全 文 ：民族药草龙药材的质量控制研究
李 兵，黄志其，韦建华，卢汝梅 (广西中医药大学，广西南宁 530001)
摘要 ［目的］建立草龙药材的质量控制方法。［方法］采用薄层色谱法对草龙进行定性鉴别，并采用 HPLC法测定草龙药材中有效成分
没食子酸的含量。色谱柱为 HypersilC18 柱(4． 6 mm × 250 mm，5 μm)，流动相为乙腈 －浓度 0． 05%磷酸(5∶ 95，V/V)，流速为 1． 0
ml /min，检测波长为 270 nm。［结果］草龙药材中没食子酸的薄层色谱鉴别特征明显，专属性强;在 0． 40 ～2． 40 μg /ml范围内，没食子酸
浓度与峰面积呈良好的线性关系(R =0． 999 9)，平均回收率为 98． 36%，RSD为 2． 28%(n = 6)。［结论］建立的草龙药材定性定量测定
方法简单准确，可为草龙药材的质量控制提供科学依据。
关键词 草龙;质量控制;没食子酸
中图分类号 S567 文献标识码 A 文章编号 0517 －6611(2012)27 －13338 －02
Study on Quality Control of Ludwigia hyssopifolia
LI Bing et al (Guangxi College of Traditional Chinese Medicine，Nanning，Guangxi 530001)
Abstract ［Objective］To establish a quality control method of Ludwigia hyssopifolia． ［Method］TLC was adopted to identify and HPLC was
adopted to determine effective contents of gallic acid of Ludwigia hyssopifolia，with HypersilC18 (4． 6 mm × 250 mm，5 μm)column as analyt-
ic column and a mobile phase consisted of acetonitrle － 0． 05% phosphoric acid (5∶ 95，V /V)at a flow rate of 1． 0 ml /min and the detection
wavelength at 270 nm． ［Result］ The gallic acid of Ludwigia hyssopifolia was characterized by TLC，and was highly specific． The liner of
quercetin was 0． 40 － 2． 40 μg (R = 0． 999 9)． The average recovery was 98． 36%，with RSD = 2． 28% (n = 6)． ［Conclusion］The method
is fast and accurate，and can be used for the quality control study of Ludwigia hyssopifolia．
Key words Ludwigia hyssopifolia;Quality control;Gallic acid
基金项目 2011 年度广西教育厅科研项目(编号:201106LX269)。
作者简介 李兵(1982 － ) ，男，广西南宁人，讲师，硕士，从事中药化学
成分和质量标准研究，E-mail:gxlb0910@ 163． com。
收稿日期 2012-04-24
草龙是柳叶菜科(Onagraceae)植物线叶丁香蓼(Ludwi-
gia hyssopifolia(G． Don)Exell)的干燥全草，分布于台湾、湖
南、广东、海南和广西等地，具有清热解毒和祛腐生肌的功
效，主要用于治疗感冒、咽喉肿痛和疮疥等［1］。草龙为广西
壮族民间常用药，主要用于治疗感冒、咽喉肿痛、口舌生疮和
皮炎等疾病，具有很好的应用价值。卢汝梅等对草龙提取物
及化学成分的抗菌活性进行了研究。试验结果表明，草龙的
乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物有明显的体外抑菌作用，抑
菌作用最强的是乙酸乙酯萃取物［2］。没食子酸单体具有体
外抑菌作用。但目前关于草龙的质量控制方面的研究鲜有
报道。因此，笔者以没食子酸为指标成分，采用薄层色谱法
对草龙药材进行定性鉴别，并采用 HPLC法测定草龙药材中
指标成分没食子酸的含量，以期为草龙药材的制剂开发和质
量控制提供科学依据。
1 材料与方法
1． 1 材料
1． 1． 1 研究对象。草龙，采于广西南宁，经广西中医药大学
中药研究所刘寿养副教授鉴定为柳叶菜科丁香蓼属植物线
叶丁香蓼(Ludwigia hyssopifolia(G． Don)Exell)的干燥全草。
1． 1． 2 主要仪器。LC-20A高效液相色谱仪，购自日本岛津
公司。
1． 1． 3 主要试剂。没食子酸，购自中国药品生物制品检定
所，批号 110831-200803;乙腈为色谱纯，其余试剂均为分析
纯，市售。
1． 2 方法
1． 2． 1 草龙药材中没食子酸的薄层色谱鉴别。(1)对照品
溶液的制备。取 1. 0 mg 没食子酸对照品，加适量无水甲醇
溶解，摇匀，作为对照品溶液。(2)样品溶液的制备。取
1. 000 g草龙药材粗粉，置 50 ml 量瓶中，加入 25 ml 无水甲
醇，超声提取(功率 250 W，频率 50 kHz)30 min，放冷，滤过，
取滤液10 ml于水浴上浓缩至1 ml，即得。(3)没食子酸的薄
层鉴定。照薄层色谱法试验，吸取上述对照品溶液和样品溶
液适量，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶 G
