全 文 ：第 28 卷 第 2 期
2013 年 06 月
西 南 科 技 大 学 学 报
Journal of Southwest University of Science and Technology
Vol． 28 No． 2
June 2013
收稿日期:2013 － 10 － 17
项目基金:西南科技大学青年基金项目(09ZX3129) ;西南科技大学实验室开放基金(12xnkf36)。
作者简介:秦海燕(1975—) ，女，讲师，硕士，主要从事药用植物学的教学、科研工作。E － mail:qinhaiyan03@ 163． com。
HPLC法测定珠子参中人参皂苷 Ｒd的含量
秦海燕1 索志荣2 魏亚琴2
(1．西南科技大学生命科学与工程学院 四川绵阳 621010;2．西南科技大学分析测试中心 四川绵阳 621010)
摘要:采用反相高效液相色谱检测法测定了珠子参中人参皂苷 Ｒd 的含量。色谱柱为 Zorbax extend － C 18柱(250
mm ×4． 6 mm，5． 0 μm) ，流动相为乙腈 － 水(3565) ，流速为 1． 0 mL·min －1，检测波长为 205 nm。结果表明:人
参皂苷 Ｒd浓度在 11． 0 ～ 110． 0 μg·mL －1范围内线性关系良好，平均回收率(n = 6)为 97． 2%(ＲSD = 2． 5%)。
该法快速、灵敏、准确，可为珠子参的质量控制以及综合利用提供科学依据。
关键词:高效液相色谱法 珠子参 人参皂苷 Ｒd
中图分类号:Ｒ917 文献标志码:A 文章编号:1671 － 8755(2013)02 － 0092 － 03
HPLC Determination of Ginsenoside Ｒd Content
in Ｒhizoma Panacis Majoris
QIN Hai-yan1，SUO Zhi-rong2，WEI Ya-qin2
(1． School of Life Science and Engineering，Southwest University of Science and Technology，
Mianyang 621010，Sichuan，China;2． Analytical and Testing Center，Southwest University of
Science and Technology，Mianyang 621010，Sichuan，China)
Abstract:ＲP － HPLC was used for determining the content of Ginsenoside Ｒd in the rhizoma ranacis ma-
joris． The separation was performed under conditions of Zorbax extend － C 18 column (250 mm × 4． 6
mm，5． 0 μm) ，the mobile phase of acetonitrile － water(35∶ 65) ，the flow rate 1． 0 mL·min －1，and
the detection wave (205 nm)． The results show that tThe linear relationship is good when the density of
Ginsenoside Ｒd ranges between were 11． 0 ～ 110． 0 μg·mL －1(r = 0． 999 5) ，and the average recovery
rate (n = 6)is 97． 2%(ＲSD = 2． 5%)． The method is rapid，accurate and sensitive to control the
quality of rhizoma ranacis majoris and helps achieve an efficient utilization of it as well．
Key words:HPLC;Ｒhizoma Panacis Majoris;Ginsenoside Ｒd
珠子参又名珠儿参，为五加科植物珠子参
Panax japonicus C． A． Mey． var． major(Burk． )C．
Y． Wu et K． M． Feng 或羽叶三七 Panax japonicus
C． A． Mey． var． bipinnatifidus(Seem )C． Y． Wu
et K． M． Feng的干燥根茎，具有补肺、养阴、活络、止
血的功效，用于气阴两虚、烦热口渴、虚劳咳嗽、跌
打损伤、关节疼痛、咳血、吐血、外伤出血等症的治
疗［1］。化学研究表明，珠子参主要活性成分为皂苷
类成分［2］。药理实验表明皂苷类成分具有镇痛、镇
静［3］、提高免疫力［4，5］、抗肿瘤［6］等活性。对于珠子
参的质量控制有用薄层法鉴别竹节参皂苷Ⅳa 和人
参皂苷 Ｒ0
［7］及高效液相色谱法测定竹节参皂苷
Ⅳa［8］、齐墩果酸含量［9］等方法，而对珠子参不同部
位人参皂苷 Ｒd 的测定文献报道较少，本文采用高
效液相色谱法对一年生珠子参根、茎、叶中人参皂苷
Ｒd含量进行测定，为提高珠子参药材的利用率、建
