全 文 ：第７卷第１期
２００９年１月
生 物 加 工 过 程
ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＢｉｏｐｒｏｃｅｓｓＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ
Ｖｏｌ．７Ｎｏ．１
Ｊａｎ．２００９
收稿日期：２００８０５２９
基金项目：河北省科技厅基金资助项目（０４５４７００５１２Ｄ２）
作者简介：王 静（１９７８—），女，河北正定人，工程师，研究方向：生物制药；王丽丽（联系人），教授，Ｅｍａｉｌ：ｗａｎｇｌｉｌｉ＠ｈｅｂｕｓｔ．ｅｄｕ．ｃｎ
一株芽孢杆菌在维生素 Ｃ二步发酵中
对小菌的促进作用
王 静１，冯文亮２，３，王丽丽２，仪 宏２
（１．华北制药维尔康有限公司，石家庄 ０５００３１；
２．河北科技大学 生物科学与工程学院，石家庄 ０５００１８；
３．华北制药生物燃料研究所，石家庄 ０５００３５）
摘 要：从土壤中分离到１株能更好促使小菌生长和产酸的芽孢杆菌Ｂ６０１，作为伴生菌与巨大芽孢杆菌相比，在生长
过程中，发酵液中Ｂ６０１活菌数小于巨大芽孢杆菌，而其芽孢数则多于巨大芽孢杆菌。对Ｂ６０１组成菌系的发酵条件
进行优化，得到如下结果：１００ｇ／ＬＬ山梨糖、６ｇ／Ｌ尿素、１０ｇ／Ｌ玉米浆、培养温度３０℃和发酵周期４４ｈ。与巨大芽孢
杆菌组成菌系相比其底物Ｌ山梨糖质量浓度提高了２５％，尿素下降了５０％，玉米浆质量浓度下降了３３％，温度提高
了２℃，发酵周期缩短了４ｈ。结果表明：Ｂ６０１作为伴生菌，与巨大芽孢杆菌相比，该菌株明显提高了发酵效率。
关键词：巨大芽孢杆菌；伴生菌；２酮基Ｌ古龙酸；普通生酮基古龙酸菌；维生素Ｃ
中图分类号：ＴＱ９２４ 文献标志码：Ａ 文章编号：１６７２－３６７８（２００９）０１－００２４－０５
ＰｒｏｍｏｔｉｏｎｅｆｅｃｔｏｆＢａｃｉｌｕｓｍｅｇａｔｅｒｉｕｍｏｎＫｅｔｏｇｕｌｏｎｉｇｅｎｉｕｍ
ｖｕｌｇａｒｅｉｎｔｗｏｓｔｅｐｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎｏｆｖｉｔａｍｉｎＣ
ＷＡＮＧＪｉｎｇ１，ＦＥＮＧＷｅｎｌｉａｎｇ２，３，ＷＡＮＧＬｉｌｉ２，ＹＩＨｏｎｇ２
（１．ＮｏｒｔｈＣｈｉｎａＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＷｅｌｃｏｍｅＣｏ．，Ｌｔｄ．，Ｓｈｉｊｉａｚｈｕａｎｇ０５００３１，Ｃｈｉｎａ；
２．ＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇＩｎｓｔｉｔｕｔｅ，ＨｅｂｅｉＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｓｈｉｊｉａｚｈｕａｎｇ０５００１８，Ｃｈｉｎａ；
３．ＮｏｒｔｈＣｈｉｎａＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＢｉｏｆｕｅｌＲｅｓｅａｃｈＩｎｓｔｉｔｕｔｅ，Ｓｈｉｊｉａｚｈｕａｎｇ０５００３５，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＡｓｔｒａｉｎｏｆＢａｃｉｌｕｓｍｅｇａｔｅｒｉｕｍＢ６０１，ｉｎｐｏｓｓｅｓｓｉｏｎｏｆｐｒｏｍｏｔｉｏｎｅｆｅｃｔｏｎＫｅｔｏｇｕｌｏｎｉｇｅｎｉｕｍ
ｖｕｌｇａｒｅｇｒｏｗｔｈａｎｄａｃｉｄｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ，ｗａｓｓｃｒｅｅｎｅｄｆｒｏｍｓｏｉｌ．Ｕｎｄｅｒｍｉｘｅｄｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ，ｔｈｅ
ｎｕｍｂｅｒｏｆｔｈｅｖｉａｂｌｅｂａｃｔｅｒｉｕｍｗａｓｌｅｓｓｔｈａｎｔｈａｔｏｆＢ．ｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ，ｂｕｔｔｈｅｎｕｍｂｅｒｏｆｔｈｅｓｐｏｒｅｓｗａｓ
ｍｏｒｅｔｈａｎｔｈａｔｏｆＢ．ｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ．ＴｈｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｆｏｒｔｈｅｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎａｓｓｏｃｉａｔｅｄＢ６０１ｗｅｒｅｏｐｔｉｍｉｚｅｄａｓ
