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FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY 提取物与应用
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2015年 第40卷 第04期
狼爪瓦松(Orostachys cartilagineus)为景天科瓦
松属[1-5]的一种药用植物，多生于干山坡岩石上，
主要产于山东、内蒙古、辽宁、吉林和黑龙江等
地区，多用于抗旱与观赏的研究，瓦松属植物中
收稿日期：2014-11-20 *通讯作者
基金项目：延边大学校项目(2010306-601010003)；国家自然科学基金项目(21365023)。
作者简介：李承范(1958—)，男，副教授，研究方向为天然物中化学成分的分离与分析。
含有黄酮类[6]等化学成分，药理作用为抗病毒、
抗菌[7-9]等。黄酮类物质是植物的重要次生代谢产
物，具有开发前景的天然抗氧化剂，能有效地减
少和清除自由基，具有延缓人体衰老、防治疾病
李承范1，王思宏1,2*，李东浩2
(1.延边大学分析测试中心，延吉 133002；
2.延边大学长白山生物资源与功能分子教育部重点实验室，延吉 133002)
摘要：为研究狼爪瓦松的药用价值，通过DPPH自由基清除能力，羟自由基清除能力和超氧阴离
子清除能力来评价其抗氧化活性。实验结果显示狼爪瓦松乙醇提取物对DPPH自由基的清除率为
99.15%，羟基自由基清除率为94.55%，超氧阴离子清除率为61.33%。狼爪瓦松中黄酮类化合物
对清除自由基有一定的作用，其清除效果在一定范围内随着总黄酮质量浓度的增加而增强。
关键词：狼爪瓦松提取物；总黄酮；抗氧化活性
中图分类号：TS 201.4 文献标志码：A 文章编号：1005-9989(2015)04-0285-03
Antioxidant activities from Orostachys cartilaginous extracts
LI Cheng-fan1, WANG Si-hong1,2*, LI Dong-hao2
(1.Analysis and Inspection Center of Yanbian University, Yanji 133002; 2.Key Laboratory of
Natural Resource of the Changbai Mountain and Functional Molecules,
Ministry of Education, Yanbian University, Yanji 133002)
Abstract: To investigate the medicinal value of Orostachys cartilaginous, the antioxidant activity is
evaluated by 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) radical, hydroxyl radical and superoxide anion radical
scavenging ability of DPPH. The results revealed that DPPH radical scavenging ability of is 99.15%,
hydroxyl adical scavenging rability is 94.55% and superoxide anion radical scavenging ability is 61.33% of
Orostachys cartilaginous ethanol extract. The results of antioxidant activity shows that the total fl avonoids
of Orostachys cartilaginous extracts implied their definite radical scavenging ablity, in addition, within
certain concentration the scavenging effect is enhanced with increasing concentration of total fl avonoids.
Key words: Orostachys cartilagineus; total fl avonoids; antioxidant activity
狼爪瓦松提取物的抗氧化活性的
研究
DOI:10.13684/j.cnki.spkj.2015.04.055
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的作用[10]。以狼爪瓦松为材料，采用70%的乙醇
溶液回流提取黄酮，并对其抗氧化活性进行了研
究，以期为开发提供狼爪瓦松提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 材料
狼爪瓦松：吉林延吉市依兰镇；芦丁标
准品：中国医药上海化学试剂公司；二苯代苦
味酰基自由基(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazy，
DPPH)：Sigma公司；亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧
化钠、无水乙醇等：分析纯，天津科密欧化学试
剂有限公司。
1.2 主要仪器
U-3400型紫外可见分光光度计：日本日立
公司；DFT-50型手提式高速万能粉碎机：浙江
