全 文 ：收稿日期: 2006 12 16
作者简介: 谢怡青 ( 1977 ) ,女 ,广东梅州人 ,农艺师 ,主要从事植物组织培养方面的研究。
猪笼草组培快繁技术研究
谢怡青 ,　谢雄辉 ,　丘亮伟 ,　黄愉光
(梅州市农业科学研究所 ,　广东梅州　 514011)
摘要: 以猪笼草的顶芽和腋芽为外植体进行组培快繁研究 ,结果表明:在 1 /2M S+ 6-BA 1mg /L+ NAA 0. 1mg /
L培养基中培养 10d后 ,能诱导出幼芽 ; 1 /2MS+ 6-BA 2mg /L+ NAA 0. 1mg / L培养基对丛生芽的增殖效果最好 ,
增殖倍数达 4. 1;生根培养基以 1 /4M S+ 6-BA 0. 1mg / L+ NAA 0. 5mg /L为最佳 ,生根率可达 95%以上。
关键词: 猪笼草 ;组织培养 ;快速繁殖
中图分类号: Q949. 749. 3; S336　 文献标识码: B　　　　　文章编号: 1002— 8161( 2007) 02- 0131- 02
Tissue culture and rapid propagation of Nepenthes mirabilis
XIE Yi-qing , XIE Xiong-hui, QIU Liang-w ei, HU ANG Yu-guang
(Meizhou Institute of Agricultural Sciences, Meizhou , Guangdong 514011, China )
Abstract: The top buds and axillar y buds of Nepenthes mirabilis used a s explants for tissue culture and rapid
propagation w ere studied. The r esults showed that the young buds could be induced after 10 day s cultured on the
medium 1 /2M S+ 6-BA 1mg / L+ NAA 0. 1mg /L. The 1 /2M S medium with 6-BA 2. 0mg /L and N AA 0. 1mg /L
w as the best fo r multiplica tion cultur e o f clumpy buds and the multiplica tion coefficient w as 4. 10. The 1 /4M S
medium with 6-BA0. 1mg /L and NAA 0. 5mg /L w as the best fo r inducing r oo ts f rom shoots and the r oo tag e ratio
w as above 95% .
Key words: Nepenthes mirabilis ; tissue culture; rapid pr opaga tion
　　猪笼草为猪笼草科猪笼草属多年生草本植物 ,
是热带食虫植物的代表种 [1 ]。 其由叶片变化而来的
笼状变态叶造型独特 ,用作盆栽或吊盆观赏 ,优雅别
致 ,观赏价值高。同时其具有食虫特性 ,奇趣无比 ,是
环保灭虫的绝佳选择 ,也是目前食虫植物中最令人
青睐的种类之一。 由于猪笼草雌雄异株 ,结实率低 ,
且种子萌发慢 ,发芽率低 ,而扦插繁殖生根慢 ,不易
成活。 为此 ,我们以猪笼草的顶芽和腋芽为试验材
料 ,通过组织培养研究 ,成功地培育出猪笼草植株。
1　材料与方法
1. 1　材料
猪笼草母株由市场购买 ,以其顶芽和腋芽为外
植体。
1. 2　方法
1. 2. 1　消毒　在生长季节选取健壮无病虫害植株
的顶芽或带腋芽的茎段 ,用自来水冲洗干净 ,剪去叶
片 ,注意切口的平整。在超净台上用 70%的酒精浸泡
30s,再置 0. 1% HgCl2溶液中消毒 12min,添加吐温
2～ 3滴 ,无菌水冲洗 5～ 6遍。
1. 2. 2　培养基　以 M S和 1 /2M S为基本培养基 ,加
入 3%蔗糖、 0. 7%卡拉胶粉 , p H5. 8。 不同培养阶段
分别附加相应的生长素和细胞分裂素 ,并在增殖阶
段和生根阶段设置不同浓度、配比处理。其中在外植
体诱导及增殖阶段 ,设加入激素 6-BA及不同 M S浓
度进行比较 ,共 4个处理 ;在生根阶段设不同的 MS
浓度及添加活性炭进行比较 ,共 4个处理。
1. 2. 3　培养条件　培养温度 25～ 28℃ ,光照度 1500
～ 2000lx ,光照 12h /d。
1. 2. 4　移栽　幼苗种植在由沙和珍珠岩 ( 1∶ 1)混
合成的基质中。
2　结果与分析
2. 1　外植体的诱导
将消毒好的外植体切掉基部伤口褐化部分 ,切
成 2～ 3cm带芽点的茎段 ,接入诱导培养基 1 /2M S+
6-BA 1mg /L+ N AA 0. 1mg /L内 ,注意伤口的圆滑
平整 ,减少褐化。培养 7d后 ,转入新的同种培养基中
防止褐化。 10d后芽开始萌动生长 , 30d后在所有培
养基上 ,叶腋都有新分化的丛生芽产生。部分培养基
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中的外植体产生大量愈伤组织 ,丛生芽形成的数量
