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锥花福禄考的组织培养与离体快速繁殖



全 文 :锥花福禄考的组织培养与离体快速繁殖
石文山 , 刘兰兰 , 刘秀丽 (滨州职业学院生物工程系 ,山东滨州 256624)
摘要 以锥花福禄考新生嫩茎的顶芽和茎段为材料 ,以培养基MS+BA1.0(mg/L ,下同)+IAA 0.1诱导出芽最好;用增殖培养基MS+BA
0.5+IAA 0.2进行快速繁殖 ,增殖率最高;生根以 1/2 MS+IBA 0.2培养基最好 ,15 d生根率可达到 100%;生根试管苗移栽到草炭 3∶蛭石
2∶珍珠岩 1的混合基质中成活率高达 96%。建立了一套锥花福禄考的离体快速繁殖体系 ,为工厂化生产奠定了基础。
关键词 锥花福禄考;组织培养;快速繁殖
中图分类号 Q943.1  文献标识码 A  文章编号 0517-6611(2006)17-4265-02
  锥花福禄考(P·Paniculata L)别名天蓝绣球 、宿根福禄
考 ,为花葱科福禄考属 ,多年生宿根草本植物 ,株高约为 50~
70 cm ,茎秆粗壮 ,基部半木质化 ,无分枝。其花色艳丽 、丰富 ,
花朵直径约为 2.5 cm ,密集 ,圆锥花序顶生 ,花序形态美观 ,
花开耐久并且连续 ,花期 6 ~ 9月 ,较耐寒 ,对土壤要求不高 ,
故世界各地的园林中广泛栽培。常规繁殖采用分株 、压条及
扦插等繁殖方法 ,费工费时 ,速度慢且容易出现病害等问
题[ 1] 。为此笔者从 2004年 10月份开始以幼嫩茎段为外植体
进行了锥花福禄考的组织培养研究 ,找出一套最佳离体快速
繁殖流程 ,为大规模工厂化育苗提供技术参数。
1 材料与方法
1.1 试验材料 锥花福禄考试材由中国科学院植物研究所
购得 ,品种有红 、粉 、白 、紫等颜色。
1.2 试验方法 晴天下午切取锥花福禄考的新生嫩茎 ,用
1%洗洁精浸泡并用清洁软毛刷刷洗 10~ 30min ,进行表面灭
菌 ,然后用纯净水冲洗 10 min 。用 70%酒精浸泡 10 s ,再用
0.1%升汞溶液浸泡 8~ 10min ,不断摇动 ,消毒后用无菌水冲
洗 5~ 6次 ,茎尖剥去外层叶片 ,嫩茎切成单芽茎段分别接种
于诱导培养基中 ,每瓶接种 1个外植体。以MS 作基本培养
基 ,附加 30g/L的蔗糖 ,5.5g/L的琼脂 ,添加不同浓度的 BA 、
IAA ,用浓度 1mol/L的盐酸或氢氧化钠调节 pH值至 5.8。培
养室温度为(25±2)℃,光照强度 2000~ 3000 lx ,每日光照 13h。
2 结果与分析
2.1 不同激素浓度对茎尖萌发率的影响 将消毒过的茎尖
用无菌滤纸吸干水分 ,剥离掉外围叶片 ,切取顶端生长点 0.5
~ 1.0mm ,接种到FY①~ ④号培养基中 ,每瓶 1个 ,每种培养
基 8瓶 ,接种 5周后 ,调查萌发率(表 1)。
  表 1 不同激素浓度对茎尖接种成活率的影响
培养

