全 文 ：4 82 药学学报 A e扭 P h a r m a ce u t ie a S in ie a 198 9 ; 24 (7 ) : 4 82 ~ 48 6
研 究 论 文
香荚兰素对抗大鼠杏仁核点燃效应
吴惠秋 谢 林 金小南 葛 琪 * * 金 辉 * * 刘国卿
(中国药科大学药理教研室 , 南京 2 10 0 09)
提要 用大鼠杏仁核点燃模型研究了香英兰素的抗瘫痛作用 . 每日一次低电流刺激杏仁
基底外侧核可在第 15 天使大鼠产生典型的五期反应 , 刺激后放电显著延长 . 香英兰素在不产
生中枢抑制作用的剂量即可抑制点燃效应的五期反应 , ED , 为 286 m g / k g ( i p ) , 同时使刺
激后放电时程比对照组下降 28 . 6% . 苯妥英钠抑制五期反应的 E D ,。 为 56 m g / k g , 也能明
显缩短刺激后放电时程 . 本文提供了一种新型慢性实验性瘫痛模型 .
关键词 癫痛 ; 点燃模型 ; 杏仁基底外侧核 ; 香英兰素
香英兰素 ( v a n i l li n )是兰科植物天麻 ( G a s t r o ida e la t a B lu m e ) 中有效成分香英兰醉
(v a in n yl al co h ol ) 的结构类似物 , 为我校研制的抗癫痈药物 . 临床资料表明香荚兰素对
癫痈小发作 、 大发作和精神运动性发作都有较好的疗效 l() . 在多种实验性癫痈模型上 , 香
英兰素都显示了较强的抗惊作用 (2) . 点燃模型为一种慢性实验性癫痈模型 . 资料表明 , 临
床广泛使用的大多数抗癫痈药物 , 尤其是广谱抗癫痈药都能有效地对抗点燃效应 (3) 。 本文
建立了大鼠杏仁核点燃模型 , 并在该模型上研究了香英兰素的抗癫痈作用 .
材 料 与 方 法
电极埋植 实验用雌性 S p r a g u e一D a w l e y 大鼠 , 体重 2 2 0 士 5 9 ( 又 士 SD , 下同 ) 。 在
eq iu et ns in 复合麻醉剂 (组成为 : 戊 巴 比妥钠 1 . 21 5 ;9 水合氯醛 5 . 31 2 9 ; 硫酸镁
2
. “ 7 ;9 丙 二醇 49 . 5 m ;l 无水 乙 醇 12 . 5 m l , 溶 解后用 蒸馏水 稀释 到 12 5 m l)
3 m l/ k g
,
iP 麻醉下固定于 D va id K oP f 动物脑立体定位仪上 , 施行无菌手术 . 按 K o in g
大鼠图谱 (4) 将直径为 0 . 6 m m 的双极刺激电极埋植于两侧杏仁基底外侧核 , 座标为 A : 3 . 4
一 3 . 9 m m , L : 4 .0 m m , H : 一3 .2 m m . 皮层 电极由直径 1 . 0 、 m m 的不锈钢小螺钉焊接
导线组成 , 固定于左右顶叶皮层硬膜外侧 . 皮层和杏仁核电极依序焊于一七蕊微型插座
上 , 用牙托粉固定于颅骨表面 。 动物手术后饲养一周 , 以期创口恢复 , 并每日 im 硫酸庆
大霉素 , 防止感染 .
本文于 198 年 8 月 21 日收到 .
. 国家教委青年教师和国家青年自然科学基金资助项 目二 ’ 中国药科大学八八届毕业生 .
