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蒙古扁桃的组织培养与快速繁殖技术研究



全 文 :蒙古扁桃的组织培养与快速繁殖技术研究
吴建华1,王立英2,李 健1,2 (1.种苗生物工程国家重点实验室,宁夏银川 750004;2.宁夏林业研究所(有限公司) ,宁夏银川 750004)
摘要 [目的]对蒙古扁桃(Prunus mongolica Maxim.)的组织培养与快速繁殖技术进行研究。[方法]以蒙古扁桃幼嫩茎段为外植体进
行组织培养试验。[结果]筛选出适合蒙古扁桃外植体的诱导培养基为 MS +6-BA 0. 80 mg /L + IAA 1. 20 mg /L +30 g /L 蔗糖 +5 g /L琼
脂粉,pH值为 6. 0 ~6. 2;愈伤组织诱导培养基为 MS +6-BA 1. 00 mg /L + NAA 0. 10 mg /L + 30 g /L 蔗糖 + 5 g /L琼脂粉,pH值为 6. 0 ~
6. 2;继代芽分化培养基为MS +6-BA 0. 80 mg /L + IAA 1. 50 mg /L + NAA 0. 05 mg /L +30 g /L蔗糖 +5 g /L琼脂粉,pH值为6. 0 ~6. 2;生
根培养基为 1 /2 MS + IBA 0. 50 mg /L +根皮苷 5. 00 mg /L +15 g /L蔗糖 +5 g /L琼脂粉,pH值为 6. 0 ~6. 2;以草炭∶蛭石∶珍珠岩 =2∶ 1∶
1为移栽基质效果最好。[结论]为蒙古扁桃品种改良及工厂化繁育提供参考。
关键词 蒙古扁桃;组织培养;快速繁殖
中图分类号 S603. 6 文献标识码 A 文章编号 0517 -6611(2010)04 -01733 -02
Study on Tissue Culture and Rapid Propagation of Prunus mongolica Maxim.
WU Jian-hua et al (State Key Laboratory of Seedling Bioengineering of Ningxia,Yinchuan,Ningxia 750004)
Abstract [Objective]The research aimed to study the tissue culture and rapid propagation of Prunus mongolica Maxim. . [Method]Young
stems were used as explants to study tissue culture of Prunus mongolica Maxim. [Result]The results showed that the best explant induction
medium was MS + 6-BA 0. 80 mg /L + IAA1. 20 mg /L + 30 g /L Sugar + 5 g /L agar powder(pH value 6. 0 - 6. 2),the callus inducton medium
was MS + 6-BA 1. 00 mg /L + NAA 0. 10 mg /L + 30 g /L Sugar + 5 g /L agar powder(pH value 6. 0 - 6. 2),the shoot multiplication medium
was MS + 6-BA 0. 80 mg /L + IAA 1. 50 mg /L + NAA 0. 05 mg /L + 30 g /L Sugar + 5 g /L agar powder(pH value 6. 0 - 6. 2),and the rooting
medium was 1 /2 MS + IBA 0. 50 mg /L + phloridzin 5. 00 mg /L + 15 g /L Sugar + 5 g /L agar powder(pH value 6. 0 - 6. 2),the transplant
soil components of turf,vermiculite and perlite was 2∶ 1∶ 1. [Conclusion]The study can lay the reference for variety modifying and industrial
beeding.
Key words Prunus mongolica Maxim.;Tissue culture;Rapid propagation
作者简介 吴建华(1978 -) ,女,宁夏银川人,工程师,从事植物组织培
养和脱毒快繁工作。
收稿日期 2009-10-19
蒙古扁桃 Prunus mongolica Maxim.为蔷薇科(Rosaceae)
李亚科(Prunoideae)李属旱生落叶灌木,灌高 1 ~2 m,为亚洲
中部戈壁荒漠区特有的旱生落叶灌木,是内蒙古干旱沙地特
有的乡土树种,是防沙治沙造林的首选树种之一[1]。由于其
花期风沙大,家畜啃食严重,天然繁殖困难,出苗率低且死亡
率高,加之其为当地良好薪材和冬春季家畜喜食饲料,滥伐
破坏严重,导致蒙古扁桃资源越来越少,分布范围日趋缩小,
趋于濒危。为使干旱、半干旱地区的优良林木遗传资源得到
有效利用,丰富防沙治沙优良种植材料,开展蒙古扁桃组培
快繁技术研究就成了当务之急。目前,关于蒙古扁桃组织培
养技术的研究[2 -3]已有少量报道。笔者在前人研究基础上,
对蒙古扁桃的组织培养及快速繁殖技术进行研究。
1 材料与方法
1. 1 材料 蒙古扁桃(Prunus mongolica Maxim.)种子萌发
的幼嫩茎段。
1. 2 培养条件 愈伤组织启动培养基:①MS + 6-BA 0. 80
