全 文 ：中南药学 2013 年 3 月 第 11 卷 第 3 期 Central South Pharmacy. March 2013, Vol. 11 No. 3
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（收稿日期： 2013-02-01； 修回日期： 2013-02-21）
珠子参总皂苷肠吸收机制研究
刘超，张欣，赵东东，王薇 *（陕西中医学院，陕西 咸阳 712036）
摘要：目的 研究珠子参总皂苷在大鼠的肠吸收动力学特征。方法 采用大鼠肠外翻模型，分别收集不同质量浓
度珠子参总皂苷给药后不同时间点的肠囊液样品，采用 HPLC对人参皂苷 Ro、竹节参皂苷Ⅳ a进行检测，计算其
吸收参数来分析其在肠道的吸收特征。结果 不同质量浓度的珠子参总皂苷中人参皂苷 Ro、竹节参皂苷Ⅳ a在各
肠段均为线性吸收，R2 均＞ 0.9，符合一级吸收；人参皂苷 Ro和竹节参皂苷Ⅳ a回肠累积吸收量和吸收速率高于
空肠（P＜ 0.05）。人参皂苷Ro和竹节参皂苷Ⅳ a在空、回肠中的吸收速率常数（Ka）随着剂量增加而增加（P＜ 0.05）。
结论 人参皂苷 Ro和竹节参皂苷Ⅳ a在回肠具有选择吸收性，在空、回肠中为被动转运。
关键词：珠子参总皂苷；肠外翻模型；高效液相色谱法；吸收机制
中图分类号：R965 文献标识码：A 文章编号：1672-2981(2013)03-0191-03
doi:10.7539/j.issn. 1672-2981.2013.03.010
Mechanism of intestinal absorption of total saponin in Panacis Majoris Rhizoma
LIU Chao, ZHANG Xin, ZHAO Dong-dong, WANG Wei * (Shaanxi University of Chinese Medicine, Xianyang Shaanxi
712036)
Abstract: Objective To study the dynamic absorption of total saponins in Panacis Majoris Rhizoma in the small intestines
of rats, and discuss the metabolism. Methods The absorption ingredients of Panacis Majoris Rhizoma were investigated by
the model of in vitro everted intestinal sac. The intestinal sac liquors of the jejunum and ileum were collected at different in-
tervals and ginsenoside Ro and chikusetsusaponin Ⅳ a were detected by HPLC as representative markers. The accumulative
absorption quantity and the constant of absorption rate (Ka) of ginsenoside Ro and chikusetsusaponin Ⅳ a were calculated.
Results At different concentrations of Panacis Majoris Rhizoma, ginsenoside-Ro and chikusetsusaponin Ⅳ a in various in-
testinal sections showed linear absorption (R2＞ 0.9), conformed to zero order absorption rate. In the jejunum and ileum the
Ka of ginsenoside Ro and chikusetsusaponin Ⅳ a increased with the raised dosage of Panacis Majoris Rhizoma (P＜ 0.05).
Conclusion At low dosage ginsenoside Ro and chikusetsusaponin Ⅳ a in the jejunum is selective, while in the jejunum and
ileum ginsenoside Ro and chikusetsusaponin Ⅳ a are passively absorbed.
Key words: total saponin in Panaois Majoris Rhizoma ; in vitro everted sac; HPLC; absorption
基金项目：国家自然科学基金项目（编号：81102805/H2803）；陕西省教育厅专项科研计划项目（编号：2010JK490）。
作者简介：刘超，男，硕士研究生，主要从事中草药药效物质基础的研究，E-mail：stevenhopeliu@qq.com * 通讯作者：王薇，女，博士，
副教授，主要从事太白中草药资源及质量控制方面的研究，Tel：（029）38185156， E-mail：drnyw_19@126.com
珠子参系五加科植物珠子参 [Panax japonicas C.A. Mey.
var. major （Buck.）C. Y. Wu et K. M. Feng]或羽叶三七 [Panax
japonicas C.A. Mey. var. bipinnatifi dus（Seem.） C.Y. Wu et K.M.
