全 文 ：２０１４年６月 防 护 林 科 技 Ｊｕｎｅ，２０１４
第６期（总１２９期） Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ Ｆｏｒｅｓｔ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｎｏ．６（Ｓｕｍ Ｎｏ．１２９）
文章编号：１００５－５２１５（２０１４）０６－００１７－０２
收稿日期：２０１４－０３－１９
作者简介：黄立华（１９７１－），女，大学，工程师，主要从事
名特优新经济林果组培快繁技术研究．
水栒子组织培养快繁体系研究
黄立华
（辽宁省干旱地区造林研究所，辽宁 朝阳１２２０００）
摘 要：以水栒子（Ｃｏｔｏｎｅａｓｔｅｒ ｍｕｌｔｉｆｌｏｒｕｓ Ｂｕｎｇｅ．）的新梢带侧芽茎段为外植体，研究了不同激素组合对其外植体
诱导、丛生芽分化增殖以及试管苗生根的影响。结果表明：芽诱导最适培养基为 ＭＳ＋ＢＡ０．８＋ＮＡＡ０．０４，诱导率
为６８％；分化增殖最佳培养基是 ＭＳ＋６－ＢＡ１．２＋ＮＡＡ０．０４，增殖倍数为４．５３；最佳生根培养基是１／２ＭＳ＋
ＩＢＡ０．４＋ＮＡＡ０．０４，生根率为９１％；试管苗移栽的最佳基质组合及配比为沙子∶熟表土∶草炭土∶果渣＝３∶３∶
２∶２，成活率达９１％。
关键词：水栒子；组织培养；激素组合；培养基
中图分类号：Ｓ７２２．３７ 文献标识码：Ａ ｄｏｉ：１０．１３６０１／ｊ．ｉｓｓｎ．１００５－５２１５．２０１４．０６．００７
Ｔｉｓｓｕｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ ａｎｄ Ｒａｐｉｄ Ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ Ｓｙｓｔｅｍ ｏｆ Ｃｏｔｏｎｅａｓｔｅｒ ｍｕｌｔｉｆｌｏｒｕｓ
Ｈｕａｎｇ Ｌｉｈｕａ
（Ｌｉａｏｎｉｎｇ Ｐｒｏｖｉｎｃｉａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｆｏｒ Ａｆｆｏｒｅｓｔａｔｉｏｎ ｉｎ Ａｒｉｄ Ｒｅｇｉｏｎｓ，Ｃｈａｏｙａｎｇ １２２０００，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｌａｔｅｒａｌ ｂｕｄｓ ｗｉｔｈ ｓｔｅｍ ｓｅｇｍｅｎｔｓ ｆｏｒ ｎｅｗ ｓｈｏｏｔｓ ｏｆ Ｃｏｔｏｎｅａｓｔｅｒ ｍｕｌｔｉｆｌｏｒｕｓ ｗｅｒｅ ｔａｋｅｎ ａｓ ｅｘｐｌａｎｔｓ；ｔｈｅ
ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｓ ｏｆ ｈｏｒｍｏｎｅｓ ｏｎ ｉｔｓ ｅｘｐｌａｎｔ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ，ｔｈｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ＆ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｍｕｌｔｉｐｌｅ
ｂｕｄｓ，ｒｏｏｔｉｎｇ ｏｆ ｐｌａｎｔｌｅｔ ｗｅｒｅ ｓｔｕｄｉｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔ ｓｈｏｗｓ ｔｈａｔ：ｔｈｅ ｏｐｔｉｍｕｍ ｍｅｄｉｕｍ ｆｏｒ ｂｕｄ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｉｓ ＭＳ＋ ＢＡ０．８
