全 文 ：基金项目：新疆医科大学第十期大学生创新性实验计划项目（２０１５１０７６００２０）
作者简介：赵　爽（１９９５－），女，在读本科，研究方向：天然产物的活性筛选。
通信作者：周晓英，女，硕士，教授，硕士生导师，研究方向：天然产物的质量控制与活性筛选，Ｅ－ｍａｉｌ：ｘｙ＿ｚｈｏｕ＠ｑｑ．ｃｏｍ。
薄层扫描法测定毛头牛蒡子中牛蒡苷和苷元的含量
赵　爽，骆秀珍，唐　瑶，韦　朔，古丽阿扎提·买合买提，周晓英
（新疆医科大学药学院，乌鲁木齐　８３００１１）
摘要：目的　测定毛头牛蒡子中牛蒡苷和苷元的含量。方法　以氯仿－甲醇（１０∶１）为展开剂，在高效薄层
板上对毛头牛蒡子中的牛蒡苷及苷元进行分离，并以２８０ｎｍ为检测波长对毛头牛蒡子进行扫描测定。结果　牛
蒡苷和牛蒡苷元的线性范围分别为１．０２０～６．１２０、０．１０１～０．６０６μｇ；加样回收率分别为９９．７１％和９８．１１％，毛头牛
蒡子中牛蒡苷和苷元的含量分别为９３．７５ｍｇ／ｇ和２．０５ｍｇ／ｇ。结论　薄层扫描法简便、准确、重复性好，可用于
测定毛头牛蒡子中牛蒡苷和苷元的含量。
关键词：毛头牛蒡子；薄层扫描；牛蒡苷；苷元
中图分类号：Ｒ９１４　　文献标识码：Ａ　　文章编号：１００９－５５５１（２０１６）１２－１５６６－０３
ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００９－５５５１．２０１６．１２．０２０
Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ａｒｃｔｉｎ　ａｎｄ　ａｒｃｔｉｇｅｎｉｎ　ｉｎ　Ａｒｃｔｉｕｍ　ｔｏｍｅｎｔｏｓｕｍ　Ｍｉｌｌ
ｓｅｅｄｓ　ｗｉｔｈ　ＴＬＣＳ
ＺＨＡＯ　Ｓｈｕａｎｇ，ＬＵＯ　Ｘｉｕｚｈｅｎ，ＴＡＮＧ　Ｙａｏ，ＷＥＩ　Ｓｈｕｏ，Ｇｕｌａｚａｔ　Ｍａｈｍｕｔ，ＺＨＯＵ　Ｘｉａｏｙｉｎｇ
（Ｐｈａｒｍａｃｙ　Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｘｉｎｊｉａｎｇ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｕｒｕｍｑｉ　８３００１１，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｓｅｔ　ｕｐ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔｓ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｍｅｔｈｏｄ　ｏｆ　ａｒｃｔｉｎ　ａｎｄ　ａｒｃｔｉｇｅｎｉｎ　ｉｎ　Ａｒｃｔｉｕｍ
ｔｏｍｅｎｔｏｓｕｍ Ｍｉｌ　ｓｅｅｄｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ａ　ＴＬＣＳ　ｍｅｔｈｏｄ　ｗａｓ　ｕｓｅｄ．Ｔｈｅ　ｄｅｖｅｌｏｐｅｒ　ｗａｓ　ｃｏｎｓｉｓｔｅｄ　ｏｆ　ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ
ａｎｄ　ｎ－ｂｕｔｙｌ　ａｌｃｏｈｏｌ　ｏｆ　１０∶１，ａｒｃｔｉｎ　ａｎｄ　ａｒｃｔｉｇｅｎｉｎ　ｗｅｒｅ　ｉｓｏｌａｔｅｄ　ｂｙ　ｈｉｇｈ　ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ　ｔｈｉｎ　ｌａｙｅｒ　ｐｌａｔｅ　ａｎｄ
ｓｃａｎｎｅｄ　ａｔ　２８０ｎｍ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｔｈｅ　ｌｉｎｅｒ　ｒａｎｇｅｓ　ｏｆ　ｃａｌｉｂｒａｔｉｏｎ　ｃｕｒｖｅｓ　ｗｅｒｅ　１．０２０－６．１２０ｍｇ／ｍＬ　ａｎｄ　０．１０１－