Feng]的干燥串珠状根茎，具有补肺、养阴、活络、止血等功效，
临床上多用于气阴两虚、烦热口渴、虚劳咳嗽、跌扑损伤、
关节疼痛、咳血、吐血、外伤出血等症的治疗 [1]。珠子参总
皂苷为珠子参的主要有效成分，具有较强的药理活性。当
前大多数皂苷类化合物的主要给药方式均为口服给药，而
大量研究发现，皂苷类化合物经口服给药后，在肠道内都
较难吸收，生物利用度低 [2-5]。本文采用大鼠肠外翻模型研
究珠子参总皂苷在肠道的吸收动力学特征，初步阐明其吸
收机制，为口服给药制剂的研制和临床用药提供一定的理
论依据。
1 材料
1.1 仪器
数控超级恒温水槽（上海艾测电子科技有限公司）；
BT100-1F 型蠕动泵（兰格公司）；Waters2695高效液相色
谱仪（美国沃特斯，2996紫外检测器，Empower色谱工作
Central South Pharmacy. March 2013, Vol. 11 No. 3 中南药学 2013 年 3 月 第 11 卷 第 3 期
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站）；HGN-300500氮气发生器（山东鲁创分析仪器有限公
司）；SB-3200D型超声清洗机（宁波新芝生物科技股份有
限公司，180 W，40 kHz）；Anke TGL- 18C离心机（上海
安亭科学仪器厂）；BP-121S电子天平（北京赛多利斯仪器系
统有限公司，d＝ 0.1 mg）；混合气瓶（95% O2，5% CO2）。
1.2 动物
SD大鼠，（180±20）g，雌雄兼用 [第四军医大学实
验动物中心，合格证号：SCXK（军）2007-007]。上述动物
均以标准颗粒饲料饲养。
1.3 试药
珠子参药材均采自秦岭主峰太白山，由陕西中医学院
药学院生药教研室王继涛副教授鉴定为五加科植物珠子参
Panax japonicas C.A. Mey. var. major （Buck.） C. Y. Wu et K.
M. Feng。
氯化钠、碳酸氢钠、氯化钾、磷酸二氢钠、氯化镁、氯
化钙、葡萄糖（均为分析纯，北京化学试剂公司）；乙腈（色
谱纯，Fisher公司）；甲醇（色谱纯，Fisher公司）；纯净
水（杭州娃哈哈集团有限公司）；乙酸（分析纯，北京化工
厂）；人参皂苷 Ro对照品、竹节参皂苷Ⅳ a对照品（均为
陕西中医学院药学院中药化学研究室自制，面积归一化法测
定纯度均＞ 98%）。
2 方法
2.1 珠子参总皂苷制备
珠子参药材粉末，加 6倍量 50%乙醇溶液，回流提取
2次，每次 1.5 h。滤过，滤液回收乙醇至无醇味，加水调整
药液浓度至 1 g • mL－ 1，上预先处理好的 D101大孔吸附树
脂柱，先用水洗除去杂质，继用 60%乙醇洗脱，合并乙醇
洗脱液，减压回收乙醇，浓缩液水浴蒸干，研匀，得珠子参
总皂苷粉末，其中总皂苷含量为 81%。
2.2 Tyrode的配制
取 NaCl 4.0 g、KCl 0.14 g、NaHCO3 0.5 g、MgCl2 0.05 g、
NaH2PO4 0.025 g，均不含结晶水，溶于 250 mL蒸馏水中，
密闭冷藏；取CaCl2 0.1 g溶于 250 mL蒸馏水中，密闭冷藏；
临用前不断搅拌，并将后者与前者均匀混合，加入葡萄糖
0.5 g，调节 pH值至 7.4，即得。
2.3 测定方法
2.3.1 色谱条件 色谱柱：Alltima C18柱（4.6 mm×250 mm，
5 μm）；流动相：乙腈（A）-0.2%磷酸水（B），梯度洗
脱：0～ 10 min（30%A）；10～ 20 min（30%～ 45%A）；
20～ 30 min（45%～ 60%A）；30～ 35 min（60%～ 65%A）；
柱温：25 ℃；检测波长：220 nm；流速：1 mL • min－ 1；进
样量：20 μL。
2.3.2 线性关系考察 取各对照品，均溶于甲醇，配制成不
同浓度的混合对照品溶液。其浓度为人参皂苷 Ro（4.25、
10.62、21.25、42.5、106.2 mg • L－ 1）、竹节参皂苷Ⅳ a（1.062、
2.125、4.25、21.25、42.5 mg • L－ 1）。取上述混合对照品
溶液 200 μL，加入 200 μL Tyrode，振荡混合后，用氮气吹
干，加 200 μL甲醇，超声溶解，移取上清液，用 0.22 μm
滤膜滤过，进样 20 μL。记录色谱图（见图 1）和峰面积，
以峰面积（A）对质量（μg），进行线性回归，求得标准曲线
回归方程和相关系数。结果为人参皂苷 Ro 在 0.085 0～ 2.125