＋ ＮＡＡ０．０４，ｉｔｓ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｂｅｉｎｇ ６８％；ｔｈｅ ｏｐｔｉｍａｌ ｍｅｄｉｕｍ ｆｏｒ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ＆ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｉｓ ＭＳ＋６－
ＢＡ１．２＋ ＮＡＡ０．０４，ｔｈｅ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｍｕｌｔｉｐｌｅｓ ｂｅｉｎｇ ４．５３；ｔｈｅ ｏｐｔｉｍａｌ ｒｏｏｔｉｎｇ ｍｅｄｉｕｍ ｉｓ １／２ＭＳ＋ＩＢＡ０．４＋
ＮＡＡ０．０４，ｔｈｅ ｒｏｏｔｉｎｇ ｒａｔｅ ｂｅｉｎｇ ９１％；ｔｈｅ ｏｐｔｉｍａｌ ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ ＆ｒａｔｉｏ ｏｆ ｔｈｅ ｔｒａｎｓｐｌａｎｔｅｄ ｐｌａｎｔｌｅｔｓ ｉｓ：ｓａｎｄ∶ｍａ－
ｔｕｒｅ ｔｏｐｓｏｉｌ∶ｔｕｒｆｙ ｓｏｉｌ∶ｆｒｕｉｔ ｍａｒｃ＝３∶３∶２∶２，ｔｈｅ ｓｕｒｖｉｖａｌ ｒａｔｅ ｂｅｉｎｇ ９１％．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｃｏｔｏｎｅａｓｔｅｒ ｍｕｌｔｉｆｌｏｒｕｓ；ｔｉｓｓｕｅ ｃｕｌｔｕｒｅ；ｈｏｒｍｏｎｅ ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｓ；ｍｅｄｉｕｍ
水栒子（Ｃｏｔｏｎｅａｓｔｅｒ ｍｕｌｔｉｆｌｏｒｕｓ Ｂｕｎｇｅ）别称
栒子木，属蔷薇科栒子属灌木，树高２～４ｍ。广布于
我国东北、华北、西北和西南，生于海拔 ４００～
１０００ｍ的沟谷或山坡杂木林中；性强健、耐寒，喜光
而稍耐阴，对土壤要求不严，极耐干旱和瘠薄；夏季
白花素雅，秋季红果鲜亮，是花、果俱佳的观赏植
物［１］。水栒子既可在草坪中孤植，或数株丛植于草
坪边缘、园林坡地，更可修剪成绿篱或制作成盆景，
甚是美观。
据了解，目前水栒子的繁殖主要采用种子繁殖
方式。但由于种质资源少、种子休眠期长等原因，使
繁殖速度难以满足市场需求。为此，我们尝试采用
组织培养技术快速繁殖水栒子，即以水栒子的新梢
带侧芽茎段为外植体，研究不同激素配比对腋芽诱
导、丛生芽增殖以及试管苗生根等的影响，借以为水
栒子的组培快繁提供理论依据。
１ 材料与方法
１．１ 试验材料
供试材料由辽西红豆杉科技有限公司苗圃提
供。外植体为当年生带侧芽嫩枝。
１．２ 试验材料的消毒与处理
先将供试材料切成４～５ｃｍ的带腋芽茎段，在
洗衣粉溶液中浸泡１０ｍｉｎ，用软毛轻刷茎段后用流
水冲洗２ｈ。接着在超净工作台中先用７５％酒精消
毒３０ｓ，无菌水冲洗２～３次，再用０．１％升汞溶液
浸泡４～８ｍｉｎ，继续用无菌水冲洗５～６次，每次冲
洗２～３ｍｉｎ，冲洗干净后放入超净工作台中备用。
１．３ 试验方法
１．３．１ 培养基的配制 腋芽诱导及分化增殖采用
ＭＳ为基本培养基；生根采用１／２ＭＳ为基本培养
基；附加３％蔗糖和０．８％琼脂，ｐＨ值５．８。各阶段
