全 文 ：祁州漏芦(Rhaponticum uniflorum)为菊科(Compositae)
漏芦属(Rhaponticum)多年生草本植物，为中国药典收
载品种，在我国广泛分布于华北、东北和西北诸省，主
产于辽宁省、内蒙古自治区、河北省[1]。祁州漏芦入药
部位为其根，具有清热解毒、消肿排脓、下乳、舒筋通
脉之功效[2]。蒙医认为祁州漏芦具有杀“粘”、止刺痛、
清热、解毒、解表等功效，临床用于治疗肠刺痛、瘟
热、发症、结喉、麻疹、毒热、心热、血热、新陈热、
伤热等[3]，在临床上用于治疗降血脂和抗氧化作用已取
得了较好疗效[4]。药理实验表明，祁州漏芦具有较好的
抗动脉粥样硬化、抗脂质过氧化、免疫促进、改善脑功
能、抗衰老等作用[5]。
由于近年旅游开发以及自然环境的破坏和无节制
的采挖，野生状态的漏芦资源已急速下降，又由于漏芦
属植物为多年生草本，自然生长十分缓慢，野生资源更
趋于枯竭。为解决药材资源的可持续利用，开展祁州
漏芦的组织培养及快速繁殖的研究，就显得更为迫切和
重要。笔者查阅大量资料看到，关于漏芦属植物的组织
培养研究有少数报道，但关于祁州漏芦的组织培养尚未
见相关报道。本研究旨在通过对祁州漏芦组织培养的研
究，为建立其快速繁殖体系提供依据。
1 材料与方法
1.1 材料
本实验所用祁州漏芦采自于黑龙江大庆高新区一营
草甸，经哈尔滨医科大学大庆校区刘金杰教授鉴定为祁
州漏芦。
1.2 培养基与培养条件
采用MS基本培养基，添加0.7％琼脂、3％蔗糖及不
同浓度的植物生长调节剂，调节pH值至5.8，121℃高
祈州漏芦的组织培养与快繁技术研究
赵春艳1，刘金成1，方 坤1，王宏波2
（1 哈尔滨医科大学大庆校区， 黑龙江大庆 163319；2 哈尔滨医科大学附属五院， 黑龙江大庆 163319）
摘 要：目的：对祁州漏芦愈伤组织诱导培养基和生长的培养条件进行研究，构建祁州漏芦快速繁殖体系。方
法：通过筛选外植体，添加不同种类及浓度的生长调节剂对祁州漏芦进行愈伤组织诱导、芽增殖培养及生根培养。
结果：诱导愈伤组织适宜培养基：MS+0.3mg/L NAA+3.0mg/L 6-BA；芽增殖培养以MS+0.3mg/L NAA+5.0mg/L 6-BA
为宜；生根培养以1/2MS+0.1mg/L NAA为佳。结论：利用组织培养技术能够实现祁州漏芦快速繁殖。
关键词：祁州漏芦；组织培养；快速繁殖
压灭菌30min，备用。所有培养均在以下条件下进行：温
度(25±1)℃ ，光照时间12h/d，光照强度1 500—2 000lx。
1.3 方法
取长势良好的祁州漏芦茎尖、茎段和叶片做为外
植体原料，进行清洗、消毒和接种。清洗的程序如下：
自来水粗洗→1％洗衣粉水洗去表面尘土→流水冲洗
30min→蒸馏水冲洗1min→用无菌纱布擦干→置于超净
工作台上。
消毒与接种的步骤：在超净工作台上将材料放置
于70％酒精中漂洗30s→0.1％ HgCl消毒8min→无菌水
冲洗7—8次。然后将消毒后的茎段剥去外皮，切成长
约0.5—1cm的小段，茎尖切成0.2—0.5cm的小段，叶片
切成0.2cm大小的小块，接种于预先配制好的培养基上，
每瓶接种10个，将瓶封口，置于22℃条件下诱导愈伤
组织的形成。
2 结果与分析
2.1 诱芽培养
分别将不同部位的外植体接种到表1各培养基中，
发现不同外植体诱导愈伤组织有一定的差异，在茎尖、
茎段和叶片的愈伤组织诱导中，由3号培养基的激素浓
度配比诱芽效果最好，该组合下诱导的愈伤组织出芽率
高，生长快。
表1 诱导祁州漏芦不定芽的培养基配方
序号 基本培养基 NAA(mg/L) 6-BA(mg/L) 诱导率(％)
1 MS 0.1 1.0 60
2 MS 0.2 2.0 55
3 MS 0.3 3.0 80
4 MS 0.4 4.0 70
5 MS 0.5 5.0 76
基金项目：黑龙江省教育厅科学技术研究项目“大庆地区祁州漏芦资源的开发利用”（项目编号：2008-11531183）。
作者简介：赵春艳（1977— ），女，山东人，硕士研究生，讲师，研究方向为资源植物。
中国食物与营养 2011,17(10):28-29
Food and Nutrition in China
祁州漏芦的茎尖、茎段和叶片对愈伤组织诱导不一
样，在由3号培养基的激素浓度配比下试验结果表明，
愈伤组织的诱导及分化不定芽能力以茎尖为最好，茎段
次之，而叶片形成愈伤组织的能力最差（表2）。
表2 诱导祁州漏芦不定芽的培养基配方
外植体 接种块数 愈伤组织个数
出芽率
（％） 不定芽个数
茎尖 50 40 80 530
茎段 50 30 60 340
叶片 50 12 24 0
2.2 芽增殖培养
将诱导出来的愈伤组织及芽丛转到新的3种不同激
素组合的培养基上进行芽增殖培养：将初代培养基的
芽丛分离并切割成2cm的茎段，分别接种于MS+0.3mg/L
NAA+5.0mg/L 6-BA；MS+0.3mg/L NAA+10.0mg/L 6-BA；
