全 文 ：　第 26 卷第 2 期
2002 年 3 月 　
南 京 林 业 大 学 学 报 (自 然 科 学 版)
Journal of Nanjing Forest ry University(Natural Sciences Edition)　
Vol.26 , No.2　
Mar., 2002　
福建山樱花的组织培养及植株再生
王光萍 ,黄敏仁
(南京林业大学林木遗传和基因工程重点实验室 ,江苏　南京　210037)
摘　要:以春季萌发的福建山樱花嫩枝为外植体诱导丛生芽 。在 1/4M S +BA1.0 mg/L +
IBA0.01 mg/ L的培养基上 ,其丛生芽诱导率达 87.5%;在继代培养中选择 MS+BA1.0 mg/L+
IBA0.1 mg/L+GA30.3 mg/L 或 K T1.0 mg/ L+NAA0.1 mg/ L+GA3 0.3 mg/L 培养基 ,不定
芽增殖较快 。赤霉素对其不定芽的伸长有明显效果 ,当芽伸长至 3 ～ 4 cm 时 ,切下置于生根培
养基1/2MS+NAA1.0 mg/L+IBA1.0 mg/L+BA0.75 mg/L 中 ,生根率达 90%以上 ,移栽成
活率达 95%。
关键词:福建山樱花;组织培养;植株再生
中图分类号:S685　　　　文献标识码:A　　　　文章编号:1000-2006(2002)02-0073-04
Tissue Culture and Plant Regeneration of Cerasus campanulata
WANG Guang-ping ,HUANG Min-ren
(The Key Laboratory of Forestry Genetics & Gene Engineering Nanjing
Forestry University , Nanjing 210037 , China)
Abstract:Stabilized shoot cultures were achieved when the explant sources w ere the juvenile branches of
Cerasus campanulata in spring.The inducing rate of fasciculated shoots w as 87.5% when the inducing
medium of 1/4MS w ith BA 1.0 mg/L and IBA 0.01 mg/L were used.The adventit ious shoo ts were propa-
gated most rapidly when subcultured on the medium of MS with BA 1.0 mg/ L , IBA 0.1 mg/L andGA3 0.3 mg/
L ,or MS with KT1.0 mg/L ,NAA 0.1 mg/L and GA3 0.3 mg/L.The elongation of advent itious shoots w as
g reatly affected by gibberellin.The adventi tious shoo ts were cut and roo ted in the roo ting medium of 1/2MS
w ith NAA 1.0 mg/ L IBA 1.0 mg/ L and BA 0.75 mg/L .The too ting rate was more than 90%.The sur-
viving rate w as 95%when the intact shoots w ere moved to the greenhouse.
Key words:Cerasus campanulata;Tissue culture;Plant regeneration
1　材料与方法
福建山樱花(Cerasus campanulata)又名钟花樱桃 ,钟花樱等[ 1] 。原产我国 , 2 ～ 3月开花 ,粉红色 ,
花形钟状 ,是一种具有较高观赏价值的绿化树种。
1999年 3月底 ,于南京中山植物园采集 1 ～ 2 cm 长的嫩枝 ,用流水冲洗 2 h ,放入 70%酒精内消毒
1 min ,再用 0.1%氯化汞消毒 7 min ,无菌水清洗 4次 ,用灭菌滤纸吸干其表面水份 ,插入培养基中 。诱
导丛生芽分别以 MS 、1/4M S和 1/2MS(大量元素 1/4或 1/2)为基本培养基[ 2 ～ 5] ,附加的激素分别为细
胞分裂素 BA1.0 ～ 5.0 mg/L ,生长素 IBA0.01 mg/ L 或 KT1.0 ～ 5.0 mg/L , IBA0.01 mg/L;不定芽增