根据生长的不同需要附加ＢＡ、ＮＡＡ、ＩＢＡ等生长调
节剂，生长调节剂在高温灭菌前加入，灭菌条件为
１２１℃２０ｍｉｎ。
１．３．２ 培养条件 培养室温度为２５±３℃，光照强
度为２ ０００～４ ０００ｌｘ，每日光照１４～１６ｈ。
１．３．３ 腋芽诱导 将消毒处理后的供试材料切成
长约１ｃｍ的带１个腋芽的小茎段接种到腋芽诱导
培养基中，ＢＡ采用０．６、０．８、１．０ｍｇ ?Ｌ－１等３个浓
度梯度处理，ＮＡＡ采用为０．０４、０．０６、０．０８ｍｇ ?Ｌ－１
等３个浓度梯度处理。每处理各接种３０瓶，２０ｄ后
统计成活率。
１．３．４ 继代增殖 将从腋芽处产生的不定芽用接
种刀切下，转接到继代增殖培养基中。ＢＡ 采用
１．０、１．２、１．４ｍｇ ?Ｌ－１等３个浓度梯度处理，ＮＡＡ
采用０．０２、０．０４、０．０６ｍｇ ?Ｌ－１等３个浓度梯度处
理。每处理各接种３０瓶，每瓶５个芽，３０ｄ后统计
芽的分化、增殖及生长情况。
１．３．５ 根诱导培养基 选择生长健壮、有一定木质
化，长２～３ｃｍ、留２～３片叶片的无菌苗接种到生
根培养基中，ＩＢＡ采用０．３、０．４、０．５ｍｇ ?Ｌ－１等３个
浓度梯度处理，ＮＡＡ采用０．０２、０．０４、０．０６ｍｇ ?Ｌ－１
等３个浓度梯度处理。转接３０瓶，每瓶１０个芽，６０
ｄ后调查生根率及生长情况。
２ 结果与分析
２．１ 不同激素配比对腋芽诱导的影响
在同一培养条件下，充分灭菌后转入腋芽诱导
培养基中的茎段，７ｄ后便可确定是否污染。无污
染的茎段１０ｄ左右便可在腋芽处长出嫩黄绿色的
小芽，２０ｄ左右腋芽明显增殖（表１）。显而易见，在
ＭＳ＋ＢＡ０．８＋ＮＡＡ０．０４培养基中的腋芽诱导快、
诱导率高，且生长良好、芽粗壮。
表１ 不同激素浓度对水栒子腋芽诱导的影响
ＢＡ
／ｍｇ ?Ｌ－１
ＮＡＡ
／ｍｇ ?Ｌ－１
转接数／瓶 诱导率／％ 生长情况
０．６ ０．０４ ３０ ３９ 较弱
０．６ ０．０６ ３０ ３５ 一般
０．６ ０．０８ ３０ ４３ 一般
０．８ ０．０４ ３０ ６８ 粗壮
０．８ ０．０６ ３０ ５５ 较好
０．８ ０．０８ ３０ ６１ 较粗壮
１．０ ０．０４ ３０ ５７ 较弱
１．０ ０．０６ ３０ ４９ 较弱
１．０ ０．０８ ３０ ６４ 一般
２．２ 继代增殖培养基的筛选
将生长健壮的不定芽转接到增殖培养基中，并
进行７ｄ左右的暗培养，１５ｄ后培养基中的不定芽
出现了增殖芽，培养４０ｄ分析不同的ＢＡ、ＮＡＡ组
合对水栒子继代增殖的影响，其结果见表２。结果
表明：随着ＢＡ浓度的增加，水栒子丛生芽的增殖倍
数也有所提高，当ＢＡ浓度为１．４ｍｇ ?Ｌ－１时，其增
值倍数高达５．５６倍，但丛生苗生长细弱，玻璃化现
象严重，不适于生根操作和将来移栽［２］；在ＢＡ浓度
为１．２ｍｇ ?Ｌ－１时虽然繁殖倍数略低，但丛生苗生长
健壮，适宜进一步生根培养。综合表２信息可知，水
栒子最适的增殖培养基为：ＭＳ＋６－ＢＡ１．２＋
ＮＡＡ０．０４。
表２ 不同激素浓度对水栒子分化增殖的影响
ＢＡ
／ｍｇ ?Ｌ－１
ＮＡＡ
／ｍｇ ?Ｌ－１
转接数
／瓶
增殖
倍数
生长情况
１．０ ０．０２ ３０ ２．９３ 分化增殖不明显，苗细弱
１．０ ０．０４ ３０ ２．２５ 生长慢，分化不明显
１．０ ０．０６ ３０ ３．１８ 分化苗少，苗畸形
１．２ ０．０２ ３０ ４．２６ 分化明显，但生长慢
１．２ ０．０４ ３０ ４．５３ 分化明显，苗粗壮
１．２ ０．０６ ３０ ３．９６ 分化明显，有玻璃化现象
