全 文 ：２０１３年
第３３卷　第６期
河北大学学报（自然科学版）
Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｈｅｂｅｉ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（Ｎａｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　Ｅｄｉｔｉｏｎ）
２０１３
Ｖｏｌ．３３Ｎｏ．６
ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１０００－１５６５．２０１３．０６．０１７
　收稿日期：２０１３－０１－２１
　基金项目：９８５工程资助项目（ＭＵＣ９８５０４－１４，ＭＵＣ９８５０７－０８）；高等学校学科创新引智计划资助项目（Ｂ０８０４４）；中央高校基
本科研业务费专项资金资助项目（０９１０ＫＹＺＹ４６）
　第一作者：张璐（１９８８－），女，山东枣庄人，中央民族大学在读硕士研究生，主要从事植物细胞工程方面的研究．
Ｅ－ｍａｉｌ：ｚｈａｎｇｌｕ．ｇｏｏｄｌｕｃｋ＠１６３．ｃｏｍ
　通信作者：王俊丽（１９６４－），女，河北新乐人，中央民族大学教授，博士生导师，主要从事植物细胞工程及资源利用研究．
Ｅ－ｍａｉｌ：ｗａｎｇｊｕｎｌｉ１６９８＠１６３．ｃｏｍ
华北八宝组织培养与再生体系的建立
张璐，王俊丽，王珏，田璧瑞，马林喜
（中央民族大学 生命与环境科学学院，北京　１０００８１）
　　摘　要：为更好地保护和利用野生华北八宝资源，以华北八宝的幼嫩叶片作为外植体，探讨了不同的植
物生长调节剂及不同质量浓度的配比对愈伤组织诱导、不定芽分化以及生根的诱导效应，建立了华北八宝的
组织培养再生体系．结果表明，诱导愈伤组织的最佳培养基为ＭＳ＋２，４－Ｄ　２．０ｍｇ／Ｌ＋６－ＢＡ　０．５ｍｇ／Ｌ；不定
芽诱导分化的最佳培养基为 ＭＳ＋６－ＢＡ　１．０ｍｇ／Ｌ，诱导率达８１．５２％；最佳生根培养基为１／２ＭＳ培养基．
关键词：华北八宝；愈伤组织；不定芽；植株再生
中图分类号：Ｑ９４５　　　文献标志码：Ａ　　　文章编号：１０００－１５６５（２０１３）０６－０６４８－０６
Ｐｌａｎｔ　ｔｉｓｓｕｅ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ａｎｄ　ｅｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔ　ｏｆ　ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ　ｓｙｓｔｅｍ　ｏｆ
Ｈｙｌｏｔｅｌｅｐｈｉｕｍ　ｔａｔａｒｉｎｏｗｉ （Ｍａｘｉｍ．）Ｈ．Ｏｈｂａ
ＺＨＡＮＧ　Ｌｕ，ＷＡＮＧ　Ｊｕｎｌｉ，ＷＡＮＧ　Ｊｕｅ，ＴＩＡＮ　Ｂｉｒｕｉ，ＭＡ　Ｌｉｎｘｉ
（Ｃｏｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｌｉｆｅ　ａｎｄ　Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｍｉｎｚｕ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　Ｃｈｉｎａ，Ｂｅｉｊｉｎｇ　１０００８１，Ｃｈｉｎａ）
　　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｆｏｒ　ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｗｉｌｄ　Ｈｙｌｏｔｅｌｅｐｈｉｕｍ　ｔａｔａｒｉｎｏｗｉｉ（Ｍａｘｉｍ．）Ｈ．Ｏｈｂａ，
ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｐｌａｎｔ　ｇｒｏｗｔｈ　ｒｅｇｕｌａｔｏｒｓ　ｏｎ　ｃａｌｕｓ，ａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓ　ｂｕｄ　ａｎｄ　ｒｏｏｔ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ｗｅｒｅ　ｄｉｓ－
ｃｕｓｓｅｄ　ａｎｄ　ａ　ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ　ｓｙｓｔｅｍ　ｗａｓ　ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ　ｂｙ　ｕｓｉｎｇ　ｌｅａｆ　ｅｘｐｌａｎｔｓ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ｏｐｔｉ－
ｍａｌ　ｍｅｄｉｕｍ　ｏｆ　ｃａｌｕｓ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ｗａｓ　ＭＳ＋２，４－Ｄ　２．０ｍｇ／Ｌ＋６－ＢＡ　０．５ｍｇ／Ｌ．Ｔｈｅ　ｓｕｉｔａｂｌｅ　ｍｅｄｉｕｍ　ｆｏｒ　ｉｎ－
ｄｕｃｉｎｇ　ａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓ　ｓｈｏｏｔｓ　ｗａｓ　ＭＳ＋６－ＢＡ　１．０ｍｇ／Ｌ，ａｎｄ　ｔｈｅ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ｒａｔｅ　ｏｆ　ａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓ　ｂｕｄｓ　ｒｅａｃｈｅｄ
８１．５２％．Ｔｈｅ　ｂｅｓｔ　ｍｅｄｉｕｍ　ｏｆ　ｒｏｏｔ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ｗａｓ　１／２ＭＳ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｈｙｌｏｔｅｌｅｐｈｉｕｍ　ｔａｔａｒｉｎｏｗｉｉ；ｃａｌｕｓ；ａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓ　ｓｈｏｏｔｓ；ｐｌａｎｔ　ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ
华北八宝（Ｈｙｌｏｔｅｌｅｐｈｉｕｍ　ｔａｔａｒｉｎｏｗｉｉ（Ｍａｘｉｍ．）Ｈ．Ｏｈｂａ），又称华北景天，是景天科八宝属的多年生
草本植物．花期７～８月，果期９月．分布于内蒙古、河北、山西等地，生于海拔１　０００～３　０００ｍ处山地石缝中．
常见于向阳山石上［１］．
华北八宝属于中国的名贵香草植物，可用于精油香料的提取、疾病的防治等［２］．该植物为多肉多浆耐旱
花卉，株型小巧，花朵繁茂，可作为耐旱盆栽花卉用于城市园林绿化，并且已被录入中国第６批植物新品种保
第６期 张　璐等：华北八宝组织培养与再生体系的建立
护名录［３－４］．
根据文献报道，八宝属植物大多具有药用价值，例如，八宝、轮叶八宝、珠芽八宝、白八宝、狭穗八宝、紫花
八宝［５－６］等植物具有祛风清热、散瘀消肿、消炎止血等功效．由于华北八宝分布海拔较高，在低海拔地区繁殖
难度大，目前可利用的野生资源较少．为了进一步扩大种源，可以采用组织培养的方法，建立华北八宝的快速
高效再生体系．目前已有多种植物通过组织培养技术建立了其再生体系，如半夏［７］、新疆雪莲［８］、胭脂花［９］等．
