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Research of active substances about Vaccinium vitis-idaea L. and its development and application

红豆越桔活性成分研究及开发利用



全 文 :生命科学
Chinese Bulletin of Life Sciences
第21卷 第1期
2009年2月
Vol. 21, No. 1
Feb., 2009
文章编号 :1004-0374(2009)01-0151-05
红豆越桔活性成分研究及开发利用
祖桂芳1,赵晓红2*,崔胜楠2
(1 首都师范大学生命科学学院,北京 100037;2 北京联合大学应用文理学院,北京 100191)
摘 要:红豆越桔是一种新兴的水果,其果实根茎叶中含有丰富的活性物质—— 花青素、黄酮、有
机酸等。这些活性物质具有抗氧化损伤、清除氧自由基、抑制癌细胞、提高视力等多种作用。本文
综述了国内外近年来对红豆越桔活性物质的研究概况,以及对红豆越桔产品的开发现状,并对进一步的
研究提出了展望。
关键词:红豆越桔;活性物质;生理功能
中图分类号:S663.01;Q946  文献标识码:A
Research of active substances about Vaccinium vitis-idaea L. and
its development and application
ZU Gui-fang1, ZHAO Xiao-hong2*,CUI Sheng-nan2
(1 Collage of Life Science, Capital Normal University, Beijing 100037, China; 2 College of Applied Arts
and Sciences, Beijing Union University, Beijing 100083, China)
Abstract: As a kind of new fruits, Vaccinium vitis-idaea L. contains many active substances, such as anthocyanin,
flavonoids and phenolic acid, et al., which have the potential abilities of anti-oxidation, anti-free radical, anticancer
and sight improvement. The study status, product development and prospect of Vaccinium vitis-idaea L. active
substance were reviewed here.
Key words: Vaccinium vitis-idaea L.; active substance; physiological function
收稿日期:2008-07-26;修回日期:2008-08-20
*通讯作者:xiaohong@ygi.edu.cn
红豆越桔(Vaccinium vitis-idea L.)属于杜鹃花
科(Ericaceae),越桔属(Vaccinium. spp)[1,2],原产于
我国东北、前苏联、朝鲜、北美、北欧的高山地
带,常与笃斯越桔混生,在我国主要分布在东北的
大兴安岭与长白山,以及新疆等高寒地区[3],在湿
润、有机质丰富、酸性土壤上生长良好[4 ]。红豆
越桔是风靡世界的新兴保健水果蓝莓的重要野生品
