全 文 :维吾尔药罗勒乙酸乙酯提取物抗炎作用的研究
古兰·托来西1 ,依巴代提·吐乎提1 ,胡君萍2 ,艾斯木提拉·奴尔艾合买提1 ,艾尼瓦尔·吾买尔1(1.新疆医科大
学药学院药理教研室 乌鲁木齐 830054;2.新疆医科大学生药/天药教研室 乌鲁木齐 830054)
摘要:目的 探讨维吾尔药罗勒乙酸乙酯提取物抗炎作用。方法 采用二甲苯所致小鼠耳肿胀模型 ,角叉菜胶所致小鼠足肿胀模型及小鼠棉
球肉芽肿模型来观察罗勒乙酸乙酯提取物的抗炎作用。结果 与阳性对照组相比 ,乙酸乙酯提取物对二甲苯所致小鼠耳肿胀度有显著的抑制
作用(P<0.01)。与对照组相比 ,对角叉菜胶所致小鼠足肿胀及小鼠棉球肉芽肿的形成有显著的抑制作用(P<0.001)。结论 维药罗勒乙酸
乙酯提取物有明显的抗炎作用。
关键词:维药罗勒;二甲苯;角叉菜胶;抗炎
中图分类号:R969.4;R969 文献标识码:A 文章编号:1006-3765(2011)-02-0023-03
作者简介:古兰·托来西 , 女(1984-)。 硕士研究生。联系电话:
15099509375 , E-mail:Gulan.215@163.com
通讯作者:艾尼瓦尔·吾买尔(维吾尔族),男 ,博士 ,硕士生导师 ,研究
方向:心血管药理
基金项目:新疆自治区高校科研计划(XJEDU2006130)
Study on the ant i-inflammatory effect of an ethyl acetate extraction of
Uygher Medicine Ocimum Basilicum L
GULAN Tolox1 , IBADET Toht i1 , HU Jun-ping2 , ASMUTILA Nurahmat1 , ANWAR Umar1(1.Department of pharm-
cology , Xinjiang Medical University Urumqi 830054 , China;2.Phytochemistry Pharmacognosy Office , Xinjiang
Medical University ,Urumqi 830054 ,China)
ABSTRACT:OBJECTIVE To study on the anti-inflammato ry effect of an ethyl acetate ex tractions of Uygher
Ocimum Basilicum L.(OBL).METHODS The anti-inflammatory effects of OBL ex traction was observed by
adapts Xylene induced mouse ear edema model ,mouse pow sw ollen induced by carrageenon and using the modal of
mouse granulat ion.RESULTS Compared w ith the positive contrast , the OBL ethyl acetate ext ract ions have a sig-
nifocantly good effect to decrease the Xylene induced mouse ear edema(P <0.01).Compared with the control
g roup ,mouse pow sw ollen induced by carrageenan and the model of mouse g ranulation were decreased significantly
(P<0.001).CONCLUSION The OBL ethyl acetate ex tractions have anti-inf lammatory effect.
KEY WORDS:Uygher Ocimum Basilicum L , Xylene , Car rageenan , Anti-inflammatory
罗勒(Ocimum basilicum L.OBL)是唇形科罗勒属一年生
草本植物 ,是维吾尔医应用历史悠久的常用药材之一 , 植物维
文名为热依汗(Rayhan)〔1〕 , 别名九层塔 , 毛罗勒 , 丁香 , 香草