立质量控制方法及综合利用等提供科学依据。
1 实验仪器与材料
1． 1 仪器
HP1260 高效液相色谱仪(美国 Aglient 公司) ;
优普超纯水制造系统(上海优普实业有限公司) ;
KQ5200 型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限
公司)。
1． 2 材料
人参皂苷 Ｒd(购自中国药品生物制品检定所，
供含量测定用，批号:111818 － 201001) ，纯度大于
99． 8%;珠子参药材为 2010 年 5 月采自四川青川，
一年生，经西南科技大学生命科学与工程学院候大
斌教授鉴定，为珠子参 Panax japonicus C． A． M ey．
var． major(Burk． ) ;乙腈和甲醇为色谱纯，水为超
纯水。
2 溶液配制
2． 1 供试品溶液的配制
分别将珠子参根、茎、叶在 60 ℃烘箱干燥 12 h，
研细过筛后分别取药材粉末约 600 mg，精密称定，
置烧杯中，用 80%甲醇超声提取 2 次，每次 30 min，
滤入 25 mL 容量瓶中，合并滤液，再用 80%甲醇定
容至刻度，摇匀。取适量用 0． 45 μm 微孔滤膜滤
过，作为供试品溶液。
2． 2 对照品溶液的配制
精密称定人参皂苷 Ｒd 对照品 5． 5 mg，置于 25
mL容量瓶中，甲醇溶解，定容，摇匀，得浓度为 0． 22
mg·mL －1的人参皂苷 Ｒd 对照品溶液，该溶液作为
对照品储备液，其它不同浓度的对照品溶液由储备
液稀释得到。
3 色谱条件
美国 Zorbax extend － C 18(250 mm × 4． 6
mm，5． 0 μm)色谱柱;流动相:乙腈 － 水(35∶ 65) ;
流速:1． 0 mL /min;检测波长:205 nm。对照品和样
品的色谱图见图 1。
4 方法学考察和样品测定
4． 1 线性关系考察
精密移取“2． 2”项所配的人参皂苷 Ｒd 储备液
一定体积于 10 mL 量瓶中，稀释，配成人参皂苷 Ｒd
浓度分别为 11． 0，22． 0，44． 0，66． 0，88． 0，110． 0
μg·mL －1对照品溶液，将上述对照品溶液分别平行
测定 3 次(均进样 10． 0 μL) ，以平均峰面积 Y 对浓
度 C(μg·mL －1)进行线性回归，人参皂苷 Ｒd 回归
方程和相关系数为:Y = 8． 53C + 20． 86，r =
0． 999 5，线性范围为 11． 0 ～ 110． 0 μg·mL －1。
图 1 对照品(A)和样品(B)的 HPLC图
Ｆｉｇ．1 HPLC chromatograms of reference substance and samples
4． 2 精密度实验
精密量取珠子参药材根供试品溶液 10． 0 μL，
重复进样 6 次，高效液相色谱仪进行测定，人参皂苷
Ｒd峰面积积分值的 ＲSD为 1． 9%。
4． 3 稳定性实验
以珠子参根供试品溶液作为样品溶液，在 8 h
之内每隔 1 h进行测定，结果人参皂苷 Ｒd峰面积积
分值的 ＲSD为 2． 1%(n = 9)。
4． 4 重复性试验
珠子参根粉末 6 份，各约 600 mg，精密称定，按
“2． 1”项配置方法操作，制备供试品溶液，高效液相
色谱仪进行测定，人参皂苷 Ｒd 含量的 ＲSD 为
2． 6%。
4． 5 加样回收率试验
珠子参根粉末 6 份，每份约 300 mg，精密称定，
分别精确加入人参皂苷 Ｒd 对照品储备液 4． 0 mL，
按“2． 1”项下供试品配制方法制备供试品溶液，进
行测定。人参皂苷 Ｒd的平均加样回收率 (n = 6)
为 97． 2%，ＲSD为 2． 5%。
4． 6 样品的测定
按“2． 1”项下操作制备供试品溶液，进样 10． 0
μL进行测定，用 Y = 8． 53C + 20． 86回归方程计算。
结果珠子参茎中未检出人参皂苷 Ｒd，叶和根中人参
皂苷 Ｒd含量分别为 0． 15%和 0． 28%。
39第 2 期 秦海燕，等 :HPLC法测定珠子参中人参皂苷 Ｒd的含量
5 讨论
5． 1 以回流提取法和超声波提取法对提取条件分
别进行考察，结果两种提取方法人参皂苷 Ｒd 提取
效率相差不明显，由于超声波提取法的方便且易于
操作，故采用超声波提取法作为制备样品的方法，同
时，考察了水、20%甲醇、40%甲醇、60%甲醇、80%
甲醇、甲醇以及提取时间、提取次数等提取条件，确
定了文中提取条件的提取产率最高。
5． 2 色谱条件的优化。先后考察了不同的色谱柱、
不同比例的乙腈 －水流动相以及不同的检测波长，
对检测条件进行优化，经多次实验，该实验的色谱条
件分离效果最好。
5． 3 检测意义。通过对珠子参植株各个器官的分
别检测，可以发现珠子参地上部分叶中也含有较高
的人参皂苷 Ｒd，植物茎主要是输导组织，这也是茎
中未检出人参皂苷 Ｒd 的原因之一，另外，可能与采
收季节有关，需后续实验进一步验证。珠子参地上
部分叶中含有较高的人参皂苷 Ｒd，因此，可以将珠
子参的叶进行采收利用，这不仅提高了生产效益，也
使珠子参的药用资源得到更充分的利用。
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