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紫叶稠李叶中总黄酮含量的研究



全 文 :335※工艺技术 食品科学 2006, Vol. 27, No. 10
紫叶稠李叶中总黄酮含量的研究
王光全 1,孟庆杰 1,郭尚敬 1,李桂兰 1,孙莹莹 1,刘立翠 2
(1.聊城大学生命科学学院,山东 聊城 252059;2.聊城市鲁西骨科医院,山东 聊城 252059)
摘 要:采用分光光度法,以芦丁为标准品,测定紫叶稠李叶中的总黄酮含量。结果表明:紫叶稠李叶中总黄
酮含量为0.875%。黄酮提取的最佳工艺条件为乙醇浓度60%,提取时间2.5h,提取温度60℃,料液比1g:30ml。
关键词:紫叶稠李;总黄酮;分光光度法;提取
Study on the Total Flavonoids Content in Leaves of Prunus virginiana
WANG Guang-quan1,MENG Qing-jie1,GUO Shang-jing1,LI Gui-lan1,SUN Ying-ying1,LIU Li-cui2
(1.College of Life Science, University of Liaocheng, Liaocheng 252059, China;
2.Hospital for Orthopedics of Luxi, Liaocheng 252059, China)
Abstract :Flavonoids in leaves of Prunus virginiana was determined by spectrometric. The analytical result showed that the
average content of flavonoids in leaves of Prunus virginiana was 0.875%. The optimum extracting conditions were: alcohol
density 60%, extract time 2.5h, extract temperature 60℃ and solid-liquid ratio 1g: 30ml.
Key words:P unus virginiana;total flavonoids;spectrometric method;extract
中图分类号:Q623.54 文献标识码:A 文章编号:1002-6630(2006)10-0335-03
收稿日期:2006-08-27
作者简介:王光全(1957-),男,教授,主要从事植物资源开发利用的教学和科研工作。
紫叶稠李(Prunus virginiana cv)为蔷薇科(Rosaceae)
落叶乔木,原产于北美,上世纪末由中科院北京植
物园引入。该树种从春天的粉红色初芽到展开的嫩绿
色幼叶,到初夏叶色逐渐变红,5月底较老叶片变为
紫红色,到七月底全树紫红,其叶色变化极为丰富,
色彩艳丽;树形自然开张,叶片繁茂,以及初夏后
所结紫红色的果实,都具有很高的欣赏价值。该树种
可耐-40℃的严寒和40℃以上的酷热,且耐水湿、耐
干旱、耐瘠薄,抗病虫害,为难得的大型园林彩叶观
赏树种[1]。同时,紫叶稠李叶片中含有丰富的黄酮类
化合物(flavonoids)。据现代医学研究证明,黄酮类化
合物分子中含有多电子的羟基部分,使其具有良好的
抗氧化性能,是一种天然抗氧化剂[2,3],具有清除人体
中超氧离子自由基、抗衰老和增加机体免疫力的生理
活性作用。同时,黄酮类化合物还具有降血压、降血
脂、增进冠状动脉血流量、软化血管和防治冠心病、
心绞痛以及抗肿瘤等作用[4]。迄今有关紫叶稠李黄酮类
化合物的含量及其提取方面的研究尚未见过报道,为
充分开发利用这一植物资源,本文对紫叶稠李叶片总
黄酮的含量进行了分析提取,并通过数据分析,确定
最佳提取条件[5,6],为进一步开发利用这一资源提供科
学依据。
1 材料与方法
1.1材料
紫叶绸李叶片于2005年七月采自聊城市农业科技
园, 叶片去除杂质洗净后晾干,置于60℃烘干箱中干
燥,然后用粉碎机粉碎后备用。
1.2仪器与试剂
FA1004电子天平 上海精科天平仪器有限公司;
752N型紫外可见分光光度计 上海精密科学仪器有限公
司;DZF-6020真空干燥箱 上海一恒科技有限公司;
HWS28电热稳定温水浴锅 金坛市新航仪厂;RE-52AA
型旋转蒸发器 北京仪诚科技有限公司;TDL-5型高速