等〔2〕。原产于以印度为中心的亚洲热带〔3〕 , 我国中部 ,南部 ,
东部有栽培 ,主要分布与云南 ,四川 ,广东 , 台湾 , 湖南 , 湖北 ,
福建 , 新疆等。现代化学研究表明罗勒的主要成分包括挥发
油类 ,黄酮类及其苷类 , 香豆素类 ,此外还含萜类和生物碱类。
本实验所研究的是在新疆栽培的罗勒。本课题组前期研究已
表明新疆罗勒有降血压 ,调血脂及抗血栓作用 , 在国外研究表
明罗勒具有抗炎作用 ,但国内未见罗勒抗炎作用的研究报告。
前期罗勒各个提取物抗炎作用的预实验结果表明罗勒乙酸乙
酯提取部位抗炎作用比较明显 , 因此 , 本实验初步研究 OBL
乙酸乙酯提取物的抗炎作用。
1 实验材料
1.1 药品及试剂 阿司匹林(Sigma公司进口分装), 盐酸地
塞米松片:0.75mg/片(天津药业集团新郑股份有限公司 , 批
号 090817),戊巴比妥钠(批号 860901), 角叉菜胶(Biosharp
公司 , 批号 1000245),二甲苯 , OBL 乙酸乙酯提取物
1.2 实验仪器 冷冻干燥机(北京博医康实验仪器有限公
司 , FD-1),旋转蒸发器 RE-52AA , 恒温水浴锅 B-220(上海亚
荣生化仪器厂 , 新疆医科大学中药-生药学实验室提供)
1.3 实验动物 昆明种小鼠 , 清洁级 , 体重 20±2g , 均由新
疆医科大学动物中心提供。
2 实验方法
2.1 药材的提取 新疆托克逊县采集的罗勒地上部分粉碎
后用8 ~ 10 倍量 95%乙醇室温密闭浸泡 12h 后 , 回流提取三
次(3h , 3h , 1h), 收集滤液 ,浓缩 , 所得浸膏以乙酸乙酯溶萃取 ,
浓缩浸膏状置-70℃冷藏 1h , 取出后放入冷冻干燥机 24 h 后
·23·
Strait Pharmaceutical Journal Vol 23 No.2 2011
得罗勒乙酸乙酯萃取物固体粉末 , 乙酸乙酯萃取物在 5%的
CMC-Na溶液溶解至所需浓度。
2.2 OBL乙酸乙酯提取物对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响
取昆明种小鼠 48 只 , 体重为 18~ 22g , 雌雄个半 ,每组 12 只 ,
随机分为 4 组。即空白对照组 ,阳性对照组(阿司匹林组),乙
酸乙酯提取物高 ,低剂量组 , 剂量为 400mg , 100mg·kg -1。每
只小鼠灌胃受试物 1 日给药 1 次 ,连续给药 7d , 在末次给药
时 ,分别将每只小鼠右耳外侧均匀涂抹二甲苯 0.1mL·
10g -1 , 左耳不涂二甲苯 , 1h 后脱颈处死 , 于左右耳同一部位
用直径 8mm 的虹膜环冲下耳片 ,称耳片重 , 以两耳片差为肿
胀度 , 并计算出罗勒水提物对二甲苯致小鼠耳肿胀的抑制
率〔5 ~ 8〕。
2.3 OBL乙酸乙酯提取物对角叉菜胶致小鼠足跖肿胀的影
响 取昆明种小鼠 48 只 ,雌雄各半 , 随机分为 4 组 , 每组 12
只 ,即空白对照组 , 地塞米松对照组 , OBL 乙酸乙酯提取物
高 ,低剂量组。动物各组灌胃给药 , 连续 7d , 于末次给药 1h
后每只小鼠右后肢用游标卡尺测右足跖厚度 , 然后皮下注射
1%的 0.1m L角叉菜胶混悬液致炎 , 并分别在致炎后 1 , 2 , 4 ,
6h 用游标卡尺测右足跖厚度〔5 , 7 , 9〕。
2.4 OBL乙酸乙酯提取物对小鼠棉球肉芽肿形成的影响
取昆明种小鼠 48 只 , 雌雄各半 ,随机分为 4 组 , 每组 12 只 ,即
空白对照组 ,地塞米松组(阳性对照组), OBL-乙酸乙酯提取
物高 ,低剂量组。各组动物戊巴比妥钠麻醉 , 无菌操作方式下
在小鼠腋下植入棉球(每个棉球重量为 30mg , 高压灭菌后
60℃烤箱烘干), 然后各组动物灌胃给药 ,连续 12d , 末次给药
后将小鼠 1%戊巴比妥钠 0.03mL/ 10g 麻醉 , 取出棉球 , 剥离
肉芽组织 , 置 60℃烤箱烤至恒重。
肉芽干重=植入棉球肉芽肿重量-植入棉球重量(30mg)
抑制率 P%=(NS 组棉球肉芽肿重量-给药组棉球肉芽
肿重量)/ NS 组棉球肉芽肿重量〔5 , 8〕
2.4 统计学方法 数据用 SPSS16.0 统计软件处理 , 所有结
