全 文 ：第30卷第2期
2011年4月
生态科学
EcologicalS ience
30(2)：20l一206
Apr．2011
宋晖，王友绍．红树植物叶片总RNA提取方法比较与优化【J】．生态科学，20ll，30(2)：20l一206．
SONGHuLwANGYou—sha0．AnalySisandimproyem朗tofhj曲·quaI姆RNAex昀cdoninl酗V豁ofm柏g∞veplants叨．￡幻魄出耐
＆艮聊P，20ll，30(2)：20l-206．
红树植物叶片总RNA提取方法比较与优化
宋晖1’3，王友绍1’2’
1．中国科学院南海海洋研究所热带海洋环境动力学重点实验室，广州510301
2．中国科学院大亚湾海洋生物综合试验站，深圳51812l
3．中国科学院研究生院，北京100039
【摘要】分别采用三种植物RNA提取试剂盒、改良的CTAB．LiCl法和CTAB．异丙醇法五种方法提取四种红树植物叶片总RNA，
并用紫外光谱、琼脂糖凝胶电泳、cDNA合成和rcal．thnePcR等手段对提取效果进行鉴定。反复试验表明：五种方法对白骨壤
一廊绷力肠耽州力口叶片总RNA提取均有良好的效果。Ti锄gcllI矾A提取试剂能够成功提取秋茄缸删如ff口c册如，、桐花树彳PgfcP阳J
cDr拧fc“，口f“历、白骨壤的总RNA，提取的木榄Bn倒加乃狮疗D门啸fz口总RNA浓度低、杂质较多，且稳定性较差，在对该方法改
良后则能够成功提取木榄的总RNA。InvinDg蚰试剂盒对木榄和秋茄叶片均有良好的提取效果，但是对桐花树提取的I泔A易受
到蛋白的污染。CTAB．Licl法和CTAB．异丙醇法提取的RNA总产量偏低，提取时间较长，且实时定量结果表明，两种方法反
转录效率较试剂盒方法也偏低。
关键词：红树植物；总I矾A：提取：方法比较
doi：10．3969／j．ism．1008-8873．2011．02．019中图分类号：Q95-3文献标识码：A 章编号：1008-8873(2011)02-20l-06
Analysisandmpmvementofllighquali姆RNAextractionillIeav链ofmangmVeplants
SONGHuil∞．Ⅵ恰NGY．ou．sha01’2·
1．Ke)，Ldbomto口西如picdlMar neE刑imn眦mnl现船mtcs，s删hCh蛔SeoIrIstimte嘭oce鲫o|0科Cht煅eAcad哪y西scie玳嚣．
6啾册昏hou510301．Chi’m
2M硎neBiolo斟Researchsl口lionotD叫dB睇Chin船eAcnde霄咿可Sci饥ces．shenzh朋518121．Ch讹
3．Gr口dIlnleSchool西theCh讯嚣eAc口aemy巧sciences，Be珏ing100039．Chi船
Abstract：Fiveex仃牡tion删弛odsincludingTak撒鼢n，Ti撇g∞l【it，IIlvi仃og阳l(it，modificdCTAB—LiClaIldCTAB-i∞propyl
alcoholm劬0dwerccomparedf-or x仃；蛐gtotalRNAf如m eleavesoffollfmangroVepl柚ts但r唧切．口母御加·r砌红口，X口，d纠妇
∞刑％彳曙耙P，．珊fD朋缸甜肠，甜脚，and彳，级御肠珊删M)．皿e矗vem modsH伽all观i扭blef．orto脚RNA既咖cti∞inl∞V韶of彳．
小口，．f疗口．Ti柚g曲kitw勰弧ccess缸llyllscdto能劬IcttlleI己NAinleav器of彳．cD聊fc“，口f却朋，彳．聊口，f行口，柚d芷融‘butfailedto
extracttlleRNAinleavesof曰．眇l雅D州^赶仉Invi仃c喀∞虹ex扛∞tedhighqmI时RNAof曰．乃研加砌加硎d足础￡butcouldnot
