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福建山樱花组培快繁技术



全 文 :20 林业科技开发 2015 年第 29 卷第 1 期
doi:10. 13360 / j. issn. 1000-8101. 2015. 01. 006 中图分类号:S722. 3
福建山樱花组培快繁技术
李勇,方扬辉,郑雪燕,黄金华,郭洁,张志才*
(福建省洋口国有林场,福建 顺昌 353211)
摘 要:从福建省洋口国有林场场部门口的樱花园中选择 1 株福建山樱花优良个体开展组培快繁技术研究,建立
了组培快繁技术体系。结果表明:最适诱导培养基为 MS + 6-BA 0. 4 mg /L + NAA 0. 3 mg /L +蔗糖 3%;继代增殖
培养基为 MS + 6-BA 0. 4 mg /L + GA30. 2 mg /L +蔗糖 3%;生根培养基为 1 /2 改良 MS + IBA 0. 2 mg /L + NAA 0. 2
mg /L +蔗糖 1. 5%;移栽基质泥炭土∶杉木树皮∶谷壳体积比为5∶ 4∶ 1。采用该技术体系的福建山樱花组培苗芽诱导
率较高,达到 84%,月继代增殖倍数为 4. 14,生根率可达 91. 6%,移栽成活率可达 89%。
关键词:福建山樱花;组织培养;培养基;生根;移栽
A technique on rapid propagation of Cerasus campanulata by tissue culture∥ LI Yong,FANG Yanghui,
ZHENG Xueyan,HUANG Jinhua,GUO Jie,ZHANG Zhicai
Abstract:Half lignification stems of Cerasus campanulata from Yangkou Forest Farm,Fujian Province were used to the ex-
periment on rapid propagation. The techniques system for tissue culture was established as follows:media for initial culture
was MS + 6-BA 0. 4 mg /L + NAA 0. 3 mg /L + sucrose 3%,media for clump shoots induction culture was MS + 6-BA 0. 4
mg /L + GA3 0. 2 mg /L + sucrose 3%,media for rooting culture was 1 /2 improvement MS + IBA 0. 2 mg /L + NAA 0. 2 mg /
L + sucrose 1. 5%,and transplantation media was peat soil 50% + Chinese fir bark 40% + chaff 10% . Followed this tech-
niques system,the inductivity was up to 84%,the multiplication was 4. 14 per month,the rooting rate was up to 91. 6%,
and the transplantation survival rate was up to 89% .
Key words:Cerasus campanulata;tissue culture;nutrient medium;rooting;transplant
First author’s address:FujianYangkou State-owned Forest Farm,Shunchang 353211,Fujian,China
收稿日期:2014-07-31 修回日期:2014-10-18
基金项目:中央财政林木良种苗木培育补贴项目(闽财农[2013]9
号) ;福建省洋口国有林场项目(闽洋林[2013]12 号)。
作者简介:李勇(1975 -) ,男,高级工程师,主要从事林木遗传选育研
究工作。通信作者:张志才,男,高级工程师。E-mail:yklzzc@ 126. com
福建山樱花(Cerasus campanulata)为蔷薇科李属
落叶小乔木,自然分布于我国福建、台湾、浙江、广东、
江西和广西等地[1]。福建山樱花早春开花,先花后
叶,花期 2 个月,花粉红色、白色,呈下垂性开展,花
萼钟筒状,姿态优美花量丰富[2]。福建山樱花是集
观赏、用材、生态和食用价值于一身的优良乡土树
种,近年来在园林观赏和小区绿化方面很受欢
迎[3]。又因福建山樱花种子结实量少,采种期短,
发芽率不高,各种规格的苗木供不应求,因此,通过
组培技术快速繁育福建山樱花具有十分重要的意
义[4-7]。借鉴多种樱花组培技术研究试验[8-12],分别
