全 文 ：迁 ` j’ 大学学报 fl 然 科 学版
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1 9 8 7年 碗三 峭
木模 、 桅子 、 倒挂金钟愈伤组织的
诱导 和再生植株 的形成
李 世承 赵彦 芳 邹 杰 李 晶
(生 物 系 )
摘 要
本文报道了木懂 、 桅子 、 倒挂 金钟 外植体经组织培养形成 了再生 植株的过程 在以 冬M s 十 6-`
BA
, + I A A
` , , (或 I B A I 或 2 . 4 一 D , 一 。; 、 ) + G A 。 . 、
体 . 经 3 个月左右 , 可获得再生植株 . 在以冬M s 十 6 一 B A 渗`
L H
, . , , 为培养基时 , 培养木榄叶外 植
N A A 。
.
: 一 。 、 : + L H : 。
` . 为培养基培养
桅 子 、 倒挂金 钟茎 段外植体 时 . 经 2 一 3 个 月培养 . 勺可 获得茎段 外 植体的再生 苗。
当小苗长 至 1 . 5 一 : 厘米高时 . 截取幼苗转移到要M s + 6 一 B A 。` (或 K T 。 。 ) + N A A 。
I B A
, 、 + L H
I 。 。
形成完整植株 .
或 冬`习 S 十 N A A 。 , L H , : 。 的生根培养基上 , 经 2 。 天左 右的培养 ,均能分化出根来 ,
木懂 、 倒挂金钟花多而艳丽 , 桅子花浓香 , 另外 , 木桂 、 桅 子对大气污染物 ( 5 0 2等
又有吸收能力 , 因此 , 它们是绿化 、 美化 、 香化和净化环境的有益植物 . 但在 目前国内对这
些植物的繁殖多限于常规方法 , 很少用组培方法来繁育 , 尤其木懂植物至今未见组培报直
本…力肠直了木谨、 桅予 姚圭金钟夕卜植体经组织培养形成再生植株的过程 , 进而为木模、 桅子 、 倒
挂金钟快速无性繁殖 , 提供新方法 、 新途径 .
材料和方法
1
、 材料的选择和消毒处理
试材选自辽大花房培养的木懂 、 桅子 、 倒挂金钟的嫩枝 、 嫩叶 , 材料取下后 , 经 自来水
冲洗 . 沥干后 、 再在无菌操作条件下 , 对材料进行表面消毒 . 先用 7%0 酒精溶液浸泡 2 一
李晶系辽 大花 房工作 人 员
1 9 86 年 5 月 2 0 日收到
木懂 桅子 倒挂金钟愈伤组织的诱导和再生植株的形成 总第邓期
3分钟 , 然后 , 捞出再放入 0 . 1 %升汞溶液中浸泡 5 一 7分钟 , 最后 用无菌水冲洗 3 一 4
遍 , 再用剪子 (或手术刀 ) 将材料剪成 0 . 8 一 1 厘米 2 小块 , 或切成 0 . 8 一 1 厘米长的小
段 , 置于无菌的培养皿内 (皿内事先要放好灭过菌的吸水纸 ) 以待下步接种 .
2
、 接种和培养
将处理好的材料 , 以每三 角瓶 2 一 3 块 , 接到指定的培养基上 . 木懂叶外植体培养基
M S + 6 一 B A 3 + I A A O . , (或 IBA O
.
, 或 2 . 4 一 D 。 : 一 。 。 ) + G A 。 。 + L H : 。 。 : 桅
倒挂金钟茎段培养基为音M S + “ 一 B A 3 十 NA A .O 卜 。
1一2为
+ L H I 0 0
温度为 2 3 一 2 5 ’ C 、 光照为 l 。阅 一 2 0 0 0 勒克斯的培养架上 , 每日光照
天左右观察一次 , 记录其生长情况 (重要形态变化 、 以照像进行记录 )
, 材料接完后放在
9 一 10 小时 ,每 1 0
. 当幼苗长至 1 . 5
一 2 厘米高时 , 切割小苗转移到青M s + K T o s (或 “ 一 B A o . , ) + NA A 。一 十 BI A .O5
+ ` H : 。 。 或吝M s十 N A A 、 十 L H ; 。。 的生根培养基上 , 以促进生根 .`
试 验 结 果
!