各有不同。
2. 2　不同浓度 6-BA对丛生芽增殖的影响
将丛生芽切割 ,分接在①～ ④培养基里 (见表
1) ,观察其变化。 从表 1可以看出 ,接种在以 1 /2M S
为基本培养基的猪笼草丛生芽长势旺盛 ,丛生芽苗
生长正常 ,基部不产生或产生少量愈伤组织 ,褐化较
轻 ;而接种在以 M S为基本培养基的丛生芽苗分化
较多 ,但长势较弱 ,基部产生较多愈伤组织 ,褐化较
严重。说明丛生芽的增殖倍数随 6-BA浓度的增加而
不断增殖 ,因此可选定 1 /2M S+ 6-BA 2mg /L +
N AA 0. 1mg /L为芽增殖最佳配方。
表 1　不同浓度 6-BA对丛生芽增殖的影响
处理 接种芽数
(个 )
增殖芽数
(个 ) 增殖倍数 苗长势
① 1 /2M S+ 6-BA 1mg /L+ N AA 0. 1mg /L 20 56 2. 8 旺盛、丛生芽正常
② M S+ 6-BA 1mg /L+ NAA 0. 1mg /L 20 70 3. 5 丛生芽多 ,长势不正常
③ 1 /2M S+ 6-BA 2mg /L+ N AA 0. 1mg /L 20 64 3. 2 旺盛、丛生芽正常
④ M S+ 6-BA 2mg /L+ NAA 0. 1mg /L 20 82 4. 1 丛生芽多、不正常 ,少量玻璃化
2. 3　不同激素配比对组培苗生根的影响
待丛生芽长至 3～ 4cm高时 ,切下接种到 ( 1)～
( 4)培养基内 (见表 2) ,经培养可观察到所有培养基
都能生根 ,根刚长出时较白 ,后生出黑色根毛 ,一般
在 30～ 40d左右形成完整根系。其中 ( 1)、 ( 2)处理的
切口有少量褐变 ,形成的根较粗 ,而 ( 3)、 ( 4)处理未
发现褐变 ,但形成的根较细。在 MS浓度上 , 1 /4M S
比 1 /2M S生根慢 ,但产生的根较粗壮 ,较短 ,生根率
较高 ; 1 /2M S生根较快 ,根较细 ,较长 ,生根率较低 ,
说明 1 /4M S+ 6-BA 0. 1mg /L+ N AA 0. 5mg /L为
理想生根培养基。
表 2　不同激素配比对组培苗生根的影响
处理 接种株数
(株 )
生根株数
(株 )
生根率
(% )
生根数
(条 )
( 1) 1 /2M S+ 6-BA 0. 1mg /L+ N AA 0. 5mg /L 20 18 90 8～ 10
( 2) 1 /4M S+ 6-BA 0. 1mg /L+ N AA 0. 5mg /L 20 19 95 8～ 10
( 3) 1 /2M S+ 6-BA 0. 1mg /L+ N AA 0. 5mg /L+ 0. 05%活性炭 20 16 80 6～ 8
( 4) 1 /4M S+ 6-BA 0. 1mg /L+ N AA 0. 5mg /L+ 0. 05%活性炭 20 17 85 6～ 8
2. 4　移栽
当不定根长至 1. 5cm以上时 ,在自然光照下炼
苗 12d,再打开瓶盖炼苗 2d,然后用镊子从培养瓶中
小心取出试管苗 ,放入盛有自来水的大盆里 ,轻轻洗
去基部附着的培养基 ,但注意不要损伤根系。最后栽
入由沙和珍珠岩各半混合成的基质中 ,注意浇水、遮
荫、保温 ,成活率可达 95%以上。
3　小结与讨论
3. 1　大多数植物应在其生长初期采样较好 ,生长末
期采样 ,外植体在培养基中反应迟钝或不能培养成
功 [2 ]。本试验结果表明 ,在猪笼草组培快繁中 ,利用
健康植株的顶芽和腋芽为外植体诱导不定丛芽 , 1 /2
M S比 MS更能诱导出正常的丛芽 ,而增加 6-BA的
浓度能显著提高增殖率。 其中以 1 /2M S+ 6-BA
2mg /L + N AA 0. 1mg /L培养基对丛芽诱导增殖
效 果最好 ,而生根培养基则以 1 /4M S+ 6-BA
0. 1mg /L + N AA 0. 5mg /L为最佳 ,生根率可达
95%以上。
3. 2　在猪笼草组织培养过程中 ,褐化现象较为严
重 ,而缩短转瓶周期常常可以减轻褐变 [3 ]。但本试验
采用及时转瓶、添加抑制剂等方法 ,效果一般。李浚
明、谭文澄等认为 ,在植物组织培养中加入一些植物
器官的汁液 ,如椰子汁、番茄汁等 [ 4, 5] ,有利于愈伤组
织 (或不定芽 )的增殖。本试验同时发现 ,在猪笼草增
殖过程中 ,基部产生的愈伤组织对丛芽的产生和增
殖有一定的影响 ,具体原因有待进一步研究和探讨。
参考文献:
[ 1]　陈健妙 ,高培元 ,甘铨 .猪笼草的组织培养和快速繁殖
[ J].植物生理学通讯 , 2003, 39( 2): 40.
[ 2 ]　熊丽 ,吴丽芳 .观赏花卉的组织培养与大规模生产
[ M ].北京:化学工业出版社 , 2002. 31～ 32.
[ 3]　潘瑞炽 .植物组织培养 [M ].广州: 广东高等教育出版
社 , 2001. 55.
[ 4]　李浚明 .植物组织培养教程 [ M ].北京: 中国农业大学
出版社 , 1992. 33.
[5 ]　谭文澄 ,戴策刚 .观赏植物组织培养技术 [M ].北京:中
国林业出版社 , 1991. 106.
(责任编辑　林　涛 )
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