熏，直至造模成功。然后固定于 10%甲醛中，做病理切
片观察小鼠肺组织病理学改变。
1． 5． 1 悬钩子木对实验性慢性支气管炎的治疗作用 造模成
功后断头处死模型组全部小鼠，取血清备用，取肺称重计算肺指
数。阳性对照组灌胃给肺宁颗粒(4． 28g /kg)每天 1 次，正常组
给同剂量的生理盐水灌胃，治疗组为高剂量组(8． 56g /kg)、中
剂量组(4． 28g /kg)、小剂量组(2． 14g /kg) ，每天灌胃给悬钩子
木的水提物一次，连续给药 14 d。在全部实验过程中每 10 d称
量一次小鼠体重，给药 14d 后断头处死全部小鼠，取血清备用，
取肺称重计算肺指数，然后图定于 10%甲醛中，做切片观察小
鼠肺组织病理学改变。
1． 5． 2 悬钩子木对肺组织切片的影响 采用 HE 染色法，取
材、固定，脱水、透明，浸蜡、包埋，切片、贴片，脱蜡、染色，封片并
进行观察。
2 结果
2． 1 小鼠的外观及体重变化 正常对照组小鼠的精神良好、动
作敏快、饮食正常、被毛密泽。模型对照组小鼠的精神差、动作
很少、倦卧、饮食量少、被毛无泽。造模第 10d时，模型组和各给
药组小鼠体重小于正常对照组小鼠体重;造摸第 20d时，模型组
和各给药组小鼠体重小于正常对照组小鼠体重;第 30d时，悬钩
子木大、中剂量组的体重跟肺宁颗粒组体重相近，而且这三组接
近于正常组，结果见表 1。
表 1 各组小鼠体重变化情况比较(珋x ± s，n = 16)
组别
剂量
(g /kg)
实验前 第 10天 第 20天 第 30天
正常对照 23． 44 ± 1． 24 28． 45 ± 1． 79 32． 96 ± 3． 85 36． 82 ± 1． 24
模型对照 24． 69 ± 1． 02 25． 99 ± 1． 22＊＊ 27． 95 ± 5． 30＊＊
肺宁颗粒 4． 28 22． 21 ± 1． 39 26． 51 ± 3． 23 31． 23 ± 2． 07 36． 59 ± 0． 90
悬钩子木 8． 56 22． 84 ± 1． 74 27． 18 ± 1． 35 31． 27 ± 2． 54 36． 23 ± 0． 70
悬钩子木 4． 28 23． 30 ± 1． 50 27． 17 ± 1． 51 31． 08 ± 2． 23 35． 95 ± 0． 54
悬钩子木 2． 14 22． 73 ± 1． 79 26． 83 ± 1． 37 30． 50 ± 0． 91 34． 53 ± 1． 18
与模型组比较 * P ＜ 0． 05，＊＊ P ＜ 0． 01(下同)
2． 2 慢性支气管炎小鼠的肺指数变化 模型组小鼠肺指数大
于正常对照组小鼠肺指数。大剂量、中剂量给药组小鼠肺指数
小于模型组，与阳性对照组相比悬钩子木各剂量组的肺指数无
521中药药理与临床 2013;29(2)
* 课题来源:内蒙古自然科学基金资助项目，批准号: 2010Zd25
DOI:10.13412/j.cnki.zyyl.2013.02.045
明显差异，结果见表 2。
表 2 慢性支气管炎小鼠的肺指数变化(珋x ± s)
组别 鼠数(只) 剂量(g /kg) 肺指数
正常对照 16 0． 00619 ± 0． 0011
模型对照 16 0． 00951 ± 0． 00198
肺宁颗粒 16 4． 28 0． 00749 ± 0． 00158*
悬钩子木 16 8． 56 0． 00645 ± ． 000141*
悬钩子木 16 4． 28 0． 00771 ± 0． 00138*
悬钩子木 16 2． 14 0． 00841 ± 0． 001444
2． 3 肺组织病理学改变 正常对照组支气管上皮光滑完整、形
态清晰，肺泡组织形态均匀，肺泡间质厚薄适当，支气管腔中几
乎没有分泌物和炎症细胞，肺泡无扩张，支气管下可见少量的
淋巴细胞(图 1)。模型对照组支气管粘膜上皮细胞变形坏死，
脱落，部分支气管粘膜上皮内杯状细胞增生，管腔内可见坏死、
脱落的上皮细胞及分泌物，支气管壁内大量淋巴细胞，少许浆
细胞浸润致管壁增厚。部分肺泡壁变薄，肺泡扩张，呈肺气肿变
化，个别区域肺泡呈肺萎陷(图 2)。肺宁颗粒组:支气管粘膜上
皮排列整气，无脱落及水肿。支气管壁内末见炎细胞浸润。肺
泡无萎陷，个别胞泡扩张(图 3)。悬钩子木 8． 56g /kg 组支气管
粘膜上皮排列整气，无脱落及水肿，不明显的管腔少许分泌物
(图 4)。悬钩子木 4． 28g /kg支气管壁炎细胞不明显，个别支气
管壁内有炎细胞浸润，致管壁增厚，腔内少许分泌物，肺泡无扩
张(图 5)。悬钩子木 2． 14g /kg 部分支气管壁内少许炎细胞浸
润，致管壁增厚，气管腔内有少许分泌物，少部分肺泡扩张，肺泡
壁变薄(图 6)。
3 小结