n奠novetheproteinofleavesof彳．co，行fc“，口f”m．TheRNAamountex ractedusingC1．AB—LiClandimproVedCTAB-isoprI)pyl
alcoholmetllodsw弱l嘶nerⅡmllsingRNAex柏ctionl【its；b∞id髓，tt圮emci蛐cyofrever∞们nscrjpti∞PCRofC1AB·LiCland
CrAB-isopropylalc holmethodswalower．
Keywords：M赳lgrovepI柚ts；totaIRNA；懿仃acti∞；anaIysis
收稿日期：20ll_02．22收稿，2011．04．15接受 、
基金项目：“十一五”国家科技支撑计划重点项目(2009BADB280606)；国家自然科学基金项目(41076070)；中国科学院知识创新工程重要方向
性项目(Kzc勉一Yw-Q07也，KSC勉-EWGl2C，KsCX2·Sw．132)．
作者简介：宋晖(1984一)。女，博士研究生，研究方向：海洋生物学，Email：∞nghuigirl@gmail．啪
。通讯作者：王友绍(1963一)男，教授(二级)，E·Inail：ysw雠g@scsio．∽．cn
万方数据
生态科学Ecolo舀calS ience 30卷
1弓I言(Introduction)
红树林是生长在热带、亚热带海岸潮间带的木
本植物群落，具有防浪护堤、过滤陆地径流及污染
物、减轻海洋污染，为鱼虾蟹贝和鸟类提供栖息和
觅食场所等重要的生态功能【1】。由于红树植物生长
于高盐海水的特殊生境，以及其特殊的生态功能，
关于红树植物耐盐机制、耐受重金属、多环芳烃和
多氯联苯等污染物机理以及植物种类进化等方面的
研究备受关注【2-川。
RNA是植物分子生物学重要的研究对象之一，
获得高质量的RNA则是后续RT-PCR、Northem杂交、
cDNA文库构建、实时定量PCR等分子生物学研究
的基础。目前用于植物RNA提取的方法很多，各类
商业试剂盒质量也是参差不齐；且红树植物在长期的
进化中其叶片含有大量的高复合蛋白、多糖、多酚、
次级代谢物以及革质化严重等特点，这给其核酸提取
带来了很大的困难【4】。本研究采用三种植物RNA提
取试剂盒(Tak锄，Tiangen及InVi仃ogen)及改良CTAJ3
提取缓冲液对木榄(口n掣把，口g唧加肭妇)、秋茄
(融ff口c口，l如D、桐花树0镏fcP，．础cD，一记“肠f“所)和白骨
壤0廊绷刀妇坍口一"口)四种常见红树植物叶片lⅢA提
取结果进行了比较，并针对不同植物提出了提取总
RNA的优化措施。
2材料与方法(Mater．aIsandMethods)
2．1红树植物
实验用红树植物木榄、秋茄、桐花树和白骨壤由
本实验室培植，采集木榄、秋茄、桐花树和白骨壤叶
片的幼嫩组织置于液氮中备用。
2．2三种植物I矾A提取试剂盒
(1)1’akara植物I斟A提取试剂盒(RNAisofor
Polysacch撕de-^chPlantTissue，Takamcode：D326)，
按试剂操作步骤进行。
(2)TiaIlgen植物RNA提取试剂盒(RNAplalltplus
Reagent，code：DP437)，按试剂操作说明进行。改
良方法为在氯仿抽提步骤之前先用苯酚：氯仿：异戊
醇(25：24：1)抽提，12000叩m离心。后续的步
骤则遵循试剂操作说明进行。
(3)Invi缸．ogenC ncenTMPlantIⅢAReagent
(catalogno：12322．012)，按试剂操作说明进行。
2．3CTAB．LiCI改良法
根据张玉刚，Ghangal等的方法[硒】。
(1)称取四种红树植物的幼嫩叶片0．2g，加液氮
研磨成粉末，加入65℃预热的提取缓冲液(2％CTAB，
2％PvP，100mM％s—HClp =8．0，25mMEDTA，
