全 文 ：1 9 8 6年 甘 肃 农 大 学 报 期 4第
我国西北地区不同河北杨地理种
源的过氧化物酶同工酶分析兴
孙 雪新 陶 毅
(林学系 )
【摘要】 用同工酶法分析了我国西北六个地区河北杨六个地理种 源的过氧化物酶
酶谱的差异 。
河北杨 ( Pop u l u sh o Pe ic n s i sH o et eh e w )是我国西北地区 的一个优良
树 种。 目前 尚未发现雄株 。 本试验以过氧化物酶同工酶作为六个河北杨 种源地理变异的
墓因标记 夕 分析了河北杨 地理变异所 源于的过氧化物酶同工酶位点 。
材料与方法
六个河北杨种源材料来 源于陕西省的榆林 , 吴旗 ; 一甘肃省的泉兰 、 永靖 ; 青海省的
民和 : 宁夏回族自治区的固原 , 采用不完全随机区组设计 , 将各个种源的插穗扦插于试
验地中 。
待苗木 长出 3 一 4 片一叶子时 , 分别采集各个矛},源上粼二叶片 2 克 , 用 自来 水 冲 洗 3
次 , 再用蒸馏水冲洗 2 次 , 然后在研钵中研磨成浆状 , 以 4 0 0 0转 / 分钟 , 的速度离心 30
分钟 , 取上清液保存在冰箱中备用 。
采用聚丙烯 酞胺盘状凝胶 电泳 . 凝胶浓度 7 . 5% , 每个凝胶管 加样 10 ul , 电流强度
Z m A / 管 , 用 0 . 0 01 %的澳酚兰作指示 染料 。 在 4 ℃的条件下 电泳 1 50 一 1 80 分钟。
称取 2 克联苯胺 , 加入 18 m l冰醋酸 , 不断搅动使其溶解 , 溶解后用 72 m l l 0 ℃蒸馏
水稀释 , 再加 4 滴过氧化氢 , 并立 即将凝胶柱放入使其着色 , 染色时间 10 分钟左右 .
结果与分析
山于不同种 源的河 比杨所处的地理环境不同夕 在不同的生态条 件下 , 经过长期的选
择和适应使其 内部结构和生理生化过程发生了一定程度的变异 。 这种变异反映在过氧化
物酶同工酶的差异上 , 表现为谱带的数 目 , 宽度 、 着 色的深浅以及迁移率等的不同上 .
通过对六个种源的分析可 以看出 , 它们的酶谱分布有两 个区 , 即 I 区和 l 区。 按各潜带迁
移率的大小将这些潜带依次用 A 、 B 、 C 、 D 、 E , F 、 G 、 H 表征 。 谱型模示见下 图 ;
收稿 日期 : 1 9 56 年 9 月 7 日
. 蔡国年、 周映悔二位同志参加了本试验的部分工作。
0 18甘 肃 农 大 学 报 198 6年
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西北地区河北杨不同地理种源的酶谱妊移状况
各种源迁侈率见下表 ,
6 个河北杨种撼的酶谱迁移率表
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一 0 . 2 8 一 0 . 3 1 一 0 . 3 0 一 0 . 3 0
一 0 . 3 5
一 0 . 4 3
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先出现 , 且 这三条带的迁移率 , 宽度 也大体 川近 。 其中 B 、 C带较窄 , 约为 Z m n : 左 右 ,
曰待较宽 , 约为 Z c m 左右 , 其前沿部分粉 色较浓 , 向后逐渐变浅 , 过渡到底 色。
共它几条 i泞带在六个种源 , {“ 的表现均 汀不同 。 青海的民 和 伸源共有 5 条 话 带 , 即
A
、
B
、
C
、
E
、
G 书犷, 无 D 、 H们了, A带显 色很淡 。 B 、 C, {i沁止色较淡 。 永靖 、 榆林 、 旱
胜种源邵汀 A 、 B 、 C 、 D 、 E、 F 、 G 、 H 7 袄脸 , 它 们灼迁移率也墓本相等 。 但永 站
种 源的 A 、 G带显色佼淡 , H书护限丫 ( 均为 0 . 5 m l ) ; 偷 休神源沟 A 、 B带显 色较浅 ,
歹、 G 、 “ 带的迁侈率比水靖和举兰种扮略小一些 ; 牟兰种扮 A带址 色长浅 、 E 刁沙址 色
第 4 期 我国西 {口也区不 同河 }匕杨地理种源的过氧化物酶同工酶分析 1 0白
深且较宽 , 着 色也比较均一 。 吴旗种源共有 6 条 i普带 , 即 A 、 B 、 C 、 E 、 F 、 H带 , 无
