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生物技术通报
BIOTECHNOLOGY BULLETIN 2011 年第 9 期
SMART技术构建衣藻细胞的酵母双杂交文库
孙银行 潘俊敏
(清华大学生命科学学院 细胞骨架与信号转导实验室，北京 100084)
摘 要: 衣藻是用来研究植物光合作用和动物纤毛常用的模式生物。为了研究蛋白质之间的相互作用，利用 SMART
技术构建了衣藻的酵母双杂交文库。使用 Trizol 试剂提取鞭毛再生过程和光周期培养的细胞进入分裂前的衣藻细胞的总
RNA，经过 Oligotex纯化得到 mRNA;应用 SMART技术和 LD-PCR合成双链 cDNA，经过 CHROMA SPIN TE-400 柱子去除短片
段的 cDNA;cDNA 和线性化载体 pGADT7-Rec 共转化酵母 Y187 构建酵母双杂交文库。库容达到 3. 0 × 106 CFU，重组率为
70%，插入片段平均长度为 0. 6 kb。以上结果说明该文库质量较好，能够通过筛选文库得到与目的蛋白互相作用的蛋白质，为
寻找蛋白质的作用伴侣打下基础。
关键词: 鞭毛再生 细胞周期 衣藻 酵母双杂交文库 SMART技术
Construction of a Yeast-Two-Hybrid Library of
Chlamydomonas reinhardtii with SMART Technique
Sun Yinhang Pan Junmin
(Cytoskeleton and Signal Transduction Lab，School of Life Science，Tsinghua University，Beijing 100084)
Abstract: A Yeast-Two-Hybrid library of the model organism Chlamydomonas reinhardtii was constructed． Total RNA was extrac-
ted from cells undergoing flagellar assembly or prior to mitosis using Trizol reagent． Oligotex was used to purify mRNA． The first strand
cDNA was synthesized by reverse transcription of mRNA with SMART technique，and LD-PCR was performed to synthesize double
strand cDNA． Shorter cDNAs were eliminated by running through a CHROMA SPIN TE-400 column． Purified cDNA and linear vector
(pGADT7-Rec)co-transformed into yeast strain，Y187，generating Yeast-Two-Hybrid library． The capacity of the library is 3. 0 × 106
CFU with a recombination rate of 70% and an average size of inserts of 0. 6 kb． These results indicate that the library is suitable for
screening for potential partner(s)of proteins of interest．
Key words: Flagella regeneration Cell division Chlamydomonas reinhardtii Yeast-two-hybrid library SMART technique
收稿日期:2011-03-04
基金项目:高等学校博士学科点专项科研基金项目，清华大学自主科研计划(2010THZO)
作者简介:孙银行，男，硕士，研究方向:细胞生物学;E-mail:sunyh_wy@ yahoo. com. cn
通讯作者:潘俊敏，男，博士，研究方向:细胞骨架与信号转导;E-mail:panjunmin@ mail. tsinghua. edu. cn
衣藻是单细胞的绿藻，有两个配对型 mt + 和
mt －，细胞具有一个直径约为 10 μm 的细胞体和两
根约 12 μm的等长鞭毛［1］，还有一个大的杯状叶绿
