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2012
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ChineseJournalofBioprocessEngineering
Vol.10No.5
Sep.2012
doi:10.3969/j.issn.1672-3678.2012.05.009
NOPH
:2011-12-01
JQR!
:
$¹º»¼I½A¾¿ÀÁ
(2010GXNSFD013030);
$GH}¼¯P®¯pªÉÀ¾½¾¿ÀÁ
(2009115);
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(09YJ17SW02)
ST.U
:
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(1983—),
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:1672-3678(2012)05-0044-06
Purificationandcharacterizationofcompleteandtruncated
formsofCa2+independentαamylases
WANGChenghua1,2,SHENNaikun2,QINYan2,ZHUJin2,WANGQingyan2,
HEBingfang1,HUANGRibo1,2
(1ColegeofBiotechnologyandPharmaceuticalEngineering,NanjingUniversityofTechnology,Nanjing210009,China;
2StateKeyLaboratoryofNonFoodBiomassandEnzymeTechnology,NationalEngineeringResearchCenterfor
NonFoodBiorefinery,GuangxiKeyLaboratoryofBiorefinery,GuangxiAcademyofSciences,Nanning530007,China)
Abstract:TwoformsofCa2+independentαamylases(Amy7BandAmy7S),fromBacilussubtilisCN7,
werepurifiedandcharacterized.TheenzymaticstarchhydrolysisproductswereanalyzedbyHPLC.The
resultsshowedthattheAmy7Bwaspurifiedby36foldandAmy7Swaspurifiedby75foldsimultaneously
afterthermaldenaturation,ultrafiltration,ammoniumsulfateprecipitation,andmolecularsievechroma
tography.BothformshadthethesameoptimumpH65,thesameoptimumtemperatureof65℃ and
verysimilaramylolyticpatern.CalciumionsandEDTAhadnosignificantefectsontheiractivities.
However,theAmy7S(47×104)wasapproximately20×104,shorterthantheAmy7B(67×104),
thehalfinactivationtemperatureandthespecificactivityofAmy7Swere623℃ and(185387±
7561)U/mg,theywerehigherthanthatat596℃ and(90599±9652)U/mgofAmy7B.
Keywords:aciduric;αamylase;Bacilussubtilis;calcium;starchhydrolysis
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1 B.subtilisCN7α ~Ρxy
Table1 PurificationresultsofαamylasesfromB.subtilisCN7
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