全 文 :组织培养快速繁殖肾茶的研究
李任珠 丁之福1) 林 培1)
(海南大学农学院 , 海口 570228)
摘 要 利用组织培养手段快速繁殖肾茶的研究结果表明:以肾茶的茎尖 、茎节 、节间和嫩叶作
为外植体 ,均能诱导产生愈伤组织 , 但在愈伤组织分化不定芽的诱导中 , 以茎尖最好 , 茎节次
之 ,再次为叶 , 而节间则不易分化成芽.在培养中 , 基本培养基以MS 最合适 , 诱导愈伤组织最好
的培养基是MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L(或 2 , 4-D 0.1 mg/ L),而且对不定芽的分化
最佳;生根壮苗阶段 ,以附加 10%马铃薯和 0.1 mg/L NAA的 1/2MS 培养基效果最好 , 发根率达
100%,且苗粗壮.此外 ,还介绍了肾茶试管苗移栽技术 , 并对炼苗基土作了试验 , 结果表明:肾
茶对土壤的适应性强 ,但其中以垃圾土最优.
关键词 肾茶;组织培养;快速繁殖
中国图书资料分类号 Q 949.777.6
肾茶[ Clerodendranthus spicatus(Thumb)G.Y.Wu] 为唇形科(Labiatae)肾茶属(Cleroden-
dranthus)的多年生常绿中草药 ,原产于热带亚热带地区 ,我国约有 2个种 ,其中 1个种在海南
岛[ 1] .肾茶不仅花形美丽 ,而且全草具有清热去湿 ,排石利尿之功效 ,对治疗急 、慢性肾炎 、膀胱
炎 、尿路结石 、胆结石等疾病有较好的疗效[ 2] .据了解 ,目前海南省的肾茶主要来源于外省 ,民
间多以野生肾茶入药 ,生产上尚属野生状态.近几年来 ,由于热带野生资源遭到严重破坏 ,民间
挖取野生药材上市的现象屡见不鲜 ,从而使海南的肾茶等野生药材资源面临着逐年减少和日
趋枯竭的局面;另一方面 ,由于肾茶种子很小且又难于得到 ,而外省在生产上主要采用压条 、扦
插的传统生产方式 ,繁殖速度甚慢 ,很难满足市场的需求.笔者通过组织培养手段快速繁殖肾
茶的研究 ,旨在为保护 、开发和利用海南岛的肾茶药材资源提供科学依据.
1 材料和方法
1.1 材 料 试验材料为海南的肾茶 ,由个体种植户提供.
1.2 培养基 用MS(Murashlge and Skoog 1992)、B5(Gamborg 1968)、H(Bourgin 1967)、KC(Knud-
sonc 1946)4种基本培养基 ,在培养物的不同发育阶段分别添加不同种类和浓度的植物激素及
其他附加物 ,蔗糖 2%,pH 5.8 ,用 0.65%的琼脂固化 ,分装后经 121 ℃(1.1 kg/cm2 压力)灭菌
20 min ,冷却备用.
1.3 灭菌处理 取幼嫩的肾茶枝条 ,先用洗洁精轻轻擦洗表面 ,再用自来水冲洗干净 ,然后切
下叶片 、茎段(3 ~ 5 cm),放入消毒过的玻璃瓶中 ,用蒸馏水冲洗数次.在超净工作台上 ,于无菌
条件下用 75%酒清消毒切下的叶片和茎段 5 ~ 10 s ,倒去酒精 ,再用0.1%氯化汞溶液浸泡并轻
收稿日期:1998-03-19
1) 本校 93级农本学生
第 16卷第 3期 海 南 大 学 学 报 自 然 科 学 版 Vol.16 ,No.3
1998年 9月 NATURAL SCIENCE JOURNAL OF HAINAN UNIVERSITY Sep., 1998
摇10 min ,倒去氯化汞溶液 ,用无菌水冲洗 4 ~ 5次 ,最后用无菌解剖刀去除叶片边缘及主脉 ,
并切成0.5 cm×0.5 cm 的小片;茎节 、节间 、茎尖分别切成 0.5 cm长的小块 ,用无菌镊子将外
植体接种到培养基上培养.
1.4 培养条件 培养室温度为(25±2)℃,光照强度 1 500 ~ 1 800 lx ,每天连续光照 10 ~ 12 h.
1.5 统计分析方法 采用单项分组资料的方差分析法[ 3] , F 测验显著后 ,再用新复极差测验
(SSR 测验)进行平均数间的多重比较.