种之一,含有丰富的营养成份,其中以有机酸最为
丰富,含有柠檬酸、琥珀酸、富马酸、苹果酸、
酒石酸等 10 余种有机酸,还含多种糖类、维生素
和微量元素,有很高的营养价值[5,6]。 红豆越桔果
实为亮红色,是提取天然色素的重要原料,在越桔
的果实和茎叶中含有花色苷、黄酮、萜类等多种活
性成分[7],具有多种生理功能,对于保健和治疗有
很好的作用。因此,对红豆越桔各种活性成分的研
究也是近年来国内外的热点之一。
1 红豆越桔活性成分研究概况
1.1 红豆越桔中的活性成分
1.1.1 越桔花色苷 越桔果实中含有种类丰富的色
素,而且含量较高。越桔果实中的色素为花色苷类
天然色素,可调配成蓝、蓝紫、紫、绛紫、玫
瑰红、粉红等一系列鲜艳悦目的颜色,其稳定性
强,是品质优良的天然色素。
李颖畅等[8]报道,越桔果实呈色物质是由飞燕
草色素、矢车菊色素、牵牛花色素、芍药色素和
锦葵色素等5种色素与葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖
各自结合形成的花色苷和乙酰化花色素苷组成。花
152 生命科学 第21卷
色素苷种类和含量视越桔品种而异。Viljanen等[9]对
6 种浆果中的花色素进行了研究,发现在红豆越桔
果实中,含有3-葡萄糖-矢车菊色素、3- 半乳糖-
矢车菊色素和3-阿拉伯糖矢车菊色素,与所研究的
其他浆果相比,存在的色素种类比较简单,但其中
3-葡萄糖-矢车菊色素的含量很高,是所研究浆果
中在单一品种含量最高的色素。用色价法测得红豆
越桔果实色素色价值7.839,用高效液相色谱法测
定红豆越桔花色苷含量有147.759 mg/100 g鲜果[10]。
孟凡丽等[11]则从红豆越桔果实中提取到一种单体化
合物,经过薄层层析、反相高效液相色谱、质谱、
核磁共振对此化合物进行结构鉴定,确定此物质为
3-半乳糖-矢车菊色素。Viljanen等[12]报道,红豆
越桔中还含有原花色素苷,主要是以二聚和三聚体
的形式存在。
花色苷为水溶性物质,易溶于甲醇、乙醇、
水及其组成的混合溶剂,不溶于石油醚、乙醚等非
极性溶剂。花色苷通常用醇法提取。邹阳等[13]对越
桔中花色苷的提取工艺进行研究,实验测定了提取
试剂、温度、时间、p H 值,以及料液对花色苷
提取的影响,并经过正交实验确定了蓝莓花色苷提
取的最佳条件是:乙醇浓度 8 0 % ,浸提时间
30min,浸提温度 30℃,pH2,料液比为 1∶10,
在这些条件下色素的提取率为92.4%。
1.1.2 越桔中的黄酮 红豆越桔中含有丰富的黄
酮。潘一峰等[14]从越桔果渣中提取出黄酮类物质,
并采用HPLC(高效液相色谱法)对越桔果渣中黄酮甙
元进行定性和定量分析。用甲醇和水(40∶60)作为
流动相,以0.8mL/min 流速进行洗脱,368nm 波长
检测越桔果渣水解液中黄酮类成分并测定其含量,
其结果发现,越桔果渣中黄酮甙元主要有杨梅素和
槲皮素,其含量分别为0.020% 和 0.069%。实验还
确定了越桔果渣黄酮(flavonoids from fruit residues of
Vaccinium vitisidaea L., FFV)的总得率约为3.80%。
通过HPLC 表征分析,FFV 中杨梅素和槲皮素的黄
酮甙元含量约为6.42%。在对红豆越桔茎叶中活性
物质的研究中也发现了黄酮-槲皮素的存在[7]。
1.1.3 其他活性物质 在红豆越桔的果实、茎、叶
和根中都存在游离和结合态的三萜酸,主要是苯二
酸、油酸及其衍生物,但其种类和含量在不同的器
官中有所不同。在传统的药用器官果实和叶中,三
萜酸含量较高,分别占干重的 1% 和 0.6%。在根
中相对较少,但多以结合态存在。因此,根中结