药学学报 A e 护 . p h ar ma沈 u t ie a s i ni e a 1 9 9 8: 24 (7 ) : 4 82 ~4 6 84 3 8
点燃过程 点燃过程的首次刺激以产生刺激后放电 (a几er i dsch 盯gc , A D ) 时程 10 一
20 5 为原 则选定各 鼠刺激参数 . 刺激参数 为 60 H z 矩形 波串脉冲 , 波宽 1 m s , 持续
1 5
, 恒流输 出强度范围在 140 一 2 0 “ A 之间 . 每 日定时用该刺激参数刺激左侧杏仁基底
外侧核一次 , 以 A D 时程和大 鼠行为变化为观察指标 。 随着刺激次数增加 , 动物 A D 时
程逐渐延长 (图 1 ) 。 行为变化根据 R ac in e 分期法 (5) 分为五期 : 第一期 , 大 鼠白发活动突
然停止 , 鼠须颤动 , 部分动物伴有湿狗样反应 , 约在 1一 4 d 内出现 ; 第二期 , 动物发
呆 , 面部肌肉痉挛 , 咀嚼 , 持续到约第六次刺激为止 ; 第三期 , 一侧或双侧前肢离地 , 发
呆 , 点头 , 持续 4 一 6 ;d 第四期 , 直立 , 前肢阵挛 , 伴有而肌痉挛 、 闭眼 、 流涎等 , 持
续 3一 s ;d 第五期 , 前肢激烈阵挛 , 失去平衡 , 翻倒打滚 , 数分钟后恢复正常姿态 。 动
物达五期反应即被点燃 . 连续三天对刺激产生相同的五期反应开始给药 。 药物 iP hl 后用
固定的刺激参数刺激动物 , 观察药物对五期反应和 A D 时程的影响 . 一次给药后该动物
休息一周 , 第二次给药前需连续三次得到重现的五期反应 。 实验结束后 , 大鼠脑用 10 %
甲醛灌流固定 , 作 40 # m 组织切 )十, 检查电极位置 , 弃去组织学位置不正确者 .
A 39的
材料 香英兰素和苯妥英钠分别由中国药
科大学制药厂和上海第八制药厂产品 , 实验时
用生理盐水溶解 。 其它试剂均由市场购得 . 恒
流刺激器为 D S C 一 2 型恒流恒压双边刺激器 。
脑 电 图 仪 为 上 海 医 用 电 子 仪 器 产 八道
N D 一 82 8 型 。
结 果
人 37 5()
人 从 30
F ig 1
.
H i s t o lo g ie a l l o e a t io n o f e lc z r o d e t iP s
in b a s o la t o r a l a m y g d a ] a
.
一 大鼠杏仁核点燃效应的产生
选定各动物刺激参数后 , 每 日一次用同一
参数刺激左侧杏仁基底外侧核 。 图 2 可见首次
刺激动物后产生的 A D 。 A D 常呈现高幅高频
的癫痛样放电 , 由多个棘波和其它复合波组
成 , 经 2一 5 5 的潜伏期后同时出现在杏仁核
和皮层 。 通常刺激侧杏仁核的 A D 时程短于
对侧杏仁核和皮层 (图 2 ) , 提示与局灶性放电的扩布有关 。 50 % 的动物一和二期反应中
表现 出湿狗样反应 , 达第三期后逐渐消失 。 图 3 可见随刺激次数增加 , A D 时程逐渐延
长 , 由开始刺激时的 12 . 5 士 2 . 4 5 到第 15 次 即平均达五期反应所需刺激次数时的 6 9 .0 士
5
.
15 ( n = 10
,
p < .0 01 )
。 行为 由第一期向第五期反应过渡 , 直至动物被完全点燃 。 由首
次刺激到达五期反应所需的刺激次数为 15 . 2 士 2 . 8 ( n = 10) .
二 . 苯妥英钠对杏仁核点燃效应的作用
动物被点燃后即进行药物作用的观察 。 苯妥英钠在该模型上有较好的抗惊作用 。 保护
杏仁核点燃的五期反应的 E D S。 为 56 .0 土 .6 Om g / k g (95 % 可信限 ) , 并可明显缩短 A D 时
程 (表 1 ) .
4 8 4 药学学报 ^ e at P h a x r口 a ec u t ie a S in ie a 198乳 2 4 (7 ): 482~ 486
F II 2
.
E I朗 t roe n e e p h a lo g r a p h云e a ft e dr ics h a r g e e v o k e d b y th o n sr t s tmi u la t io n o f a m y gd a la k in d l in g. Th e le a d s R C
a n d LC a cr ri g h t
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F ig 3
.