０．６０６ｍｇ／ｍＬ　ｆｏｒ　ａｒｃｔｉｎ　ａｎｄ　ａｒｃｔｉｇｅｎｉｎ　ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅ　ｓａｍｐｌｅ　ｒｅｃｏｖｅｒｙ　ｒａｔｅ　ｏｆ　ａｒｃｔｉｎ　ａｎｄ　ａｒｃｔｉｇｅｎｉｎ
ｗｅｒｅ　９９．７１％ａｎｄ　９８．１１％ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｃｏｎｔｅｎｔｓ　ｏｆ　ａｒｃｔｉｎ　ａｎｄ　ａｒｃｔｉｇｅｎｉｎ　ｉｎ　Ａｒｃｔｉｕｍ　ｔｏｍｅｎｔｏｓｕｍＭｉｌ　ｓｅｅｄｓ
ｗｅｒｅ　９３．７５ｍｇ／ｇ　ａｎｄ　２．０５ｍｇ／ｇ　ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｔｈｅ　ｍｅｔｈｏｄ　ｉｓ　ｓｉｍｐｌｅ，ａｃｃｕｒａｔｅ，ｒｅｐｒｏｄｕｃｉｂｌｅ
ａｎｄ　ｃａｎ　ｂｅ　ｕｓｅｄ　ｔｏ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔｓ　ｏｆ　ａｒｃｔｉｎ　ａｎｄ　ａｒｃｔｉｇｅｎｉｎ　ｏｆ　Ａｒｃｔｉｕｍ　ｔｏｍｅｎｔｏｓｕｍ ｍｉｌ．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ａｒｃｔｉｕｍ　ｔｏｍｅｎｔｏｓｕｍ　Ｍｉｌ　ｓｅｅｄｓ；ＴＬＣＳ；ａｒｃｔｉｎ；ａｒｃｔｉｇｅｎｉｎ
　　毛头牛蒡 （Ａｒｃｔｉｕｍ　ｔｏｍｅｎｔｏｓｕｍ　Ｍｉｌｌ）在新疆
分布广泛，是新疆特有的药用植物，其干燥成熟果实
毛头牛蒡子在维吾尔医中用于多种疾病的治疗［１］。
毛头牛蒡子中含有氨基酸、多糖、木脂素、脂肪油等
多种化学成分［２－４］。有研究表明木脂素类化学成分
具有抗肿瘤、抗炎等活性［５－７］。本研究采用薄层色
谱扫描法测定毛头牛蒡子中牛蒡苷和牛蒡苷元的含
量，该法操作方便、快速，可为毛头牛蒡子的质量控
制提供依据，现报道如下。
１　仪器与试药
１．１　仪器　ＸＳ１０５型十万分之一电子天平（瑞士梅
特勒－托利多），ＲＥ－５２Ａ旋转蒸发仪器（上海亚荣生
化仪器厂），Ｌｉｎｏｍａｔ５薄层色谱点样器（ＣＡＭＡＧ），
薄层色谱点样针（ＣＡＭＡＧ），薄层色谱照相仪（ＲＥ－
ＰＲＯＳＴＡＲ３），ＴＬＣ　ＳＣＡＮＮＥＲ３薄层扫描仪（ＣＡ－
ＭＡＧ），薄层板加热器（ＣＡＭＡＧ），薄层色谱展开缸
（上海信宜仪器厂），超声清洗仪（ＳＫ３２００Ｈ，上海汉
克科学仪器有限公司）。
１．２　试药　毛头牛蒡子采集于新疆阿勒泰地区，经
新疆医科大学中医学院李永和主任药师鉴定为毛头
牛蒡 （Ａｒｃｔｉｕｍ　ｔｏｍｅｎｔｏｓｕｍ　Ｍｉｌｌ）的干燥成熟果
实，牛蒡子苷对照品（上海融禾医药科技有限公司，
　第３９卷　第１２期 新 疆 医 科 大 学 学 报 Ｖｏｌ．３９　Ｎｏ．１２
　２０１６年１２月 Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｘｉｎｊｉａｎｇ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｄｅｃ．２０１６
批号：０９０５１６），牛蒡苷元对照品（上海融禾医药科技
有限公司，批号：０９０７１２），甲醇、氯仿均为分析纯试
剂（天津市富宇精细化工有限公司）。
２　方法与结果
２．１　样品溶液的制备　精密称取毛头牛蒡子粉末
０．３００　０ｇ用石油醚回流脱脂后，将毛头牛蒡子粉末
置于锥形瓶中，加入甲醇３０ｍＬ，超声提取３０ｍｉｎ，
将提取液过滤，蒸干，残渣加适量甲醇溶解，定容至
１０ｍＬ，过０．２２μｍ微孔滤膜，备用。
２．２　对照品溶液的配制　精密称取牛蒡苷０．０１０　２
ｇ和牛蒡苷元０．０１０　１ｇ，分别加甲醇溶解定容至５
ｍＬ。吸取牛蒡苷和牛蒡苷元对照品溶液各５ｍＬ
和０．５ｍＬ，加甲醇定容至１０ｍＬ，作为混合对照品溶
液，备用（其中牛蒡苷和牛蒡苷元的浓度分别为
１．０２０ｍｇ／ｍＬ和０．１０１ｍｇ／ｍＬ）。
２．３　薄层层析及薄层扫描条件　高效硅胶Ｇ板（安