G带 夕 其中 A 带显 色较浅 , F 、 I诬带 比较清晰 。 固原利“源酶带数 目最多 , 除上述各种 源
的所 带 外 , 在 二若 sljJ E i片之间出现了一 条 D 游 , 这是其它仲源所 杯具 备的 , 其 中 G带
显 色较浅 , E带 汾色浓且较宽 、 颜 色也比较 J匀一 。
从上述试验结果看 , 永靖 , 偷林 、 皋兰三种源的过找化物酶同工酶的谱型 比 较 一
致 ; 固原种源除具有其它种源所共有的酶带外 , 还 出现了一条 D带 ; 民和和武功种 源的
谱型也存在一定程度上的变异 。 所有这些都可 以作为鉴定和确认河 化杨利,源的 重 要 标
记 。
从六个种 源的过氧化物酶同工晦的基本姗型 仁看是非常一致的 , 但是也存在一定程
度的龙异 。 作为一 个种来 说 , 这种共性是容易解释的 , ,一个物种有其共同的遗传基础 , 反
映在同工酶上就是比较一致的酶浴型 , 但 同时由于其处于不同的地理环境 , 在不同的生
态条件下 , 经过长期的演变夕 选丰倒任成 了不同的生态类型 , 其内部组成结构和生理生化
过程都发生了相应的变化 , 从而含成了与原始 ( 野生型 ) 酶分子略有不同的氨基酸序列
的突变型晦分子 , 这些陶的出现使不同的生态型能更好的适应所在的环境 , 同时这也是
树种进化的一个机理 。
利用同工酶电泳分析伎术 , 分析林木 间的种源羞异是近代分子生物学的一 项 新 技
术 , 通过试验我们认为在迸 亡少分析时应注意以下三个方面的问题 :
1
、 进行种 源间抢异的分析 , 需要反复多次的重复试验 , 才能得 出比较 准 确 的 结
果 。 有可能各种源间在某 一 生 一氏发育阶段差异显著 ; 而在另一发育阶段差异不显著 ; 或
省在某些器官差异显若 , 而在另一些器官差异不显著 。 同样采样的不 同方法 , 不同的酶
东统都有 , .J 能得出不同的结 沦 , 囚此要严格掌握试验条件 。
2
、 随着细饱的生 长发汀 , 其体内的过城化物酶的含量有不断增 加的趋势 夕 在本次
试脸 中也有所农现 , 据有关文献报道 , 过较化物酶同工酶的含量和植物的呼吸 作 用 有
关 , 随 一省呼吸作用灼 如汪 , 共台虽有所增加 。 这一点在今后的试验中应弓!起高 度 的 重
视 。
3
、 同工的分析仅仅是种洲问差异分析的一个方面 , 要得出完整准确的结论 , 还必
抓阳其它分析 仃法们互 比校 , 相互 印证 , 作出练 合的刘断 。
参 考 文 献
〔 1 〕 孙止沂 : 1% 2 . 同工酶法在杨树研究上的初步应用 , 廿肃林业科技 , ( 3 . 4 ) : 2 6一 2 匀`
〔 2 〕 杜东岳 : l ” 3 , 毛自杨不同类型的同工酶分析 , 北京林业大学学报 , ( 3 ) : 16 一 20
〔3 〕 董源 : 1 9 8 3 . 花粉绒毡层及花粉发育的电子显微镜研究近况 资 北京林业大学学报 ,
( 3 )
:
7 3一。 o 。
〔 4 〕 沈熙环 : 1 0 8 3 . 同工阵在林木退传有种学中应用的若干实例 , 北京林业大学学报 ,
( 1 )
: 礴3一 5 2 。
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T he An a ly s is o f Is op e o rx y ds a e on the P opu lu s
Hep e in es is Hu e t Che w in D if fe ren tGe oga rp h ia el
Re gl on s o fN o r th ws e tPa r toh f C in a
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i n t h e l o C i o f
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s P e e i e s w e r e e x i s t e d
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H e P e i n e s i s
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