本研究的目的在于以野生华北八宝植株为材料，建立组织培养再生体系，为华北八宝的进一步开发利用
奠定基础．
１　材料与方法
１．１　植物材料的选取与消毒处理
华北八宝野生植株采自北京灵山海拔２　３００ｍ的石缝间．选取其幼嫩叶片作为外植体，将幼嫩叶片小心
取下，用洗涤灵清洗干净之后在流水下冲洗２ｈ，用体积分数为７０％的酒精浸泡３０ｓ，再浸于质量分数为
０．１％的 ＨｇＣｌ２ 中（加吐温２滴）消毒１２ｍｉｎ，用无菌水冲洗３～４次．
１．２　培养基及培养方法
以 ＭＳ培养基为基本培养基，添加质量分数为３％的蔗糖和１％的琼脂粉（ｐＨ　５．８），１２１℃高压灭菌
２０ｍｉｎ．
１．２．１　愈伤组织的诱导
在 ＭＳ培养基中分别加入不同质量浓度的２，４－Ｄ（０，０．５，１．０，２．０，４．０ｍｇ／Ｌ）与６－ＢＡ（０，０．５，１．０，
２．０ｍｇ／Ｌ）２种植物生长调节剂，以幼嫩叶片为外植体进行愈伤组织的诱导．
将消毒后的幼嫩叶片切成０．３ｃｍ×０．５ｃｍ的小块，并用刀片在叶面上刻伤，接种于已经过１２１℃高压
灭菌２０ｍｉｎ后的培养基中，每瓶接种７块，９瓶为一个处理，重复３次，３０ｄ后观察统计愈伤组织诱导率．
１．２．２　不定芽的分化诱导
以 ＭＳ为基本培养基，加入不同质量浓度的６－ＢＡ（０，０．５，１．０，２．０，４．０ｍｇ／Ｌ），ＴＤＺ（０，０．５，１．０，２．０，
４．０ｍｇ／Ｌ），ＮＡＡ（０，０．５，１．０，２．０，４．０ｍｇ／Ｌ），以生长旺盛的愈伤组织为材料进行不定芽的分化诱导．
将愈伤组织切成０．５ｃｍ×０．５ｃｍ×０．５ｃｍ的小块，每瓶接种７块，９瓶为一个处理，重复３次，３０ｄ后
观察统计不定芽诱导率．
１．２．３　生根培养
分别在 ＭＳ，１／２ＭＳ　２种培养基中进行生根培养．将长到２～３ｃｍ的不定芽取出，接于增殖培养基６－ＢＡ
１．０ｍｇ／Ｌ中．２０ｄ后将长到３～４ｃｍ的不定芽接于生根培养基中，每瓶接种数为６个，９瓶为一个处理，重
复３次，３０ｄ后观察统计生根率．
１．２．４　炼苗与移栽
选取已生根且植株健壮的再生苗，移栽前先打开瓶盖，在散射光条件下炼苗３ｄ，之后用镊子轻轻取出
幼苗，先将幼苗根部的培养基用清水冲洗干净，然后将幼苗移栽到珍珠岩∶营养土∶蛭石＝１∶２∶１（体积比）的
培养土中．移栽后浇透水，之后保持适当的温度、湿度和光照．移栽１５ｄ后统计成活率．
１．２．５　培养条件
培养室温度为（２５±２）℃，光照时间为１２ｈ／ｄ，光照强度为４０μｍｏｌ／（ｍ
２·ｓ）．
２　结果与分析
２．１　愈伤组织的诱导
研究发现，培养基中添加单一植物生长调节剂时，愈伤组织的诱导效果均不好．当２，４－Ｄ质量浓度为
２．０ｍｇ／Ｌ时诱导率最高为２３．８１％（表１）；６－ＢＡ质量浓度为１．０ｍｇ／Ｌ时诱导率最高为１２．５６％（表２）．在
·９４６·
河北大学学报（自然科学版） 第３３卷
含有不同质量浓度２，４－Ｄ和６－ＢＡ组合的培养基中愈伤组织诱导率较高，以培养基ＭＳ＋２，４－Ｄ　２．０ｍｇ／Ｌ＋
６－ＢＡ　０．５ｍｇ／Ｌ中的愈伤组织诱导率最高，达到了９２．０６％（表３），并且愈伤组织状态良好，黄绿色较疏松，
生长旺盛（图１）．
表１　２，４－Ｄ对华北八宝愈伤组织诱导率的影响
Ｔａｂ．１　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　２，４－Ｄ　ｏｎ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ｒａｔｅｓ　ｏｆ
ｔｈｅ　ｃａｌｕｓ　ｏｆ　Ｈｙｌｏｔｅｌｅｐｈｉｕｍ　ｔａｔａｒｉｎｏｗｉ
ρ（２，４－Ｄ）／（ｍｇ·Ｌ
－１） 接种数／块 诱导率／％
