全 文 :蒙古扁桃的组织培养与快速繁殖技术研究
吴建华1,王立英2,李 健1,2 (1.种苗生物工程国家重点实验室,宁夏银川 750004;2.宁夏林业研究所(有限公司) ,宁夏银川 750004)
摘要 [目的]对蒙古扁桃(Prunus mongolica Maxim.)的组织培养与快速繁殖技术进行研究。[方法]以蒙古扁桃幼嫩茎段为外植体进
行组织培养试验。[结果]筛选出适合蒙古扁桃外植体的诱导培养基为 MS +6-BA 0. 80 mg /L + IAA 1. 20 mg /L +30 g /L 蔗糖 +5 g /L琼
脂粉,pH值为 6. 0 ~6. 2;愈伤组织诱导培养基为 MS +6-BA 1. 00 mg /L + NAA 0. 10 mg /L + 30 g /L 蔗糖 + 5 g /L琼脂粉,pH值为 6. 0 ~
6. 2;继代芽分化培养基为MS +6-BA 0. 80 mg /L + IAA 1. 50 mg /L + NAA 0. 05 mg /L +30 g /L蔗糖 +5 g /L琼脂粉,pH值为6. 0 ~6. 2;生
根培养基为 1 /2 MS + IBA 0. 50 mg /L +根皮苷 5. 00 mg /L +15 g /L蔗糖 +5 g /L琼脂粉,pH值为 6. 0 ~6. 2;以草炭∶蛭石∶珍珠岩 =2∶ 1∶
1为移栽基质效果最好。[结论]为蒙古扁桃品种改良及工厂化繁育提供参考。
关键词 蒙古扁桃;组织培养;快速繁殖
中图分类号 S603. 6 文献标识码 A 文章编号 0517 -6611(2010)04 -01733 -02
Study on Tissue Culture and Rapid Propagation of Prunus mongolica Maxim.
WU Jian-hua et al (State Key Laboratory of Seedling Bioengineering of Ningxia,Yinchuan,Ningxia 750004)
Abstract [Objective]The research aimed to study the tissue culture and rapid propagation of Prunus mongolica Maxim. . [Method]Young
stems were used as explants to study tissue culture of Prunus mongolica Maxim. [Result]The results showed that the best explant induction
medium was MS + 6-BA 0. 80 mg /L + IAA1. 20 mg /L + 30 g /L Sugar + 5 g /L agar powder(pH value 6. 0 - 6. 2),the callus inducton medium
was MS + 6-BA 1. 00 mg /L + NAA 0. 10 mg /L + 30 g /L Sugar + 5 g /L agar powder(pH value 6. 0 - 6. 2),the shoot multiplication medium
was MS + 6-BA 0. 80 mg /L + IAA 1. 50 mg /L + NAA 0. 05 mg /L + 30 g /L Sugar + 5 g /L agar powder(pH value 6. 0 - 6. 2),and the rooting
medium was 1 /2 MS + IBA 0. 50 mg /L + phloridzin 5. 00 mg /L + 15 g /L Sugar + 5 g /L agar powder(pH value 6. 0 - 6. 2),the transplant
soil components of turf,vermiculite and perlite was 2∶ 1∶ 1. [Conclusion]The study can lay the reference for variety modifying and industrial
beeding.
Key words Prunus mongolica Maxim.;Tissue culture;Rapid propagation
作者简介 吴建华(1978 -) ,女,宁夏银川人,工程师,从事植物组织培
养和脱毒快繁工作。
收稿日期 2009-10-19
蒙古扁桃 Prunus mongolica Maxim.为蔷薇科(Rosaceae)
李亚科(Prunoideae)李属旱生落叶灌木,灌高 1 ~2 m,为亚洲
中部戈壁荒漠区特有的旱生落叶灌木,是内蒙古干旱沙地特
有的乡土树种,是防沙治沙造林的首选树种之一[1]。由于其
花期风沙大,家畜啃食严重,天然繁殖困难,出苗率低且死亡
率高,加之其为当地良好薪材和冬春季家畜喜食饲料,滥伐
破坏严重,导致蒙古扁桃资源越来越少,分布范围日趋缩小,
趋于濒危。为使干旱、半干旱地区的优良林木遗传资源得到
有效利用,丰富防沙治沙优良种植材料,开展蒙古扁桃组培
快繁技术研究就成了当务之急。目前,关于蒙古扁桃组织培
养技术的研究[2 -3]已有少量报道。笔者在前人研究基础上,
对蒙古扁桃的组织培养及快速繁殖技术进行研究。
1 材料与方法
1. 1 材料 蒙古扁桃(Prunus mongolica Maxim.)种子萌发
的幼嫩茎段。
1. 2 培养条件 愈伤组织启动培养基:①MS + 6-BA 0. 80
mg /L + IAA 1. 20 mg /L;②MS +6-BA 1. 00 mg /L + NAA 0. 10