激素组合
mg/ L
接种数

诱导数

诱导率
%
新梢平均
高度∥cm
FY① MS+BA 0.5+IAA 0.1 8 6 75.0   2.6
FY② MS+BA 1.0+IAA 0.1 8 7 87.5 3.0
FY③ MS+BA 1.5+IAA 0.2 8 5 62.5 2.1
FY④ MS+BA 2.0+IAA 0.2 8 3 37.5 1.8
  由表 1可见 ,接种 1周后各培养基茎尖均有不同程度的
愈伤化 ,膨大并逐渐伸长 ,第 5周后统计结果显示:FY①幼叶
伸展 、芽伸长;FY②茎尖基部形成少量愈伤组织 ,幼叶展开 、
芽伸长较快;FY③愈伤组织较大 ,茎尖膨大明显 ,芽伸长较
基金项目 滨州职业学院科研项目。
作者简介 石文山(1963-),男 ,山东昌邑人 ,硕士,副教授 ,从事植物组
培工作。
收稿日期 2006-06-03
慢;FY④大部愈伤化 。结果表明以培养基 FY②最适合福禄
考茎尖的诱导 ,不但启动快 ,且成活率高 。
2.2 不同激素浓度对侧芽萌发率的影响 将消毒过的幼嫩
茎段分切成单芽茎段 ,接种于 FY①~ ④号培养基中 ,每瓶 1
块外植体 ,每种培养基接 8瓶 ,4周后调查萌发率(表 2)。
  表2 不同激素浓度对侧芽接种萌发率的影响
培养

激素组合
mg/ L
接种数

诱导数

诱导率
%
新梢平均
高度∥cm
FY① MS+BA 0.5+IAA 0.1 8 7 87.5 3.4
FY② MS+BA 1.0+IAA 0.1 8 6 75.0 3.0
FY③ MS+BA 1.5+IAA 0.2 8 5 62.5 2.7
FY④ MS+BA 2.0+IAA 0.2 8 4 50.0 2.1
  由表 2可见 ,接种 1周侧芽开始萌发 ,4周后结果显示:
FY①号培养基萌发率最高 ,达 87.5%,新梢长势快 ,平均高度
达 3.4 cm ,其次为 FY②号培养基。顶芽和侧芽的诱导在 BA
浓度为0.5~ 1.0mg/L较合适 ,当BA浓度超过1.0mg/L时诱
导率有下降的趋势(图 1、2)。
图 1 BA浓度对锥花福禄考顶芽诱导率的影响
图 2 BA浓度对锥花福禄考侧芽萌发率的影响
2.3 不同激素浓度对增殖的影响 将茎尖和茎段诱导出的
丛生芽切割成单芽茎段接种于增殖培养基FZ①~ ⑥中 , 30 d
安徽农业科学 , Journal of Anhui Agri.Sci.2006 , 34(17):4265-4266                     责任编辑 罗芸 责任校对 罗芸
后的增殖表现为培养基FZ②的芽苗生长快且苗壮 ,增殖 5.8
倍 ,其次为FZ①号培养基(表 3)。
统计结果显示(表 3),当 BA浓度高于 1.0mg/L时苗基
部出现大量愈伤组织 ,影响试管苗的生长 ,随 BA浓度的增
加 ,苗高和增殖倍率呈下降趋势 ,且苗细弱 ,说明在锥花福禄
考增殖过程中 ,低浓度的细胞分裂素有利于其增殖 ,试管苗
生长较快且茎秆粗壮 ,非常适合生根移栽(图 3)。
  表 3 不同激素浓度对福禄考增殖的影响
培养基 激素组合
mg/L
接种数

苗高
cm
增殖率
倍数
FZ① MS+BA 0.5+IAA 0.1 20 6.6 5.5
FZ② MS+BA 0.5+IAA 0.2 20 6.7 5.8
FZ③ MS+BA 1.0+IAA 0.1 20 6.0 4.5
FZ④ MS+BA 1.0+IAA 0.2 20 5.6 4.3
FZ⑤ MS+BA 1.5+IAA 0.2 20 5.2 3.9
FZ⑥ MS+BA 2.0+IAA 0.2 20 4.5 3.2
图 3 试管苗增殖
2.4 不同激素浓度对生根的影响 将高于 4 cm的健壮试管
苗剪下 ,苗的基部切成 60°的斜面 ,插入生根培养基中 ,15 d统
计根数和生根率。结果表明(表 4),添加 IBA的生根效果比
添加NAA的明显要好 ,尤其以添加 IBA0.2mg/L为最好(图
4),生根数量最多 ,平均达到 6.5条 ,生根率达 100%。
  表 4 不同激素浓度对福禄考生根的影响
培养基 激素组合
mg/L
接种数