慢性支气管炎是由于寒冷、吸烟等因素长期反复作用下呼
吸道得到刺激之后支气管粘膜细胞失去完整性，免疫力下降的
同时病毒、支原体等微生物造成炎症性细胞。从肺组织病理改
变可以看到支气管壁增厚，有炎症细胞，支气管腔内有渗出物，
肺泡变薄、扩张、有些地方发现肺气肿。在本实验中，悬钩子木
各剂量组及肺宁颗粒组，都不同程度的减轻慢性支气管炎模型
小鼠肺组织病理学改变，说明悬钩子木具有能治疗吸烟引起的
慢性支气管炎的药理作用。
参考文献
1 中华人民共和国卫生部药典委员会．中华人民共和国卫生部药品标
准．蒙药分册，1998，42 ～ 43
2 内蒙古卫生厅．内蒙古蒙成药标准·赤峰:内蒙古科技出版社，1984，
252
3 伊希巴拉珠儿．认药白晶鉴·呼和浩特:内蒙古人民出版社，1998 ∶
243
4 占布拉道尔吉．无误蒙药鉴·呼和浩特:内蒙古人民出版社，1988 ∶
143
5 罗布桑．蒙药学·呼和浩特:内蒙古人民出版社，2006∶ 205
6 吴香杰，布和巴特尔，扎苏娜． 蒙药材库页悬钩子和毛接骨木抗炎镇
咳作用的药理学研究·内蒙古民族大学学报(蒙医药学) ，2012;1(22)
∶ 28 ～ 31
Studies on chronic bronchitis with Ramulus rubi
Wu Xiangjie，Hong yan1，Chao Lumen2
(1 Mongolia-Medicine College，Inner Mongolia University for the Nationalities;2 Graduate Student of Mongolia-Medicine College，
Inner Mongolia University for the Nationalities，Tongliao 028000)
Objective:To explore pharmacological action of Mongolian Medicine Ramulus Rubi to treat chronic bronchitis． Methods:Cigarette-
621 中药药理与临床 2013;29(2)
smoking is used to establish chronic bronchitis model of the mice． The water extracts of Ramulus Rubi was perfused into the stomach of the
mice for 14 days，and then body weight change，the lung index and pathological changes were tested． Results:In model control group，cell
deformation necrosis and loss occurred in bronchial epithelial cells． There are exudates in bronchial lumen． The expansion of the alveoli and
emphysema can be observed． Ramulus Rubi high-dose group，middle-dose group and positive control all relieved significantly the inflamma-
tion of lung tissue in infected mice，but treatment impact of low-dose group is not significant． Conclusion:The water extracts of Ramulus Ru-
bi can relieve the inflammation of lung tissue and have pharmacological action to treat chronic bronchitis．
Key words Ramulus rubi(悬钩子木) ;chronic bronchitis;experimental studies
大黄、巴豆霜对溃疡性结肠炎大鼠 CD4 + CD25 + Treg的影响
王晓红1，侯丽娟2，孙晓萍2，唐 方1
(1天津医科大学总医院中医科;2天津医科大学，天津 300052)
摘 要 目的:探讨巴豆霜、大黄及其成分是否通过维持 CD4 + CD25 + Treg平衡，发挥溃疡性结肠炎( UC) 大鼠的治疗作用。
方法:采用 2，4，6 －三硝基苯磺酸( TNBS) 法复制 UC大鼠模型，将 40 只大鼠随机分为空白对照组、模型组、巴豆霜 +大黄组、巴豆霜