2．0MNaCl，1％PEG4000，O．59·L。1亚精胺，用前加
B．巯基乙醇至浓度20％)1mL，颠倒混匀，置于65
℃水浴中10min，12000印m，10min，取上清。
(2)用等体积的苯酚：氯仿：异戊醇(25：24：
1)抽提，12ooO印m离心，取上清液，再加等体积
的氯仿：异戊醇(24：1)，12000甲m离心10min，
取上清。
(3)加入1／3体积的8MLiCl和2／3体积的异丙
醇，置于．20℃沉淀过夜(7．8h)。4℃12000rpm离心
15min，弃上清。
(4)加入1mL预冷的75％乙醇洗涤沉淀，12000
印m离心1min，干燥后溶于30“LRnase．肫e水中，
一70℃保存。
2．4CTAB．异丙醇法
(1)方法在沉淀IⅢA之前步骤同CTAB—LiCl法，
沉淀IⅢA时只加等体积的异丙醇。后面方法同
CTAB—LiCl法，但是最后RNA溶于100皿的
Ibase．舶e水。
(2)加入等体积的65℃预热10min后的非酶多糖
清除剂(天泽基因)中，充分震荡1min，加入等体
积的氯仿，充分震荡混匀。12000rpm离心2min，
吸取上清液。
(3)加入O．1倍体积的3M醋酸钠(pH=5．2)和两
倍体积的无水乙醇，混匀，12000叩m离心lOrnjn。
小心弃上清。
(4)加入lmL75％乙醇，12000印m1 in，小心
弃上清。干燥后溶于30此Ihase．舶e水中，一70℃保
存。 ，
2．5总RNA检测及纯度分析
(1)RNA样品紫外分光光度计检验。取5uLRNA，
溶于500uLRnase．f-ree水，混匀，用岛津Uv-1700
型紫外分光光度计测定260姗和280nm波长下的
OD值。
(2)RNA样品非变性琼脂糖凝胶电泳检测。另取
10uLRNA样品，于1％琼脂糖凝胶电泳后，EB染色，
用Alpha凝胶成像系统拍照记录。
万方数据
2期 束晖，等：红树植物叶片总RNA提取方法比较与优化
(3)RNA样品的RT’PcR检验。R1二PcR是摹因克
隆、转基因植物分子鉴定等分子学实验的重要方法之
一，为了验证不同方法提取红树植物叶片RNA的可
用性效果．进行R■PcR验证，并进行实时定量PcR
检测，验证不同方法的反转录效率。通过Pr鲫egaR01
RN鹞}Fr∞DN赫c(M610)去除基因组DNA后，
cDNA合成参照1协鲫公司M-加Ⅳ反转录说明书
进行，以合成的cDNA为模板．根据术搅18s基因设
计引物，正向引物：5’GG6C^11cG¨mc3’，反
向引物：5’cc枷1口30cATconl鲋3’，进行实时
定量扩增。采用Takar“DRR081)实时定量试剂，25llL
扩增体系：125uLsYBRPremixbu船r，95uLddH，O，
05IlLl0岫01正向引物，05llLIOuml反向引物，2uL
模板。扩增程序为：95℃变性30s；95℃变性5s，55
℃复性15s，72℃延伸30s，循环45次；65℃母5℃
测定熔解曲线，每隔O5℃测定吸光值。
3．1不同提取方法的RNA完整性检涌
提取的RNA以1％非变性琼脂糖凝胶电泳检测，
五种方法的提取结果如图lA所示．cT^B．Licl沉淀
法对四种红树植物RNA提取均有良好的效果．28s
和18s条带清晰，且亮度28s是18s的l5．20倍，加
入高浓度的LjcI能有效的去除多糖、蛋白等杂质的
污染，而且能够有效的选择性的沉淀RNA，去除基
因组DNA的污染．而其他四种提取方法则会有少量
基因组DNA的污染，颁在后续的反转录步骤前用
DNAⅡ船e消化去除DNA。但该方{击沉淀时间需过夜
(7·8h)．提取周期较长。如图lc所示，Invi仃。卿
RNA提取试剂，其对木杭、秋茄、白骨壤均有良好
的提取结果，28s、18s、5s条带清晰且完整．提取
圈1红时植钎叶片总脒^琼脂糖凝腔电泳
F嘻1A铲r僻e州elecI”pho岫“印ofm柚$m仲pl蛐ⅡkI‘蛳Ilt№
万方数据
生态科学Ec0109i■sc啪∞ 30卷