徽良臣）预先在１１０℃活化３０ｍｉｎ，冷却至室温备
用。分别取对照品溶液３μＬ、样品溶液２μＬ点于
薄层板，以氯仿∶甲醇（１０∶１）为展开剂展开，取出
晾干，在３６５ｎｍ下扫描。检测波长：２８０ｎｍ，带宽：
６ｍｍ，狭缝：４．００ｍｍ×０．３ｍｍ，扫描速度：２０ｍｍ／ｓ，
扫描结果见图１～３。
图１　混合对照品薄层扫描图
　
　　
图２　毛头牛蒡子样品薄层扫描图
　
　　
图３　毛头牛蒡子样品及混合对照品
的３Ｄ扫描图
２．４线性关系考察　精密吸取混合对照品溶液１．０、
２．０、３．０、４．０、５．０、６．０μＬ点于同一高效硅胶Ｇ板，按
“２．３”项下方法测定吸光度积分值，以混合对照品点
样量为自变量 （Ｘ），峰面积积分值为因变量（Ｙ），进
行线性回归，得牛蒡苷回归方程：Ｙ ＝２　１３１　Ｘ ＋
１　５０４．７，ｒ＝０．９９９　３；牛蒡 苷 元 回 归 方 程：Ｙ ＝
７７５．０４　Ｘ－２５５．３７，ｒ＝０．９９９　４。结果表明，牛蒡苷
和牛蒡苷元分别在１．０２０～６．１２０μｇ和０．１０１～０．
６０６μｇ范围内线性关系良好。
２．５　精密度试验　精密吸取混合对照品溶液２、４、６
μＬ，在１ｄ内分别测定相同点样量的对照品６份，为
日内精密度；分别测定相同点样量的样品各６份，连
续测定３ｄ，为日间精密度，操作方法同“２．３”项下。
结果牛蒡苷和牛蒡苷元日内精密度的ＲＳＤ分别为
１．８２％、２．３６％，牛蒡苷和牛蒡苷元日间精密度的
ＲＳＤ分别为１．１４％、１．３４％，表明精密度良好。
２．６　稳定性试验　精密吸取供试品溶液，按“２．３”
项下方法处理，于０、２、４、６、８、１２、２４、４８ｈ测定结
果，牛蒡苷和牛蒡苷元峰面积积分值的ＲＳＤ（ｎ＝
６）分别为１．５４％、１．９２％，表明供试品溶液在４８ｈ
内稳定性较好。
２．７　稳健性试验　稳健性试验是通过改变某个特
定的色谱参数，进行重复的试验，来考察结果是否随
着色谱参数的变化而产生改变。本试验通过对展开
剂的组成、饱和时间、展开剂的体积、相对湿度、扫描
时间及展开距离进行微小改变来考察稳健性。结果
这些改变对牛蒡苷和牛蒡苷元的影响较小，ＲＳＤ为
０．９４％～２．５８％，ＲＳＤ均＜３％，表明试验稳健性较
好，见表１。
表１　稳健性试验结果（ｎ＝６）
条件
牛蒡苷
峰面积ＳＤ　ＲＳＤ／％
牛蒡苷元
峰面积ＳＤ　ＲＳＤ／％
展开剂组成（±０．２ｍＬ） ７２．０６　 １．４１％ １６．６９　 １．１０％
饱和时间（±５ｍｉｎ） ４７．７７　 ０．９４％ ３４．３８　 ２．２４％
流动相体积（±５ｍＬ） ６６．０６　 １．３０％ ２３．４８　 １．５５％
相对湿度（±５％） ５９．６６　 １．１７％ ３９．３１　 ２．５８％
扫描时间（±５ｍｉｎ） ７１．８２　 １．４０％ １８．２８　 １．１７％
展开距离（±０．２ｃｍ） ５７．３６　 １．１１％ ２６．８１　 １．７５％
２．８　回收率试验　取已知含量的牛蒡苷和牛蒡苷元
的毛头牛蒡子粉末５份，分别加入牛蒡苷９．３７６ｍｇ、
牛蒡苷元０．２０４ｍｇ，加标样品按“２．１”项下方法提取，
按“２．３”项下方法展开及测定。结果牛蒡苷的平均回
收率为９９．７１％，ＲＳＤ＝１．１９％；牛蒡苷元的平均回收
率为９８．１１％，ＲＳＤ＝１．３８％ （ｎ＝５）。结果表明，该方
法用于测定牛蒡苷和牛蒡苷元含量准确可靠。
２．９　检测限和定量限　精密量取一定量的牛蒡苷
和牛蒡苷元对照品，用甲醇稀释成每１ ｍＬ 含
０．００５　１ｍｇ牛蒡苷和牛蒡苷元０．００４　０ｍｇ的溶液，
点于同一高效硅胶Ｇ板，分别点样１、２、３、４、５μＬ，
（下转１５７２页）
７６５１　第１２期 赵　爽，等：薄层扫描法测定毛头牛蒡子中牛蒡苷和苷元的含量
Ｓｃｈｒｅｎｋ［Ｊ］．Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ，２０１４，１９：５１－５９．