殖培养基为 MS附加 BA1.0 ～ 2.0 mg/L , IBA0.1 mg/L ,GA3 0.3 ～ 5.0 mg/ L 或 KT1.0 ～ 2.0 mg/L ,
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收稿日期:2001-04-28　　　　修回日期:2002-01-07
基金项目:江苏省高新技术项目(S011229)
作者简介:王光萍(1963-),女 ,浙江上虞人 ,南京林业大学林木遗传和基因工程重点实验室工程师。
NAA0.1 mg/L ,GA3 0.3 mg/L。芽伸长至 3 ～ 4cm ,诱导生根 。生根培养以 1/2MS 为基本培养基[ 3] ,附
加不同种类及浓度的生长素与细胞分裂素。以上所有培养基的 pH 均为 5.7 ,蔗糖浓度除生根培养基为
1.5%外 ,其余均为 3%,光照强度为 1 200 lx ,每日光照 12 h。
2　结果与讨论
2.1　丛生芽诱导和增殖
表 1　培养基和不同组合的激素对不定芽诱导的影响
Table 1　The effects of culture medium and hormones
on adventitious bud differentiation
基本培养基 激素种类及浓度/mg·L -1
芽接种
数/个
分化数
/个
分化频
率%
1/ 2MS
1/ 4MS
BA1.0+IBA0.01 10 3 30.0
BA2.0+IBA0.01 8 2 25.0
BA5.0+IBA0.01 10 2 20.0
KT 1.0+IBA0.01 10 3 30.0
KT 2.0+IBA0.01 10 3 30.0
KT5.0+ IBA0.01 8 1 12.5
BA1.0+IBA0.01 8 7 87.5
BA2.0+IBA0.01 8 3 37.5
BA5.0+IBA0.01 8 1 12.5
KT 1.0+IBA0.01 10 6 60.0
KT 2.0+IBA0.01 8 3 37.5
KT5.0+ IBA0.01 8 1 12.5
外植体接种 20 d后 ,在 MS培养基上的嫩枝褐
化现象较严重 ,丛生芽分化率低于 10%;1/2MS培
养基上有少量褐化 ,丛生芽分化率在 10%～ 30%;
1/4MS培养基上外植体生长良好 ,基本无褐化现象 ,
丛生芽分化率最高达 87.5%。不同的激素组合及浓
度对丛生芽的诱导有很大影响。BA1.0 mg/L(或
KT1.0 mg/ L)和 IBA0.01 mg/L培养基上不定芽分化
较好 ,当细胞分裂素浓度提高到 BA2.0 ～ 5.0 mg/L
(KT2.0 ～ 5.0 mg/L)时 ,易产生愈伤组织 ,芽分化较
少。这可能是完全的 MS培养基中氨态氮和硝态氮
含量高 ,抑制了不定芽的分化。由表 1可知 ,降低基
本培养基的大量元素 ,并附加较低浓度的 BA和 IBA ,
即1/4MS+BA1.0 mg/ L+IBA0.01 mg/L ,则有利于
不定芽的分化 ,诱导频率高达87.5%。而细胞分裂素
浓度较高时 ,无论是 BA还是 KT 都严重影响丛生芽的诱导 ,诱导频率只有12.5%。
将分化后的丛生芽继代在诱导率最高的 1/4MS附加BA1.0 mg/ L 、IBA0.01 mg/L 的培养基上 ,20
d的观察结果表明 ,增殖系数较低 ,且出现黄化现象 。其原因可能是 1/4M S 培养基中的大量元素减少
了 75%不能满足丛生芽对营养的要求 。因此在诱导丛生芽的培养基中 ,降低 MS 培养基的大量元素有
促进作用。而完全的 MS培养基对丛生芽的增殖则是必需的。同时低浓度的赤霉素对提高丛生芽的增
殖有明显促进作用。从表 2中可以看出 ,BA1.0 mg/ L+IBA0.1 mg/L+GA3 0.3 mg/L 或 KT1.0 mg/ L+
NAA0.1 mg/L+GA3 0.3 mg/L ,丛生芽的增殖可提高 4 ～ 6倍(图 1-1)。
2.2　GA3 对芽伸长生长的影响
适宜的GA3浓度不仅有利于丛生芽的增殖 ,而且对芽的生长具有明显促进作用 ,同时基部又可萌发
新的丛生芽。由表 3可知 ,MS+BA1.0 mg/L+IBA0.1 mg/ L+GA3 2.0mg/L ,芽的伸长可达 3 ～ 4 cm ,
生长良好 ,而GA3浓度过高则使丛生芽发生黄化 ,反而造成生长不良(图 1-2)。
表 2　不同组合的激素对不定芽增殖的影响
Table 2　The effects of hormone on adventitious
bud proliferation
培　养　基
/mg·L -1
丛生芽接种数/丛