温岭石林大机械有限公司；SP210S型电子天平：
北京赛多利斯天平有限公司；SHBⅢ型循环水式
真空泵：上海豫康科教仪器设备有限公司；Q/
BKYY31-200型电热恒温鼓风干燥箱：上海跃进医
疗器械厂；RE-52D旋转蒸发器：上海青浦沪西仪
器厂。
1.3 实验方法
1.3.1 狼爪瓦松总黄酮含量的测定 对照品溶液
的制备：芦丁置50 mL容量瓶中，加入乙醇适量
置水浴上加热溶解，得浓度为0.2 mg/mL对照品溶
液。狼爪瓦松黄酮类物质的提取：狼爪瓦松粉末
(1 g)，以1 g:25 mL固液比、70%乙醇(v/v)水浴回流2
次，过滤，合并2次滤液，转入100 mL容量瓶中。
0、0.25、0.50、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mL对照品
液分别置于25 mL容量瓶中，依次加70%乙醇(10.0
mL)，5%亚硝酸钠溶液(1.0 mL)摇匀，放置6 min，
10%硝酸铝溶液(1.0 mL)摇匀，放置6 min，4%氢氧
化钠溶液(10.0 mL)，用30%乙醇稀释至刻度，放置
15 min后，在波长510 nm处，测定吸光度。进行了
精密度、稳定性、重现性、加标回收率实验。
1.3.2 抗氧化性实验
1.3.2.1 DPPH自由基的清除活性的测定 不同稀释
度提取液(2 mL)，置于有塞的试管(10 mL)中，加入
配制好的DPPH-70%乙醇水溶液(2×10-4 mol/L，
2 mL)，充分混匀，室温条件下，静置30 min，用
紫外光分光光度计在517 nm条件下测定其吸光度
Ai(并以70%乙醇溶液作为参照液)；同时将DPPH溶
液(2 mL)与70%乙醇溶液(2 mL)混合，摇匀，静置
5 min后的吸光度Ac；并将样品液(2 mL)与70%乙醇
溶液(2 mL)混合，摇匀，静置后的吸光度Aj，根据
下列公式计算溶液的抑制率。
1.3.2.2 羟基自由基的清除活性的测定[11] 取7支试
管，依次加入邻二氮菲溶液(1 mL，0.75 mmol/L)和
磷酸缓冲液(3.5 mL，pH=7.4)，硫酸亚铁溶液(1.5
mL，0.75 mmol/L)，混匀静置。取5支试管，分别
加入不同浓度提取液(每支试管加的体积不同)，
混匀后静置，另外2支分别标记为损伤管和未损伤
管，不向其中滴加提取液，在损伤管中加人0.01%
H2O2溶液(1 mL)，未损伤管不加H2O2溶液，最后
用蒸馏水稀释至10 mL刻度线，试管于37 ℃保温1
h，536 nm处，分别测定吸光度，并根据下列公式
计算出羟自由基(·OH)清除率。
式中：A2为未损伤管中溶液的吸光度；
A1为损伤管溶液的吸光度；
A0为加黄酮试管中溶液的吸光度。
1.3.2.3 超氧阴离子自由基的清除活性的测定[12]
采用邻苯三酚自氧化法。取Tris-HCl缓冲液
(4.5 mL，0.05 mol/L，pH=8.2)，加入盛有蒸馏水
(4.2 mL)的试管中，置25 ℃水浴中预热20 min。分
别加入不同浓度的提取液1.0 mL，立即加入25 ℃
水浴中预热的邻苯三酚(0.3 mL，3 mmol/L HCl)，
混匀，反应4 min，立即加入2滴8 mol/L HCl，终止
反应，在420 nm处测定吸光度Ai(样品管以同浓度
的狼爪瓦松总黄酮提取溶液做参比)。模型组以蒸
馏水(1 mL)代替样品试液(以蒸馏水做参比)，测空
白吸光度Aj，用下列公式计算超氧阴离子(O2-)自由
基的清除率：
2 结果与讨论
2.1 狼爪瓦松总黄酮含量的测定
以吸光度为纵坐标，芦丁的用量为横坐标，
绘制标准曲线。测定结果表明，配制的芦丁标准
溶液含量与其吸光度呈现良好的线性关系，其线
性回归方程为y=0.0953x+0.0771，R2=0.9985。
精密度实验结果(n=5)显示，按含量是0.2、
0.6、1.2 mg 3个浓度芦丁的吸光度值RSD分别为
0.50%、0.52%、0.63%，表示仪器的精密度好。
狼爪瓦松提取溶液分别在0~60 min的7个时间段，
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显色后室温放置60 min内，其吸光度稳定(n=7)，
RSD为2.29%，表明稳定性良好。重复性实验结果
(n=5)的吸光度的RSD为1.07%，表明方法的重复性
好。加样回收率实验结果(n=5)，黄酮含量的平均
回收率为100.60%，RSD为2.12%，可用于狼爪瓦
松总黄酮含量测定。
用NaNO2-Al(NO3)3-NaOH体系是与黄酮提取
液形成络合物，线性关系好，总黄酮含量结果，
如表1所示。
表1 狼爪瓦松中总黄酮含量
样品号 1 2 3 平均
吸光度/A 0.2624 0.2520 0.2630
提取液中黄酮浓度/(mg/L) 0.3839 0.3670 0.3826 0.3820
总黄酮含量/(mg/g) 38.33 36.65 38.20 37.73
2.2 抗氧化活性的研究
2.2.1 狼爪瓦松总黄酮对DPPH自由基清除能力
3所示，狼爪瓦松提取物的超氧阴离子自由基的
清除能力随着浓度的增加而增大，浓度达到382
μg/mL时，狼爪瓦松提取物对羟自由基的清除率
为61.33%。
图1 不同浓度的提取液对DPPH自由基的清除能力
图3 不同浓度的提取液对超氧阴离子自由基的清除能力
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狼爪瓦松提取物对DPPH自由基的清除能力，
如图1所示，清除率随着样品浓度的增加而增大，
样品浓度达到76.4 μg/mL时，对DPPH自由基的
清除率为99.15%，而后随着黄酮浓度的增加，对
DPPH自由基清除率慢慢降低。
2.2.2 羟自由基清除能力 狼爪瓦松提取物对羟自
由基的清除能力，如图2所示，清除率随着浓度的