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ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｍａｊｏｒ　ａｎｔｈｏｃｙａｎｉｎｓ［Ｊ］．Ｆｏｏｄ　Ｃｈｅｍ，
２０１３，１３９：１－８．
［１７］　凌文华．膳食花色苷与健康［Ｍ］．北京：科学出版社，２０１４：
５１－５４．
［收稿日期：２０１６－９－１］
（本文编辑　施洋）

（上接１５６７页）
每个点点３次，按“２．３”项下条件展开，扫描。信噪
比Ｓ／Ｎ为３∶１时的样品浓度为检测限，信噪比Ｓ／
Ｎ为１０∶１时的样品浓度为定量限。结果牛蒡苷的
检测限为１５．３ｎｇ，定量限为５１．０ｎｇ；牛蒡苷元的检
测限为１２．０ｎｇ，定量限为４０．０ｎｇ。
２．１０　样品含量的测定　按“２．１”项下方法对毛头
牛蒡子样品进行提取，按“２．３”项下方法展开及测
定，计算样品中牛蒡苷和牛蒡苷元的含量，结果牛蒡
苷和牛蒡苷元的含量分别为９３．７５ｍｇ／ｇ和２．０５
ｍｇ／ｇ，见表２。
表２　毛头牛蒡子中牛蒡苷和牛蒡苷元含量（ｎ＝３）
样品序号 取样量／ｇ 牛蒡苷（ｍｇ／ｇ） 牛蒡苷元（ｍｇ／ｇ）
１　 ０．３００　１　 ９４．０３　 ２．１１
２　 ０．３００　７　 ９３．６６　 ２．０１
３　 ０．３００　９　 ９３．５６　 ２．０３
３　讨论
在供试品溶液的制备过程中，由于毛头牛蒡子
中含有大量的脂肪油，故在提取前需进行脱脂，避免
干扰，故采用石油醚回流脱脂。本研究考察了氯仿－
甲醇、氯仿－甲醇－冰乙酸、氯仿－甲醇－水－甲酸－冰乙酸
３种展开系统对毛头牛蒡子中的牛蒡子苷及苷元的
展开效果，结果氯仿－甲醇系统展开效果较好，且氯
仿－甲醇比例为１０∶１时展开所得薄层色谱图分离
效果最好，故采用此展开条件。方法学验证结果表
明，薄层色谱扫描法测定毛头牛蒡子中的牛蒡苷和
牛蒡苷元，操作简单、方便，线性、精密度、稳定性、稳
健性均良好，可用于毛头牛蒡子中牛蒡苷和苷元含
量的测定。
参考文献：
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新疆师范大学学报：自然科学版，２０１３，３２（４）：４１－４３．
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用及初步作用机制探讨［Ｊ］．中国药理学通报，２０１５，３１（６）：
８０５－８０９．
［６］　Ｗｕ　ＪＧ，Ｗｕ　ＪＲ，Ｓｕｎ　ＬＮ，ｅｔ　ａｌ．Ａｍｅｌｉｏｒａｔｉｖｅ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ａｒｃｔｉｎ
ｆｒｏｍ　Ａｒｃｔｉｕｍ　ｌａｐｐａ　ｏｎ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ　ｇｌｏｍｅｒｕｌｏｎｅｐｈｒｉｔｉｓ　ｉｎ　ｒａｔｓ
［Ｊ］．Ｊ　ｏｆ　Ｐｈｙｔｏｍｅｄ，２００９，１６（１１）：１０３３－１０４１．
［７］　Ｗｕ　Ｘ，Ｄｏｕ　ＹＮ，Ｙａｎｇ　Ｙ，ｅｔ　ａｌ．Ａｒｃｔｉｇｅｎｉｎ　ｅｘｅｒｔｓ　ａｎｔｉ－ｃｏｌｉｔｉｓ
ｅｆｆｉｃａｃｙ　ｔｈｒｏｕｇｈ　ｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇ　ｔｈｅ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｔｈ１ａｎｄ　Ｔｈ１７
ｃｅｌｓｖｉａａｎ　ｍＴＯＲＣ１－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ　ｐａｔｈｗａｙ［Ｊ］．Ｂｉｏｃｈ　Ｐｈａｒｍ，
２０１５，９６（１１）：３２３－３３６．
［收稿日期：２０１９６－４－１６］
（本文编辑　施洋）
２７５１ 新 疆 医 科 大 学 学 报 第３９卷