体，是研究光合作用和鞭毛(或纤毛)的良好模式生
物。纤毛是一种从细胞表面突起的较保守的亚细胞
结构，从原生生物到脊椎动物细胞都存在，在脊椎动
物成体中几乎所有的细胞都具有纤毛［2］。纤毛分
为运动纤毛和不动纤毛，前者参与细胞运动，后者参
与调控动物的发育和各种生理器官的正常功能;纤
毛结构和功能上的缺陷导致的疾病统称为“纤毛相
关疾病”，如纤毛不动综合征(PCD)、Kartagener 综
合征、男性不育及脑积水、肾囊病(cystic kidney dis-
ease)和巴德 －毕氏综合征等，因此对纤毛结构和功
能的研究对于揭示这些疾病的机理具有重要意义。
由于衣藻具有培养简单、繁殖较快、容易转基因和突
变体筛选、鞭毛易于观察和分离的优势，成为研究纤
毛的绝佳模式生物。
纤毛由 3 部分组成:纤毛膜、基质和轴丝(axon-
eme) ，仅轴丝就有 250 多种多肽组成［3］，要研究这
么多蛋白质的相互关系就需要一个良好的系统。酵
生物技术通报 Biotechnology Bulletin 2011 年第 9 期
母双杂交是现在广泛应用的一个较成熟的研究蛋白
质互作的系统。基本原理如下:大多数真核生物基
因的表达是通过转录因子(transcription factor)与基
因上游的转录激活序列(upstream activating se-
quence，UAS)的结合激活的;转录因子由 DNA 结合
结构域(binding domain，BD)和激活结构域(activa-
ting domain，AD)组成;BD 负责与 UAS 的结合，AD
负责转录激活［4］。AD 和 BD 各自功能的发挥不需
要直接相连，只需要彼此邻近就可以［5］，因此人为
地把 AD和 BD 分开并分别和其他两个蛋白质(X
和 Y)相连形成融合蛋白，如果 X和 Y有相互作用，
二者结合的同时把 AD和 BD拉在一起，能够正常激
活下游报告基因的表达，通过报告基因筛选阳性的
蛋白互作。通常的做法是分别构建 BD-bait(“诱
饵”)质粒和 AD-prey(“猎物”)质粒，将二者共同转
化或者分步转化进入有营养缺陷(如 Ade －，His －，
Leu －，Trp －)的酵母菌株(如 Y187)中，这些营养缺
陷的菌株在缺少相应营养成分的培养基上不能生
长，但如果“诱饵”和“猎物”蛋白有相互作用，就能
够激活报告基因的表达，长出来的就是阳性克隆。
该系统可以用来筛选 cDNA文库中与目的蛋白相互
作用的蛋白质，通常是把目的蛋白和 BD 相连，cD-
NA和 AD相连构成 cDNA文库。
目前，文库构建基本上有两种策略:一是合成的
cDNA 在体外通过连接酶和载体相连，然后转化细
胞(如 Stratagene 公司) ;另一是合成的 cDNA 和线
性化的载体共同转化酵母，在体内重组酶的作用下，
cDNA和载体相连形成完整的质粒(如 Clontech 公
司) ，后者又称为 SMART 技术(switching mechanism
at 5 end of RNA transcript)［6］，本研究所用的就是该
技术。在 cDNA第一条链合成过程中，当反转录酶
MMLV-RT(Moloney murine leukemia virus reverse
transcriptase)到达 mRNA 模板的 5端，该酶的末端
转移酶活性(terminal transferase activity)在 cDNA链
的 3端加上几个 C碱基，和 SMART Ⅲ 寡核苷酸 3
端的几个 G 碱基配对，创造一个延伸的模板，反转
录酶跳转到这个延伸模板上继续前进。这一段延伸
末端正好作为接下来的 LD-PCR (long-distance
PCR)的引物定位点，如此通过 PCR 得到的 cDNA
其中一端有一个共同的序列，称为“SMART Ⅲ末
端”，而另一端也有一个共同的序列就是反转录的
引物序列，称为“CDS Ⅲ末端”;这两个共同的序列
能够和载体上的两段序列在体内重组酶的作用下发
生重组形成完整的环状质粒。
1 材料与方法
1. 1 材料
1. 1. 1 藻株和菌株 野生型衣藻 21gr(cc-1690)由
本实验室保存;酵母菌株 Y187 购自 Clontech 公司
(Cat． No． 630490)。
1. 1. 2 主要试剂 RNA提取试剂 Trizol Reagent由
本实验室自制［7］;mRNA 纯化试剂盒 OligotexTM-
dT30 ＜ Super ＞ mRNA Purification Kit(From Total
RNA)购自 TaKaRa公司(Code:D9086) ;文库构建试