合态三萜酸的含量最高,达干重的 0.01 %。苯二
酸是主要的三萜酸,油酸与苯二酸的含量比值在不
同的植物器官中不同,果实和叶中比值较高,分别
为 1∶2.4 和1∶2,在茎和根中较低,分别为1∶3.5
和 1∶3.2[15]。
Ek 等[16]用甲醇和超声波法粗提后,进一步用
固相分离法提取,从红豆越桔中提取出28种酚类物
质,经初步确认,除了花色素、黄酮,还包括黄
醇碱、儿茶酚及其糖苷,而且还含有不同种类的咖
啡酸和阿魏酸,其中槲皮素-3-O-α- 阿拉伯糖苷、
香豆醇-己糖-间苯二酚、咖啡醇-己糖-间苯二酚
山萘酚-戊糖苷等物质为首次报道在此植物中发现。
还有人对越桔茎、叶化学成分进行提取、分
离,从中得到6 种单体化合物。其中除了黄酮类物
质,通过化学反应及测试各种光谱确定其还含有二
十一烷烃、胡萝卜苷、金丝桃苷、秦皮苷和熊果
苷,收率分别为0.0026、0.0014、0.1056、0.0981
和0.5324,其中二十一烷烃、胡萝卜苷和秦皮苷为
首次从越桔中得到[7]。
1.2 红豆越桔活性成分的生理功能研究进展
花色苷、黄酮、酚类以及其他活性物质是多
种植物的药用成分,具有多种生理作用,是药用植
物用于治疗的基础,但由于活性物质的种类和含量
不同,含有相似成分的植物药用作用不完全相同。
随着对红豆越桔利用的加深,对红豆越桔的活性成
分的功能及作用的研究成为近年来对红豆越桔研究
的热点之一。
1.2.1 红豆越桔活性成分抗氧化性研究  国外有人
用14种果蔬汁对过氧化自由基(ROO)、羟基自由基
(·OH)、过氧亚硝酸盐(ONOO-)的清除能力进行探
索,发现红豆越桔对过氧化自由基(ROO)、羟基自
由基(·O H )有很强的清除能力,抗过氧亚硝酸盐
(ONOO-)的能力也在比较高的水平,在所研究的果
蔬中具有最好的抗氧化能力[17]。花色苷是一种具有
很强抗氧化能力的成分,它的抗氧化效果,比我们
所熟知的抗氧化剂维生素C 还要高。原花色素苷是
所发现的抗氧化性最强的物质,由此可见,红豆越
桔的抗氧化作用与它所含的这些活性成分密不可分。
李颖畅和孟宪军[18]采用体外实验模型对蓝莓花
色苷抗脂质体过氧化、还原力和清除羟基自由基、
超氧阴离子自由基进行了研究, 并与抗坏血酸进行比
较,其结果表明蓝莓花色苷具有抗脂质体过氧化能
力、还原能力和清除羟基自由基、超氧阴离子自由
153第1期 祖桂芳,等:红豆越桔活性成分研究及开发利用
基的能力。蓝莓花色苷抗脂质体过氧化能力强于抗
坏血酸。还原能力和清除超氧阴离子自由基的能
力,低浓度时和抗坏血酸接近,高浓度时强于抗坏
血酸。蓝莓花色苷抗脂质过氧化、清除羟基自由基
和超氧阴离子自由基的IC值分别为168.97、141.12
和 345.71 μg/mL。
酚类化合物花青素、鞣花丹宁酸、原花色素
在抑制脂质过氧化和蛋白质的氧化中发挥了重要作
用。Viljanen等[12]比较了不同来源的酚类化合物在抗
脂质过氧化和蛋白质氧化中的作用,发现红豆越桔
和欧洲越桔对脂质过氧化的抑制作用很强,二聚和
三聚形式的原花色苷的抗氧化作用最好。
Ho等[19]对红豆越桔中所含的6种单宁物质进行
研究,发现原花色苷A1 有很强的活性氧清除能力,
茶丹宁能有效地抑制活性氧形成[19 ]。核因子 -κB
(NF-κB)和激活蛋白-1(AP-1)是两个关键的调节因
子,控制着活性氧类(reactive oxygen species,ROS)
引起的氧化应激反应,是氧化反应作用的靶,AP-1
的信号通路对转录和肿瘤的产生都有很重要的作
用。越桔提取物通过作用于细胞外信号调节激酶
1/2(extracellular regulated kinase1/2,ERK1/2)抑制
