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红檵木的组织培养技术研究



全 文 :红 木的组织培养技术研究
林紫玉 , 李贞霞 , 张建伟 (河南科技学院 ,河南新乡 453003)
摘要 将红 木的茎尖 、腋芽及叶片接种到激素比例不同的MS 中 ,结果表明MS+6-BA1.0mg/ L+6-KT2.0mg/L+NAA0.3mg/L+Vc5.0
mg/L诱导率最高 ,可达 66.7%,再将这些诱导出的丛生芽转入MS+6-BA2.0mg/ L+NAA0.2mg/L上 ,可获得大量的丛生芽。
关键词 红 木;组织培养;诱导
中图分类号 Q949.751.4  文献标识码 A  文章编号 0517-6611(2005)05-0842-01
  红 木(Loropetalum chinense var.rubrum)是 木的变异品
种。作为彩叶树种 ,用途十分广泛。由于红 木座果率低 ,
易产生返祖现象而出现白花 木的后代 ,极少用种子繁殖。
目前繁殖以扦插为主 ,亦可压条 、嫁接 、播种。但又存在繁殖
系数低的缺点。利用组织培养可工厂化批量生产。
1 材料与方法
1.1 材料 从健壮红 木母株上采取茎尖 、腋芽及中度成
熟叶片作为外植体。
1.2 方法
1.2.1 外植体表面灭菌及初代培养。将采回的生长健壮 、
无病虫害的枝条用流水冲去表面污物 ,切取茎尖 、腋芽及中
度成熟叶片 ,用含洗洁精的溶液浸泡 5min ,然后用流水冲洗
1 h ,取出用无菌滤纸吸干表面水分 ,在无菌室内先用 70%酒
精浸泡 5 s ,用无菌水冲洗 ,接着再用 0.1%升汞溶液浸泡 5~
10min ,用无菌水冲洗 4~ 5遍 ,再用无菌滤纸吸干表面水分 ,
在超净工作台上剥去茎尖和腋芽外面的包片 ,叶面切去四
周 ,再切成 6mm×6mm左右的小块 ,分别接种于诱导培养基
上 ,其中叶片小块又分正面放置和反面放置两组。
1.2.2 培养条件。以MS为基本培养基 ,附加植物生长调节
剂 ,配比如下:①MS +6-BA 1.0 mg/L+6-KT 0.5 mg/L+IBA
0.2mg/L+Vc 5.0 mg/L;②MS +6-BA 2.0 mg/L+6-KT 0.5
mg/L+NAA 0.2mg/L+Vc 5.0mg/L;③MS+6-BA 1.0mg/L+
6-KT 2.0mg/L+NAA 0.3 mg/L+Vc 5.0mg/L。pH值 5.8 ,蔗
糖 3%,琼脂 0.6%,培养温度(25±2)℃,每日光照 12 h ,光照
度 2000 lx。④MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L;⑤MS+6-
BA 2.0mg/L+NAA 0.2mg/L;⑥MS+6-BA 5.0mg/L+NAA 0.5
mg/L;⑦3/4MS+IBA 0.5mg/L+蔗糖 20mg/L+琼脂 7mg/L。
上诱导生根 。
1.2.3 诱导与分化情况。观察统计其污染率 、枯死率及生
存率。诱导培养经过 40 d左右 ,茎尖 、腋芽一部分可直接诱
导产生丛生芽 ,也有部分底部切口处向外膨大 ,长出一团质
地较硬的愈伤组织 ,上部则长高成为单个芽。而叶片正面放
置接种的全部变褐枯死 ,未诱导出不定芽和丛生芽;叶片反
面放置的有 1个产生丛生芽 ,其余全部变褐枯死。
1.2.4 增殖继代培养。外植体在诱导培养基上培养 40 d
后 ,丛生芽长到 2 cm以上 ,将其切割后再转入分化及增殖培
养基上培养 20d左右 ,即能产生大量的丛生芽。
1.2.5 生根培养。切取丛芽中高约 3~ 4 cm的单个芽苗转
入如下生根培养基。
作者简介 林紫玉(1972-),女,河南邓州人 ,实验师 ,从事组织培养实验
室 、园林植物实验室工作。
收稿日期 2005-03-17
2 结果与讨论
2.1 不同灭菌时间对红 木诱导率的影响 由表 1可以看
出 ,不同灭菌时间对诱导率有较大影响 ,灭菌时间过短 ,枯死
率降低 ,污染率却大大提高 ,从而诱导率下降;灭菌时间过
长 ,污染率明显降低 ,但枯死率升高 ,诱导率同样也降低 ,由
本次实验可以看出 ,灭菌时间以 6min较好。
  表1 不同灭菌时间对诱导率的影响
灭菌时间∥min 接种数量 污染数量 枯死数量 诱导率∥%
5 10 6    2    20
6 10 3 2 50
7 10 2 5 30
8 10 1 8 10
9 10 0 10 0
10 10 0 10 0
2.2 不同培养基对红 木诱导率的影响 由表 2分析 , ③
号培养基诱导出丛生芽的时间早 ,数量多 , ①、②号培养基诱
导出单个芽 、丛生芽的数量相差不大。但从整个诱导率来
看 , ③号培养基为本实验最佳培养基。
  表2 不同培养基对诱导率的影响
培养基 接种数量 丛生芽数量 单芽数量 诱导率∥%
① 16 3 3 37.5
② 12 4 2 50.0
③ 15 8 2 66.7
2.3 叶片的接种方式对诱导分化的影响 叶片正放接种的
存活率为 0 ,反放接种的存活率仅为 6.7%。由此可见 ,外植
体的选择以茎尖 、腋芽为好 ,如果不得不用叶片作外植体时 ,
则接种时应将叶片反放 ,这样诱导效果可能会好些。
2.4 丛生芽的分化与增殖 将分化的丛生芽分别转接在
④、⑤、⑥增殖培养基上 ,均能生长分化新的丛生芽 , ④号培
养基激素浓度较低 ,丛生芽的增殖速度慢 ,数量少;⑥号培养
基激素浓度过高 ,丛生芽底部容易生出许多愈伤组织 ,反而
使上部丛芽增殖系数下降;⑤号培养基上芽苗生长旺盛 ,分
化速度快 ,枝叶浓绿 ,效果最好。由此可以看出 , ⑤号培养基
的激素配比是红 木组培的最佳增殖培养基。
2.5 生根移栽 切取丛芽中高约 3~ 4 cm的单个芽苗转入
⑦号生根培养基上诱导生根 ,约有 65%的小苗能发育为完整
的再生植株 ,经过 30 d左右 ,可将生根苗出瓶驯化移栽。
参考文献
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2003,(1):43-44.
2 何蔚红 ,马杰,崔波,等.红叶石楠的组织培养技术研究[ J] .河南科学 ,
2004,(5):646-647.
3 程广有.名优花卉组织培养技术[M] .北京:科学技术文献出版社, 2001.
安徽农业科学 , Journal of Anhui Agri.Sci.2005, 33(5):842                       责任编辑 朱永和 责任校对 朱永和
DOI :10.13989/j.cnki.0517-6611.2005.05.056