2 结果与分析
2.1 同基本培养基的不同激素配比对肾茶不同部位诱导愈伤组织的影响 为了寻找肾茶最
佳繁殖部位和诱导愈伤组织最适激素配比 ,笔者用MS 为基本培养基 ,并以 NAA 0.1 mg/L和
2 ,4-D 0.1 mg/L分别与 5种浓度的 6-BA(0.1 mg/L、0.5 mg/L 、1.0 mg/L、1.5 mg/L 、2.0 mg/
L)组合成 10个处理 ,每处理 24瓶 ,用茎尖 、茎节 、节间 、叶片各接种 6瓶 ,每瓶接 1块外植体 ,
接种 25 d后的观察结果见表 1.
表 1 不同激素配比对肾茶不同部位诱导愈伤组织的影响(1997 年)
代号 处理
mg/L
茎 头 茎 节 节 间 叶片
调查块数愈伤组织块数 诱导率/% 调查块数 愈伤组织块数 诱导率/ % 调查块数 愈伤组织块数 诱导率/ % 调查块数 愈伤组织块数 诱导率/ %
(1) 6-BA 0.1+NAA 0.1 5 2 40 4 2 50 6 3 50 6 3 50
(2) 6-BA 0.5+NAA 0.1 5 5 100 5 5 100 5 5 100 5 5 100
(3) 6-BA 1.0+NAA 0.1 4 4 100 4 4 100 6 6 100 5 5 100
(4) 6-BA 1.5+NAA 0.1 5 4 80 5 3 60 5 4 80 5 4 80
(5) 6-BA 2.0+NAA 0.1 5 3 60 5 2 40 5 3 60 5 2 40
(6) 6-BA 0.1+2 , 4-D 0.1 4 2 50 4 2 50 5 2 40 5 2 40
(7) 6-BA 0.5+2 , 4-D 0.1 5 5 100 4 4 100 5 5 100 5 5 100
(8) 6-BA 1.0+2 , 4-D 0.1 4 4 100 5 5 100 4 4 100 5 4 80
(9) 6-BA 1.5+2 , 4-D 0.1 4 2 50 5 2 40 5 4 80 5 2 40
(10)6-BA 2.0+2 ,4-D 0.1 5 2 40 5 2 40 5 3 60 5 2 40
注:基本培养基为MS.调查块数为未污染的块数.
表1结果表明:肾茶不同部位(茎尖 、茎节 、节间 、叶片)接种 25 d后 ,(1)~ (10)的处理均能
诱导产生愈伤组织 ,其中以(2)、(3)、(7)组诱导率最高 ,均达 100%.当 6-BA 的浓度增高时 ,
其愈伤组织的诱导率相对减少.
2.2 影响愈伤组织分化不定芽的因素
2.2.1 同基本培养基的不同激素配比对肾茶愈伤组织的影响 将各繁殖部位所得的愈伤组
织及时转接到上述 10个处理中继续培养 ,每瓶接 3块愈伤组织 ,繁殖部位和处理均不变动.35
d后 ,愈伤组织在各处理中的增殖倍数和分化情况见表 2.
表2结果表明:肾茶各繁殖部位在处理(2)和(7)中 ,愈伤组织增殖倍数较高 ,其中(7)比
(2)更好 ,各部位的愈伤组织增殖倍数均达 3 ~ 4倍 ,这可能是在生长素类中 , 2 ,4-D的药剂活
性作用最强所致[ 4] ;不定芽的分化以处理(3)、(4)、(8)、(9)较好 ,当 6-BA 的浓度高达 2 mg/L
时(即(5)、(10)处理),不定芽的分化即减少;同时还观察到节间愈伤组织在(1)~ (10)的处理
240 海 南 大 学 学 报 自 然 科 学 版
中均不分化不定芽 , 只长愈伤组织(见照片 1 ~ 4).为了找到其原因 , 笔者用茎节 、节间的愈伤
表 2 同基本培养基的不同激素配比对肾茶愈伤组织增殖与分化的影响
代号 处理
/mg/ L
茎 尖 茎 节 节 间 叶片
增殖倍数 不定芽个 数 增殖倍数 不定芽个 数 增殖倍数 不定芽个 数 增殖倍数 不定芽个 数
(1) 6-BA 0.1+NAA 0.1 1 0 1 0 1 0 0.5 0