(每 3～ 4个芽为一丛)
平均增
殖率%
MS+BA1.0+IBA0.1 14 200～ 300
MS+BA2.0+IBA0.1 12 200～ 300
MS+KT1.0+NAA0.1 10 100～ 200
MS+KT2.0+NAA0.1 11 200～ 300
MS+KT1.0+IBA0.1+GA3 0.3 12 400～ 600
MS+KT1.0+NAA0.1+GA 3 0.3 11 400～ 500
表 3　GA3浓度(mg/L)对不定芽伸长的影响
Table 3　The ef fects of gibberellin concentration
on adventitious bud elongation
培养基/mg·L -1 芽的生长(继代 20 d后)
MS+BA1.0+IBA0.1+GA 3 0.5 伸长不明显
MS+BA1.0+IBA0.1+GA 3 1.0 伸长 1 cm 左右
MS+BA1.0+IBA0.1+GA 3 2.0 伸长 3～ 4 cm ,芽状
MS+BA1.0+IBA0.1+GA 3 3.0 伸长 3～ 4 cm ,芽纤细
MS+BA1.0+IBA0.1+GA 3 5.0 伸长 3～ 4 cm ,芽纤细 ,生长弱 ,黄化
2.3　不同激素种类对生根的影响
与其它木本植物相似 ,福建山樱花的不定根诱导也较困难。通过多种不同激素组合培养基的试验
验 ,生根率可达 91%左右(表 4)。将高 3 ～ 4 cm 左右的无根苗切下 ,置于生根培养基中 ,不同基本培养
基及不同激素的组合对生根诱导影响极大 。由表4可知 ,使用单一的生长素或两种生长素生根率均为
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南 京 林 业 大 学 学 报 (自 然 科 学 版)　　　　　　第 26 卷　第 2 期　
1.丛生芽的形成 2.形成无根小苗
3.完整的再生植株 4.移栽后的小苗
图 1　福建山樱花的快速繁殖过程
Fig.1　Rapid propagation of Cerasus campanulata
零 。使用两种生长素结合一定浓度的细胞分裂素 ,对根的诱导率有明显提高 。同时基本培养基中减少
大量元素含量能促进不定根的产生 ,以 1/2MS 较好。生根后的无菌苗初期高生长缓慢 ,经过 30 ～ 40 d
培养 ,生长速度明显提高 ,达 7 ～ 8 cm左右(图 1-3)。
表 4　培养基及激素对生根的影响
Table 4　The effects of culture medium and hormone on rooting
基本培
养基
激素及
浓度
接种数
/个
生根数
/个
生根率
%
MS
A 8 0 0
B 8 0 0
C 9 0 0
D 10 0 0
E 10 0 0
F 8 0 0
G 14 0 0
H 12 0 0
I 10 2 20.0
J 12 2 16.7
K 8 3 37.5
基本培
养基
激素及
浓度
接种数
/个
生根数
/个
生根率
%
1/ 2MS
A 10 0 0
B 8 0 0
C 8 0 0
D 12 0 0
E 14 0 0
F 10 0 0
G 10 0 0
H 8 0 0
I 10 2 20.0
J 10 5 50.0
K 12 11 91.6
基本培
养基
激素及
浓度
接种数
/个
生根数
/个
生根率
%
1/ 4MS
A 7 0 0
B 8 0 0
C 7 0 0
D 11 0 0
E 10 0 0
F 8 0 0
G 12 0 0
H 10 0 0
I 8 2 25.0
J 9 4 44.4
K 12 8 66.7
　　注:表中激素及浓度(mg/ L)表示为A.IBA0.25;B.IBA0.75;C.IBA1.0;D.NAA0.25;E.NAA0.75;F.NAA;G.IBA0.5+NAA0.5;
H.IBA1.0+NAA1.0;I.IBA1.0+NAA1.0+6-BA0.25;J.IBA1.0+NAA1.0+6-BA0.5;K.IBA1.0+NAA1.0+6-BA0.75。
2.4　再生植株的移栽
将生长健壮的试管苗打开瓶盖 ,炼苗 1周左右 ,洗去根部琼脂 ,移栽于覆盖有遮荫网并有自动间歇
喷雾的珍珠岩苗床内 ,成活率达 95%(图 1-4)。
[ 参 考 文 献 ]
[ 1] 俞德浚.中国植物志[M ] .北京:科学出版社 , 1986.
[ 2] 王永清.樱花离体培养芽外植体的建立[ J] .四川农业大学学报 , 1996 , 15(3):341-344.
(责任编辑　郑琰炎炎)
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