A ft e rd i cs h a r罗 d u r a t io n w i t h th e d a i1y a m y g d a la s rim u 1a t i o n . E a e h v a 1u e is th e m e a n 士 S D o f l o a n i m a l s
三 . 香英兰素对杏仁核点燃效应的作用
香英兰素对大鼠杏仁核点燃的五期反应显示 出与剂量有关的保护作用 (表 1) 。 对抗
五期反应的 E D 50 为 2 86 . 0士 24 m g / k g (9 5% 可信限 ) . 2 92 m g / k g 剂量组并未使动物
t杆现明显的中枢抑制作用 , 但能较强地抑制点燃五期反应 。 2 92 和 4 08 m g / k g 剂量组使
A D 时程显著缩短 , 分别比溶媒对照组缩短 28 . 6 和 67 .4 % 。
药学学报 A e t aP h r am ac ut ie aS in ie a1 9 8 9 ; 24 (7 ) : 4 8 2 ~ 4 8 6 4 8 5
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V 妞l ill in 2 0 8 7 0 6 2 . 7土 7 . 4 2 1 . 9 0 / 7 0 / 7
P h e n y t o i n 2 9 2 9 5 5
.
6 58为土 8 . 3 . 2吕 . 5 2 / 9 0 / 9
4 0 8 9 8 8
.
8 24
.
7 士 7 1 ’ 67 .4 7 / 9 0 / 9
5 0 7 4 2
.
9 7 3
.
3士 6 . 5 一 2 2 0 / 7 0 / 7
】o 7 84 .0 54
.
0 士 9 . 8 . 3 9 . 6 0 / 7 0 / 7
N cr fe r s t o t h e n u m b e r o f a n im a l s u cs d a t a ig
v e n d o s e
.
V a ]u e s o f A D d u r a t i o n a cr m e a n s 土 S D .
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0 1 e o m P a cr d w i th th e r e s伴 e t i v e v e h ie le g or u P .
讨 论
点燃模型是一种慢性实验性癫痛模型 . 通过杏仁核 (3) 、 海马 (6) 等脑区 的埋藏电极 , 每
日施以低强度恒流电刺激 , 可产生脑电图渐进的刺激后放电时程延长和各期行为变化 , 直
至诱发出全身性阵挛型的惊厥 . 这种由训练所致的脑电异常和惊厥行为与人类癫痈发作 ,
尤其是颜叶性鑫痛 、 部分发作及其发展成的全身发作非常相似 (3) .
点燃效应有很高的重现性 . 一旦动物被点燃 , 所出现的五期反应即为永恒性 (7) . 因此
可根据需要随时用相同蒯傲参数使动物引起发作 (8) . 使用该模型可在观察药物对惊厥行为
作用的同时定量分析脑电变化 . 不仅可以研究药物对五期惊厥反应的作用 , 还能观察药物
对点燃过程不同阶段的影响 , 即观察药物对惊厥反应的预防作用 . 临床常用的抗癫痛药物
在本模型均有不同程度 的抗惊作用 , 对多种实验性癫痈模型有效的抗癫痛药如丙戊酸钠 、
苯二氮草类以及苯妥英钠都能较强地对抗杏仁核点燃效应 (9, ’ 0) . 因此 , 点燃效应的建立 ,
为筛选新的抗瘫痛药物和研究鑫痛的病因提供了一种新型的慢性模型 .
香英兰素有较好的抗惊作用 , 3 0 0 m g / k g 剂量就能提高戊四氮和硝酸士的宁的半数
致惊量并能对抗电休克 (2) . 本文观察到香荚兰素在 2 92 m g / kg 剂量 , 在无明显中枢抑制
作用时 , 就能抑制点燃效应的全身性阵挛发作 , 缩短 A D 时程 . 表明该化合物在不产生
中枢镇静作用的剂量就能显著改善脑电 , 产生抗癫痛作用 . 江振裕等 (I ’ )报告香英兰素可
保护急性实验中电刺激引起的家兔阵挛反应 , 并改善阵挛时的脑电异常 , 和本文结果有一
定 的相似性 。 苯妥英钠对 抗大 鼠杏 仁核点燃五期反应 的 ED S。 为 30 一 10 m g / k g 范
围 (9, ’ 2 )和本文结果基木一致 。
参 考 文 献
1
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2
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3
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S e h m u tz M
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R o le v a n c o f k in d l in g a n d r e la t e d P ro c s犯 s t o h u m a n e P i le P t o g o n “ i s . P尸叩 价 u r o一尸砂 c h o卢h a r枷 e o l
万 to l P s y c h匆 t 19 8 7 ; 1 4 : 5 0 5 .