研究了 15 种诱导培养基、8 种继代培养基和 12 种
生根培养基配方对福建山樱花诱导、继代和生根的
影响,以及 3 种不同轻基质配方对福建山樱花组培
苗移栽的影响,以期建立福建山樱花组培快繁技术
体系。
1 材料与方法
1. 1 试验材料
从福建省洋口国有林场场部门口的樱花园中选
择 1 株生长健壮、树冠美观、无病虫害、花色粉红的福
建山樱花,以其当年生半木质化芽条为试验材料。
1. 2 试验方法
根据前人的研究结果,基本培养基以 MS 培养基
为基础,稍作改动,培养基 pH 值 5. 8,琼脂 6. 5 g /L,
蔗糖 15% ~ 30%,附加的激素为 6 -BA、GA3、IBA、
NAA。
1. 2. 1 诱导培养
用 0. 1% 的 HgCl 以不同消毒时间(10,12,15
min)处理秋季采集的外植体。诱导培养时,以 MS 培
养基为基本培养基,添加不同浓度的细胞分裂素 6-
BA (0. 1,0. 2,0. 4,0. 8,1. 0 mg /L)和不同浓度的
NAA(0. 1,0. 2,0. 3 mg /L)。共 15 个处理,每个处理
重复 3 次,每个重复 50 瓶,每瓶接 1 个外植体。
1. 2. 2 继代培养
继代增殖培养时,以诱导培养的新芽茎段为材料,
MS培养基为基本培养基,蔗糖 3%,添加 0. 4 mg /L的
森林资源培育 欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗
林业科技开发 2015 年第 29 卷第 1 期 21
6-BA和不同浓度的 GA3(0. 1,0. 2,0. 3,0. 5,0. 8,
1. 0,2. 0 mg /L)。共 7 个处理,每个处理重复 3 次,每
个重复 50 瓶,每瓶接种 7 个新芽,即每个重复 350
株,继代 5 次后进行数据统计。
1. 2. 3 生根培养
生根培养以继代增殖苗为材料,改良 1 /2 MS 为
基本培养基,蔗糖 1. 5%,添加不同浓度的 NAA(0. 1,
0. 2,0. 5 mg /L)和 IBA(0. 2,0. 4,0. 6 mg /L)。共 9 个
处理,每个处理重复 3 次,每个重复 50 瓶,每瓶接种
10 个植株,即每个重复 500 株。
1. 2. 4 移 栽
移栽以炼苗 14 d、生长健壮的生根苗为材料,以
不同体积比的泥炭土、杉木树皮和谷壳(2∶ 7∶ 1,5∶ 4∶
1,7∶ 2∶ 1)为移栽基质,共 3 个处理,每处理移栽 5 000
株苗,15 和 30 d 后每处理分别抽样 200 株苗进行调
查分析。
2 结果与分析
2. 1 外植体诱导
2. 1. 1 消毒时间对外植体诱导的影响
对秋季采集的福建山樱花半木质化芽条采用 3
种不同的表面灭菌时间进行试验,结果见表 1。由表
1 可知,用 0. 1%的 HgCl 处理外植体 10 min,外植体
死亡率低,为 12%,但污染率高达 48%;处理 15 min,
外植体死亡率高达 44%,污染率为 10%;处理 12 min
的效果最好,死亡率为 18%,污染率为 15%,有效诱
导率最高,达到 67%。
表 1 不同消毒时间对福建山樱花外植体诱导的影响
消毒时间 /min 死亡率 /% 污染率 /% 无菌活体率 /%
10 12 ± 0. 51 48 ± 2. 16 40 ± 2. 10
12 18 ± 0. 76 15 ± 0. 48 67 ± 3. 12
15 44 ± 2. 15 10 ± 0. 44 46 ± 1. 95
2. 1. 2 激素对外植体诱导的影响
对秋季采集的福建山樱花芽条采用 15 种不同培
养基进行诱导试验,结果见表 2。由表 2 可知,9 号培
养基,即 MS +6-BA 0. 4 mg /L + NAA 0. 3 mg /L +蔗
糖3%的诱导率、萌芽个数和平均芽长均最高,分别
为 84%、78个和 2. 3 cm。但其增殖倍数不高,为1. 86。
分别对 15 个培养基、5 个浓度的6-BA和 3 个浓度的
NAA的诱导率进行 Duncan 多重比较(表 2、3),结果
表明:9 号培养基的诱导率显著优于其他 14 种培养
基,15 号和 14 号培养基次之,1 号培养基的诱导率最
低;1. 0 和 0. 4 mg /L的 6-BA的诱导率显著优于其他
3 种浓度;0. 3 mg /L 的 NAA 的诱导率显著优于其他
2 种浓度。说明 9 号培养基最有利于福建山樱花芽
条诱导,1. 0 和 0. 4 mg /L 的6-BA、0. 3 mg /L 的 NAA
对福建山樱花芽条诱导率的贡献最大。
表 2 不同培养基对福建山樱花诱导的影响
培养基
编号
6-BA/
(mg·L - 1)
NAA/
(mg·L - 1) 诱导数
诱导率 /
% 萌芽数
平均芽长 /
cm 增殖倍数
1 0. 1 39 26 ± 1. 13 H 75 1. 6 1. 92
2 0. 1 0. 2 57 38 ± 1. 19 G 108 1. 5 1. 89