l固l：三瑚的．=———L——L——W。0J≈牛—__HH＆：立磊巨土d吲
‘二一“
田2木植l‰基因的实时定量扩增曲线和涪解曲线
Fl蚪n⋯一m卸⋯nd枷lt⋯e缸l瓢弘眦ⅡEow枷翰
RNA的质量较高，但是和Llcl沉淀法比，此试剂不
能有效的去除基因组DNA的污染．在28s条带上面
或多或少都有基因组条带的污染。Ti孤卿提取试荆
能有效提取秋茄、桐花树和白骨壤叶片的RNA，但
是同InⅥ们啪相同也受到了基因组D1qA的干扰。
对于木榄．沉淀则得到一大丽的粘性物质，难溶于水．
在电泳加样时存在漂样，因此该法难以有效的去除蛋
白及多糖等的污染，而在改良啊蛐鲫提取步骤(提
取过程中加入苯酚：氯仿：异戊醇的处理)后．则得
到了良好的RNA提取效果．如圈lD所示。由于LicI
沉淀法周期较长。尝试性的只用异丙醇沉淀RNA，
但是提取的RNA难溶，有明显的多糖污染。用天泽
基因的非酶多糖去除剂在后续的处理中能够有效的
去除多糖，如图lB所示。该法对桐花树和白骨壤能
够有效的提取RNA，但是对木榄和秋茄提取的RN^
条带有轻微的拖尾现象，且5s条带较亮，说明RNA
在提取过程中有少量的降解。Thk目m提取结果如图
1E所示，该法只对白骨壤有良好的提取效果．其它
三种植物均不能有效的提取其RNA，提取的RNA呈
褐色，且牯稠．在电泳点样时出现漂样．说明该法不
能有效的去除多酚、多糖的污染。其它四种方法加入
B．巯基乙醇后均能有效防止多酚氧化。在后续的步骤
中使多酚得以去除．提取的RNA为乳白接近透明色-
而白骨壤叶片中由于多酚含量较少故用nk蚰试剂
亦能成功提取。因此，提取红树植物叶片的总RNA，
防止多酚氧化是提取过程的关键因素之一。
30RNA浓度、纯度检测
Licl沉淀法，InvI们g锄以及改良后的n眦鲫
提取试剂盒法提取的总RNA．0D2∞^0D瑚的比值均
龃度
在18—21之间，说明提取的RNA能有效的去除蛋白、
多塘等的污染。其它方法对白骨壤提取的比值也均在
I 8．2I之问。但是LIcI沉淀法和异丙醇沉淀法提取
的RNA的产率较低，一般为5啦70Ilg幢，而其它方法
均为90ug-150Ilg恒。
33m：PcR和r刊-Ii眦PcR扩增目的基因
为进一步验证各类提取试剂盒和cTAB改良法
之后提取的RNA的质量，以术榄为倒，扩增其1ss
基因。通过扩增曲线和溶解曲线表明，改善后的方法
均能有效的扩增出目的基因。对表达量进行比较，取
同样的O5u窖总RNA，反转录．通过R∞I．Ⅱme扩增
18s基因，如田3所示．1、2、3，4显示的分别是
Licl法、异丙醇法、na雌蚰和l州Ⅱ雌en试剂反转
录后的扩增定量结果，L尬l和异丙醇沉淀法的扩增量
明显低于hwih鲫和TIang∞试剂盒。
高质量的RNA是进行分子生物学研究的基础和
关键．提取植物总RNA的基本原理是将细胞破碎后．
使RNA与糖、蛋白质、DNA等杂质分开。植物的生
长特性决定了植物材料的理化性质，在RNA提取的
时候要根据材料的特点选用适宜的方法口】。红树植物
叶片中含有大量多糖、高蛋白、酚类、醌类及其它次
生代谢物质，采用常规的提取方法报难得到高质量的
RNA【“。因此，去蛋白、去多糖和抑制多酚氧化是提
取红树植物叶片RNA的关键。
万方数据
2期 柬晖，等：红辩植物叶片总R№提取方法比较与优化
lJI
圈3四种不同RN^挺取方法术槐l☆rRN^基园的相对衰选
结果．1c聃导I埘珐；LcIA嘴丙酵法：1I吖栅·明提
取试剂盘；^"¨铷提取试莉盘．
Fl岫黜I^n"哪l憎岫Ⅱ1％r心^pm“&嚣捌训惭
“d垧t哪tnH^删rid甜m州m州I．cr^B{jCl．
2cr^mI·叩MI蝴m；3．h“唧u；^n“掣H日
4_l蛋白的去除
咖抽提法被广泛应用于植物蜊A和RNA的提取。㈨是一种很强的去污荆，有明显的蛋白
质变性效果。该提取液在富含多酚厦敬级代谢物质的
白桦、幕叶橙中都有良好的提取效果”’⋯．在富含多
