全 文 ： 猪笼草组培快繁技术
吴雪松 1 ,李　江 2 ,钟青凤 1 ,吴雪枫 1
( 1.吉安市林业科学研究所 , 江西吉安 343011; 2.江西省林业科学院 ,江西 南昌 330032)
[摘　要 ] 猪笼草具节茎段经消毒处理后接种到 M S+ 6-BA3. 0 mg /L+ N AA0. 1 mg /L+ Vc50 mg /L的培养基中 ,诱导出侧芽 ;切
取侧芽带 1～ 2个节的茎段接入 1 /8M S+ 6-BA0. 8 m g /L+ N AA0. 1 mg /L培养基中 ,诱导愈伤组织和芽并继代培养 ,扩繁 2. 5～ 3. 0
倍。继代 3～ 5次后取高度大于 3 cm具 2个节的芽 ,切顶芽在 1 /8MS+ 6-BA0. 05 mg /L+ IAA0. 1 mg /L芽增殖培养基中培养。具节
茎段则先在 1 /8M S+ 6-BA0. 5 mg /L+ N AA0. 1 mg /L培养基中培养 ,待其抽出侧芽后再转入芽增殖培养基中培养 ,繁殖倍数可扩增
1. 5倍。将继代培养芽丛中具 2个节的芽接到 1 /4M S+ NAA0. 2 mg /L+ IAA0. 5 mg /L+ 活性炭 500 mg /L培养基中 , 30 d生根率可
达 75% ;炼苗 20 d左右移栽 ,成活率 85%以上。
[关键词 ] 猪笼草 ;组织培养 ;培养基 ;分段增殖
[中图分类号 ] S688. 9; S604+ . 3　　　　　 [文献标识码 ] A　　　　　 [文章编号 ] 1003- 8981( 2005) 04- 0048- 03
Tissue Culture and Fast Propagation in Nepenthes Alata
WU Xue-Song1 , LI Jiang2 , ZHONG Qing-Feng1 , WU Xue-Feng1
( 1. Fo restr y Institute o f Ji’ an, Ji’ an 343011, Jiangxi, China;
2. Fo restr y Academy of Jiangxi Pr ovince, Nanchang 330032, Jiangx i, China )
Abstract: The latera l buds could be inducted in the M S media added 3. 0 mg /L6-BA, 0. 1 mg /L N AA and 50 mg /L
Vc, with sterilized and knur led stem sections o f Nepenthes Alata. The stem sections with 1～ 2 bur ls from the late ral
buds w ere cultured in fr esh 1 /8 M S media added 0. 8 mg /L 6-BA and 0. 1 mg /L N AA , and when the multiply ra te
( M R value) was up to 2. 5～ 3. 0 times, the pr ocess w ould be r epea ted, and so did it about 3～ 5 times. Then, the lat-
eral buds mo re than 3 cm high with 2 bur ls wer e cultur ed in the 1 /8M S media added 0. 05 mg / L 6-BA , 0. 01 mg /L
IAA. Th e stem sections with burls w er e cultur ed in the 1 /8 M S added 0. 5 mg /L 6-BA and 0. 1 mg /L N AA, till la ter-
al buds gemina ted. The new la teral buds were cultured a s the anterio r buds. The M R value w ould be up to 1. 5
times. After the buds with 2 bur ls we re cultured in the 1 /4M S added 0. 2 mg /L NAA, 0. 5 mg /L IAA and 500 mg /L
activ e carbon, the ra te o f ro otag e could get to 70% afte r 30day s, and the surv iv al rate w ere mo re than 85% after the
seedling s trained fo r 20 day s we re tr ansplanted.