果用表示 , 采用单因素方差分析和 SNK 两两比较 , P<0.05
为有统计学意义。
3 结果
实验结果表明 , 与空白对照组比较罗勒乙酸乙酯提取物
高 ,低剂量组有显著性差异(P<0.001), OBL 乙酸乙酯提取
物高 , 低剂量的抑制率分别为 63.24%, 56.40%, 乙酸乙酯高
剂量组与阳性对照(阿司匹林)比较 , 也有显著性差异(P <
0.05),抑制率比阳性对照高。
表 1 OBL 提取物对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响(x±s)
组别 剂量(mg·kg-1)
动物数
(只)
两耳重量差
(mg)
抑制率
(%)
空白对照组 -- 11 4.68±2.17 --
阿司匹林组 50 10 2.00±1.54*** 57.26
OBL乙酸乙酯高 400 12 1.72±1.32***△ 63.24
OBL乙酸乙酯低 100 12 2.04±0.90*** 56.40
与空白对照组比较:***P <0.001;与阳性对照组比较 △P <
0.05;
结果表明:与空白对照组比较 OBL 乙酸乙酯提取物的
高 , 低剂量组在致炎后 1 , 2 , 4 , 6h 均有显著的抑制足跖肿胀的
作用(P <0.01 或 P<0.001),与地塞米松组比较 , 在 4h 时有
明显差异(P <0.05)。
表 2 OBL提取物对角叉菜胶致小鼠足跖肿胀的影响(x±s)
组别 剂量(mg·kg -1) 0(h) 1(h) 2(h) 4(h) 6(h)
空白对照组 -- 1.63±0.13 2.30±0.12 2.25±0.13 2.06±0.24 1.98±0.21
地塞米松组 7.5 1.60±0.10 2.06±0.22* 1.90±0.23*** 1.88±0.08* 1.78±0.10**
OBL-乙酸乙酯高 400 1.63±0.09 2.04±0.21* 1.90±0.17*** 1.83±0.17**△ 1.75±0.13***
OBL-乙酸乙酯中 100 1.63±0.11 2.06±0.29* 1.90±0.27*** 1.83±0.16**△ 1.76±0.15**
与空白组比较:*P<0.05 , **P<0.01 , ***P<0.001;与地塞米松对照组比较:△P<0.05
结果表明:与空白对照组比较 , OBL-乙酸乙酯高 , 低剂量
组的抑制率分别为 30.71%, 30.16%, 有显著性差异(P <
0.001)与地塞米松组比较 ,无明显差异(P >0.05)。
表 3 本发明提取物对小鼠棉球肉芽肿形成的影响(x±s)
组别 剂量(mg·kg -1)
动物数
(只)
棉球肉芽干重
(mg)
抑制率
(%)
空白对照组 — 10 144.70±17.57 --
地塞米松组 7.5 10 95.27±18.92*** 34.16
OBL-水提物高 400 12 100.27±24.91*** 30.71
OBL-水提物低 200 11 100.80±19.48*** 30.16
与空白对照组比较:***P<0.001;
4 讨论
二甲苯致小鼠耳片肿胀 , 角叉菜胶诱发小鼠足肿胀及小
鼠棉球肉芽肿是常用的炎症模型 ,主要表现为局部的充血 ,水
肿 ,渗出及红肿等病例反应过程 , 是应用最多的研究药物抗炎
作用的方法之一〔9〕。本实验结果表明 , OBL乙酸乙酯提取物
有明显的抑制二甲苯致小鼠耳肿胀作用 , 抑制率分别为
63.24%, 56.40%, 与阿司匹林组比较有显著抑制作用(P <
0.01)。
对角叉菜胶致小鼠足肿胀实验结果表明 , OBL 乙酸乙酯
提取物高 , 低剂量组在致炎后均有显著的抑制作用(P <
0.01)。对小鼠棉球肉芽肿形成实验结果表明 , OBL 乙酸乙
酯提取物高 , 低剂量组与模型对照组比较 , 也有显著的抑制作
用 , 抑制率分别为 30.71%, 30.16%。
根据以上研究结果推断 , OBL 乙酸乙酯提取物抗炎作用
与抑制局部血管扩张 , 降低毛细血管通透性 , 血浆渗出液减少
及抑制炎症后期肉芽组织的增生有关。此试验为今后研究维
药罗勒抗炎作用有效成分提供了依据。
参考文献
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·中药与天然药物·
防己及其同科伪品的生药学比较