糖的百合、甘薯、棉花叶片的提取效果中也已得到验
证”¨“。该研究通过改进咖缓冲液配方．加入高
浓度的肛巯基乙醇．防止多酚等故生代谢物的氧化，
从而在后续的纯化步骤中有效的去赊。该法能有效的
使秋茄和白骨壤叶片的蛋白变性并去除，后续只需氯
仿抽提即可去除蛋白。但是木榄和桐花树的蛋白含量
较高，必须用酚氯仿抽提才能更有效的去除蛋白。
I州ⅡDg蛆和啊蛐ge|l提取试剂对秋茄和白骨壤叶片
能通过后续的氯仿抽提去除蛋白．但只有对啊锄雕l
提取步骤进行优化后(在氯仿步骤之前再用酚氯仿抽
提一扶)．方能有效的去除蛋白污染．从而得到高质
量的木榄和桐花树的总酬A。
屯2多酚的抑制
红树植物叶片富含酚类化合物。匀浆时，酚类及
醌类物质会被氧化为褐色，褐色物质能与RNA稳定
结合，影响后续RNA的分离厦纯化”⋯。提取液通过
加入浓度高选2∞‘的m巯基乙醇且结合PvP防止酚
共氧化，巯基乙醇可抑制多酚氧化，PvP可螯台酚类
物质．从而有效的去除多酚、醌类等次缎代谢物质．
I州nogeⅡ’n柚鲫提取试剂里也含有舡巯基乙醇，
而僦m试剂里没有抑制多酚类物质氧化的物质．
从而氧化后的多酚娄物质与RNA共沉淀．影响了
RN^的提取结果。白骨壤里的敬生代谢物、多酚类
含量较少-因此提取试剂里无需巯基乙醇等抑制剂均
能有效的提取RNA。所以Tahm不适用于提取多酚
含量较高的木榄、秋茄、桐花树叶片的总心A。
43多糖的去除
红树植物多糖的去除同其它植物一样是提取
RNA的难题之一。通常去除多糖的方法有⋯¨6】：l、
在高浓度Nr或K．条件下．通过苯酚、氯仿等有机
蓿剂抽提；2、异丙醇沉淀RNA时加入高盐溶液选
择性的沉淀RNA，如柠檬酸钠和Nacl。3、低浓度无
水乙醇和3咖m醋酸钾或醋酸钠溶液配台以去除多
糖杂质。4、通过LIa选择沉淀RNA。实验经验表
明，采用LicI选择沉淀RNA可达到去除多糖的效果，
而其他单一的方法都不能有效的击除红树植物提取
过程中的多糖，-但是Lla选择性的沉淀大分子的
rRNA和mRNA，因此总RNA的完整性不好，如图
lA所示，28s和18删A均能提取，但是5ⅡRNA
不能完整的提取出来。而且．研究表明，ucl在后续
的反转录实验中有可能影响反转录酶的效率，该研究也验证了该结果．如图3所示。I州哪、n蛐鲫
提取试剂盒，在高浓度的Nacl的条件下．通过氯仿
抽提就能有效击除秋茄和白骨壤中的多糖．而木榄和
桐花树，则需要在高浓度Nacl下通过加入酚氯仿抽
提步骤方能有效去除多糖。
实验结果表明t5种方法对提取白骨壤叶片均有
良好的效果，c】姐Licl法和c1姐异丙醇沉淀法
改良后也能提取得判木橇和秋茄叶片的总RNA．但
是产率偏低。I州们胂提取试剂在四种植物总RNA
的提取教栗优于Ⅲ锄哪和nk哪，但是其价格也比
较昂贵。因此改良后的髓a删提取试剂，价格低廉．
是提取红树植物叶片试剂盒的良好选择。
Il】Fux，D扎gs，suqz蛐gqshisl∞l咖M曲删哼
RNAlioman鲫v％砒m呻t№ⅢdⅢ们geⅡ们f惭口
mk☆口脚mpm2004，2219～l‰
12】Ea眦墨协YI曲咂6c撕叽甜∞n∞I匍I噼州eom
mcm4雌一—删西掣一。呐蝌懒m1≈
●■■■。。
万方数据
生 态科学EcologicalScience 30卷
Agrobact甜um缸lctionalscreeniIlg[J】．P，口肼＆切lcP，2009，
’176(2)：272．278．
13l H啪gGYW趾gYS．Expression锄dcharacterization
鲫坶sisof唧e2metallomionein的mgreyIn锄gr0Ve
species似vfc绷珂细小口r加圳inrcspo set0m tals廿它ss【J】．
彳鼋凇ffc‰lcD，魄y，2010，99(1)：86-92．
【4】 符秀梅，韩淑梅，朱红林，周秀，李小靖，吴辉，谢俊，
陈银华．一种有效的红树根部总IⅢA提取方法【J】．华北
农学报，2009，24：13．15．