3 0. 3 75 50 ± 2. 36 E 129 1. 3 1. 72
4 0. 1 51 34 ± 1. 03 G 108 1. 8 2. 12
5 0. 2 0. 2 60 40 ± 1. 22 FG 123 1. 5 2. 05
6 0. 3 87 58 ± 1. 57 D 189 1. 5 2. 17
7 0. 1 66 44 ± 2. 22 FG 147 1. 9 2. 23
8 0. 4 0. 2 93 62 ± 2. 86 CD 198 2. 1 2. 13
9 0. 3 126 84 ± 4. 11 A 234 2. 3 1. 86
10 0. 1 69 46 ± 1. 98 EF 159 2. 1 2. 30
11 0. 8 0. 2 87 58 ± 3. 11 D 186 1. 8 2. 14
12 0. 3 96 64 ± 3. 12 C 207 1. 5 2. 16
13 0. 1 84 56 ± 2. 58 DE 174 1. 2 2. 07
14 1. 0 0. 2 99 66 ± 3. 22 BC 216 1. 2 2. 18
15 0. 3 105 70 ± 3. 12 B 231 1. 4 2. 20
注:不同大写字母表示 0. 01 水平差异显著。下同。
表 3 不同浓度 6 - BA和 NAA对福建山樱花诱导率的影响
6-BA NAA
浓度 /(mg·L -1) 诱导率 /% 浓度 /(mg·L -1) 诱导率 /%
0. 1 38 ± 1. 83 D 0. 1 41. 2 ± 1. 93 C
0. 2 44 ± 1. 76 C 0. 2 52. 8 ± 2. 45 B
0. 4 63 ± 2. 96 A 0. 3 65. 2 ± 2. 56 A
0. 8 56 ± 2. 55 B
1. 0 64 ± 2. 86 A
2. 2 激素对继代增殖的影响
对福建山樱花诱导瓶苗采用 7 种不同培养基进
行继代培养试验所得的结果见表 4。由表 4 可知,2
号培养基,即 MS +6 - BA 0. 4 mg /L + GA3 0. 2 mg /L +
表 4 不同培养基对福建山樱花继代增殖的影响
编号 6-BA /(mg·L -1) GA3 /(mg·L -1) 接种数 继代 5 次芽数 月增殖倍数 丛生芽特征
1 0. 1 7 22 3. 14 ± 0. 16 B 芽生长快、丛芽很少,有效苗比例低
2 0. 2 7 29 4. 14 ± 0. 21 A 芽生长快、丛芽很多,有效苗比例高
3 0. 3 7 23 3. 29 ± 0. 12 B 芽生长快、丛芽很多,有效苗比例高
4 0. 4 0. 5 7 18 2. 57 ± 0. 11 CD 芽生长快、丛芽很少,有效苗比例低
5 0. 8 7 19 2. 71 ± 0. 13 C 芽生长慢、丛芽很少,有黄化,有效苗比例低
6 1. 0 7 17 2. 43 ± 0. 09 D 芽生长慢、丛芽很少,有黄化,有效苗比例低
7 2. 0 7 18 2. 57 ± 0. 14 CD 芽生长慢、丛芽很少,有黄化,有效苗比例低
欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗 森林资源培育
22 林业科技开发 2015 年第 29 卷第 1 期
蔗糖 3%的继代增殖倍数最高,为 4. 14,芽生长快、丛
芽很多,有效苗比例高。多重比较结果表明,2 号培
养基的增殖倍数显著优于其他 6 种培养基,3 号和 1
号培养基次之,显著优于其他 4 种培养基。
2. 3 激素对生根的影响
对福建山樱花继代瓶苗采用 9 种不同培养基进
行生根培养试验,结果见表 5。由表 5 可知,2 号培养
基,即 1 /2改良MS + IBA 0. 2 mg /L + NAA 0. 2 mg /L +
蔗糖 1. 5% 的生根率和平均根数均最高,分别为
91. 6%和 2. 7 根;但其生根天数在 9 个培养基中处于
中等水平,为 23 d;平均根长排第 2 名,为1. 7 cm。分
别对 9 个培养基、3 个浓度的 IBA和 3 个浓度的 NAA
的生根率进行 Duncan多重比较(表 5、6) ,结果表明:
2 号、5 号和 3 号培养基的生根率最优,9 号培养基生
根率最低;0. 2 和 0. 4 mg /L 的 IBA 生根率最优,0. 6
mg /L的 IBA的生根率最低;0. 2 和 0. 1 mg /L的 NAA
生根率最优,0. 5 mg /L 的 NAA 生根率最低。说明 2
号培养基最有利于福建山樱花继代芽条生根,0. 2 和
0. 4 mg /L的 IBA、0. 2 和 0. 1 mg /L的 NAA对福建山
樱花继代芽条生根的贡献最大。
表 5 不同培养基对福建山樱花继代芽条生根的影响
编号
IBA /
(mg·L -1)
NAA /
(mg·L -1)
生根率 /
%
生根
天数
平均
根数
平均根长 /
cm