０　 ６３　 ０ａ
０．５　 ６３　 ５．２９±２．４３ａ
１．０　 ６３　 １６．９±６．０１ｂ
２．０　 ６３　 ２３．８１±３．１８ｂ
４．０　 ６３　 ０ａ
表２　６－ＢＡ对华北八宝愈伤组织诱导率的影响
Ｔａｂ．２　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　６－ＢＡ　ｏｎ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ｒａｔｅｓ　ｏｆ
ｔｈｅ　ｃａｌｕｓ　ｏｆ　Ｈｙｌｏｔｅｌｅｐｈｉｕｍ　ｔａｔａｒｉｎｏｗｉ
ρ（６－ＢＡ）／（ｍｇ·Ｌ
－１） 接种数／块 诱导率／％
０　 ６３　 ０ａ
０．５　 ６３　 ５．２９±０．９２ｂｃ
１．０　 ６３　 １２．５６±３．１８ｄ
２．０　 ６３　 ９．５２±１．５９ｃｄ
４．０　 ６３　 ４．２３±０．９２ａｂ
　　　　数据以ｘ±ｓ表示，Ｐ＜０．０５，标有相同字母的数据表示差异不显著，标有不同字母的数据表示差异显著．
表３　６－ＢＡ和２，４－Ｄ组合对愈伤组织诱导率的影响
Ｔａｂ．３　Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｍａｓｓ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ　ｏｆ　６－ＢＡ　ａｎｄ　２，４－Ｄ　ｏｎ　ｃａｌｕｓ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ｒａｔｅｓ
ρ（２，４－Ｄ）／
（ｍｇ·Ｌ－１）
ρ（６－ＢＡ）／
（ｍｇ·Ｌ－１）
接种数／块 诱导率／％ ρ
（２，４－Ｄ）／
（ｍｇ·Ｌ－１）
ρ（６－ＢＡ）／
（ｍｇ·Ｌ－１）
接种数／块 诱导率／％
０　 ０　 ６３　 ０ａ ０　 ０　 ６３　 ０ａ
０．５　 ０　 ６３　 ５．２９±２．４３ａ ２．０　 ０　 ６３　 ２３．８１±３．１８ｂ
０．５　 ０．５　 ６３　 ５６．０９±１．１３ｃ ２．０　 ０．５　 ６３　 ９２．０６±１．５９ｅ
０．５　 １．０　 ６３　 ６１．３７±０．９１ｃ ２．０　 １．０　 ６３　 ６１．９０±５．５０ｄ
０．５　 ２．０　 ６３　 ３８．０９±４．２０ｂ ２．０　 ２．０　 ６３　 ４９．７４±４．００ｃ
０　 ０　 ６３　 ０ａ ０　 ０　 ６３　 ０ａ
１．０　 ０　 ６３　 １６．９３±６．０１ｂ ４．０　 ０　 ６３　 ０ａ
１．０　 ０．５　 ６３　 ７０．３７±６．０１ｄ ４．０　 ０．５　 ６３　 １８．５２±２．４２ｃ
１．０　 １．０　 ６３　 ４７．６２±５．７２ｃ ４．０　 １．０　 ６３　 １０．０５±１ＢＨ８３ｂ
１．０　 ２．０　 ６３　 ４１．８０±５．５７ｃ ４．０　 ２．０　 ６３　 ８．４７±０．９１ｂ
　　数据以ｘ±ｓ表示，Ｐ＜０．０５，标有相同字母的数据表示差异不显著，标有不同字母的数据表示差异显著．
ａ．刚接种的叶片；ｂ．叶片开始膨大；ｃ．开始产生愈伤组织；ｄ．叶片诱导出大量愈伤组织．
图１　２，４－Ｄ与６－ＢＡ配合对叶片愈伤组织的诱导效应
Ｆｉｇ．１　Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　２，４－Ｄ　ｉｎ　ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ　ｗｉｔｈ　６－ＢＡ　ｏｎ　ｃａｌｕｓ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ
２．２　不定芽的诱导