【51 Gh柚galRRaglluvanshiS，c 柚dshannaP．IsolatioIlof
900dqllal时RNA劬mamedici他lplamseabucl(tllom，
richiIl∞condarymetabolites[J】．P，册fP7驴fD，p∥口九d
曰fD幽硎扫奶，，47：1113一lll5．
161 张玉刚，成建红，韩振海，许雪峰，李天忠．小金海棠
总lu叮A提取方法比较及cDNA的LD．PCR扩增【J】．生
物技术通报，2005，4：50．53．
’
171李宏，王新力．植物组织RNA提取的难点及对策明．生
物技术通报，1999，l：36．39．
18】 周怀军，张洪武，．安连荣，段肖翠，崔宝禄，张晓曼，
左永忠．落叶松IⅢA提取方法对比研究【J】．河北农业大
学学报，2003，26(3)：62．“．
19l 曾凡锁，南楠，詹亚光．富含多糖和次生代谢产物的白
桦成熟叶中总RNA的提取【J】．植物生理学通讯，2007，
43(5)：913-916．
IlOl尹慧，陈莉，李晓艳，陈秋明，义鸣放．百合叶片总RNA
提取方法比较及优化叨．中国农业大学学报，2008，
13(4)：4l-45．
Illl刘洋，何心尧，马红波，吴泳历，杨佑明．用C1．AB．PVP
法提取棉花各组织总RNA的研究【J】．中国农业大学学
报，2006，ll(1)：53．56．
1121马丽．两种快速提取甘薯块根总RNA的方法[J1．山东农
业科学，2008，6：92．95．
【131M锄ingK．Isolationofmlcleic∽ids蜀rompl卸临by
di腩ren捌solventprccipi伽on[J】．4阳咖fc口，
B面c办绷括f秒，199l，195(1)：45-50．
114l朱昀，王猛，贾志伟，练云，金颖，王国英．一种从富
含多糖的玉米幼穗中提取l蝌A的方法[J】．植物学通报
2007，24(5)：624—628．
【151谢传胜，宋国琦，王兴军，夏晗，赵传志，毕玉平．拟
南芥和烟草幼嫩种子砌叮A不同提取方法的比较明．中
国农学通报，2009，25(23)：78—81．
116l赵春喜，马利华，杨同文．改进的CTAB法提取中华芦
荟叶总RNA[J】．安徽农业科学，2008，36(16)：667l-6672．
《生态科学》论文附图格式要求
插图应有图序和图题，图题应简明、准确，一般不宜超过25个字。图题及文中所有文字都需中英文同时表述，图题置于
图的下方；图注一般置于中英文图题之间，亦可放在图内；图例要清晰、分明、大小合适，一般应放在图中空当处。图例
应采用易区分的标识，如“×、口、△”等。
图的长宽比、坐标轴单位的设计、线条疏密程度等要科学、合理，切忌过分重叠、凌乱。要注意图的整体效果。图要大小
合适(能够看清所反映的内容)。
对于照相图，原稿照片应图像清晰，层次分明，反差适中，无污损和折痕。电子显微镜照片图还应在其说明文字或注释中
表明其放大倍数。如用彩图请事先向编辑部说明，彩页另收费。
插图的宽度(包括纵坐标上名称、单位)为80删n(双栏)，或160IIlIn(通栏)，高度可适当改变。图版尺寸160×240Il越。照片
要求清晰，层次分明，勿用翻拍照片和复印件，表格一律采用“三线表”。
万方数据
红树植物叶片总RNA提取方法比较与优化
作者： 宋晖， 王友绍， SONG Hui， WANG You-shao
作者单位： 宋晖,SONG Hui(中国科学院南海海洋研究所热带海洋环境动力学重点实验室,广州
,510301;中国科学院研究生院,北京,100039)， 王友绍,WANG You-shao(中国科学院南海海
洋研究所热带海洋环境动力学重点实验室,广州,510301;中国科学院大亚湾海洋生物综合试
验站,深圳,518121)
刊名： 生态科学
英文刊名： ECOLOGICAL SCIENCE
年，卷(期)： 2011,30(2)

参考文献(16条)