(2) 6-BA 0.5+NAA 0.1 2~ 3 0 2~ 3 0 3~ 4 0 3 ~ 4 0
(3) 6-BA 1.0+NAA 0.1 2~ 3 5~ 6 1~ 2 5~ 7 2~ 3 0 3 ~ 4 4 ~ 5
(4) 6-BA 1.5+NAA 0.1 1~ 2 4~ 5 1~ 2 4~ 5 2~ 3 0 3 ~ 4 3 ~ 4
(5) 6-BA 2.0+NAA 0.1 1~ 2 1~ 2 1 1~ 2 1~ 2 0 1 ~ 2 1 ~ 2
(6) 6-BA 0.1+2 ,4-D 0.1 1~ 2 0 1.5 0 1 0 0.5 ~ 1 0
(7) 6-BA 0.5+2 ,4-D 0.1 3~ 4 0 3~ 4 0 3~ 4 0 3 ~ 4 0
(8) 6-BA 1.0+2 ,4-D 0.1 2~ 3 5~ 6 2~ 3 5~ 6 2~ 3 0 2 ~ 3 3 ~ 4
(9) 6-BA 1.5+2 ,4-D 0.1 1~ 2 2~ 3 1~ 2 2~ 3 2~ 3 0 2 ~ 3 2 ~ 3
(10)6-BA 2.0+2 ,4-D 0.1 1 0~ 1 1 1 1 0 1 ~ 2 1 ~ 2
注:基本培养基为MS.增殖倍数以块为单位 ,不定芽个数为每块长出的芽数.
照片 1 茎尖愈伤组织分化的不定芽 照片 2 茎节愈伤组织的不定芽
照片 3 叶片愈伤组织分化的不定芽 照片 4 未分化芽的节间愈伤组织
241李任珠 丁之福 林 培:组织培养快速繁殖肾茶的研究
组织作为外殖体 ,并用同一激素配比处理(3)和不同基本培养基作了进一步的探讨.
2.2.2 不同基本培养基对不定芽分化的影响 用无机盐浓度递减的 MS 、B5 、H 、KC 为基本培
养基 ,并用激素组合 6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L 进行筛选.每种培养基接 3瓶 ,每瓶接 5
块愈伤组织 ,重复 3次.接种 30 d后 ,观察到茎节的愈伤组织不断分化不定芽 ,38 d后 , 茎节在
不同基本培养基中的分化率(分化率是 3 次重复分化总块数占总块数的百分率)分别为:MS
94.1%、B5 60.2%、H 40.3%、KC 20%,平均每块愈伤组织分化不定芽数见表 3.
表3 肾茶茎节在不同基本培养基同激素配比中平均每块愈伤组织分化的不定芽个数 个
基 本
培养基
重 复
Ⅰ Ⅱ Ⅲ 平均
差 异 显 著 性
0.05 0.01
MS 6.5 6.1 6.3 6.3 a A
B5 4.1 3.7 3.6 3.8 b B
H 2.6 2.4 2.5 2.5 c C
KC 1.2 1.3 1.1 1.2 d D
LSR 值 P SSR0.05 SSR0.01 LSR0.05 LSR0.01
2 3.26 4.74 0.29 0.43
SSR 测验 3 3.39 5.00 0.30 0.45
4 3.47 5.14 0.31 0.46
注:F=58.308, F0.01=7.59;同一小写字母为差异不显著 ,不同小写字母为差异显著;同理 ,同一大写字 母为差异极不显著 ,不同大写字母为差异极显著(表 5 、6同).各基本培养基中均加入 6-BA1.0 mg/ L 和NAA0.1mg/L
表3结果表明:不同基本培养基对肾茶茎节愈伤组织分化不定芽有不同的影响 ,以 MS基
本培养基诱导效果最好 ,平均每块愈伤组织分化 6.3个不定芽 ,其次为 B5基本培养基 ,平均分
化3.8个不定芽 ,最差是 KC 基本培养基 ,平均分化 1.2个不定芽.
方差分析结果表明:MS与 B5 、H 、KC 的差异达极显著水平;B5 与H及 H与 KC 的差异也达
极显著水平.这说明高无机盐浓度和高硝酸钾含量的培养基有利于肾茶茎节愈伤组织分化不
定芽.
对于节间愈伤组织在以上处理中的反应情况 ,笔者做了同样的试验 ,即将节间的愈伤组织
分别接到表3的 4种培养基中 ,38 d后观察结果见表 4.