２．２．１　ＴＤＺ与６－ＢＡ组合对不定芽分化的影响
在含有不同质量浓度的ＴＤＺ或不同质量浓度配比的ＴＤＺ与６－ＢＡ组合的不定芽诱导培养基中，均未
有不定芽的分化，部分愈伤组织呈现嫩绿色且有所增殖，部分愈伤组织褐化或死亡．因此这类培养基组合不
·０５６·
第６期 张　璐等：华北八宝组织培养与再生体系的建立
适合华北八宝不定芽的分化培养．
２．２．２　ＴＤＺ与ＮＡＡ组合对不定芽分化的影响
在含有不同质量浓度配比的ＴＤＺ与ＮＡＡ的不定芽诱导培养基中，也均未有不定芽的分化，且未分化
的愈伤组织部分褐变或死亡．因此这类培养基组合同样不适合华北八宝不定芽的分化培养．
２．２．３　６－ＢＡ与ＮＡＡ组合对不定芽分化的影响
在含有不同质量浓度的６－ＢＡ或不同质量浓度配比的６－ＢＡ与ＮＡＡ组合的不定芽诱导培养基中，均有
不定芽的分化．愈伤组织在接入含６－ＢＡ与ＮＡＡ的不定芽诱导培养基后，１０ｄ内体积有所增大，颜色加深，
１５ｄ后开始出现绿色小突起，２０～２５ｄ时，部分愈伤组织开始丛生不定芽（图２）．在ＭＳ＋６－ＢＡ　１．０ｍｇ／Ｌ培
养基中不定芽的诱导率最高，达到８１．５２％（表４）．
ａ．ＭＳ＋６－ＢＡ　１．０ｍｇ／Ｌ培养基中愈伤组织刚分化出芽；ｂ．ＭＳ＋６－ＢＡ　１．０ｍｇ／Ｌ培养基中丛生不定芽．
图２　愈伤组织分化不定芽
Ｆｉｇ．２　Ａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓ　ｂｕｄ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｆｒｏｍ　ｃａｌｕｓ
表４　愈伤组织不定芽诱导率
Ｔａｂ．４　Ａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓ　ｂｕｄ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ｒａｔｅｓ
ρ（６－ＢＡ）／
（ｍｇ·Ｌ－１）
ρ（ＮＡＡ）／
（ｍｇ·Ｌ－１）
接种数／块
不定芽
诱导率／％
ρ（６－ＢＡ）／
（ｍｇ·Ｌ－１）
ρ（ＮＡＡ）／
（ｍｇ·Ｌ－１）
接种数／块
不定芽
诱导率／％
０　 ０　 ６３　 ０ａ ０　 ０　 ６３　 ０ａ
０．５　 ０　 ６３　 ２８．０２±３．９８ｃｄ　 ２．０　 ０　 ６３　 ７９．９２±１．８５ｅ
０．５　 ０．１　 ６３　 ３１．６８±３．１５ｄ ２．０　 ０．１　 ６３　 ６４．５６±２．７７ｄ
０．５　 ０．２　 ６３　 ２７．９６±４．２３ｃｄ　 ２．０　 ０．２　 ６３　 ６３．０３±１．６０ｄ
０．５　 ０．５　 ６３　 ２３．３３±２．４４ｃ ２．０　 ０．５　 ６３　 ３６．９７±５．７１ｃ
０．５　 １．０　 ６３　 １０．０１±２．４４ｂ ２．０　 １．０　 ６３　 １１．２２±３．２７ｂ
０　 ０　 ６３　 ０ａ ０　 ０　 ６３　 ０ａ
１．０　 ０　 ６３　 ８１．５２±３．２７ｅ ４．０　 ０　 ６３　 ０ａ
１．０　 ０．１　 ６３　 ７７．２７±３．３３ｅ ４．０　 ０．１　 ６３　 １．５９±１．５９ａｂ
１．０　 ０．２　 ６３　 ６７．２４±４．８４ｄ ４．０　 ０．２　 ６３　 ５．２９±２．４３ｂ
１．０　 ０．５　 ６３　 ４１．８１±４．８４ｃ ４．０　 ０．５　 ６３　 ２．１１±１．８３ａｂ
１．０　 １．０　 ６３　 １５．９０±２．７１ｂ ４．０　 １．０　 ６３　 ０ａ
　　数据以ｘ±ｓ表示，Ｐ＜０．０５，标有相同字母的数据表示差异不显著，标有不同字母的数据表示差异显著．
２．３　生根培养
不定芽在 ＭＳ和１／２ＭＳ　２种培养基中进行诱导培养，１０ｄ后，开始生出白色细根，最长可达到３～