剂盒 Yeast Two Hybrid Library Construction Kit(Cat．
No． 630490)、PCR 扩增试剂盒 Advantage 2 Polymer-
ase Mix(Cat． No. 639201)和酵母培养基(YPDA 和
SD /-Leu)均购自 Clontech 公司;乙醇、异丙醇、酚 ∶
氯仿∶异戊醇(25∶ 24∶ 1)、氯仿∶异戊醇(24∶ 1)均购
自上海生工，为分析纯;衣藻培养基 R-medium、M-
medium为本实验室自制。
1. 1. 3 主要引物 引物名称及序列，见表 1。
表 1 引物序列
引物名称 序列(5 － 3)
SMART Ⅲ Oligo
AAGCAGTGGTATCAACGCAGAGTG-
GCCATTATGGCCGGG
CDS Ⅲ /6 Primer
ATTCTAGAGGCCGAGGCGGCCGA-
CATG-NNNNNN
5 PCR Primer
TTCCACCCAAGCAGTGGTATCAACG-
CAGAGTGG
3 PCR Primer
GTATCGATGCCCACCCTCTAGAGGC-
CGAGGCGGCCGACA
T7 Sequencing Primer TAATACGACTCACTATAGGGC
3 AD Sequencing Primer AGATGGTGCACGATGCACAG
1. 2 方法
1. 2. 1 衣藻细胞的培养和处理 pH shock 后再生
鞭毛的细胞:把平板上的衣藻细胞 21gr 接种到 R-
medium中，23℃，光周期(光照∶黑暗为 14 h∶ 10 h)培
养 4 － 5 d，为 S0 代;转接 M-medium，培养 2 d，为 S1
代;镜检，细胞运动状态良好，计数细胞浓度为
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2011 年第 9 期 孙银行等:SMART技术构建衣藻细胞的酵母双杂交文库
(2 － 5)× 106 /mL，收集细胞 50 mL于M-medium中，
pH shock 处理(用 0. 5 mol /L 醋酸调节 pH 至 4. 5，
维持 30 s，再用 0. 5 mol /L KOH调节 pH至 7. 0)后，
让衣藻在 M-medium 中再生鞭毛 45 min;然后收集
80 mg细胞，在液氮中迅速冷冻。
分裂前的光周期细胞:把平板上的衣藻细胞
21gr接种到 R-medium 中，23℃下，光周期(光照∶黑
暗为 14 h∶ 10 h)培养 4 － 5 d，为 S0 代;转接 M-medi-
um，培养 2 d，为 S1 代;镜检，运动状态良好;当进入
黑暗期的时候每隔 1 h取一次细胞统计正在分裂的
细胞的比例，当 25%的细胞正在分裂时收集细胞
80 mg，在液氮中迅速冷冻。
1. 2. 2 总 RNA的提取和 mRNA的纯化 上述两份
液氮冷冻的衣藻细胞各加 1 mL Trizol 试剂，充分吹
匀，室温静置 5 min;加 200 μL氯仿，剧烈摇晃 15 s，
静置 5 min;4℃ 14 000 r /min离心 15 min，收集上清
600 μL，加入 600 μL 异丙醇，混匀，静置 10 min;
4℃，14 000 r /min 离心 10 min，弃上清，用 1 mL
75%乙醇清洗沉淀，4℃ 8 000 r /min 离心 5 min，弃
上清，沉淀在空气中干燥几分钟，然后加入 80 μL
DEPC-H2O 溶解沉淀，各取 0. 5 μL电泳检测。取两
份 RNA各 75 μL混合，用 OligotexTM-dT30 ＜ Super ＞
mRNA Purification Kit分离纯化mRNA，取10 μL电泳
检测。其余mRNA溶液加入1 /10体积3 mol /L NaAc
和 2. 5倍体积无水乙醇，混匀，在 － 20℃中过夜沉淀
mRNA;4℃ 14 000 r /min 离心 15 min，弃上清，用
1 mL 75% 乙醇清洗沉淀，4℃ 8 000 r /min 离心
5 min，弃上清，沉淀在空气中干燥几分钟，然后加入
10 μL DEPC-H2O 溶解沉淀，即为浓缩后的 mRNA，
取 0. 5 μL电泳检测，其余保存在 － 80℃中。
1. 2. 3 双链 cDNA 的合成和短片段去除 取 2. 0
μL mRNA，加入 1. 0 μL CDSⅢ/6 引物(10 μmol /L) ，
加去离子水至总体积 4. 0 μL，72℃变性 2 min，冰浴
2 min;加入 2. 0 μL 5 × First-Strand Buffer、1. 0 μL