μg与峰面积线性关系良好，回归方程为 Y＝ 9.114×103X＋
47.23，r＝ 0.999 5。竹节参皂苷Ⅳ a在 0.021 2～ 0.849 9 μg
表 1 珠子参总皂苷提取回收试验 (n＝ 5)
Tab 1 Extract recovery of total saponin ginsenoside Ro and
chikusetsusaponin Ⅳ a in Panaois Majoris Rhizoma (n＝ 5)
珠子参总皂苷
（total saponin in Pan-
aois Majoris Rhizoma）
质量浓度
（concentration）
/mg • L－ 1
平均回收率
（average
recovery）/%
RSD
/%
人参皂苷 Ro 4.2 97.0 3.0
21.2 96.2 3.1
106.2 100.1 3.9
竹节参皂苷Ⅳ a 2.1 95.1 4.2
21.2 99.5 3.9
106.2 100.4 5.0
与峰面积线性关系良好，回归方程为Y＝1.581×103X＋3.632，
r＝ 0.999 5。
2.3.3 精密度试验 按“2.3.1”项下方法，分别取高、中、
低不同浓度对照品溶液，重复进样 5次，计算日内精密度。
每一浓度连续测定 5 d，计算日间精密度。日间和日内精密
度 RSD均＜ 5%，表明精密度良好。
2.3.4 稳定性试验 按“2.3.1”项下方法，分别取高、中、
低不同浓度的混合对照品溶液在室温存放 12 h，平行操作 3
次，平均值与零时测定值相比较，相差在 5%以内，表明 2
种皂苷在 12 h内相对稳定。
2.3.5 重复性试验 取 6份珠子参总皂苷粉末，按“2.3.2”
项下方法制备供试品溶液，取对照品和供试品溶液各进样
20 μL分析测定。人参皂苷 Ro和竹节参皂苷Ⅳ a的平均
质量分数为 14.076%、4.4549%，RSD 值为 1.8%、1.1%。
2.3.6 提取回收试验 分别取高、中、低不同浓度混合对照
品各 2份，其中 1份按照“2.3.2”项下方法处理、进样测
定，测得色谱峰面积为 A测，另 1份直接进样测定，测得色
谱峰面积为 A真。每一浓度制备 5个样品，每个样品测定一
次。计算提取回收率 R＝ A测 / A真×100%。提取回收率为
95.1%～ 100.4%，符合生物样品分析要求（见表 1）。
2.4 大鼠外翻肠囊模型试验方法 [6]
2.4.1 供试品溶液的制备 本试验参照珠子参临床应用剂量 [1]
与药效学试验 [7]，换算出大鼠的药用剂量。临用前用 Tyrode
将珠子参总皂苷溶解制成 3个浓度的混悬液（分别为 2、4、
8 g • L－ 1），待用。
0 5 10 15 20 25 30
t/min
A
B
C
1 2
图 1 珠子参总皂苷肠吸收 HPLC色谱图
Fig 1 HPLC chromatogram of absorption ingredients of Panacis Majoris
Rhizoma
A.珠子参皂苷肠外翻样品（sample of absorption ingredients of Panacis
Majoris Rhizoma）；B. 混合对照品（hybrid reference substance）；
C.Tyrode台式液；1.人参皂苷 Ro（ginsenoside Ro）；2. 竹节参皂苷
Ⅳ a（chikusetsusaponin Ⅳ a）
1 2
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表 2 不同肠段对珠子参总皂苷中 2种成分累积吸收量 Q和 Ka的影
响 (x±s，n＝ 3)
Tab 2 Uptake and absorption constant of ginsenoside Ro and
chikusetsusaponin Ⅳ a from the intestine at different concentrations
in rats (x±s，n＝ 3)
不同肠段
（intestinal
segment）
人参皂苷 Ro
（ginsenoside Ro）
竹节参皂苷Ⅳ a
（chikusetsusaponin Ⅳ a）
Q / mg Ka / h－ 1 Q/ mg Ka / h－ 1
回肠 39.45±2.08 2.17±0.46 8.06±0.99 0.34±0.02
空肠 27.47±7.11* 1.12±0.44* 5.36±0.95* 0.23±0.1*
注：与回肠比较，*P＜ 0.05。
Note：Compared with the ileum，*P＜ 0.05.