４ｃｍ，成辐射状分布．培养３０ｄ后，２种培养基的生根率均可达到１００％．１／２ＭＳ培养基中每个植株的平均
根条数可达到５．９条，而 ＭＳ培养基中的平均根条数为４．０条（图３）．
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河北大学学报（自然科学版） 第３３卷
ａ．１／２ＭＳ培养基中的健壮再生苗；ｂ．再生苗根系．
图３　再生苗
Ｆｉｇ．３　Ｒｅｇｅｎｅｒａｔｅｄ　ｐｌａｎｔｓ
２．４　炼苗与移栽
生根苗炼苗移栽后，植株生长良好，１５ｄ后统计，移栽成活率可达９５％以上．
３　讨论
本研究发现，在培养基中单独附加２，４－Ｄ或６－ＢＡ，对愈伤组织的诱导效果均不显著，而质量浓度低于
４．０ｍｇ／Ｌ的２，４－Ｄ和６－ＢＡ配合使用时，愈伤组织的诱导率明显提高．在加入２，４－Ｄ和６－ＢＡ不同质量浓度
组合的培养基中，若２，４－Ｄ质量浓度低于６－ＢＡ或与之相同时，叶片膨大表现得较为明显，并且诱导出的愈
伤组织为深绿色且较致密．而在２，４－Ｄ质量浓度高于６－ＢＡ质量浓度时，叶片膨大现象不明显，诱导出的愈
伤组织为浅黄绿色且较疏松．较高质量浓度的２，４－Ｄ（４．０ｍｇ／Ｌ）不利于愈伤组织的诱导．ＭＳ＋２，４－Ｄ
２．０ｍｇ／Ｌ＋６－ＢＡ　０．５ｍｇ／Ｌ培养基的愈伤组织诱导率最高，达到了９２．０６％．王俊丽等［１０］在对华北大黄愈
伤组织诱导研究中发现，当不同质量浓度的６－ＢＡ分别与低质量浓度２，４－Ｄ配合使用时，对愈伤组织的增殖
效应十分明显，其中 ＭＳ＋６－ＢＡ　２．０ｍｇ／Ｌ＋２，４－Ｄ　０．２ｍｇ／Ｌ培养基的增殖效果较好，这与本研究的结果
不尽相同．
此外，本研究还发现，６－ＢＡ是影响不定芽分化的关键因素，在培养基中单独添加不同质量浓度的６－ＢＡ
或不同质量浓度配比的６－ＢＡ与ＮＡＡ组合，均可诱导不定芽的分化．这与文献所报道的细胞分裂素对组织
培养中不定芽的分化及增殖有着显著作用结论［１１－１２］相一致．张晓艳等［１３］研究了影响八宝景天愈伤组织诱
导、芽诱导、生根的主要因素，发现八宝景天叶片切块诱导愈伤组织的最佳培养基为 ＭＳ＋６－ＢＡ　２．０ｍｇ／Ｌ＋
ＮＡＡ　１．０ｍｇ／Ｌ，诱导率达９３．３％；ＭＳ＋６－ＢＡ　２ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ　０．１ｍｇ／Ｌ培养基有利于芽的分化和增殖．任
爽英等［１４］研究也发现，培养基中添加６－ＢＡ时对八宝景天不定芽的分化有促进作用．上述研究与本研究结果
相一致．
本研究以华北八宝幼嫩叶片为外植体建立了其组织培养再生体系，这对野生华北八宝的开发与利用有
着重要意义．
参　考　文　献：
［１］　中国科学院中国植物志编辑委员会．中国植物志：第３４卷：第１分册［Ｍ］．北京：科学出版社，１９８４：５２．
［２］　黄德娟，黄德超．我国名贵香草植物及应用价值研究［Ｊ］．北方园艺，２００７（３）：８０－８２．
ＨＵＡＮＧ　Ｄｅｊｕａｎ，ＨＵＡＮＧ　Ｄｅｃｈａｏ．Ｒｅｓｅａｒｃｈ　ｏｆ　Ｃｈｉｎａｓ　ｒａｒｅ　ｖａｎｉｌａｐｌａｎｔｓ　ａｎｄ　ｔｈｅｉｒ　ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ　ｖａｌｕｅ［Ｊ］．Ｎｏｒｔｈｅｒｎ　Ｈｏｒｔｉ－
ｃｕｌｔｕｒｅ，２００７（３）：８０－８２．
［３］　王建国．辽宁农业植物新品种保护工作成效及发展建议［Ｊ］．杂粮作物，２００６，２６（３）：２５４－封三．
·２５６·
第６期 张　璐等：华北八宝组织培养与再生体系的建立