DTT(100 mmol /L)、1. 0 μL dNTP Mix(10 mmol /L)、
1. 0 μL SMART MMLV Reverse Transcriptase，混匀
后，25℃ 10 min，42℃ 10 min;加入 1. 0 μL SMART
III-modified oligo，混匀，42℃ 1 h，合成 cDNA 第一
链;75℃ 10 min，终止第一链反应;降到室温以后，
加入 1. 0 μL RNase H(2 U) ，37℃ 20 min 破坏 mR-
NA。LD-PCR扩增 cDNA:取 2 μL cDNA第一链，加
入 70 μL 去离子水，10 μL 10 × Advantage 2 PCR
Buffer，2 μL 50 × dNTP Mix，2 μL 5PCR Primer，2 μL
3 PCR Primer，10 μL 10 × Melting Solution，2 μL
50 × Advantage 2 Polymerase Mix进行 PCR 反应，程
序为 95℃ 30 s;95℃ 10 s，68℃ 6 min + 5 s，25 个循
环;68℃ 5 min。上述 LD-PCR反应平行 4 份。反应
后取 20 μL 用 1. 0% 凝胶琼脂糖进行电泳检测。去
除 cDNA 中的短片段:按照操作说明书，使用
CHROMA SPIN TE-400 柱子除去 cDNA中 400 bp以
下的片段，取 20 μL 电泳检测。其余部分加入 1 /10
体积 3 mol /L NaAc 和 2. 5 倍体积无水乙醇，－ 20℃
1 h，沉淀 cDNA;14 000 r /min 离心 15 min，弃上清，
沉淀在空气中干燥几分钟，然后加入 20 μL 去离子
水溶解沉淀。取 1 μL稀释 100 倍，用分光光度计测
cDNA的浓度。
1. 2. 4 构建文库 按照 Yeastmaker Yeast Transfor-
mation System 2(Clontech，Cat． No． 630439)的操作说
明，制备酵母 Y187 的感受态细胞。转化酵母:取 5. 0
μg cDNA，加入 6 μL pGADT7-Rec(0. 5 μg /μL)和 20
μL Carrier DNA(10 μg /μL) ，混匀后加入 600 μL 新
制备的 Y187感受态细胞，轻轻混匀后再加入 2. 5 mL
PEG/LiAc，混匀后30℃温育45 min，加入160 μL DM-
SO 混匀，42℃热激 20 min，25 00 r /min离心 5 min弃
上清后加入 3 mL YPD Plus Medium，30℃温育 90
min，25 00 r /min离心 5 min弃上清后用 15 mL 0. 9%
NaCl重悬细胞，涂布 150 mm SD/ － Leu 平板 100 个
(每个平板用 150 μL 菌液) ，30℃ 保温 3 － 4 d，待菌
落长出来以后将平板放在 4℃中冷冻 3 － 4 h，各加入
5 mL冷冻培养基(YPDA/25% Glycerol) ，将菌落从平
板上刮下来，调整浓度大于2 ×107 /mL，分装成 1 mL /
EP，－80℃保存，即为酵母双杂交文库。
1. 2. 5 文库库容和质量检测 取 100 μL菌液分别
作 1 /10 和 1 /100 稀释后取 100 μL 涂布 100 mm
SD / － Leu平板，30℃ 保温 3 － 4 d，待菌落长出来以
后计算文库的库容，文库库容 =平板上克隆数 ×稀
释倍数 /涂板体积 ×菌液总体积。从 cDNA 文库中
随机挑取 23 个阳性克隆，根据试剂盒提供的引物序
列设计引物:T7 Sequencing Primer(5端引物序列) :
5-TAATACGACTCACTATAGGGC-3，3AD Sequencing
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Primer(3端引物序列):5-AGATGGTGCACGATGCA-
CAG-3扩增插入片段，用 1. 0%的琼脂糖凝胶电泳
检测 PCR产物，确定文库阳性克隆率和平均插入片
段大小。
2 结果
2. 1 总 RNA的提取和 mRNA的纯化
用 Trizol试剂提取的总 RNA 经 1. 0%琼脂糖
电泳检测(图 1) ，18S rRNA 和 28S rRNA 两条带
清晰，且 28S rRNA 的量约为 18S rRNA 的两倍，
说明总 RNA 没有降解，质量较好;经 Oligotex 试
剂盒对 mRNA 分离纯化后(图 2) ，mRNA 在较大