根数

生根率
%
FS① 1/2MS+NAA 0.1 20 4.1 90
FS② 1/2MS+NAA 0.2 20 4.3 95
FS③ 1/ 2MS+IBA 0.1 20 5.7 95
FS④ 1/ 2MS+IBA 0.2 20 6.5 100
2.5 不同基质配比对移栽成活率的影响 生根试管苗移入
温室中 ,经 3~ 5 d的驯化后 ,开盖倒入清水 ,摇动 ,小心取出
试管苗 , 栽入预先用 600倍多菌灵浸透的不同配比的基质
中 ,再用 600倍多菌灵喷洒 ,覆膜保湿 ,约 15 d成活 。其中以
移栽到草炭 3∶蛭石 2∶珍珠岩 1的混合基质中成活率最高 ,达
96%(表 5)。试管苗移栽是工厂化育苗成功的关键 ,适宜的
温度 、湿度配合杀菌剂的喷洒可大幅度地提高移苗成活率 。
上述基质中的珍珠岩颗粒较大 ,疏松透气又保水 ,加上生根
苗的药剂浸泡和栽后药剂喷洒会有效地抑制杂菌孳生 ,提高
移栽成活率。
  表5 不同基质配比对福禄考试管苗移栽成活率的影响
基质 草炭 蛭石 珍珠岩 成活率∥%
FJ① 3 2 1 96
FJ② 1 1 0 88
FJ③ 1 0 1 92
图4 试管苗生根
3 结论
锥花福禄考的离体快速繁殖流程 ,其中外植体的选择以
茎尖和幼嫩茎段比较合适 ,诱导培养基以MS+BA 1.0mg/L
IAA 0.1mg/L为最合适 ,继代增殖培养基以MS+BA 0.5mg/L
+IAA 0.2mg/L较好 ,繁殖过程中基部稍有适宜的愈伤组织
和根的分化 ,增殖速度快 ,试管苗健壮 ,颜色深绿 ,非常适宜
于生根培养和试管苗的移栽。适宜的生根培养基为 1/2MS
+IBA 0.2mg/L ,发根率高 ,生根整齐 。生根苗在草炭 3∶蛭石
2∶珍珠岩 1的混合基质中 ,配合杀菌剂(多菌灵或代森锰锌)
的浸泡和喷洒 ,可以为试管苗创造近乎于无菌的良好环境 ,
提高移栽成活率。
参考文献
[ 1] 杨小梅.宿根福禄考花卉的繁殖与栽培技术[ J] .青海农技推广, 2003(3):41-42.
[ 2] 李红伟 ,张金政,张启翔.福禄考属植物及其主要栽培种的园艺学研
究进展[ J] .园艺学报 ,2005, 32(5):954-959.
[ 3] 代红艳 ,张志宏,高秀岩,等.丛生福禄考的离体繁殖[ J] .园艺学报 ,
2004, 31(3):397-399.
(上接第 4264页)
  猪由于种间屏障相对较低 ,易被人流感病毒或禽流感
病毒感染 ,成为人 、禽流感病毒的中间宿主 ,也成为人 、禽流
感病毒变异后重组的混合器 ,猪在流感病原学和流行病学
中具有重要地位 ,因此 ,应高度重视猪流感。
7 防控措施
由于目前尚无猪流感的特效药物和理想疫苗 ,因此防
控的要点是除了定期接种疫苗外 ,还必须加强饲养管理 ,注
意防寒 、增强体质 ,减少各种应激 ,避免接触水禽 ,对猪舍进
行灭鼠 ,控制犬 、猫 、鸟类和其他禽类进入猪场 。
参考文献
[ 1] 谢三星,陶立.药到猪病除[M] .济南:山东科学技术出版社 ,2001:85-
92.
[ 2] 王永坤 ,吉传义 ,周阳生 ,等.家兔一种新的病毒病———兔瘟的研究
[ J] .中国农业科学, 1988(5):73-79.
4266              安徽农业科学                        2006年