表 4 肾茶节间在不同基本培养基中诱导愈伤组织分化不定芽情况(1997年)
基 本
培养基
接种的愈伤
组 织 块 数
愈伤组织
增殖倍数
不定芽分
化 个 数
MS 15 5 ~ 6 0
B5 15 3 ~ 4 0
H 15 1 ~ 2 0
KC 15 1 ~ 2 0
注:各基本培养基中均加入 6-BA 1.0 mg/ L和NAA 0.1 mg/ L
表4的结果表明:高无机盐浓度和高硝酸钾含量的基本培养基对肾茶节间的愈伤组织增
殖有利 ,但均不分化不定芽 ,这可能是因为同种植物的不同组织和器官 ,其再生能力有很大差
异的缘故[ 4] .
242 海 南 大 学 学 报 自 然 科 学 版
照片 5 经增殖后的茎尖不定芽
2.3 不定芽的增殖 将肾茶不同部位诱导出的不定芽
芽丛切小 , 接到合适的培养基上〔MS+6-BA 0.1 ~ 1.5
mg/L+NAA 0.1 mg/L(或 2 , 4-D 0.1 mg/L)〕进行增殖
培养 ,接种 40 d后进行观察 ,结果发现肾茶不同部位所
诱导出来的不定芽增殖倍数不同:其中由茎尖诱导出来
的不定芽 ,经过 1次增殖 ,其增殖倍数最高 ,达 20倍(见
照片 5);由茎节诱导出来的不定芽 ,其增殖倍数较高 ,为
15 ~ 20倍;由叶片诱导出来的不定芽 ,其增殖倍数较低 ,
为10 ~ 15倍(不定芽增殖倍数是以MS+6-BA 1.5 mg/
L+NAA 0.1 mg/L培养基的分化结果计算).这说明肾茶
不同部位所诱导出来的不定芽经过增殖阶段 ,不定芽数
目就会成倍增长 ,这对快速繁殖肾茶是非常重要的.
2.4 根的诱导
2.4.1 无机盐浓度对根分化的影响 由以上试验得知 ,MS 培养基是诱导肾茶不定芽分化最
为适合的培养基 ,为了找到适合于诱导肾茶分化出根的MS 基本培养基无机盐的浓度范围 , 笔
者分别以MS无机盐的1/4 、1/2和全量3种浓度 , 加上NAA 0.1mg/L 、蔗糖2%、活性碳2%、
琼脂 0.65%(用于固化)进行筛选.每种浓度接 5瓶 , 每瓶接4株小苗(由增殖后不定芽形成的
小苗切下来接种),随机排列 ,重复 3次.7 d后 ,小苗开始萌发生根.12 d后统计各浓度的每株
小苗的平均根长 ,并进行方差分析(见表 5).
表5 MS无机盐浓度对肾茶根分化的影响
处 理
/mg/L
重 复
Ⅰ Ⅱ Ⅲ 平均
差 异 显 著 性
0.05 0.01
1/ 2MS+NAA 0.1 3.11 3.20 3.17 3.16 a A
1/ 4MS+NAA 0.1 3.29 2.95 3.01 3.08 a A B
MS+NAA 0.1 2.84 2.27 2.56 2.56 b B
LSR 值 P SSR0.05 SSR0.01 LSR0.05 LSR0.01
2 3.46 5.24 0.39 0.60
SSR 测验
3 3.58 5.51 0.40 0.62
注:F=8.22>F 0.05=5.14
从表 5可以看到 ,不同无机盐浓度对诱导肾茶根的分化有不同的影响:1/2MS 诱导出的根
最长 ,且重复间较稳定;1/4MS 诱导出的根较长 ,但重复间不稳定;MS诱导的根最短.
方差分析结果表明:1/2MS与 1/4MS的分化效果差异不显著;而 1/2MS 与MS和 1/4MS与
MS的分化效果差异显著 ,由此可得出:过高的MS 无机盐浓度诱导肾茶根的分化不理想.
2.4.2 不同生长素及其浓度对根分化的影响 为了找出最适合根分化的生长素及其浓度 ,笔
者在以上试验的基础上 ,利用 1/2MS基本培养基 ,并采用 2种常用的生长素 NAA和 IBA ,分别
设3种浓度(0.1 mg/L 、0.2 mg/L 、0.3 mg/L),共 6个处理 ,同样加入蔗糖 2%、琼脂 0.65%、活
性碳 0.2%,每处理接 5瓶 ,每瓶接 4株切下的芽苗 ,随机排列 ,重复 3次.7 d后 ,各瓶均开始萌
243李任珠 丁之福 林 培:组织培养快速繁殖肾茶的研究
发生根 ,12 d后统计各处理的生根情况 ,并进行方差分析(见表 6).