Key words: Nepenthes Alata; tissue Culture; medium, Subsection Multiplica tion
猪笼草 N epenthes Alata又名猪仔草 ,为猪笼草科猪笼草属植物 ,多年生草本。其瓶状叶笼着生于由叶中脉
延长的卷须末端。笼口具红晕 ,口上有盖。笼面幼时黄绿色 ,长成时红褐色 ,笼长可达 30 cm ,其形态美丽诱人 ,
是食虫植物中倍受青睐的新潮观赏品种 [ 1]。
1789年英国从原产地引种猪笼草 ,主要在欧洲著名植物园内栽培观赏。19世纪末至 20世纪初开始育种改
良。 20世纪中叶 ,育种、繁殖和生产开始形成产业化 ,并成为家庭观赏植物。国内在广东等地有野生种分布 ,很
少开发利用 [1 ]。其繁殖主要采用扦插和压条 ,繁殖速度慢 ,远不能满足人们美化生活的需要。通过组培技术 ,可
使植物得以快速大量繁殖 [2～ 8 ]。 为使这一珍奇观赏食虫植物走入千家万户 ,笔者对其组培快繁技术进行了研
究 ,获得了大量组培生根苗 ,并已进入产业化生产阶段。
经济林研究　 2005, 23 ( 4): 48-50
Nonwood　 Forest　Research 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
[收稿日期 ] 2005-07-11
[作者简介 ] 吴雪松 ( 1972- )男 ,江苏武进人 ,助理工程师 ,主要从事花卉苗木组织培养工作。
DOI : 10. 14067 /j . cnki . 1003 -8981. 2005. 04. 013
1　试验材料和方法
取国外 2年生猪笼草植株茎段 ,用自来水洗净叶片着生处泥沙 ,再冲洗 30 min以上。 以 70%的酒精浸润
0. 5 min,无菌水冲洗 2～ 3次。再用 20%的次氯酸钠消毒 12～ 15min,无菌水冲洗 2～ 3次。然后用 0. 1%的升
汞消毒 8～ 12min,无菌水冲洗 3～ 4次 ,接种至 MS+ 6-BA3. 0 mg /L+ IAA1 mg /L+ Vc50 mg /L的培养基中。
20 d后侧芽开始萌动 , 50～ 60 d侧芽长约 3 cm,切取侧芽带 1～ 2个节的茎段作外植体接种到培养基中。
愈伤组织和芽诱导培养基及增殖培养基均采用 1 /8M S培养基 ,生根培养基为 1 /8M S或 1 /4M S培养基。
以上培养基均含蔗糖 3% ,卡拉胶 0. 75% , pH值 6. 0,培养温度 26～ 28℃ ,光照 10～ 12 h /d,光强
1 000～ 1 500 lx。
2　结果与分析
表 1　愈伤组织和芽诱导试验结果
激素配比 /( mg· L- 1 ) 处理总数 出芽数 出芽率 /% 形成愈伤团块数 比率 /%
CK 60 3 5 0 0
KT1. 0+ N AA0. 1 60 36 60 42 70
2-ip1. 0 60 27 45 3 5
6-BA0. 3+ N AA0. 1 60 45 75 48 80
6-BA0. 8+ N AA0. 1 60 60 100 51 85
6-BA0. 8+ N AA0. 3 60 60 100 60 100
2. 1　愈伤组织和芽的诱导
将备好的无菌外植体茎段
以 1～ 2个节为 1个增殖单位
接种到诱导培养基中。 20 d茎
段基部出现愈伤组织 , 28 d叶
腋出现腋芽 , 35 d后形成带愈
伤块的芽丛。试验结果见表 1。
从表 1可知: 猪笼草对