mg /L。丛生芽诱导和增殖培养基:MS + 6-BA 0. 80 mg /L +
IAA 1. 50 mg /L + NAA 0. 05 mg /L。生根培养基:1 /2 MS +
IBA 0. 50 mg /L +根皮苷 5. 00 mg /L。以上培养基除生根培
养基加入 15 g /L蔗糖和 5 g /L琼脂粉外,其他培养基均加入
30 g /L蔗糖和 5 g /L 琼脂粉;所有培养基 pH 值均为 6. 0 ~
6. 2,培养温度(25 ±2)℃,光照时间 12 h /d,光照强度 40 ~ 60
μmol /(m2·s)。
1. 3 方法
1. 3. 1 无菌材料的获得。对蒙古扁桃种子进行 4 ℃低温沙
藏 40 d,25 ~28 ℃催芽,10 ~15 d发芽后移入基质中;待长出
5 ~6片真叶、高度 3 ~ 5 cm时取生长健壮苗的茎段,用饱和
洗衣粉水刷洗表面,并用自来水冲洗 1 h,置于超净工作台;
用 75%酒精浸泡 1 min,0. 1%升汞振荡消毒 5 ~ 6 min,无菌
水冲洗 5 ~6次,无菌滤纸吸干表面的水;用无菌剪刀将材料
剪成单芽茎段,接种于培养基①上光照培养;将伸长的腋芽
剪下接种至培养基②,观察。
1. 3. 2 丛生芽的诱导和增殖培养。由“1. 3. 1”获得的丛生
不定芽在增殖培养基上培养,待分化出苗后接种至增殖培养
基中,观察。
1. 3. 3 生根培养。将生长健壮的分化苗剪切成 1. 5 ~ 2. 0
cm,接入生根培养基培养,观察生根情况。
1. 3. 4 试管苗炼苗移栽。将已生根的试管苗与瓶一起置于
温室炼苗,7 d后打开瓶盖。露置 1 d后取出试管苗,小心洗
净根上附着的琼脂培养基,移栽至装有基质为草炭∶蛭石∶珍
珠岩 =2∶ 1∶ 1的营养钵中,置于温室苗床上养护。期间,保持
温室温度为 20 ~25 ℃,空气相对湿度为 85% ~ 90%;适当遮
荫,使光照强度为 50% ~60%自然光。
2 结果与分析
2. 1 无菌材料的获得 在培养基①上培养 8 ~ 10 d后腋芽
部位伸长 2 ~3 cm(图 1)。15 ~20 d后将伸长的腋芽剪下接
种至培养基②上,20 ~ 25 d 后基部膨大形成愈伤组织,10 ~
12 d后形成丛生不定芽(图 2)。
2. 2 丛生芽的诱导和增殖培养 结果 在增殖培养基上培
养 20 ~25 d,基部开始膨大,芽点突起,10 d后愈伤组织分化
出苗。将分化的芽苗接种至增殖培养基中,培养 15 ~20 d便
长出大量的丛生芽,平均分化系数达 4. 5 以上,继代周期 25
d(图 3)。
2. 3 生根培养结果 生长健壮的分化苗在生根培养基上培
安徽农业科学,Journal of Anhui Agri. Sci. 2010,38(4):1733 - 1734 责任编辑 姜丽 责任校对 况玲玲
DOI:10.13989/j.cnki.0517-6611.2010.04.120
图 1 蒙古扁桃萌芽培养结果
Fig. 1 The multiplication culture results of Prunus mongolica
Maxim.
图 2 蒙古扁桃分化培养结果
Fig. 2 The differentiation culture results of Prunus mongolica
Maxim.
图 3 蒙古扁桃增殖培养结果
Fig. 3 The germination culture results of Prunus mongolica
Maxim.
养 10 ~12 d后开始生根,株高 2. 0 ~2. 5 cm,试管苗基部长出
2 ~3条辐射状根,生根率达 85%以上(图 4)。
图 4 蒙古扁桃生根培养结果
Fig. 4 Rooting culture results of Prunus mongolica Maxim.
2. 4 试管苗炼苗移栽结果 移栽后 15 d开始生根并抽生新
叶,成活率可达 80%以上(图 5)。
图 5 蒙古扁桃移栽结果
Fig. 5 The transplanting results of Prunus mongolica Maxim.
3 结论与讨论
该研究以蒙古扁桃幼嫩茎段为外植体进行组织培养试
验,筛选出适合蒙古扁桃外植体诱导培养基为 MS + 6-BA
0. 80 mg /L + IAA 1. 20 mg /L + 30 g /L 蔗糖 + 5 g /L 琼脂粉,
pH值 6. 0 ~ 6. 2;愈伤组织诱导培养基为 MS + 6-BA 1. 00
mg /L + NAA 0. 10 mg /L +30 g /L蔗糖 + 5 g /L琼脂粉,pH值
6. 0 ~6. 2;继代芽分化培养基为 MS + 6-BA 0. 80 mg /L + IAA
1. 50 mg /L + NAA 0. 05 mg /L + 30 g /L蔗糖 + 5 g /L琼脂粉,
pH值 6. 0 ~6. 2;生根培养基为 1 /2 MS + IBA 0. 50 mg /L +根
皮苷 5. 00 mg /L + 15 g /L蔗糖 + 5 g /L 琼脂粉,pH 值 6. 0 ~
6. 2;以草炭∶蛭石∶珍珠岩 =2∶ 1∶ 1为移栽基质效果最好。
该研究建立的离体培养再生体系稳定性好,增殖速度
快,建立了蒙古扁桃组培快繁技术体系,并与生产应用紧密
结合,为蒙古扁桃品种改良以及工厂化繁育提供了参考。
参考文献
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檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪
1479 -1481.
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4371 安徽农业科学 2010 年