全 文 ：第 7卷 第 4期
19 89年 1 2月
江 西
! J ANGX I溉 !E蒸。 Vol 。 D e乙 No` 49 9 8 1
白 苞 篙 的 组 织 培 养 *
江 洪 如
(江 西省科学院生物资源研究所 , 南昌 )
【提要】 白芭高外植休在附加有生长素的 M S 培养基中能诱导出愈伤组 织 。 呈
硫松状 的愈伤组 织时芽的分化有利。 不 同浓度和组合的激素衬器官分化有一定的影
响 。 再生植株的移栽成活率达 90 % 以 上 。
【关键词】 白艺篙 , 组织培养 , 器 官分化
白苞篱 ( A : t 。从 i : l’a l 。 。 t l’j l 。二 W al l ) 系菊科篙属一年生宿根草本植物 。 白苞篙在
医药上具有平喘 , 消痰 , 止咳的功能 。 植株含有一种挥发油 , 其对于治疗喘息型慢性气管炎
有特殊疗效 [ ` 王。 白苞篙是野生植物 , 零星分布于海拔 10 一 4 0 m 的山地丘陵 , 资源难以保证
药用需要 。 加上白苞篙种子发芽率低 , 只有 8 . 95 % 〔 2 ] , 从而大大影响其繁殖率 。 通 过 白苞
高的组织培养 , 可以加速无性繁殖 , 为药材资源开辟新的途径 。
材 料 和 方 法
1
。 供试材料 取自江西奉新科研站的当年生植株 , 本实验室的盆栽植株及组织培养的再 -
生植株。
乞 方法 切下白苞篙的幼嫩茎 、 叶片 、 叶柄经 70 %的酒精表面消毒 30 5 , 再用 2一 4% 的
安替福明溶液浸泡 10 m in ; 或直接用 0 . 1% 升汞溶液进行表面消毒 8 一 10 m in , 然后用无菌水
冲洗 4一 5 次 ,在无菌条件下将茎及 叶柄切 成 0 . c4 m 左右的小段 , 叶片切成 。 . 4 x 0 . c4 m 2的小
块 , 分别接种于补加不同成分和浓度的激素的 M S培养基上 。 蔗搪浓度为 3 % ,用 0 . 8%琼脂作
固化剂 , p H值调至 5 · “ , 温度控制在“ “一“ “ ℃之间 。 诱导愈伤组织采用暗培养 , 分化培养则 ·
给予 2 5 0 L 二 x 荧光的光照 , 每天照光 1 h0 。
实 验 结 果
.
.1 愈伤组织的诱导
’
( 1 ) 激紊的作用 生长素的有无 , 对白苞篙的愈伤组织诱导起了重要的作 用 。 在 M S
培养基中 , 如果是单加。 . SP p m 6 一 B A , 则不能诱导产生愈伤组织 。 但是 , 当培养基中单加
生长素或李长素与细胞分裂素混合使用时 , 愈伤组织则产生 ( 表 1 ) 。
从表 1可以看出 , 在激素浓度及组合适 当时 ( 如 l 号培养基 ) ,愈伤率达 10 0% 。 材料经
本文于 1 9 8 9年 4 月 7 日收到 。
· 本工作曾得到中国科学院北京值物研究所李国凤副研究员的指导 , 特此致谢 。
DOI : 10. 13990 /j . i ssn1001 -3679. 1989. 04. 009
白苞禽的组织培养
接种 3天后 , 其表面就开始膨大 , 至一周时 , 基本上都有淡黄色的小瘤状粒出现 , 结构呈疏
松状 。 接种约两周后 , 愈伤组织生长达旺盛期 , 整个外植体被愈伤组织占满 , 这时即可转移
到分化培养基中。 若不及时转移 , 培养至 50 天时 , 愈伤组织块便逐渐黄褐 。
裹 1 傲素对白苞禽叶片愈伤组织诱导的影晌
伤征
特织愈组组
别
( M S )
处
NA 人
理
IB A
吧 g 1/ ) _ _ _ _ 接 种 产生愈伤 诱导频率
6
一
B人 K T 块 数 组织块数 ( % ) 愈 伤组织颜色
940720700
。
5 3 6 3 4 白 致密、 平滑
026319
0
。
2
( 0 ` 5 )
0
。
5
0
。
5
3 1
3 6
凡h钾Ino勺乙0 。 5 2 O
V 0
.
5
黄白 疏松 、 小瘤状
黄白 较疏松
淡黄绿 较致密 、 平 滑
( 2 ) 不同材料愈伤组 织诱导率的差异 白苞篙的叶及叶柄 、 茎段均能产生愈伤组织 ,
但各种外植体的愈伤组织诱导率不同 。 叶片的诱导率最高 , 其次为叶柄 , 茎段外植体的效果
最差 , 而且愈伤组织长势差 。 春季的幼嫩材料比夏末的老叶 、 老茎的脱分化能力强 。 但同龄
期的试管苗和实生苗的愈伤组织 的诱导无明显的差异 ( 表 2 ) 。
表 2 不同材料的愈伤组织诱导率的比较 .