6-BA比 K T和 2-ip更敏感 ,表中 KT和 2-ip所使用浓度虽较 6-BA高 ,但其出芽率却更低 ; 6-BA浓度以 0. 8
mg /L为好 ;适当添加 NAA有利其形成愈伤组织 ,但浓度不可过高 ,否则在继代培养时易出现变异 (见表 3)。
表 2　芽在增殖培养基Ⅰ 各处理中的生长表现
激素配比 /( mg· L- 1 ) 接种数/团 总芽数/个 有效芽/个 变异芽/个 增殖系数 芽丛生长表现
CK 50 112 112 0 1. 12
有明显不定芽抽出 ,高生长明显 ,叶片正常 ,但芽数较少。
6-BA0. 01+ IAA0. 01 50 157 157 0 1. 57
有明显不定芽抽出 ,高生长明显 ,叶片正常 ,芽数较多且较粗壮。
6-BA0. 05+ IAA0. 01 50 186 186 0 1. 86
有明显不定芽抽出 ,高生长明显 ,叶片正常 ,芽数多且较粗壮。
6-BA0. 1+ IAA0. 01 50 235 164 71 2. 35
芽数多且小 ,呈簇生状 ,所抽芽较多叶片呈显狭尖 ,芽较瘦弱 ,芽形差。
6-BA0. 5+ IAA0. 01 50 287 132 155 2. 87
芽数多且小呈簇生状 ,所抽芽叶片多呈狭尖 ,芽较瘦弱且芽质量差 ,芽形差。
KT0. 1+ IAA0. 01 50 177 155 22 1. 77
有明显不定芽抽出 ,高生长明显 ,少量叶片略显狭尖 ,芽数较多且较粗壮。
2-ip0. 1+ IAA0. 01 50 143 143 0 1. 43
有明显不定芽抽出 ,高生长明显 ,叶片正常 ,但芽数较少。
2. 2　芽的增殖
将初代培养
形成的小芽丛分
为 2～ 3个芽团 ,
转入增殖培养基
I中 ,各处理见
表 2。以 30 d为
1周 期继 代 1
次 ,每个芽团继
代 1次可产生 2
～ 3个子芽。 但
是 , 6-BA的浓度
越高 ,变异机率
越高。 变异表现
为: 芽簇生且较
少明显不定芽抽出或者所抽不定芽叶形狭尖 ,严重者叶笼笼盖缩小甚至无盖 ,或者出现多个顶芽且都扭曲变
形 ,导致植株停止高生长。 因此 ,为了增加其扩繁倍数而又减少变异 ,试验采取将较大不定芽分段增殖的方法。
在继代 3～ 5次后 ,分别进行如下处理: ( 1)团块稳定在增殖培养基Ⅰ 中培养 ,并将扩繁倍数控制在 1. 5～ 2. 0
倍 ; ( 2)取高度大于 3 cm具 2个节的芽 ,切顶芽在增殖培养基Ⅰ中培养 ,具节茎段在增殖培养基Ⅱ (见表 3)中
培养 ,待其抽出侧芽后再转入增殖培养基Ⅰ 中 ,使其维持旺盛的高生长 ,长成具节芽后再分段生产 ,扩繁倍数可
扩增 1. 5倍 ,如此循环。据观察: ( 1)中愈伤组织所抽之芽在续代 10～ 12次后 ,芽明显瘦弱且叶片狭尖 ,出现变
异症状。而 ( 2)中所抽之芽继代 16～ 18次后芽依然粗壮且叶片正常 ,变异机率明显降低。
由表 2可知芽增殖培养以 1 /8M S+ 6-BA0. 05 mg /L+ IAA0. 01 mg /L较好 ,增殖系数较高且芽表现正
常。
49第 4期 　　　　　　　　　　　　　　　　　吴雪松等:猪笼草组培快繁技术　　　　　　　　　　　　　　　　　　
表 3　带 1个节之茎段在增殖培养基Ⅱ各处理中的抽芽表现
6-BA
/( mg· L- 1 ) NAA/( mg· L- 1 ) 接种数/个 抽侧芽茎段 /个 比率/% 抽出时间及芽的生长表现
0 0 50 8 16 35 d后有侧芽抽出 ,侧芽转入增殖培养基Ⅰ 后表现正常 ,但抽芽太少。
0. 1 0. 1 50 21 42
25～ 28 d后有侧芽抽出 ,侧芽转入增殖培养基Ⅰ 后表现正常 ,但抽芽较少。