表 3 不同浓度珠子参总皂苷中 2种成分累积吸收量 Q和 Ka的影响
中的 Ka (x±s，n＝ 3)
Tab 3 Uptake and absorption constant in 2 ingredients of Zhuzishen
saponins from the intestine at different concentrations in rats
(x±s，n＝ 3)
浓度
（contentration）
/ g • L－ 1
人参皂苷 Ro
（ginsenoside Ro）
竹节参皂苷Ⅳ a
（chikusetsusaponinⅣa）
空肠
（ileum）
回肠
（jejunum）
空肠
（ileum）
回肠
（jejunum）
2 1.12±0.44* 2.17±0.46* 0.23±0.1* 0.34±0.02*
4 1.70±0.11* 2.87±0.19* 0.34±0.06* 0.4±0.15*
8 6.21±0.19 6.42±0.42 1.60±0.17 1.80±0.11
注：与 8 g • L－ 1组比较，*P＜ 0.05 。
Note：Compared with the group 8 g • L－ 1，*P＜ 0.05.
3 讨论
本试验结果显示，人参皂苷 Ro和竹节参皂苷Ⅳ a在大
鼠小肠段吸收很少均难以检测，最终将珠子参总皂苷浓度扩
大为 2倍分别为 2、4、8 g • L－ 1；人参皂苷 Ro和竹节参皂
苷Ⅳ a在回肠和空肠的累积吸收量和吸收速率见表 2和 3，
说明其在小肠的吸收较差；而在回肠的累积吸收量和吸收速
率高于空肠，说明其在回肠段具有吸收部位选择性，并且具
有浓度依赖性；人参皂苷 Ro和竹节参皂苷Ⅳ a浓度比较低
时，吸收速率较低，当浓度达到一定量时，吸收速率升高，
可能与胃肠道的 P-糖蛋白的外排作用有关。低浓度给药时，
P-糖蛋白分泌对药物经小肠上皮的渗透性影响很大，导致药
物吸收不完全；相反在高给药浓度下，P-糖蛋白介导的分泌
转运达到饱和，使得药物吸收受 P-糖蛋白介导的影响很小，
因而降低 P-糖蛋白底物的吸收、降低生物利用度。
参考文献
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（收稿日期： 2013-01-03； 修回日期： 2013-01-31）
2.4.2 统计方法 [5] 计算药物累计吸收量（Q）见公式 1，以
Q对时间 T作相关回归分析，进行数学模型拟合，比较不
同剂量下各成分 Ka以及平衡状态时累计的吸收量。数据以
x±s表示，用 SPSS 17.0对数据进行分析，各组间数据比
较采用单因素方差分析（One-way analysis of variance），P
＜ 0.05认为具有统计学意义。
注：Q（mg）为药物各时间的累积吸收量，Cn为各时
间点取样的实际检测浓度，V平衡为平衡前肠管中加入的台氏
液体积，V样为每次取样的体积。
2.5 大鼠外翻肠囊试验
2.5.1 大鼠外翻肠囊模型的建立 试验前大鼠禁食 12 h，
称重，断颈椎处死，沿腹中线和腹白线分别剪开皮肤与肌
肉，考察的肠段区间均为自胃幽门以下 10 cm开始向下量
取 10 cm为空肠段，从回盲瓣以上 10 cm开始向上取 10 cm
为回肠段。将剪下的肠管放入台氏液中冲洗至无肠内容物为
止，将自制硅胶套管软端插入肠管用丝线结扎，小心将肠道
翻转，用台氏液冲洗内表面，将另一端用丝线结扎成囊状，
将肠管放入盛有 50 mL 37 ℃恒温台氏液的麦氏浴管中开始
供混合气体，在肠管中注入 2 mL台氏液平衡 5 min，然后将
麦氏浴管中的台氏液换成不同浓度（分别为 2、4、8 g • L－ 1）
含药台氏液，分别在 30、60、90、120 min在肠管中取样
200 μL，用氮气吹干，加 200 μL甲醇，超声 5 min，移取上
清液，用 0.22 μm滤膜滤过，进样 20 μL分析。同时补充等
体积的 37 ℃台氏液，样品放入干净的 EP管中，－ 20 ℃保
存待用，试验结束后将肠管纵向剖开自然摊于滤纸上测量长
度和宽度，记录吸收面积 A [8]。
2.5.2 珠子参总皂苷中 2种成分在空肠和回肠中累积吸收量
的比较 不同质量浓度的总皂苷中人参皂苷 Ro和竹节参皂
苷Ⅳ a在各肠段均为线性吸收，R2均＞ 0.9，符合一级吸收；
2种成分回肠累积吸收量和吸收速率高于空肠（P＜ 0.05），
结果见表 2。人参皂苷 Ro和竹节参皂苷Ⅳ a在空、回肠中
的 Ka随着剂量增加而增加（P＜ 0.05），符合被动吸收。
结果见表 3。
n×
n－1
i＝1平衡 样
＋
iQ C V V C＝ （1）∑