、 叶外植体丛株的再生
、 戎 _ , 。 ~ ` 一 ~ 1 、 , 。 , 。 ~ 二 , “ , 决 ~ ` 二 。 月 。不佳叮外恨件恢丁万 皿 。 一 0 一 D八 3 一 坑入 。 I 、 联 坦八 。 ’ 肌 ` · , 一 U “ · `一 0 ” 2十 G凡 5 十 L 1H 0 的培养基上 , 接种 3 夭切块肿胀 、 皱 曲 . ? ~ 10 天 , 切块绿色变淡 , 并有
凸凹不平现象发生 (见附图 I 一 1) . 培养 20 天后 , 切 口肿胀强烈 , 切块表面 , 尤其切口 、
叶柄及叶脉处 , 有白色或黄绿色痛状物生成 (见附图 I 一 2 ) . 25 一 30 天后 , 瘤状物逐
渐增多 , 而早生的省状物进一步生长 、 分化 , 形成 了绿色或黄绿色柱状物 (见附图 I 一 3 、
4 )
. 此柱状物密集成群形 成丛芽 ,进一步生长 , 便形成了丛株 (见附图 I 一 5 ) . 附加 IA A
生长素的培养基 , 诱导分化率可达 9。 %以上 .
用上 述 培 养基培养桅子 、 倒挂金钟叶外植体时 , 除 晋M s 十 6 一 B A 3 + 2 . ;
一 D 。 , 一 。 。
+G
A。 、十 L H ; 。。 的培养基能使倒挂金钟叶外植体产生再生株外 , 其它都不能使它
们产生再生株 , 只能形成愈伤组织 , 或由愈伤组织形成再生根 (见附图 I 一 6 、 7 、 8)
2
、 振子 、 倒挂金钟茎 段丛芽的诱导
将消毒过的桅子 、 倒挂金钟茎段接于专M s + 6 一 B A 3 十 N A A o l 一。 2 + L H 10 的培养基上 , 10 天后茎节开始膨大 , 潜入培养基内的部分更为明显 . 15 天后茎节上有芽生出
(见附图 I 一 9 、 1 0 ) . 3 0 一 4 0 天后 , 不定芽逐渐增多 . 50 一 6 0 天后形成丛苗 (见附
图 I 一 1 、 1 2 ) . 幼苗增生率为原株的 5 一 2 0 倍 .
3
、 再生根的诱导
当无根苗长至 1 . 5 一 2 厘米高时 , 截取幼苗转移到生根培养基上 , 经 20 天左右的培养 ,
均可生出茁壮的根来 (见附图 I 一 13 、 14 、 1 5) . 根的诱 导 率 为 95 %以上 .
讨 论
从木毯 桅子、 倒挂金钟诱导成苗的事实 , 可以得出以下二点体会 :
1
、 同一激素处理 , 由于植物种类 (或基因型 ) 不同 , 造成各外植体分化率差异
50 辽 宁大学学报 自然科学版 1 9名7 第三 期
如 : 同用一种培养墓一音 S M十 “ 一 B A 3十 认 A `或 IB A) 。 · ; 十 G A。一十 L” l川 ) ,
培养木撞 、 扼子 、 倒挂 金钟叶外植体时 . 木懂可诱导分化成苗 , 而化子 、 倒挂金钟叶外植
体却不能诱导分化成苗 , 只能形成愈伤组 织 (或再生根 ) , 芽的 分化率为零 .
又如 : 用专M S 一 “ 一 B A 3 + ” · 4 一 D 乐 、 一 、 5 十 “ “ 。 . 5 + L H I的 培养基培养木懂 、
扼子 、 倒挂 金钟叶外植体时 , 木侄 , 倒挂 金钟叶外植体可诱导分化成苗 (见附图 I 一 5 、
6 )
. 可是桅子无论怎样继 代培养 , 也不 产生不定芽 . 只停留在脱分化的愈伤组织或由愈
伤组织形成再生根的水平上 ( 见附图 I 一 7 、 8 ) .
2
、 同一植物外植体 . 用不同激素和浓度处理 , 对其形态建成也有不一致性 . 具单一
生长素或生长素 / 细胞分裂素比值高的 , 易生根 (或愈伤组织 ) , 反之则易生芽 .
如 : 用含有生长素 NA A 、
专M S + KT “ 一 +
BI A
、 或 2 . 4 一 D的培养基 : 专M s 十 NA A 。 + L H 10 。 或
NA A
o s + IB A o
.