材 料
外植体数目
愈伤组织诱导率 ( % ) , .
愈伤块生长势
幼嫩叶片 幼嫩叶柄 幼嫩茎段
4 5
4 4
一般
老叶
27差1487好丹hCU310好
. 均在表 1 中 皿号培养基中培养 ; 帐粗愈伤组织数 /外植休数 ) x 10
2
. 分化苗的再生
将培养两周左右的叶片及叶柄愈伤组织块转入再分化培养基 。 一般一块愈伤组织可切成
三至四块进行分化培养 。 愈伤组织经分化培养约 15 一 25 天 , 其表面陆续有绿点出现 , 这些绿
点有一部分很快长成小苗 。 肉眼可辨的绿芽点到 cZ m 高的小苗 , 只需一个月左右 。 在分化培
养中 , 不同浓度和组合的生长素对愈伤组织的器官分化有一定的影响 ( 表 3 ) 。
表 3 不同浓度和组合的激紊对器官分化的效果
情乞分芽培养基号
( M S )
生 长
N人A
素 ( m g / 1 )
I B A
细胞分裂素 ( m幻 l) 况
根zt儿LǔK
一AǔBù内匕一
偶尔有一条根
有
有
有
有无
.5 6 江西科学 1 9 8 9年 第 4期
6 一 B A在浓度适当且与 N A A组合时 ( I号 ) , 可发生芽的分化 , 而 兀 、 兀 、 万号几 种
组合 , 都只有根的分化 。 此外 , 愈伤组织块的结构对以后器官分化影响也较大。 黄白疏松找
的愈伤决则易发生芽 的分化 ;而致密的愈伤块多是分化根 , 并且先分化根的不再有芽的发生 。
本次实验初步结果 , 茎段愈伤组织长势较差 , 未能获得茎段外植体的分化芽 。
8
. 完整植株的形成及移栽
当无根苗高 1 c m 时 , 便可将苗基部从组织块上切下 , 转移至不含在何激素的 ( 1 / 2 )
M S培养基中 ,培养达一周 ,茎基部可长出 2 一 3 条新根 , 约三周后 , 即可将再生植株移栽 于
装有沙 : 泥土为 1 : 3的盆中。 移栽易成活 , 其成活率可达 90 %以上 。 在本次实脸中 , 已经培养
出三代再生苗 。 小 结
白苞篙外植体愈伤组织的诱导 , 如无生长素而仅有细胞分裂素是不能产生效果的 ( 见表
1 )
。 这又一次证明了 S k 。 。 g ( 1 95 7 ) 和 M il l er 提出的在植物外植体的培养过程中 , 首先
对愈伤组织的诱导 , 生长素是必要的 【3 J 。 在芽的诱导过程中 , 6 一 B A 的效果比 K t 、 tZ 更为
朋显。 有关 白苞篙的组织培养 , 国内报道甚少 , 除李国珍 ( 1 9 8 8 ) I ` j有过报道外 , 未 曾见
过其他有关类似报道 。 本工作为白苞篙的加速繁殖 , 保证其药用需要 , 并使之在组织培养过
程中可能产生药用有效成分含量高于原母株的突变系 [ “ J , 提供了一定 的实验基础和依据 , 这
在理论上和实践上都是很有意义的 。
参 考 文 献
〔力 万阜昌等 : 白苞篙挥发油平喘作用和毒性实验观察 , 江西医药 , 1 9 8 3 ; ( 2 ) : 31 一 3
〔2〕 奉新科研站 : 白苞篙引种驯化栽培及其提油技术 , 江西科学 , 1 9 8 4 ; 〔 2 ) : 61 一 63
〔3〕 s k o o g F a 二 d 五遭i l l e r C O : C h e m i e a l : e g o l a t三o n o f g r o w t h 拄 u `1 o r g a n f o r -
m a t i o n i : : p l a n t t王s s u e e u l t u r e i n v i t r o . S y m p o s i a S o e E x P B i o l , 1 95 7 ; 1 1 : 1 1 8
〔 4〕 李国珍等 : 植物离体培养的染色体和同工酶的研究 , 中国植物学会五十五周年年会学
术论文摘要汇编 , 1 9 8 : 4 2
〔5〕 贺锡纯 .李: 青篙愈伤组织诱导分化及青篙素含量的变化 , 植物学报 , 1 98 3 , 2 5 ( 1 ) : 8了一盼
丁I SSUE C U L T U R E O厂 G HO S T P L AN T W O RMW 0 0 0
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T五e h o r 位 o n e s i n d i f f e r e n t e o n e e n t r a t i o n a n d e o m b i -
n a t i o n s h a d a e e r t a i n i n f l u o n e e u p o n o r g a n o g o n o s i s
.
A s u r v i v a l r a t e o f
左 r a n s p l a n t e d p l a a t l e t s o f r e g e n e r a t i o n w a s m o r e t h a n 9 0% 。
鱿e y w o r d: : G h o s t p l a n t w o r 皿 w o o d ; T i s s u e e u l t u r e , O r g a n o g o n o s i s