离心机。
芦丁(99.99%);无水乙醇,氢氧化钠;硝酸铝;
亚硝酸钠等。
1.3方法[5]
1.3.1对照品溶液的制备
精密称取在120℃下减压干燥至恒重的芦丁对照品
10.50mg,置于50ml容量瓶中,加70%的乙醇溶液,
置于水浴上加热溶解,放冷;然后,用70%的乙醇溶
液稀释至刻度线,摇匀即得0.21mg/ml的标准溶液。分
别取上述标准溶液0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、
2006, Vol. 27, No. 10 食品科学 ※工艺技术336
乙醇浓度(%) 30 50 60 70 80
总黄酮含量(%) 0.2450.3840.4420.4770.501
表1 乙醇浓度对提取的影响
Table 1 Effect of alcohol concentration on extraction
提取时间(h) 1 1.5 2 2.5 3
总黄酮含量(%) 0.1640.2870.6170.5730.553
表2 提取时间对提取的影响
Table 2 Effect of time on extraction
料液比(g/ml)1:10 1:20 1:30 1:40 1:50
总黄酮含量(%) 0.0780.2230.4860.5730.552
表3 料液比对浸提的影响
Table 3 Effect of solid-liquid ratio on extraction
温度(℃) 40 50 60 70 80
总黄酮含量(%) 0.3640.5180.5880.6260.629
表4 浸提温度对浸提的影响
Table 4 Effect of temperature on extraction
水平
A B C D
乙醇浓度(%) 提取时间(h) 料液比(g/ml)提取温度(℃)
1 50 1.5 1:30 50
2 60 2.0 1:40 60
3 70 2.5 1:50 70
表5 因素水平表
Table 5 The factors and levels for the orthogonal design
4.0ml于10ml量筒,各加30%乙醇,使成为5ml;先加
5%亚硝酸钠溶液0.3ml,摇匀,放置6min;再加10%
硝酸铝0.3ml,摇匀,放置6min;加4%氢氧化钠4.0ml,
再加30%乙醇溶液至10.0ml。则分别得到0.105、0.210、
0.315、0.420、0.525、0.630、0.840mg/ml的标准溶液[7]。
1.3.2标准曲线的制备
分别从上述制备的标准溶液中,以30%乙醇溶液
5ml,5%亚硝酸0.3ml,10%硝酸铝溶液0.3ml,4%氢
氧化钠4.0ml,然后再用30%乙醇溶液定容至10.0ml的
溶液作空白液,用紫外分光光度计;以3cm比色皿,
510nm波长测定吸光度,作以芦丁量(mg)与吸光度的标
准曲线,用最小二乘法作线性回归,得芦丁量Y(mg)与
吸光度X的方程如下:y=0.1157x-0.1164,R2=0.9997,
线性关系良好。
1.3.3总黄酮含量测定
移液管移取1ml样品于量筒,用70%乙醇稀释到所
需溶液。使其颜色接近芦丁标准液颜色,尽量使其吸光
度在0.2~0.6的范围内,以保证其吸光度检测稳定性。从
已稀释好的样品中移取1ml于量筒。加30%乙醇至5.0ml,
先加5%氢氧化钠0.3ml,摇匀,静置6min,再加10%
硝酸铝0.3ml,摇匀静置6min,再加4%氢氧化钠4.0ml,
用30%乙醇定容至10ml,摇匀,静置15min后测定。
2 结果与分析
2.1单因素试验[5]
2.1.1乙醇浓度对提取的影响
分别用30%、50%、60%、70%、80%乙醇溶液
浸泡相同量的样品12h,测定提取液的总黄酮含量,结
果见表1。
试验结果表明:随乙醇浓度的提高,提取率不断增
加,但在60%~80%之间提取率相差不大。在试验过程
中可看出:80%的乙醇提取液为墨绿色,而50%~70%
的提取液为棕黄色。可见80%的乙醇把叶绿素也提取出
来了,而叶绿素对紫外吸收有干扰,使测量结果偏高,
且不利于黄酮的提纯。因此乙醇浓度确定为70%以下。
2.1.2提取时间对提取的影响
在物料比1:30,60%乙醇条件下,每隔一段时间
计算一次黄酮含量,结果见表2。
由表2可见最佳提取时间为2h。当提取时间加大
时,提取的总黄酮量则降低,这可能是提取时间加长
使乙醇部分挥发,沸点增大,导致某些黄酮类化合物
丧失[8,9]。