从表 6可见 ,诱导肾茶植株根分化并不难 ,常用的 2种诱根生长素 NAA和 IBA 都能诱导
肾茶生根 ,且形成完整植株.方差分析结果表明 ,NAA 0.1 mg/L 诱导生根效果与其他处理之间
的差异达极显著水平 , IBA 0.1 mg/L 与NAA 0.2 mg/L和 IBA 0.3 mg/L与 NAA 0.3 mg/L 之间
的差异不显著 ,而NAA 0.2 mg/L与 IBA 0.3 mg/L之间差异显著 , IBA 0.2 mg/L 与其他处理之
间均达极显著水平.由此可见 ,处理 1/2 MS+NAA 0.1 mg/L 最适合于肾茶根的分化.同时 ,在
试验中还观察到 ,用 NAA 0.1 mg/L 诱导的根最粗壮 ,其小苗长势也较其他处理好.
表 6 生长素及其浓度对根分化的影响 cm
处 理
/mg/L
重 复
Ⅰ Ⅱ Ⅲ 平均
差 异 显 著 性
0.05 0.01
1/2 MS+NAA 0.1 3.11 3.20 3.17 3.16 a A
1/2 MS+IBA 0.1 2.51 2.54 2.55 2.53 b B
1/2 MS+NAA 0.2 2.54 2.33 2.43 2.43 b BC
1/2 MS+IBA 0.3 2.36 2.11 2.19 2.22 c c
1/2 MS+NAA 0.3 2.36 1.96 2.19 2.17 c c
1/2 MS+IBA 0.2 1.84 2.11 1.90 1.95 d D
LSR 值 P SSR0.05 SSR0.01 LSR0.05 LSR0.01
2 3.01 4.17 0.153 0.211
SSR 测验 3 3.16 4.37 0.160 0.221
4 3.25 4.50 0.165 0.228
5 3.31 4.58 0.168 0.232
6 3.36 4.64 0.171 0.235
注:F=171.81>F0.01=6.36
2.5 壮苗试验 经组织培养所得到的肾茶小苗很细小 ,直接在大田中种植 ,成活率较低 ,必须
进行壮苗培养以提高移栽成活率.因此笔者将壮苗与生根试验同时进行.
以1/2MS+NAA 0.1 mg/L+蔗糖 2%+琼脂 0.65%+活性碳 0.2%+马铃薯 10%为处理
1 ,以不加马铃薯为对照组(其他同处理 1),每处理接8瓶 ,每瓶接 4株小苗(只保留 1个节及 2
片小叶 ,小苗高约 2 cm).接种 7 d后 ,2个处理均开始萌动生根 ,第 10 d进行观察 ,发现处理 1
中单株平均根长已达1cm;而对照组(处理 2)中单株平均根长仅为0.1 ~ 0.2 cm ,有的甚至才萌
发根点.接种 20 d后 ,处理 1中各瓶小苗均开始分化新生长点及新叶 ,新分枝的节间短且粗
壮;而对照组中各株也分化新叶 ,但节间较长且细.接种 30 d后 ,处理 1中每株平均有 4 ~ 5条
根 ,粗壮 ,叶数增多且变浓绿(此时即可出瓶移栽);而对照组每株平均根数较少 ,根细 ,叶数虽
多但未变浓绿.由此可见 ,马铃薯对于肾茶小苗的壮苗是有利的 ,也是必要的.
2.6 试管苗的移植
2.6.1 炼苗时间与移栽成活率的关系 试管苗是在无菌条件下 ,有良好营养供给 ,有适宜的
光照 、温度和 100%的相对湿度 ,并有适宜的植物激素等满足其生理需要的环境中培养的 ,试
管苗一旦移植出瓶 ,环境发生剧烈变化 ,若没有经过一段适应期的炼苗 ,而直接移栽是很难成
活的.
244 海 南 大 学 学 报 自 然 科 学 版
炼苗天数
图 1 炼苗天数与成活率关系示意图
炼苗时间的长短对试管苗的移栽成活率至关重要.
炼苗时间不足 ,则试管苗适应外界环境的能力就弱;
时间过长则易引起污染 ,使苗根腐烂 ,营养供应不
足 ,植株变弱 ,二者均能导致成活率下降.试验表明:
肾茶试管苗炼苗时间以 2 d为宜 ,成活率与时间的关
系见图1.