AP-1、NF-κB 和 JB6P+ 细胞的癌变,并诱导人白血
病HL-60 细胞凋亡,引起癌细胞死亡[20]。
潘一峰等[14,21]对越桔果渣中提取的黄酮抗氧化
性研究,发现FFV可有效降低大鼠肝肾中自发性和
Fe2+-Vc、H2O2 诱导的丙二醛(MDA)生成,抑制H2O2
诱导产生的红细胞溶血和肝脂质过氧化作用,以及
阻止Fe2+ 诱导卵黄蛋白低密度脂蛋白的氧化作用,
显著降低小鼠的肝、肾、脑的 M D A 含量,提高
肝和血浆中超氧化物歧化酶(S O D )和过氧化氢酶
(CAT)的活性,对高脂血症具有一定的治疗作用。
活性物质的作用与其结构有密切关系。Zheng
和 Wang[22]研究表明,槲皮素(黄酮)、3-半乳糖苷-
芍药花色素、3-半乳糖苷-矢车菊色素在红豆越桔
中含量较多,是最重要的抗氧化成分,这些物质抗
氧化作用的强弱与其在浆果中的结构和含量有关:
槲皮素和花青素-3,4-二羟基取代物在B环上以及在
A和B 环之间存在共轭结构,有很强的抗氧化作用。
咖啡酸也具有很强的抗氧化作用,这可能与其3、4
位上的氢化有关[22]。
1.1.2 越桔活性成分其他作用 有报道显示对小鼠
口服红豆越桔茎叶提取物后血液中吸收的成分进行
研究,在服用提取物的小鼠血浆中发现两种化合
物,秦皮苷和熊果苷,通过病理学试验证明这两种
物质具有消炎、止咳、祛痰的功效。经临床治疗
证实,越桔对急慢性支气管炎及其他呼吸道感染疾
病有显著疗效[23,24]。于妮娜等[25]研究越桔提取物临
床治疗急、慢性支气管炎的机理发现越桔提取物抑
制二氧化硫引起的支气管腺体的病理性改变,对二
氧化硫性慢性支气管炎模型小鼠具有治疗作用。
据《中药大辞典》记载:红豆越桔可用于风
湿、痛风。郭小李和瞿伟菁[26]以小鼠为研究对象对
越桔果实是否具有抗痛风效应进行试验,其结果表
明,越桔果渣黄酮(FFV)对高尿酸血症有一定的改
善效应。
红豆越桔具有改善认知能力、提高记忆力的作
用。张俊鸽等[27]用对照法研究越桔提取物(Billberry
P.E, BPE)对戊巴比妥钠所致小鼠学习记忆获得障碍
的影响。实验小鼠随机分成 6 组,分别为正常对照
组、模型组、人参总皂苷(50mg/kg)组和BPE(100、
200、400mg/kg)组。灌胃21 d 后制备学习记忆障
碍模型,除正常对照组外,均分别静脉注射15 mg/
kg戊巴比妥钠。采用Morris水迷宫测定越桔提取物
对小鼠学习记忆的影响;然后检测脑组织中丙二醛
(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和胆碱脂酶(CHE)的
含量及活性。结果表明对戊巴比妥钠所致学习记忆
获得障碍小鼠在100mg/kg BPE 组有显著的改善作
用,200、400mg/kg BPE 有改善作用,而且可减
少小鼠脑中 MDA 的含量、提高 SOD 及 CHE 活性,
实验证明了越桔提取物对戊巴比妥钠所致小鼠学习
记忆获得障碍有改善作用。
刘春民等[28]报道,长期使用越桔花青素可以明
显减轻视疲劳,改善视力,对青少年近视有很好的
预防和改善作用。陈英等[ 2 9 ] 研究了原花青素
(procyanidins, PC)对氧化损伤晶状体的形态学及抗氧
化系统的影响。通过与氧化损伤组、维生素C 组以
及维生素 E 组比较,发现 PC 可提高氧化损伤晶状
体的抗氧化能力,降低脂质过氧化物水平,减轻晶
状体损伤程度。
2 红豆越桔的开发和利用
2.1 红豆越桔食用开发与研究
红豆越桔生长于我国的东北等高寒地带,多为
野生,无化学物质和农药污染之虑,是加工食品极
好的天然原料。越桔果实营养丰富含有 18 种氨基
酸,8 种必需氨基酸,而且含量较高,还含有多