MS+0.5mg/L NAA+10.0mg/L 6-BA培养基上，培养5d左
右，愈伤组织开始增殖。10d左右在一些愈伤组织表
面产生许多淡绿色突起，进而分化成不定芽。培养15d
时，调查愈伤组织分化成芽的情况，认为以MS+0.3mg/L
NAA+5.0mg/L 6-BA为最佳组合的芽增殖培养基。
2.3 生根培养
当无根苗长至1cm以上时，转接到1/2MS+L NAA
(0.05、0.10、0.20、0.40mg/L)培养基中诱导生根。其中，
1/2MS+0.10 mg/L NAA培养基中形成的根白色粗壮，且
生长快。3周时间便能产生良好的根系。
2.4 移栽定植
芽长到3—4cm时，切取健壮的植株转到生根培养
基上，所有的植株都能够正常生长，培养1周后，即诱
导出根，10d后每株可长出3—5条根，根长达4—5cm，
再培养一周，植株健壮，叶色浓绿，然后揭去纸盖练
苗。轻轻洗去根部培养基，移到小盆中，盖上塑料膜及
烧杯，保持较高的温度，10d后揭去塑料膜及烧杯，可
移栽到大田，小苗成活率95％。
3 结果
对祁州漏芦不同部位的外植体进行诱导，在相同消
毒处理下和同种培养基中，最佳诱导外植体为茎尖。本
实验确定了诱导愈伤组织最佳培养基：MS+0.3mg/L
NAA+3.0mg/L 6-BA；最佳芽增殖培养为MS+0.3mg/L
NAA+5.0mg/L 6-BA；最佳生根培养为1/2MS+0.1mg/L NAA。
4 结论
采用诱导祁州漏芦茎尖产生愈伤组织的方法可加快
祁州漏芦的繁殖，可在较短期内产生大量丛生芽，然后
诱导生根，从而加快繁殖速度。本实验证明，利用组织
培养技术能够实现祁州漏芦快速繁殖。◇
参考文献
［1］余孝东，梁卫文，杨淑华，等. HPLC法测定漏芦药材
中β-蜕皮甾酮的含量. 中药材，2002, 25(5): 331-332.
［2］刘斌，石任兵，涂光忠，等. 祁州漏芦水煎液中二萜化
合物Diosbulbin-B的分离鉴定. 北京中医药大学学报，
2004, 27(6): 58-60.
［3］内蒙古卫生厅. 内蒙古蒙药材标准. 赤峰：内蒙古科技出
版社，1987: 511.
［4］布日额，东格尔道尔吉，其其格玛. 漏芦属植物化学成
分及生物活性研究进展. 中国民族民间医药杂志，2004,
70: 291.
［5］张永红，张建钢，谢捷明，等. 祈州漏芦根中的三萜成
分. 中国中药杂志，2006, 30(23): 1833.
Tissue Culture and Rapid Propagation of Rhaponticum uniflorum
ZHAO Chun-yan1, LIU Jin-cheng1, FANG Kun1, WANG Hong-bo2
(1 Harbin Medical University Daqing Campus, Daqing 163319, China;
2 Five Affi liated Hospital of Harbin Medical University, Daqing 163319, China)
Abstract: 【Objective】 To provide some new evidences for rapid propagation of Rhaponticum uniflorum through studying on
medium with callus tissue culture and the condition of growth．【Method】 Callus tissue induction, bug proliferation culture, rooting
culture of Rhaponticum uniflorum were conducted by explants selecting and growth regulator adding different hormones.【Result】
The appropriate medium for different culture stages were MS+0.3mg/L NAA+3.0mg/L 6-BA in callus culture induction, MS+0.3mg/L
NAA+5.0mg/L 6-BA in differentiation and subculture of cluster buds, 1/2MS+0.1mg/L NAA in rooting culture．【Conclusion】Rapid
propagation can be achieved with plant tissue culture in Rhaponticum uniflorum．
Keywords: Rhaponticum uniflorum；tissue culture；rapid propagation
29第10期 赵春艳等：祈州漏芦的组织培养与快繁技术研究