2.6.2 不同基土对移栽成活率的影响 采用河沙 、
红土 、垃圾土 、椰糠以及河沙混红土(1∶1)、河沙混垃
圾土(1∶1)6种基土进行筛选.每一种基土移植 3盆 ,
每盆种5株小苗 ,随机排列并放置于相同光照强度和
温度(室温)的地方进行培养.移植 7 d 后 ,小苗开始
恢复生机 ,叶片挺展;14 d 后 ,除河沙混垃圾土中有
一盆 4/5死苗(发生死苗的特征是:先是叶片 ,茎出现水渍半透明状 ,而后是小苗基部枯烂及至
全株)外 ,其余各基土中的小苗长势均良好 ,成活率达 100%.对河沙混垃圾土中的死苗进行补
苗 ,并严格控制浇水量和浇水次数 ,12 d后再进行观察 ,发现只有 1株死苗 ,成活率为 93.3%.
由此可见 ,肾茶小苗对土壤的适应性很强;浇水量和浇水次数是影响肾茶小苗移栽成活率的重
要因素.
移栽 30 d后 ,各基土中的小苗均已抽出新技 ,长出新叶 ,其中以垃圾土中的小苗最健壮 ,
生长最快;其次为椰糠和红土;最慢的是河沙混垃圾土 ,其植株矮小细弱(见照片 6 、7 、8).由此
可见 ,肾茶宜在疏松 、肥沃 、湿润并含有丰富有机质的土壤中生长.
1 为沙土;2 为椰糠;3 为垃圾土;4 为红土;5 为河沙混红土(1∶1);6 为河沙混垃圾土(1∶1)
照片 6 不同基土移植
照片 7 移栽垃圾土中的肾茶小苗(30 d) 照片 8 移栽河沙混垃圾土(1∶1)中的肾茶小苗(30 d)
245李任珠 丁之福 林 培:组织培养快速繁殖肾茶的研究
3 结 论
在肾茶的组织培养过程中 ,用茎尖 、幼叶 、茎节 、节间作为外植体 ,均能诱导出愈伤组织 ,但
茎尖 、幼叶 、茎节所产生的愈伤组织经过诱导分化后可以产生丛芽 ,而节间的愈伤组织在同样
的条件下却难于分化出丛芽 ,这可能是因为同种植物的不同组织和器官 ,其再生能力有很大差
异的缘故[ 4] ,有关这方面的资料尚需进一步的研究.
参 考 文 献
1 广东省植物研究所编辑.海南植物志.第四卷.北京:科学出版社 , 1977.56 ~ 57
2 中国医学科学院药用植物资源开发研究所.中国药用植物栽培学.北京:农业出版社 , 1991
3 南京农业大学主编.田间试验和统计方法.北京:农业出版社 , 1987.101~ 110
4 谭文澄 ,等主编.观赏植物组织培养技术.北京:中国林业出版社 , 1991.62 ~ 85
Study on Rapid Propagation of Clerodendranthus spicatus
through Tissue Culture
Li Renzhu Ding Zhifu Lin Pei
(Agricultural Col lege , Hainan University , Haikou 570228)
Abstract This paper discusses the results of the study on rapid propagation of Clerodendranthus spicatus
by means of tissue culture.The experiment proves as follows:The stem tips , the stem nodes , the inter-
nodes , and the new leaves that are taken as explants can induce callus.For inducing the callus into un-
fixed buds ,however , each of them take different effects —the stem tips takes the best effect ,next to the
stem nodes and the third new leaves.But the inter-nodes are proved to be the hardest for inducing buds.
MS is the most suitable basic medium for the culture and the most effective medium for inducing callus is
MS+6-BA 0.5 ~ 1 mg/L+NAA 0.1 mg/L(or 2 ,4-D 0.1 mg/L).For unfixed buds inducing , the
optimum medium is MS+6-BA 1 ~ 1.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L(or 2 , 4-D 0.1 mg/L).During the
process of rooting and strengthening shoots culture period , 1/2 MS medium which is added 10%potato
and 0.1mg/L NAA takes the best effect.Besides , the rooting rate can be as high as 100% and the shoots
grow up strongly.The paper also gives an account of technology in the transplantation of tube shoots of
Clerodendranthus spicatus.The experimental result of the matrix or soil for tube shoots growth indicates
that Clerodendranthus spicatus has a higher adaptability to any soil , of which the dust soil is proved to be
the best.
Key words Clerodendranthus spicatus;tissue culture;rapid propagation
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