莫建霞(浙江大学药学院 杭州 310058)
摘要:目的 鉴别比较粉防己 S tephania tetrand ra S.Moore 、其同科伪品木防己 Cocculus trilobus(Thunb.)DC.及金线吊乌龟 S tephania cephalan-
tha Hayata。方法 采用来源 、性状 、显微及薄层色谱法对三者进行鉴别比较。结果 三者在植物形态 、性状 、显微 、化学成分上均有各自的鉴
别特征 ,其中粉防己与金线吊乌龟在植物特征及药材的粉性程度上比较相似, 与木防己则差异较大;三者在根及茎的横切面特征上具有显著差
异;化学成分上三者具有各自的特征。结论 三者的鉴别方法中以根及茎的横切面显微鉴别最为简单 、有效。
关键词:粉防己;木防己;金线吊乌龟;生药鉴定
中图分类号:R282.5 文献标识码:B 文章编号:1006-3765(2011)-02-0025-03
作者简介:莫建霞 ,女(1978.3-)。毕业于广州中医药大学实验师 ,
硕士 ,主要从事药用植物学 、中药鉴定学教学及科研工作。联系电
话:0571-88208445 , E-mail:mojx@zju.edu.cn
全国各地商品防己类药材的基源复杂 , 正品为防己科植
物粉防己 Stephania tetrandra S.Moore的根 ,伪品主要有同科
植物木防己 、金线吊乌龟及马兜铃科广防己 、穆坪马兜铃 、异
叶马兜铃 , 山茱萸科植物小果微花藤 、瘤枝微花藤等植物的
根〔1〕。不同科植物间差异较大 , 易与正品防己区别 ,而同科植
物在亲缘上较近 ,更易混淆。本文选取防己的同科伪品木防
己Cocculus trilobus(Thunb.)DC.及金线吊乌龟 Stephania
cephalantha Hayata与正品粉防己 Stephania tetrandra S.Moore
进行鉴别比较。重点对其进行植物形态 、生药性状 、组织特
征 、薄层鉴别等研究 , 旨在为防己药材的正确使用提供鉴别依
据。
1 实验材料与仪器
1.1 实验材料 粉防己采集于浙江嵊州长乐镇 , 木防己采集
于浙江大学紫金港校区湿地附近 , 金线吊乌龟采集于浙江西
天目山 ,三者经浙江大学中药系陈柳蓉鉴定分别为防己科植
物粉防己 Stephania tetrandra S.Moo re 、同科植物木防己 Coc-
culus trilobus(Thunb.)DC.及同科植物金线吊乌龟 Stephania
cephalantha Hayata。
1.2 仪器与试剂 蔡司 ZEISS-数码显微成像系统(德国蔡
司公司);莱卡 CM1900 冷冻切片机(德国莱卡公司);EYELA-
N1000 型旋转蒸发仪(日本艾朗)。
水合氯醛 、丙三醇 、氯仿 、正己烷 、无水乙醇等均为分析
纯。
2 实验内容与结果
2.1 原植物比较 取粉防己 、木防己及金线吊乌龟原植物 ,
比较茎 、叶及根的特征 ,三者区别结果(见表 1)。
表 1 粉防己 、木防己及金线吊乌龟植物特征比较
粉防己 木防己 金线吊乌龟
植物来源 粉防己 Stephania
tetrandra S.Moo re 木防己 Cocculustr ilobus(T hunb.)DC.金线吊乌龟 Stephaniacephalantha Hayata
茎 绿色草质茎 ,基本光滑 绿色草质茎 ,有柔毛 红褐色草质茎 ,光滑
叶 叶柄盾生 ,叶膜质 ,被细腻柔毛 叶柄基生 ,叶纸质 ,两面均被毛 叶柄盾生 ,叶膜质 ,光滑
根 圆柱形 ,易折断 ,断面粉性强
圆柱形 ,不易折断 ,
断面木性强
块状 ,断面
粉性强
2.2 根性状鉴定比较
2.2.1 粉防己:块根呈不规则圆柱形 , 常弯曲如结节样 , 直径
1 ~ 3 cm。表面灰褐色 , 块根弯曲处有深陷的横沟。 体重 , 质
坚实 , 断面平坦 ,灰白色至黄白色 ,富粉性 , 有排列稀疏的放射
状纹理。气微 , 味苦。
2.2.2 木防己:根长圆柱形 , 略扭曲 ,直径 1 ~ 2.5 cm。 表面
灰褐色或黑褐色 , 有纵向波状弯曲的沟纹 , 偶见扭曲处有横向
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Strait Pharmaceutical Journal Vol 23 No.2 2011