增加而增大，浓度达到382 μg/mL时狼爪瓦松提
取物对羟自由基的清除率为94.55%。
图2 不同浓度的提取液对羟自由基的清除能力
3 结论
用紫外分光光度法测定狼爪瓦松总黄酮。狼
爪瓦松的总黄酮对DPPH自由基、羟基自由基、超
氧自由基均有一定的清除能力，其清除作用随着
黄酮浓度的增大而表现出明显的量效关系。选择
了DPPH自由基清除能力，羟自由基清除能力和超
氧阴离子自由基的清除能力来评价狼爪瓦松总黄
酮的体外抗氧化活性，提取物均有较好的抗氧化
活性，狼爪瓦松提取物对DPPH自由基和羟基自
由基的清除能力强于其超氧负离子自由基的清除
能力。在狼爪瓦松总黄酮浓度为76.4 μg/mL时对
DPPH自由基清除率最高，为99.15%；浓度为382
μg/mL时对羟基自由基(·OH)的清除率最高，达
94.55%。浓度为382 μg/mL时对超氧自由基(O2-·)
的清除率最高，为61.33%。
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2.2.3 超氧阴离子自由基的清除能力 狼爪瓦松提
取物的超氧阴离子自由基的清除能力结果，如图
食 品 科 技
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2015年 第40卷 第04期
收稿日期：2014-11-19 *通讯作者
作者简介：李倩竹(1990—)，女，硕士研究生，研究方向为食品质量与安全评价。
李倩竹，赵玉娟，刘 乔，张梦莹，沈明浩*
(吉林农业大学食品科学与工程学院，长春 130118)
摘要：目的：探究茗葱不同溶剂提取物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌及蜡样芽孢杆
菌的抑菌作用。方法：分别取茗葱鳞茎和叶子2部分，采用水煎法制备水提物，超声波辅助乙
醇浸泡法制备醇提物，滤纸片法观察2种提取物对4种细菌的抑制效果，比较茗葱不同部位及不
同提取物的抑菌作用。结果和结论：茗葱水提物及醇提物均对蜡状芽孢杆菌和沙门氏菌产生较
好的抑制作用，从抑菌效果看醇提物优于水提物，且叶子优于鳞茎；对大肠杆菌无作用；对金
黄色葡萄球菌只有醇提物起作用。茗葱可被开发成为一种天然的抑菌剂。
关键词：茗葱；提取物；抑菌作用
中图分类号：TS 205 文献标志码：A 文章编号：1005-9989(2015)04-0288-03
Antimicrobial activity of wild allium victorialis L.extracts
LI Qian-zhu, ZHAO Yu-juan, LIU Qiao, ZHANG Meng-ying, SHEN Ming-hao*
(College of Food Science and Engineering, Jilin Agricultural University, Changchun 130118)
Abstract: Objective: To explore the antimicrobial activity of different extracts of Allium victorialis L. on
Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Salmonella and Bacillus cereus. Method: The whole plant of
Allium victorialis L. were divided into bulbs and leaves two parts. Each part was decoted with water to
prepare the water extracts and immersed with 70% ethanol with the assistance of ultrasonic waves to
prepare the alcohol extracts. The inhibition effect of two kinds of extracts on the four types of bacteria
was observed by the fi lter method, and then the antimicrobial activity of extracts obtained from different
parts and in different extraction methods was compared. Result and Conclusion: Both aqueous extracts
and alcohol extracts had a good inhibition effect on Salmonella and Bacillus cereus. And alcohol extracts
were better than aqueous extracts, the leaf was better than the bulb in bacteriostatic effect. None had
effect on Escherichia coli. Only alcohol extracts had effect on Staphylococcus aureus. Allium victorialis L.
can be developed as a natural antibacterial agent.
Key words: Allium Victorialis L; extract; antimicrobial activity
野生茗葱提取物抑菌作用研究
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