薄层板上，以甲苯 －乙酸乙酯 －甲酸(3∶ 5． 4∶ 0． 6，V /V /V)为
展开剂，薄层板置展开缸中预饱和 30 min，展开，取出，晾干，
喷浓度 5%的磷钼酸，在 105 ℃加热至斑点显色清晰，观察
现象。
1． 2． 2 色谱条件。色谱柱为 HypersilC18(4． 6 mm × 250
mm，5 μm) ;流动相为乙腈 －浓度 0． 05%磷酸(5∶ 95，V /V) ;
检测波长为 270 nm;流速为 1． 0 ml /min;柱温为室温。
1． 2． 3 对照品溶液的制备。精密称取8． 0 mg没食子酸对照
品，加无水甲醇溶解，并定容至 10 ml，作为对照品溶液。
1． 2． 4 供试品溶液的制备。精密称取 1． 000 g 草龙药材粗
粉，置 50 ml量瓶中，精密加入 25 ml无水甲醇，称定重量，超
声提取(功率 250 W，频率 50 kHz)30 min，放冷，再称定重量，
用无水甲醇补足减少的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
1． 2． 5 系统适应性试验。取上述对照品溶液和供试品溶液
适量，在“1． 2． 2”色谱条件下进行测定，建立 HPLC 图谱，考
察系统适应性。
1． 2． 6 方法学考察。(1)线性关系的考察。分别精密吸取
0． 5、1． 0、2． 0、2． 5和 3． 0 μl 对照品溶液，在“1． 2． 2”色谱条
件下进行测定，以对照品浓度(μg /ml)为横坐标，对应峰面积
为纵坐标，绘制标准曲线，计算回归方程。(2)精密度试验。
责任编辑 石金友 责任校对 李岩安徽农业科学，Journal of Anhui Agri． Sci． 2012，40(27):13338 － 13339
DOI:10.13989/j.cnki.0517-6611.2012.27.109
取“1． 2． 3”项下没食子酸对照品溶液，精密吸取 2 μl，在“1．
2． 2 ”色谱条件下重复进样 6 次，测定峰面积，计算峰面积的
RSD。(3)重复性试验。取同一批草龙药材，按“1． 2． 4”项下
的方法制备 6份供试品溶液，在“1． 2． 2”项下色谱条件下，分
别进样 5 μl，计算没食子酸的平均含量的 RSD。(4)稳定性
试验。取同一批草龙药材，按“1． 2． 4”项下的方法制备供试
品溶液，常温下保存，在“1． 2． 2”项下色谱条件下，分别于 0、
4、8、16和 24 h进样 5 μl进行测定，计算峰面积的 RSD。(5)
加样回收试验。精密称取已知含量的草龙药材粗粉 0. 500
g，共 6份，置于具塞锥形瓶中，分别加入没食子酸对照品适
量，按“1． 2． 4”项下的方法制备供试品溶液，在“1． 2． 2”项下
色谱条件下，分别进样 5 μl 进行测定，计算平均回收率
和 RSD。
1． 2． 7 样品含量测定。精密称取 1． 000 g草龙药材粗粉，共
3份，按“1． 2． 4”项下方法制备供试品溶液，在“1． 2． 2”项下
色谱条件下，分别进样 5 μl 进行含量测定，以峰面积计算没
食子酸的含量。
2 结果与分析
2． 1 薄层鉴定 试验结果表明，供试品色谱图与对照品色
谱在相应位置上显相同颜色的斑点，重现性好。
2． 2 系统适应性试验 图 1 表明，对照品溶液和供试品溶
液在相同的时间有对应的吸收峰，且各峰之间的分离度良
好，理论塔板数按没食子酸计算不少于 2 000，表明系统适应
性良好。
注:A为对照品;B为草龙药材。
图 1 没食子酸对照品和草龙药材 HPLC图谱
2． 3 方法学考察 (1)线性关系的考察。计算得回归方程
为:Y =2 388． 1X + 25． 797(R = 0． 999 9)。试验结果表明，在
0． 40 ～2． 40 μg /ml范围内，没食子酸浓度与峰面积呈良好的
线性关系。(2)精密度试验。计算得峰面积的 RSD 为
0. 88%(n =6) ，表明精密度良好。(3)重复性试验。计算得
没食子酸平均含量的 RSD 为 1． 36%(n = 5) ，表明方法重复
性良好。(4)稳定性试验。计算得峰面积的 RSD 为 2． 08%
(n =5) ，表明供试品溶液在 24 h 内稳定。(5)加样回收试
验。计算得平均回收率为 98． 36%，RSD为 2． 28%，表明该方
法准确可靠，可用于草龙中没食子酸的含量测定。
2． 4 草龙中没食子酸的含量测定 由表 1 可知，草龙中没
食子酸的平均含量为 3． 15 mg /g，RSD为 2． 95%。
3 结论与讨论
在制备供试品溶液时，考察了水、无水甲醇和无水乙醇
等提取溶剂对结果的影响。试验结果表明，以无水甲醇作为
提取溶剂时有效成分的含量较高。试验同时考察了乙腈 －
表 1 样品测定结果(n =3)
样品 没食子酸含量∥mg /g 平均含量∥mg /g RSD∥%
1 3． 07
2 3． 12 3． 15 2． 95
3 3． 25
水、无水甲醇 －水和乙腈 －浓度 0． 05%磷酸水溶液等流动相
对结果的影响，发现以乙腈 －浓度 0． 05%磷酸水溶液(5∶ 95，
V /V)为流动相时，保留时间适中，分离度大于 1． 5，故试验采
用此溶液作为流动相。该方法快速、准确、灵敏度高、重现性
好，首次对广西民族药草龙的质量进行了薄层鉴别和含量测
定，对草龙药材的品质评价和质量控制具有指导意义。
参考文献
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［2］韦建华，卢汝梅，周媛媛．草龙提取物及化学成分的抗菌活性研究［J］．
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檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪
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