0. 5 0. 1 50 43 86 20～ 22 d后有侧芽抽出 ,侧芽转入增殖培养基Ⅰ 后表现正常 ,且抽芽较多。
1. 0 0. 1 50 50 100
20～ 22 d后有侧芽抽出 ,侧芽转入增殖培养基Ⅰ 后 ,叶片多呈狭尖。
0. 5 0. 3 50 46 92 20～ 22 d后有侧芽抽出 ,但侧芽转入增殖培养基Ⅰ 后 ,有少量叶片呈狭尖。
　　由表 3可知茎段抽
芽 培 养 以 1 /8M S+
6-BA0. 5 mg /L+ N AA
0. 1 mg /L较好 ,所抽侧
芽多且对继代培养没有
影响。
2. 3　根的诱导
将经过继代培养的
芽 ,挑选 3 cm以上具 2
个节的粗壮单个顶芽 ,
接入培养基中培养 , 15～ 18 d后芽开始生根 , 30 d后有 70%的芽生出 2～ 3条长 0. 5 cm左右的根。 一般来讲 ,
降低 M S培养基中元素含量有利生根 ,但笔者曾多次试验使用 1 /8M S+ N AA0. 2 mg /L+ IAA0. 5 mg /L+ 活
性炭 500 mg /L,其生根效果均比 1 /4M S培养基差。具体不同培养基生根情况见表 4。
表 4　不同培养基生根情况
培养基 NAA/( mg· L- 1 ) IAA/( mg· L- 1 ) 活性炭/( mg· L- 1 ) 处理数/株 生根比率/% 生根时间和情况
1 /8M S 0. 2 0. 5 500 100 35～ 40 25 d后根开始长出 , 40 d后生根比率为40%左右。有 1～ 2条长 0. 5 cm左右的根。
1 /4M S 0. 2 0. 5 500 100 70～ 75 15～ 18 d后芽开始生根 , 30 d后有 70%的芽生出 2～ 3条长 0. 5 cm左右的根。
1 /4M S 0. 5 0. 5 500 100 70～ 75 15～ 18 d后芽开始生根 , 30 d后有 70%的芽生出 2～ 3条长 0. 5 cm左右的根。切口处膨大 ,部分有愈伤组织 ,不利移栽。
2. 4　移植
将已生根的小苗放入荫棚内炼苗 18～ 25 d,使其充分木质化 ,叶色浓绿 ,将小苗取出 ,洗去培养基移栽入
1 /3椰糠+ 2 /3泥炭土的基质中 ,注意保温保湿 ,小苗很快正常生长 ,成活率 85%以上。
4　结论
( 1)猪笼草的组织培养 ,其培养基的选择:初代培养以 1 /8M S+ 6-BA0. 8 mg /L+ N AA0. 1 mg /L为好 ;继
代培养以 1 /8M S+ 6-BA0. 05 mg /L+ IAA0. 01 mg /L和 1 /8M S+ 6-BA0. 5 mg /L+ N AA0. 1 mg /L为好。生
根培养基则以 1 /4M S+ N AA0. 2 mg /L+ IAA0. 5 mg /l+ 活性炭 500 mg /L为好。
( 2)在猪笼草继代培养中 ,采取顶芽和茎段分段增殖、茎段增殖转换培养基的方法 ,是扩大繁殖倍数 ,降低
变异机率 ,提高苗木质量 ,形成大批量生产能力的有效途径。
( 3)一般来讲 ,降低 MS培养基中各元素的含量有利生根。但在猪笼草组培中 , 1 /8M S不论在生根时间 ,还
是生根率方面与 1 /4M S相比均相差甚远 ,其原因尚待进一步探讨。
[参　考　文　献 ]
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50　　 　　　　　　　　　　　　　　　　　　经　　济　　林　　研　　究　　　　　 　　　　　　　　　　　第 23卷