5 +
苗或叶外植体产生根 ( 见附图
素比值高时 , 其作用结果相反 ,
I 一 1 3 、
L H :
。 。 时 , 都能使木懂 、 桅 子 、 倒挂 金钟的无根
14
、
15 和 8 》 . 但当培养基中细胞分裂素 / 生长
恰有利于芽的分化 · 本次试验所用的分化培养基 : 音M S
+ 6 一 B A 3 + IA A 。
· 、 (或 BI A 。 · 、 或 2· 4 一 D 。 · , 一 。· 5 ) + G A。 · 5 十 L H、 。。 或言 M s + 6
一 B A 3 + N A A 。
.
; 一 。 . : 十 L H ;。 。 …都是细胞分裂素含量 比较高的培养基 , 因此 都能很好的
使其生芽 .
综上试验表明 :
植物外植体形成再生植株的过程 ,其愈伤组织 、芽和根的出现 , 是受植物种类 (或基因型 )
和细胞分裂素与生长素的 比值大小等因素所决定 . 在外植体固定时 , 则与细胞分裂素 / 生
长素比值高低而呈正反波动 . 当细胞分裂素 / 生长素化值大时 ,则利于生芽 ; 当细胞分裂素
/生长素比值小时 , 则利于生根 , 本试验结果与前人所做结果大体一致 .
今 考 文 献
[ 1 ] 上海植物生理研究所 ( 19 7 8) 植物组织和绷胞培养 , 上海科学技术出版社 .
【2 」中国植物学会 、 植物组织培养法 .
〔 3 〕 O · L 盖博格等 ( 1 9 8 0 ) 植物组织培养方法 , 科学 出版社 ·
〔 4 〕 罗士伟 ( 1 9 7 9 ) 植物组织培养在花齐上的应用 , 植物生理学通讯 ( 3) 1 一 9 .
[ 5 〕 黄敏仁 ( 1 9 8 0 ) 植物生理学通讯 ( 3 ) 4 7 一 4 9 .
〔 6 〕 陈维伦 ( 2 9 8 0 ) 植物生理学通讯 ( 6 ) 4 0 一 4 1 .
[ 7 ] 蔡军等 ( 1 9 8 4 ) 植物生理学 通讯 ( 5 ) 3 7 一 3 8 .
[ 8 〕 李启任等 ( 1 9 8 5 ) 植物生理学通讯 ( 4 ) 4 0 .
[ 9 〕 王泽均 ( 2 9 8 2 ) 植物生理学通讯 ( 5 ) 3 5 .
〔 1 0 〕 杨乃博 ( 2 9 8 1 ) 植物学报 2 3 ( 4 ) 2 8 4 一 2 8 7 .
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;
附图 I 示木懂 、 桅子 、 倒挂金钟叶外植体成苗情况
1
、 示木横叶外植体培养 01 天 左右表面呈凸凹不平 。
2
、 培养 2 0 天左右从切 口 、 叶脉上和叶柄处产生瘤状物。
3
、 培养 3 0 天左右瘤状物发展成柱状物 。
4
、 为一个柱状物的放大。
5
、 培养 5 0 天左右柱状物增多 , 形成丛苗 。
“ 、 示倒挂金钟叶外植体在告M “ + 6 一 B A 3
十 L H 、 。 。 培养基 上形成幼苗。
+ 2
.
4 一 D o . l一 。 . 5 G A o
8
、 示桅子叶外植体在各种培养基上形成愈伤组织或形成再生根 。
示木懂 无根苗 、 移植生根培养基上形成壮根 。
附图 I 示桅子 、 倒挂金钟 茎段成苗情 况
9
、 示桅子茎段接种培养基 5 1天后节部膨大并有芽生成 。
10
、 示倒挂金钟基段接种培养基上 5 1天后节部生芽情况 。
1 1
、 示桅子茎段培养 5 0 一 0 6夭后形成丛 芽或丛苗情况 。
1 2
、 示倒挂金钟茎段培养 5 0 天左右形成 丛苗情况 。
4 1
、 示桅 子无根苗转移到 生根培养基上 0 2天后形成根 。
15
、 示倒挂金钟无根苗转到生根培养基后 20 天左右形成根 。
木懂 、 扼子 : 倒挂金钟愈塑织细渔型却班塑丝继哩逃述 总第 2 8期 )
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