范围内弥散分布，28S 和 18S rRNA 已基本上被
去除，浓缩后的 mRNA(图 3)没有降解，mRNA 适
于构建文库。
M． DL2000 Marker;1． pH shock mRNA;
2．光周期 mRNA
图 1 衣藻总 RNA电泳检测结果
M． DL2000 Marker;1．浓缩前 mRNA
图 2 浓缩前衣藻 mRNA
电泳检测结果
M． DL2000 Marker;1．浓缩后的 mRNA
图 3 电泳检测结果衣藻
mRNA浓缩后
2. 2 双链 cDNA的合成和短片段去除
mRNA 经过反转录和 LD-PCR 扩增以后，取
20 μL电泳检测;400 bp 以下短片段去除以后，取
20 μL电泳检测。结果(图 4)显示，cDNA呈弥散状分
布，CHROMA SPIN TE-400 柱子过滤之前介于0. 1 －
4. 0 kb，CHROMA SPIN TE-400 柱子过滤之后短片段
明显减少，弥散介于0. 4 －4. 0 kb之间，但是集中分布
在 0. 5 －2. 0 kb。cDNA良好，可以用于文库构建。分
光光度计检测浓缩后的 cDNA 浓度为 0. 60 μg /μL，
cDNA的量足够构建一次文库。
M． DL2000 Marker;1．去除短片段前的 cDNA;
2．去除短片段后的 cDNA
图 4 cDNA电泳检测结果
2. 3 文库构建及质量评价
经计算，文库库容达到 3. 0 × 106 CFU，一个较
高质量的文库要求库容达到 1. 0 × 106 CFU 的标
准，说明本研究构建的文库库容较高。从 cDNA文
库中随机挑取 23 个阳性克隆，PCR 扩增插入片
段，用 1. 0%的琼脂糖凝胶电泳检测 PCR 产物的
大小(图 5) ，有插入片段的阳性克隆 16 个，1. 0 kb
以上的片段 5 个，阳性克隆率为 70%，16 个阳性
克隆的平均长度为 0. 6 kb。
3 讨论
cDNA文库构建是以细胞中的 mRNA为原始材
料的，mRNA约占细胞中总 RNA 量的 1% － 5%;较
高质量的 mRNA 是得到好的 cDNA 文库的基本前
提，由于环境中到处都是 RNase，且 RNase 极其稳
定，导致 RNA 易被降解，所以要想得到高质量的
mRNA，必须在操作过程中最大限度的抑制 RNase
的活性，所有的玻璃器皿都要 180℃烘烤 4 h，塑料
制品在 DEPC-H2O 中浸泡过夜然后高压灭菌，所有
溶液都要用 DEPC-H2O配制。
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图 5 PCR检测文库质量
细胞在不同时期 mRNA 的表达略有不同，主
要表现在 mRNA 种类和量上的差异，这是细胞基
因选择性表达的结果。我们对衣藻鞭毛组装和解
聚以及细胞周期中的蛋白质相互作用感兴趣，所
以试验材料是 pH shock以后鞭毛再生过程中的衣
藻细胞和光周期培养的进入分裂期前的细胞，从
这两种细胞中提取等量的 RNA，混合以后分离出
mRNA作为反转录的材料。结果显示，RNA 质量
良好，28S和 18S 两条带清晰锐利，且前者是后者
的两倍，说明 RNA 没有降解;分离出来的 mRNA
呈均匀的弥散状分布，大小均在 0. 5 kb以上，有些
能够达到 5 kb以上;浓缩以后依然如此，说明 mR-
NA 在分离和浓缩的过程中没有发生降解。从
mRNA反转录并 PCR 得到的 cDNA 也呈现较均匀
的弥散分布，但是大小较 mRNA 小一些，这是由于
在反转录过程中有些 mRNA 没有完整的反转录造
成的，这是体外反转录的普遍性问题，加之衣藻基
因组编码区的 G + C 含量较高(达到 68%)［8］，有
较多的复杂二级结构，使这一问题更加突出。因
此，最终得到的酵母双杂交文库中插入片段的平
均长度(0. 6 kb) ，略低于报道的平均 0. 791 kb［9］，
但高于 474 bp［10］。
mRNA反转录的不完整性会造成大量小片段
cDNA(＜ 500 bp)的出现，这些小的 cDNA 往往比
较容易连入［11］或者重组进入载体之中，导致整个
文库的插入片段平均大小降低，并且这些小的 cD-
NA往往是没有意义的，所以 PCR扩增以后要进行
一步小片段的去除，本试验中使用 CHROMA SPIN
TE-400 柱子能够选择性的去除小片段，CHROMA
SPIN TE-400 柱子处理以后 500 bp 以下的 cDNA
明显减少。
文库的阳性克隆率表征的是 cDNA连入载体的
比例，数值越大说明载体自连形成空载体的比例越
小，一般的载体都会有自连现象，本试验中阳性克隆