１．４ ０．０２ ３０ ４．６８ 分化明显，苗畸形
１．４ ０．０４ ３０ ５．５６ 丛生苗细弱，玻璃化严重
１．４ ０．０６ ３０ ４．０２ 苗畸形，过度愈伤化
２．３ 生根培养基的筛选
将不定芽转接到生根培养基中，７ｄ左右可见
不定芽基部出现白色突起，１５ｄ左右白色突起部分
长出白色的不定根。６０ｄ后对各个处理做统计分
析，结果（表３）表明，不同浓度配比的ＩＢＡ／ＮＡＡ处
理均能诱导水栒子生根，但作用效果有差异，从诸培
养基中的生根情况看，以 １／２ＭＳ＋ＩＢＡ０．４＋
ＮＡＡ０．０４培养基中的无菌苗生根最好，生根率高
达９１．０％，平均生根数为４．２６条。
表３ 不同激素浓度对水栒子生根的影响
ＩＢＡ
／ｍｇ ?Ｌ－１
ＮＡＡ
／ｍｇ ?Ｌ－１
接种数
／瓶
生根率
／％
平均生根数
／条
０．３ ０．０２ ３０ ６３．８ ２．３
０．３ ０．０４ ３０ ７０．５ ３．２
０．３ ０．０６ ３０ ７５．５ ３．６
０．４ ０．０２ ３０ ８３．５ ３．９
０．４ ０．０４ ３０ ９１．０ ４．３
０．４ ０．０６ ３０ ８８．５ ４．１
０．５ ０．０２ ３０ ６８．５ ３．９
０．５ ０．０４ ３０ ７６．５ ３．８
０．５ ０．０６ ３０ ５７．０ ２．２
２．４ 移栽
将生根培养６０ｄ的水栒子组培苗瓶口敞开，在
温室大棚内炼苗４５ｄ，取出清洗附着在根部的培养
基，将根系浸泡在多菌灵１ ０００倍液中在３０ｓ后移
栽至营养杯中。经多年试验研究得知，组培移栽苗
最适移栽基质为：沙子∶熟表土∶草炭土∶果渣＝３
∶３∶２∶２［３］。
（下转第２１页）
８１ 防 护 林 科 技 ２０１４年
毛榛子－糠椴。混交模式下，呈显著负相关的种对
没有；显著正相关的有胡枝子－黄刺玫。
由于红松的更新状况在纯林下表现得不是很
好，数量有限，分布较为集中，所以在纯林模式下，本
应作为针阔混交林下主要灌木树种的胡枝子和五角
槭，与东北地区主要顶级树种红松表现出了排斥的
现象（显著负相关）。
表３ 蒙古栎红松混交林种间关系
胡枝子 Ｐｅａｒｓｏｎ Ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ
Ｓｉｇ．（２－ｔａｉｌｅｄ）
红松 Ｐｅａｒｓｏｎ Ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ －０．０７９ ４
Ｓｉｇ．（２－ｔａｉｌｅｄ） ０．７０６ １
水曲柳 Ｐｅａｒｓｏｎ Ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ －０．２３０ ３ ０．０７５ ４
Ｓｉｇ．（２－ｔａｉｌｅｄ） ０．２６８ １ ０．７２０ ３
五角槭 Ｐｅａｒｓｏｎ Ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ ０．３９４ ８ －０．２０１ ０ －０．１６６ ７
Ｓｉｇ．（２－ｔａｉｌｅｄ） ０．０５０ ８ ０．３３５ ３ ０．４２５ ９
黄刺玫 Ｐｅａｒｓｏｎ Ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ ０．４６１ ０＊ －０．１６８ ６ －０．１８０ ９ ０．２６３ ２
Ｓｉｇ．（２－ｔａｉｌｅｄ） ０．０２０ ４ ０．４２０ ４ ０．３８６ ７ ０．２０３ ７