4
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K l iPpe l R A
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A s t e cr o t a x ie a t la s o f th e fo 邝 b r a i n a n d lo w e r P a r t s o f t h e b r a in s ct m . I s t 目 .
B a l t im o r e : W illia
s a n d W ilk i
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5
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R a e in e R
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M od i八e a t io n o f s e i z u cr a e t iv i r y b y e le e t r ie a l s t im u la t io n : 11 M o t o r 沁 i z u r e E I亡e zr o e脚 e hP a ot , r C ihl
4 8 6 药学学报 A e ta P h a r ma cu t ie a Sin ie a 1 9 8 9 ; 2 4 ( 7) : 4 8 2 一 4 8 6
入恤u r o P h s yio l19 72 ; 3 2 : 2 8 1
.
6
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G od d
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19 6 9; 乃 : 2 9 5 .
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, B u r n h a m W M
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D e v e lo p m e n t o f a n e w p h a r m a e o l o g ie a l s e i z u cr m o d e l: E脆 e t s o f a n t云e o n v u l s a n t s o n
e o r t ie a l一 a n d a m y g d a la 一k i n d lde se i z u r e s i n th e ar t
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E 户止eI p s妇 1 98 0 ; 2 1: 6 8 1 .
9
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A l be
r t s o n T E
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八乍u r o助 a r 井姐 e o lo 灯 , 1 9 80 ; 19 : 6 4 3 .
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S a l t T E
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B r J hP
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B a b i n t o n R
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T h e p h a rm
a e o一o g y o r s e i z u re s i n d u e e d b y sc n s i t i z a t io n w i t h 一o w i n t e n s i t y b r a i n
s t im u la t io n
.
P h a 护川 a e o I B 勿 e h e m B e h a v 197 3 ; l : 4 6 1 .
T H E E F F E C T O F V A N I L L I N O N T H E F U L L Y
A M Y G D A L A 一 K I N D L E D S E I Z U R E S I N T H E R A T *
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s t r u e t u r a l ly r e la t e d t o v a n i l ly l a l e o h o l i s o la t e d fr o m G a s t r o d i a e al r a B l u m e
, o n t h e fu l l y
a m y g d a la一 k i n d le d sc i z u r e s w a s in v e s t i g a t e d . F u ll y k i n d le d se iz u r e s w e r e P r o d u e e d b y r e -
pe
a t e d a P P li e a t i o n o f l o w i n t e n s i t y e le c t r i e a l s t im u l a t i o n t o t h e b a s o l a t e r a l a m y g d a la o n e e
P e r d a y
.
F i ft e e n e o n s e e u t i v e s z im u l a t i o n s w e r e n e e d e d t o r e a e h t h e fl r s t s t a g e 5 s e i z u r e s a t
w h ie h a n im a ls s h o w e d b e h a v i o r a l e o n v u l s i o n s a n d e l e e t r o e n e e P h a lo g r a P h i e a b n o r m a li t i e s
.
T h e s t a g c 5 s e i Z u r c s w e r e s u p p r e s s e d b y v a n i l li n i p 1 h b e fo r e s t im u l a t i o n w i t h t h e E D 50 0 f
2 8 6 m g / k g
.
M e a n w h i le
,
t h e e P i le P t i c a ft e r d i s c h a r g e d u r a t i o n w a s s i g n i if e a n t l y s h o r t e n e d
.
P h e n y t o i n a t a n o n t o x ie d o s e 50 m g / k g i P o b v i o u s l y r e d u e e d t h e s t a g e 5 s e i z u er s
.
T h e
P cr s e n t s t u d y P r o v id e s a v e r y u se fu l
e x P e r i m e n t a l m o d e l o f e h r o n ie e P i le P s y 10 d e t e e t
a n t i C 0 n v u l s a n t s
.
K e y w o r d s E P i le P s y ; K in d li n g m o d e l; B a s o l a t e r a l a m y g d a lo id ; V a n il l i n
P r o je e t s u P P o rt ed b y th e y o u th fu n d s o f t h e S t a t e dE
u c a t io n a l C o m m is s io n a n d t h e C h i n e s e A e a d e m y o f
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