ＷＡＮＧ　Ｊｉａｎｇｕｏ．Ｓｕｇｇｅｓｔｉｏｎｓ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ　ｅｆｆｅｃｔｉｖｅｎｅｓｓ　ｏｆ　ｎｅｗ　ｖａｒｉｅｔｉｅｓ　ｏｆ　ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　ｐｌａｎｔｓ　ｉｎ　Ｌｉａｏｎｉｎｇ［Ｊ］．Ｒａｉｎ
Ｆｅｄ　Ｃｒｏｐｓ，２００６，２６（３）：２５４－ｃｏｖｅｒⅢ．
［４］　熊敏瑞．植物新品种保护与农村经济发展［Ｊ］．河北农业科学，２００８，１２（２）：１５５－１５６，１５８．
ＸＩＯＮＧ　Ｍｉｎｒｕｉ．Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｎｅｗ　ｐｌａｎｔ　ｖａｒｉｅｔｉｅｓ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ｏｆ　ｒｕｒａｌ　ｅｃｏｎｏｍｉｃ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｈｅｂｅｉ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒ－
ａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，２００８，１２（２）：１５５－１５６，１５８．
［５］　郑艳，钱啸虎，姚胜．安徽景天科Ｃｒａｓｓｕｌａｃｅａｅ植物的分类研究［Ｊ］．安徽师大学报；自然科学版，１９９４，１７（４）：６９－７５．
ＺＨＥＮＧ　Ｙａｎ，ＱＩＡＮ　Ｘｉａｏｈｕ，ＹＡＯ　Ｓｈｅｎｇ．Ｒｅｓｅａｒｃｈ　ｏｎ　ｔｈｅ　Ｔａｘｏｎｏｍｙ　ｏｆ　Ｃｒａｓｓｕｌａｃｅａｅ　ｉｎ　Ａｎｈｕｉ　Ｐｒｏｖｉｎｃｅ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ
Ａｎｈｕｉ　Ｎｏｒｍａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ：Ｎａｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９９４，１７（４）：６９－７５．
［６］　孙元发，王志刚．黑龙江省的野生景天科植物及其价值［Ｊ］．林业科技情报，２００４，３６（２）：４－７．
ＳＵＮ　Ｙｕａｎｆａ，ＷＡＮＧ　Ｚｈｉｇａｎｇ．Ｗｉｌｄ　ｏｒｐｉｎｅ　ａｎｄ　ｔｈｅｉｒ　ｖａｌｕｅ　ｉｎ　ｈｅｉｌｏｎｇｊｉａｎｇ　ｐｒｏｖｉｎｃｅ［Ｊ］．Ｆｏｒｅｓｔｒｙ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　ａｎｄ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ
Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ，２００４，３６（２）：４－７．
［７］　ＷＡＮＧ　Ｊｕｎｌｉ，ＷＡＮＧ　Ｑｉａｎ，ＷＡＮＧ　Ｊｕｅ，ｅｔ　ａｌ．Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｐｌａｎｔ　ｇｒｏｗｔｈ　ｒｅｇｕｌａｔｏｒｓ　ｏｎ　ｍｉｃｒｏ－ｔｕｂｅｒ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ａｎｄ
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（责任编辑：赵藏赏）
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