1 0. 2 0. 1 85. 6 ± 4. 32 bc 21 2. 5 1. 5
2 0. 2 0. 2 91. 6 ± 4. 12 a 23 2. 7 1. 7
3 0. 2 0. 5 87. 6 ± 3. 89 ab 22 2. 6 1. 4
4 0. 4 0. 1 86. 1 ± 4. 65 bc 21 2. 1 1. 8
5 0. 4 0. 2 88. 5 ± 3. 96 ab 24 2. 5 1. 6
6 0. 4 0. 5 83. 5 ± 4. 13 bcd 23 1. 9 1. 5
7 0. 6 0. 1 81. 5 ± 3. 65 cd 25 2. 0 1. 2
8 0. 6 0. 2 83. 5 ± 4. 23 bcd 24 2. 1 1. 0
9 0. 6 0. 5 80. 9 ± 3. 46 d 26 1. 8 0. 8
注:不同小写字母表示 0. 05 水平差异显著。下同。
表 6 不同浓度 IBA和 NAA对福建山樱花继代芽条
诱导率的影响
IBA NAA
浓度 /(mg·L -1) 诱导率 /% 浓度 /(mg·L -1) 诱导率 /%
0. 2 88. 3 ± 4. 11 a 0. 1 84. 4 ± 4. 21 ab
0. 4 86. 0 ± 4. 25 ab 0. 2 87. 9 ± 4. 10 a
0. 6 82. 0 ± 3. 78 b 0. 5 84. 0 ± 3. 83 b
2. 4 基质对移栽的影响
对福建山樱花生根苗采用 3 种不同基质培养试
验,结果见表 7。由表 7 可知,2 号处理,即泥炭土∶杉
木树皮∶谷壳体积比5∶ 4∶ 1的移栽成活率最高,30 d统
计的移栽成活率为 93%,60 d 统计的移栽成活率
为 89%。
表 7 不同基质对福建山樱花组培生根苗移栽
成活率的影响 /%
处理 泥炭土 杉木树皮 谷壳 30 d成活率 60 d成活率
1 20 70 10 67 55
2 50 40 10 93 89
3 70 20 10 85 81
3 结论与讨论
从福建省洋口国有林场场部门口的樱花园中选
择 1 株福建山樱花优良个体开展组培快繁技术研究,
建立了组培快繁技术体系。诱导培养基为 MS + 6 -
BA 0. 4 mg /L + NAA 0. 3 mg /L +蔗糖 3%;继代增殖
培养基为 MS +6-BA 0. 4 mg /L + GA3 0. 2 mg /L +蔗
糖 3%;生根培养基为 1 /2 改良MS + IBA 0. 2 mg /L +
NAA 0. 2 mg /L +蔗糖 1. 5%;移栽基质为泥炭土∶杉
木树皮∶谷壳 = 5∶ 4∶ 1。采用该技术体系的福建山樱
花组培苗芽诱导率为 84%,月继代增殖倍数为 4. 14,
生根率可达 91. 6%,移栽成活率可达 89%。
该技术体系由于研究的影响因素等不够全面细
致,有待从各个方面优化,以达到提高增殖倍数、提高
成活率和降低成本的目的。比如可以从芽条采集季
节对诱导率的影响,每瓶培养基不同使用量对诱导、
继代和生根的影响,多种不同激素不同浓度处理对诱
导、继代和生根的影响,移栽苗水肥管理对成活率和
生长量的影响,不同移栽时期对成活率的影响等方面
开展研究。这些方面的研究对提高增殖倍数、提高成
活率和降低成本都有重要意义,需要在以后的试验和
实践中慢慢摸索,总结经验。
本试验研究了福建山樱花瓶内生根的生根率、生根
天数、平均根数和平均根长度等,生根率达到91. 6%。
瓶内生根还需经过移栽,移栽成活率为 89%,综合成
活率在 81. 5%。如果通过组培继代芽条直接开展移
栽生根试验,添加不同浓度的不同激素,移栽成活率
有望高于 81. 5%。可见,提高瓶外生根率,生产中采
用瓶外生根,能减少福建山樱花瓶内生根步骤,有效
降低组培苗培育成本。
本试验在移栽炼苗所用的基质比例和移栽时间
还存在一些不对称因素,移栽的条件要求比较苛刻,
还达不到大面积推广的条件,需要在今后的实践中继
续探索,减少移栽中的不必要因素,提高移栽成活率、
出圃率的同时,降低生产成本。
此次福建山樱花组培技术体系的建立还比较单
一,在不同花色、重瓣花等不同品种的福建山樱花新
材料的快繁体系还未全面形成,需要在以后的试验中
森林资源培育 欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗
林业科技开发 2015 年第 29 卷第 1 期 23
继续探索,建立起品种齐全的福建山樱花组培快繁技
术体系。
参考文献
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(责任编辑 田亚玲
櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒
)
doi: 中图分类号:S723. 7
沼液灌溉对桉树苗生长的影响
伍琪1,魏世清1* ,覃文能1,冼萍2,蒋湖波1
(1.广西林业科学研究院 广西优良用材林资源培育重点实验室,南宁 530002;2.广西大学环境学院)