毛榛子 Ｐｅａｒｓｏｎ Ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ －０．１７４ ６ ０．０２０ ５ －０．１５３ １ －０．１０２ １ －０．１６１ ２
Ｓｉｇ．（２－ｔａｉｌｅｄ） ０．４０３ ９ ０．９２２ ５ ０．４６５ ０ ０．６２７ ４ ０．４４１ ５
春榆 Ｐｅａｒｓｏｎ Ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ －０．２３０ ３ ０．０７５ ４ －０．０４１ ７ －０．１６６ ７ －０．１８０ ９ ０．２７２ ２
Ｓｉｇ．（２－ｔａｉｌｅｄ） ０．２６８ １ ０．７２０ ３ ０．８４３ ２ ０．４２５ ９ ０．３８６ ７ ０．１８８ １
紫椴 Ｐｅａｒｓｏｎ Ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ －０．２３０ ３ ０．０７５ ４ －０．０４１ ７ －０．１６６ ７ －０．１８０ ９ ０．２７２ ２ －０．０４１ ７
Ｓｉｇ．（２－ｔａｉｌｅｄ） ０．２６８ １ ０．７２０ ３ ０．８４３ ２ ０．４２５ ９ ０．３８６ ７ ０．１８８ １ ０．８４３ ２
胡枝子 红松 水曲柳 五角槭 黄刺玫 毛榛子 春榆
３ 结论
纯林模式下，种间关联呈显著负相关的种对有
红松－胡枝子、红松－五角槭；显著正相关的有水曲
柳－白桦、毛榛子－糠椴。混交模式下，呈显著负相
关的种对没有；显著正相关的有胡枝子－黄刺玫。
由于纯林下红松更新状况不是很好，分布较为集中，
所以作为红松针阔混交林下主要伴生树种的胡枝子
和五角槭，与红松表现出了排斥的现象。
参考文献：
［１］于顺利，马克平，陈灵芝．中国北方蒙古栎林起源和发展的初步
探讨［Ｊ］．广西植物，２０００（２）：１３１－１３７
［２］高志涛，吴晓春．蒙古栎地理分布规律的探讨［Ｊ］．防护林科技，
２００５（２）：７５－８４
［３］刘洪儒．黑龙江省蒙古栎的资源现状及经营对策［Ｊ］．林业资源
管理，１９９４（１）：５６－５７
［４］陈新美，张会儒，姜慧泉．东北过伐林区蒙古栎林空间结构分析
与评价［Ｊ］．西南林学院学报，２０１０，３０（６）：２０－２４
［５］于顺利，陈灵芝，张承军．不同地点蒙古栎群落相似性的研究
［Ｊ］．植物学通报，２０００，１７（６）：５５４－５５８
（上接第１８页）
这期间，需搭建塑料拱棚遮盖移栽苗，湿度
８０％，白天温度控制在２８±２℃，夜间温度控制在
１８±２℃，３ｄ后逐渐打开塑料拱棚，７ｄ后彻底摘掉
塑料拱棚，中午前后喷洒清水降温［４］。
３ 结论与讨论
本研究以水栒子茎段为外植体，研究了不同激
素组合对外植体的腋芽诱导、分化增殖以及生根的
影响，结果表明：水栒子最适腋芽诱导培养基为 ＭＳ
＋ＢＡ０．８＋ＮＡＡ０．０４；水栒子最适分化增殖培养基
为 ＭＳ＋６－ＢＡ１．２＋ＮＡＡ０．０４；水栒子最适生根培
养基为１／２ＭＳ＋ＩＢＡ０．４＋ＮＡＡ０．０４。
参考文献：
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［２］谭文澄，戴策刚．观赏植物组织培养技术［Ｍ］．北京：中国林业出
版社，１９９９：３５８
［３］黄立华，王占龙，朱虹，等．红醋栗组培快繁技术研究［Ｊ］．辽宁林
业科技，２０１２（２）：１５－１７
［４］龙忠伟，黄立华，王占龙．果腺肋花楸组培苗夏季炼苗移栽技术
［Ｊ］．林业实用技术，２０１２（１）：２９－３０
１２ 第６期 王颖 等 不同经营方式下的蒙古栎次生林种间关系