+没食子酸组、巴豆霜 +大黄素组。观察结肠大体形态损伤、组织学变化，测定各组大鼠外周血 CD4 + CD25 + Treg、CD4 + CD25 +
Foxp3 + Treg淋巴细胞变化。结果:与正常组比较，模型组大鼠外周血 Treg细胞降低显著( P ＜ 0． 01) 。与模型组相比，巴豆霜 +大黄
组、巴豆霜 +没食子酸组结肠大体形态损伤、组织学变化显著改善。治疗 1 周后，和模型组比较，巴豆霜 +大黄组，巴豆霜 +没食子
酸组大鼠外周血 Treg细胞有显著增高( P ＜ 0． 01 或 P ＜ 0． 05) ，且两组间比较没有差异;而巴豆霜 +大黄素组没有差异( P ＞ 0． 05) 。
结论:巴豆霜 +大黄、巴豆霜 +没食子酸对大鼠 UC具有显著治疗作用，提高大鼠外周血 CD4 + CD25 + Treg、CD4 + CD25 + Foxp3 + Treg
细胞可能是其作用机制之一，没食子酸是大黄和巴豆霜配伍发挥止泻作用的有效物质之一。
关键词 巴豆霜、大黄;溃疡性结肠炎;Treg
《本草纲目》记载:巴豆霜大黄同用，泻人反缓，为其性相
畏也，本实验前期研究表明，单品小剂量巴豆霜、与大黄按一
定比例配伍具有止泻功效［1］。为探讨传统药对止泻功效的药
理作用机制，阐明其物质基础间的配伍本质，作者拟通过巴豆
霜 +大黄，巴豆霜和大黄不同成分(大黄素、没食子酸)配伍的
比较，揭示该药对发挥中医止泻功效的配伍本质。
溃疡性结肠炎(ulcerative colitis，UC)以腹痛、腹泻、粘液脓
血便为主要临床表现，隶属于中医学泄泻、下痢等范畴，其
发病与免疫调节异常有关［2］。本实验以三硝基苯磺酸(TN-
BS)/乙醇制备大鼠溃疡性结肠炎模型，观察巴豆霜和大黄、巴
豆霜和大黄成分对 UC大鼠 CD4 + CD25 + Treg影响，探讨该药对
干预 UC与免疫调节的相关性。
1 材料与方法
1． 1 试验药物 巴豆霜及大黄粉由天津中新药业集团股份有
限公司乐仁堂制药厂提供，经唐方教授鉴定为掌叶大黄根茎粉
碎。大黄素、没食子酸标准品购于南京泽朗生物技术有限公司，
纯度大于 98%，编号分别为:ZL101222、ZL20110110YG，均为掌
叶大黄提取。
1． 2 动物 Wistar雄性大鼠 40 只，清洁级，体重 180 ～ 220g，购
于中国医学科学院实验动物中心(合格证号:京 2009 － 0004)。
1． 3 试剂 三硝基苯磺酸 TNBS购于天津润泰生物科技有限
公司(sigma公司，批号:109K5008) ，大鼠 Treg流式染色试剂盒
购于 BD公司
1． 4 仪器 流式细胞仪 EPISC Elite-EPS型
1． 5 方法 采用 TNBS /乙醇法，大鼠适应性平衡饲养 3 天，禁
食不禁水 24h，10%水和氯醛腹腔麻醉后，倒悬位，将 TNBS /乙
醇溶液(TNBS与 50%无水乙醇等体积配制，0． 4ml /100g)用 8
号导尿管由大鼠肛门轻缓注入，深约 8cm 肠腔内留置后，注入
约 0． 5ml空气。倒悬位静置 5 min。仰卧归笼，待其自然清醒，
自由饮食。正常对照组注入等量生理盐水，余步骤相同。第 2
天，大鼠出现不同程度腹泻，血便、脓血便，提示造模成功。每天
称重，记录大便情况，检测便潜血、计算结肠炎症活动指数
(DAI)［3，4］，同时观察精神状态、皮毛光泽、活动度、饮食情况。
造模成功后，随机分为 5 组:空白对照组、模型组、巴豆霜 +大黄
组(0． 6mg /ml)、巴豆霜 +没食子酸组(0． 24 + 3． 4mg /ml)、巴豆
霜 +大黄素组(0． 24 + 10mg /ml)。造模第 4 天灌胃给药，1ml /
只，1 次 /d，空白对照组和模型组等量生理盐水灌胃，给药一周。
末次给药后禁食 24h(不禁水) ，10%水合氯醛腹腔麻醉，经腹主
动脉取血约 2ml，EDTA抗凝。采血后迅速剖腹，观察并记录肠
管粘连情况，分离结肠。剪肛门至盲肠结肠段，沿肠系膜剪开肠
腔，4℃生理盐水冲洗肠内容物，滤纸吸干。肉眼观察结肠病变
组织肠黏膜形态，以正常、糜烂、溃疡分级描述，进行结肠粘膜大
体形态损伤评分(CMDI)［5，6］，摘取病变结肠组织 1 ～ 1． 5cm 制
备病理切片。
1． 5． 1 组织病理学评估 摘取新鲜大鼠结肠组织，4%甲醛溶
液固定 24h，常规脱水、石蜡包埋、切片。苏木精-伊红(HE)染
色，光学显微镜下观察。
1． 5． 2 流式细胞术检测 CD4 + CD25 + Treg ﹑ CD4 + CD25 +
Foxp3 +调节 T淋巴细胞 取 100μl抗凝全血(每管 1 × 106) ，加
入 5μl CD4-FITC，CD25-PE抗体，室温避光 15 ～ 30min。用预冷
721中药药理与临床 2013;29(2)