摘 要:利用盆栽试验研究不同沼液灌溉量及不同灌溉浓度对桉树苗生长的影响。结果表明:当沼液灌溉量为
14. 0 ~ 24. 5 L时,桉树苗苗高、地径增长差异不显著,说明桉树苗对沼液灌溉有一定的耐受能力。其中沼液灌溉量
为 21. 0 L时,桉树苗苗高增长量、地径增长量、叶绿素含量、叶面积均高于其他处理。沼液灌溉量为 24. 5 L 时,土
壤中养分含量出现累积,桉树苗生长放缓。与对照相比,不同浓度沼液都能促进桉树苗生长,其中桉树苗苗高、地
径显著增加,叶绿素含量、叶面积极显著增加,尤以 80%沼液浓度更能促进桉树苗生长。
关键词:桉树;沼液;灌溉量;灌溉浓度;生长指标
收稿日期:2014-05-28 修回日期:2014-07-01
基金项目:广西优良用材林资源培育重点实验室开放课题(12A0203) ;
广西自然科学基金项目(2013GXNSFBA019097)。
作者简介:伍琪(1986 -) ,女,助理工程师,主要从事环境微生物技术研
究工作。通信作者:魏世清,女,工程师。E-mail:weishiqing2001@ 163.
com
Influences of biogas slurry irrigation on the growth of Eucalyptus seedlings∥WU Qi,WEI Shiqing,QIN
Wenneng,XIAN Ping,JIANG Hubo
Abstract:A pot experiment was conducted to study the effects of different biogas slurry irrigation amount and different slurry
concentrations on the growth of Eucalyptus seedlings. The results showed that the difference of increment in seedling height
and ground diameter were not significant when the biogas slurry irrigation quantity was 14. 0-24. 5 L. Eucalyptus seedlings
could tolerate certain level of irrigation biogas slurry. When the amount of the biogas slurry irrigation was 21. 0 L,the seed-
ling height increment,ground diameter increment,chlorophyll content and leaf area were higher than those of the other
treatments. When the amount of the biogas slurry irrigation was 24. 5 L,the seedlings growth was affected by the soil nutri-
ent accumulation. Compared with the control,biogas slurry in different concentrations could promote the growth of Eucalyp-
tus seedlings. The seedling height and ground diameter increased significantly. The chlorophyll content and leaf area in-
creased extremely,biogas slurry in 80% concentration could especially promote the growth of Eucalyptus seedlings.
Key words:Eucalyptus;biogas slurry;irrigation amount;irrigation concentration;growthparameter
First author’s address:Guangxi Key Laboratory of Superior Timber Trees Resource Cultivation,Guangxi Forestry Re-
search Institute,Nanning 530002,China
随着沼气工程在全国的迅速发展,大量沼液未经
后续处理直接排放,成为我国水体环境的主要污染源
之一。据调查,即使只有 10%的畜禽粪便进入水体,
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10.13360/j.issn.1000-8101.2015.01.007