率为 70%，略低;但是考虑到较高的库容(3. 0 × 106
CFU) ，二者相乘依然能超过 1. 0 × 106 CFU 的标准;
由于空载体不能表达出蛋白质，并不影响文库的筛
选，所以本文库有较高的进行蛋白质相互作用筛选
的价值。
衣藻的鞭毛再生过程和细胞周期时的酵母双杂
交文库的构建为筛选鞭毛中蛋白及细胞周期蛋白的
互作打下基础。
参 考 文 献
［1］潘俊敏．衣藻、纤毛与“纤毛相关疾病”．中国科学(C 辑) :生命
科学，2008，38(5) :399-409．
［2］Wheatley DN，Wang AM，Strugnell GE． Expression of primary cilia in
mammalian cells． Cell Biol Int，1996，20(1) :73-81．
［3］Qin H，Diener DR，Geimer S，et al． Intraflagellar transport(IFT)car-
go:IFT transports flagellar precursors to the tip and turnover products
to the cell body． The Journal of Cell Biology，2004，164 (2) :
255-266．
［4］ Young KH． Yeast-Two-Hybrid:So many interactions，(in)so little
time． Biology of Reproduction，1998，58(2) :302-311．
［5］Verschure P，Visser A，Rots M． Step out of the groove:epigenetic
gene control systems and engineered transcription factors． Adv Gen-
et，2006，56:163-204．
［6］ Zhu YY，Machleder EM，Chenchink A，et al． Reverse transcriptase
template switching:A SMART approach for full-length cDNA library
construction． Biotechniques，2001，30(4) :892-897．
［7］Chomczynski P，Sacchi N． Single-step method of RNA isolation by
acid guanidinium thiocyanate-phenol-chloroform extraction． Analyti-
cal Biochemistry，1987，162(1) :156-159．
［8］Merchant SS，Prochnik SE，Vallon O，et al． The Chlamydomonas ge-
nome reveals the evolution of key animal and plant functions． Sci-
ence，2007，318(5848) :245-250．
191
生物技术通报 Biotechnology Bulletin 2011 年第 9 期
［9］Shrager J，Hauser C，Chang CW，et al． Chlamydomonas reinhardtii
genome project-a guide to the generation and use of the cDNA infor-
mation． Plant Physiology，2003，131(2) :401-408．
［10］Asamizu E，Nakamura Y，Sato S，et al． A large scale structural anal-
ysis of cDNAs in a unicellular green alga，Chlamydomonas reinhar
dtii． I． Generation of 3433 non-redundant expressed sequence tags．
DNA Research，1999，6(6) :369-373．
［11］刘志伟，张智俊，韩国民，等．毛竹笋全长 cDNA文库构建．生物
技术通报，2010(2) :98-101．
(责任编辑 马鑫
櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧櫧
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