1.曾凡锁;南楠 詹亚光,富含多糖和次生代谢产物的白桦成熟叶中总RNA的提取[期刊论文]-植物生理学通讯
2007(05)
2.周怀军;张洪武;安连荣;段肖翠 崔宝禄 张晓曼 左永忠 落叶松RNA提取方法对比研究[期刊论文]-河北农业大学
学报 2003(03)
3.李宏;王新力 植物组织RNA提取的难点及对策[期刊论文]-生物技术通报 1999(1)
4.朱昀;王猛;贾志伟;练云,金颖,王国英 一种从富含多糖的玉米幼穗中提取RNA的方法[期刊论文]-植物学通报
2007(05)
5.Manning K Isolation of nucleic acids from plants by differential solvent precipitation[外文期刊]
1991(01)
6.马丽 两种快速提取甘薯块根总RNA的方法[期刊论文]-山东农业科学 2008(6)
7.刘洋;何心尧;马红波;吴泳历 杨佑明 用CTAB-PVP法提取棉花各组织总RNA的研究[期刊论文]-中国农业大学学报
2006(01)
8.尹慧;陈莉;李晓艳;陈秋明 义鸣放 百合叶片总RNA 提取方法比较及优化[期刊论文]-中国农业大学学报
2008(04)
9.Fu X;Deng S;Su G;Zeng Q Shi S Isolating high-quality RNA from mangroves without liquid nitrogen[外
文期刊] 2004
10.张玉刚;成建红;韩振海;许雪峰,李天忠 小金海棠总RNA提取方法比较及cDNA的LD-PCR扩增[期刊论文]-生物技术
通报 2005(4)
11.Ghangal R;Raghuvanshi S;Chand Sharma P Isolation of good quality RNA from a medicinal plant
seabuckthom,rich in secondary metabolites
12.符秀梅;韩淑梅;朱红林;周秀,李小靖,吴辉,谢俊,陈银华 一种有效的红树根部总RNA提取方法[期刊论文]-华北
农学报 2009(z2)
13.Huang G Y;Wang Y S Expression and charactenzation analysis of type 2 metallothionein from grey
mangrove species (Avicennia marina) in response to metal stress[外文期刊] 2010(01)
14.Ezawa S Tada Y Identification of salt tolerance genes from the mangrove plant Brguiera
gymnorrhiza using Agrobacterium functional screening[外文期刊] 2009(02)
15.赵春喜;马利华;杨同文 改进的CTAB法提取中华芦荟叶总RNA[期刊论文]-安徽农业科学 2008(16)
16.谢传胜;宋国琦;王兴军;夏晗 赵传志 毕玉平 拟南芥和烟草幼嫩种子RNA不同提取方法的比较[期刊论文]-中国
农学通报 2009(23)

本文读者也读过(2条)
1. 符秀梅.韩淑梅.朱红林.周秀.李小靖.吴辉.谢俊.陈银华.FU Xiu-mei.HAN Shu-mei.ZHU Hong-lin.ZHOU Xiu.
LI Xiao-jing.WU hui.XIE Jun.CHEN Yin-hua 一种有效的红树根部总RNA提取方法[期刊论文]-华北农学报
2009,24(z2)
2. 王友绍.Wang Youshao 海洋生态系统多样性研究[期刊论文]-中国科学院院刊2011,26(2)


本文链接：http://d.g.wanfangdata.com.cn/Periodical_stkx201102019.aspx