mg /L + IAA 1. 20 mg /L;②MS +6-BA 1. 00 mg /L + NAA 0. 10
mg /L。丛生芽诱导和增殖培养基:MS + 6-BA 0. 80 mg /L +
IAA 1. 50 mg /L + NAA 0. 05 mg /L。生根培养基:1 /2 MS +
IBA 0. 50 mg /L +根皮苷 5. 00 mg /L。以上培养基除生根培
养基加入 15 g /L蔗糖和 5 g /L琼脂粉外,其他培养基均加入
30 g /L蔗糖和 5 g /L 琼脂粉;所有培养基 pH 值均为 6. 0 ~
6. 2,培养温度(25 ±2)℃,光照时间 12 h /d,光照强度 40 ~ 60
μmol /(m2·s)。
1. 3 方法
1. 3. 1 无菌材料的获得。对蒙古扁桃种子进行 4 ℃低温沙
藏 40 d,25 ~28 ℃催芽,10 ~15 d发芽后移入基质中;待长出
5 ~6片真叶、高度 3 ~ 5 cm时取生长健壮苗的茎段,用饱和
洗衣粉水刷洗表面,并用自来水冲洗 1 h,置于超净工作台;
用 75%酒精浸泡 1 min,0. 1%升汞振荡消毒 5 ~ 6 min,无菌
水冲洗 5 ~6次,无菌滤纸吸干表面的水;用无菌剪刀将材料
剪成单芽茎段,接种于培养基①上光照培养;将伸长的腋芽
剪下接种至培养基②,观察。
1. 3. 2 丛生芽的诱导和增殖培养。由“1. 3. 1”获得的丛生
不定芽在增殖培养基上培养,待分化出苗后接种至增殖培养
基中,观察。
1. 3. 3 生根培养。将生长健壮的分化苗剪切成 1. 5 ~ 2. 0
cm,接入生根培养基培养,观察生根情况。
1. 3. 4 试管苗炼苗移栽。将已生根的试管苗与瓶一起置于
温室炼苗,7 d后打开瓶盖。露置 1 d后取出试管苗,小心洗
净根上附着的琼脂培养基,移栽至装有基质为草炭∶蛭石∶珍
珠岩 =2∶ 1∶ 1的营养钵中,置于温室苗床上养护。期间,保持
温室温度为 20 ~25 ℃,空气相对湿度为 85% ~ 90%;适当遮
荫,使光照强度为 50% ~60%自然光。
2 结果与分析
2. 1 无菌材料的获得 在培养基①上培养 8 ~ 10 d后腋芽
部位伸长 2 ~3 cm(图 1)。15 ~20 d后将伸长的腋芽剪下接
种至培养基②上,20 ~ 25 d 后基部膨大形成愈伤组织,10 ~
12 d后形成丛生不定芽(图 2)。
2. 2 丛生芽的诱导和增殖培养 结果 在增殖培养基上培
养 20 ~25 d,基部开始膨大,芽点突起,10 d后愈伤组织分化
出苗。将分化的芽苗接种至增殖培养基中,培养 15 ~20 d便
长出大量的丛生芽,平均分化系数达 4. 5 以上,继代周期 25
d(图 3)。
2. 3 生根培养结果 生长健壮的分化苗在生根培养基上培
安徽农业科学,Journal of Anhui Agri. Sci. 2010,38(4):1733 - 1734 责任编辑 姜丽 责任校对 况玲玲
DOI:10.13989/j.cnki.0517-6611.2010.04.120
图 1 蒙古扁桃萌芽培养结果
Fig. 1 The multiplication culture results of Prunus mongolica
Maxim.
图 2 蒙古扁桃分化培养结果
Fig. 2 The differentiation culture results of Prunus mongolica
Maxim.
图 3 蒙古扁桃增殖培养结果
Fig. 3 The germination culture results of Prunus mongolica
Maxim.
养 10 ~12 d后开始生根,株高 2. 0 ~2. 5 cm,试管苗基部长出
2 ~3条辐射状根,生根率达 85%以上(图 4)。
图 4 蒙古扁桃生根培养结果
Fig. 4 Rooting culture results of Prunus mongolica Maxim.
2. 4 试管苗炼苗移栽结果 移栽后 15 d开始生根并抽生新
叶,成活率可达 80%以上(图 5)。
图 5 蒙古扁桃移栽结果
Fig. 5 The transplanting results of Prunus mongolica Maxim.
3 结论与讨论
该研究以蒙古扁桃幼嫩茎段为外植体进行组织培养试
验,筛选出适合蒙古扁桃外植体诱导培养基为 MS + 6-BA
0. 80 mg /L + IAA 1. 20 mg /L + 30 g /L 蔗糖 + 5 g /L 琼脂粉,
pH值 6. 0 ~ 6. 2;愈伤组织诱导培养基为 MS + 6-BA 1. 00
mg /L + NAA 0. 10 mg /L +30 g /L蔗糖 + 5 g /L琼脂粉,pH值
6. 0 ~6. 2;继代芽分化培养基为 MS + 6-BA 0. 80 mg /L + IAA
1. 50 mg /L + NAA 0. 05 mg /L + 30 g /L蔗糖 + 5 g /L琼脂粉,
pH值 6. 0 ~6. 2;生根培养基为 1 /2 MS + IBA 0. 50 mg /L +根
皮苷 5. 00 mg /L + 15 g /L蔗糖 + 5 g /L 琼脂粉,pH 值 6. 0 ~
6. 2;以草炭∶蛭石∶珍珠岩 =2∶ 1∶ 1为移栽基质效果最好。
该研究建立的离体培养再生体系稳定性好,增殖速度
快,建立了蒙古扁桃组培快繁技术体系,并与生产应用紧密
结合,为蒙古扁桃品种改良以及工厂化繁育提供了参考。
参考文献
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1479 -1481.
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4371 安徽农业科学 2010 年