种维生素和微量元素,有很高的营养价值[30],既可
154 生命科学 第21卷
鲜食,又可以制作加工成果酱、果汁、酿造果酒、
果醋等[31,32]。在民间很早就有红豆越桔的利用。
随着人们对天然、健康饮食的追求,越桔产
品的开发研究发展迅速。黑龙江省粮油进出口公司
从1989年开始尝试用进口丹麦流化床设备生产速冻
果,试加工了5 吨冷冻越桔果出口,质量很好。智
明[6]对越桔速冻加工技术进行了改进,提高了产品
质量。在东北地区,有很多公司对红豆越桔资源进
行开发,开发出以红豆越桔果为原料的果汁,以及
以茎叶为原料的保健茶,经检测均含有丰富的营养
物质,具有很好的保健功能,有些产品曾获得国家
绿色食品发展中心批准使用的“绿色食品”标志[33]。
有的对红豆越桔果汁的加工工艺进行改进,并提出
了在果汁中添加适量甘油来改善口味的方法[34]。在
红豆越桔果汁的基础上又有人研制新的果汁乳饮
料,增加了红豆越桔饮品的种类[35]。采用一系列先
进的加工工艺精制而成的果酒芳香清雅、风格独
特,是一种营养价值很高的保健饮料酒[36]。红豆越
桔果实中花色素含量很高,是天然食用色素的重要
来源[37]。
2.2 红豆越桔的药用开发与研究
红豆越桔具有抗氧化、抗菌消炎、止咳、平
喘祛痰等功效,还可以诱导癌细胞的死亡。因此,
红豆越桔可以用来预防和治疗由活性氧引起的各种疾
病。 衣晓峰和杨晓春[23]利用越桔水煎剂和冲剂对急
慢性呼吸道感染进行临床治疗,取得很好疗效。Ho
等[38]研究越桔中抗菌抗氧化成分,认为其可以用于
对牙周疾病的治疗。红豆越桔具有消炎、止咳、祛
痰的作用,抗菌作用,抗氧化,可用于治疗牙周
疾病。越桔果实中的花色苷素对人的眼睛有益,可
以消除眼睛疲劳,改善视力,有防止视网膜蛋白质
变性引起的白内障。有些公司生产的已研制出含有
从越桔中提取的天然物质的益视胶囊,能缓解视疲
劳,提高视力,具有改善视力的保健功能。
在欧洲很早就有用越桔作原料生产药物的报
道。作为医药用品原料使用的越桔提取物呈粉末
状,含花青甙 25% 以上,成药中一般含 0.25% -
0.3%的花青甙。1976年,意大利第一次用于制造药
品TEGENS,一片中含有80mg 花青甙和125mg 甘
醇。1995年新开发产品有法国生产的DIFRAEL100、
意大利生产的 ANTOCIN30、新西兰生产的STRIX
均为速效性片剂,服用后能缓解眼疲劳,4h 见效,
24h 作用消失。一片中含花青甙12mg、1mg β- 胡
萝卜素。这些制品在欧洲被用作眼病药剂或保健药
品,效果得到普遍承认[39 ]。
2.3 红豆越桔的其他应用
刘新民[40]曾对越桔红素在化妆品中的应用价值
进行研究分析,认为越桔红素是一种值得在化妆品
领域应用的天然色素。在当今的化妆品市场中就有
很多添加了越桔提取物的化妆品,比如一些精华液
和眼霜中添加了越桔提取物,或以越桔提取物为主
要成分对皮肤有很好的保护和改善作用。
阎照升[41]用越桔提取色素和果汁后的果渣配成
饲料喂鸡,添加适量(3%)的越桔果渣后可明显提高
产蛋率,提高饲料质量,降低饲料支出。
3 红豆越桔活性成分研究展望
红豆越桔作为一种新兴水果,引起世界的关
注。除了红豆越桔含丰富的营养,近年来有关抗氧
化性、抗肿瘤、抗菌、抗癌等作用也有很多报道,
但对红豆越桔所含的生理活性物质的作用机理方面
的研究还比较少,比如红豆越桔活性成分在抗肿瘤
作用中诱导细胞凋亡的作用机理及与凋亡相关的生
理生化变化等的研究有待于进一步深入研究,红豆
越桔保健功能值得进一步开发和利用,以提供更广
阔的市场应用前景。
[参 考 文 献]
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