2.1.3料液比对浸提的影响
用60%乙醇溶液对样品进行浸提,对不同的料液比
进行提取试验,料液比分别为1:10、1:20、1:30、
1:40、1:50,提取时间2h,结果见表3。
从表3知,1:40的料液比提取率最高。
2.1.4浸提温度对浸提的影响
称取定量的样品在40、50、60、70、80℃下保
温2h,结果见表4。
从表4知,随着温度的不断提高,黄酮提取率亦
不断增加,但60~80℃增长变化幅度不大,而70~
80℃黄酮含量最大,而差异甚微,因此,生产中以60~
70℃的温度提取黄酮为最佳温度。
2.2正交试验
在以上的单因素试验中,亦不是绝对独立的,实
验实际操作中,各因素之间会有相互影响,因此,主
要对乙醇浓度、提取时间、料液比、提取温度等四因
素水平的正交试验设计(表5)。
2.3正交试验结果[10]
按正交试验表5,各试验处理及紫叶稠李叶片中总
黄酮含量见表6。
由表6分析可知,影响总黄酮得率的四因素主次顺
序为ABCD,提取紫叶稠李叶片中黄酮类化合物的最佳
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试验 A B C D 总黄酮含量(%)
1 1 1 1 1 0.432
2 1 2 2 2 0.665
3 1 3 3 3 0.712
4 2 1 2 3 0.645
5 2 2 3 1 0.488
6 2 3 1 2 0.875
7 3 1 3 2 0.336
8 3 2 1 3 0.445
9 3 3 2 1 0.673
R1 0.603 0.4710.5840.531
R2 0.223 0.5330.6610.625
R3 0.484 0.7530.5120.601
R 0.38 0.2820.1490.094
表6 正交试验结果
Table 6 Orthogonal test result
工艺为A2B3C1D2,即乙醇浓度为60%,提取时间为2.5h,
料液比为1:30,提取温度为60℃。在此提取工艺条件
下,通过测定得黄酮类物质总黄酮含量为0.875%。
3 结 论
3.1通过以上实验分析结果表明,紫叶稠李叶片中含
有丰富的黄酮类化合物,这为今后开发利用该资源提供
了科学依据。
3.2实验中提取紫叶稠李中的黄酮类化合物,通过检
测数据分析,得出最优工艺条件参数:乙醇浓度60%,
提取时间2.5h,提取温度60℃,料液比1:30。在此最
佳提取工艺条件下测得总黄酮含量为0.875%。
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[10]李春喜, 王志和, 王文林. 生物统计学[M]. 北京: 科学出版社, 2000.
149-158.
黄姜中黄色素的提取工艺研究
唐 璇1,李稳宏1,李新生2,崔 易1,韩 枫1,李 冬1
(1.西北大学化工学院,陕西 西安 710069;
2.陕西理工学院 陕西省资源生物重点实验室,陕西 汉中 723000)
摘 要:报道了以有机溶剂浸提法从黄姜中提取黄色素工艺研究,重点在单因素的基础上,通过正交试验系统地探
讨了温度、时间、料液比、提取次数等因素对黄色素提取的影响,得到了优化工艺参数。粗提物通过醚类有机
溶剂萃取精制,色价高于16,收率为1.42%。
关键词:黄姜;黄色素;提取工艺;工艺条件
Study on the Extraction Technology of Yellow Pigment Derived from Di scorea zingiberensis
TANG Xuan1,LI Wen-hong1,LI Xin-sheng2,CUI Yi1,HAN Feng1,LI Dong1
(1.College of Chemical Engineering, Northwest University, Xi’an 710069, Chi a;
(2.Shaanxi Technology University, Bioresources Key Laboratory of Shaanxi, Hanzhong 710069, China)
Abstract :Yellow pigment was extracted with ethanol and water from Dioscorea zi giberensis. The effec s o temperature,
收稿日期:2006-08-24
作者简介:唐璇(1975-),女,在读博士,研究方向为天然产物化学与应用。