ｆｏｌｏｗｓ：Ｌｓｏｒｂｏｓｅ１０％，ｕｒｅａ０．６％，ｃｏｒｎｓｔｅｅｐｌｉｑｕｏｒ１０％，ｃｕｌｔｕｒｅｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ３０℃，ｐＨ６８，ａｎｄ
ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎｔｉｍｅ４４ｈ．Ｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ，Ｌｓｏｒｂｏｓｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｗａｓｅｎｈａｎｃｅｄｂｙ
２５％，ｔｈｅｕｒｅａｃｏｎｓｕｍｐｔｉｏｎａｎｄｔｈｅｃｏｒｎｓｔｅｅｐｌｉｑｕｏｒｗｅｒｅｄｅｃｒｅａｓｅｄｂｙ５０％ ａｎｄ３３％，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ，
ｔｈｅｃｕｌｔｕｒｅｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｗａｓｉｎｃｒｅａｓｅｄｂｙ２℃，ａｎｄｔｈｅｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎｔｉｍｅｗａｓｒｅｄｕｃｅｄｂｙ４ｈ．Ｔｈｅｅｆｉ
ｃｉｅｎｃｙｏｆｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎｗａｓｉｍｐｒｏｖｅｄｕｓｉｎｇＢ６０１ａｓｓｏｃｉａｔｅｄｂａｃｔｅｒｉａ．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｂａｃｉｌｕｓｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ；ｂａｃｔｅｒｉａａｓｓｏｃｉａｔｅｄ；２ｋｅｔｏＬｇｕｌｏｎｉｃａｃｉｄ；Ｋｅｔｏｇｕｌｏｎｉｇｅｎｉｕｍｖｕｌｇａｒｅ；
ｖｉｔａｍｉｎＣ
我国于２０世纪７０年代首创的维生素Ｃ二步发
酵法，第二步是混菌发酵，其中普通生酮基古龙酸
菌（Ｋｅｔｏｇｕｌｏｎｉｇｅｎｉｕｍｖｕｌｇａｒｅ，俗称小菌）是产酸菌，
巨大芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｕｓｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ，俗称大菌）是伴
生菌。伴生菌对小菌的生长与产酸非常重要，目前
生产上所用伴生菌大多数是巨大芽孢杆菌，国内关
于伴生菌的研究已有很多，如对新伴生菌筛选苏云
金芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｕｓｔｈｕｒｉｎｇｉｇｎｓｉｓ）、蜡状芽孢杆菌
（Ｂａｃｉｌｕｓｃｅｒｅｕｓ）和掷孢酵母（Ｓｐｏｒｏｂｏｌｏｍｙｃｅｓｒｏ
ｓｅｕｓ）。也有对伴生菌进行诱变选育，如张舟等［１］对
巨大芽孢杆菌经紫外线诱变，获得２株耐低 ｐＨ，抗
２ＫＧＡ的菌株：Ｂｎ，Ｂ５，可促使普通生酮基古龙酸
生长，使其延滞期缩短，产酸增加。赵世光等［２］利
用离子束对巨大芽杆菌进行诱变，提高了伴生菌的
作用效果。当前对新型工艺研究方向主要是基因
工程菌，使两步发酵变为一步发酵，以葡萄糖为底
物的欧文氏菌和棒杆菌［３－４］，以山梨醇为底物的黑
醋菌与普通生酮基古龙酸菌［５－６］，都是把２个菌中
与生成２－酮基 －Ｌ－古龙酸（２ＫＧＡ）有关的基因
整合到１株菌中，目前基因工程菌还没有应用工业
化生产。所以当前对传统工艺进行优化与改造依
然具有重大意义。
本实验从土壤中分离１株能促进小菌生长和产
酸的芽孢杆菌，研究它对促进小菌发酵的影响。
１ 菌种与方法
１１ 菌 种
巨大芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｕｓｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ，俗称大
菌），普通生酮基古龙酸菌（Ｋｅｔｏｇｕｌｏｎｉｇｅｎｉｕｍｖｕｌ
ｇａｒｅ，俗称小菌），芽孢杆菌 Ｂ６０１，本实验室从土壤
中分离。
１２ 培养基
种子培养基（ｇ／Ｌ）：山梨糖２０，玉米浆３，牛肉浸
膏３，酵母浸膏３，蛋白胨 １０，尿素 １，ＫＨ２ＰＯ４·２Ｈ２Ｏ
１，ＭｇＳＯ４·７Ｈ２Ｏ０２，ＣａＣＯ３１。ｐＨ６８。
优化前发酵培养基（ｇ／Ｌ）：山梨糖 ８０，玉米浆
１５，尿素 １２，ＫＨ２ＰＯ４·２Ｈ２Ｏ１，ＭｇＳＯ４·７Ｈ２Ｏ０２，
ＣａＣＯ３１。ｐＨ６８。
优化后发酵培养基（ｇ／Ｌ）：山梨糖 １００，玉米浆
１０，尿素 ６，ＫＨ２ＰＯ４·２Ｈ２Ｏ１，ＭｇＳＯ４·７Ｈ２Ｏ０２，
ＣａＣＯ３１。ｐＨ６８。
１３ 分析方法
２ＫＧＡ分析方法采用碘量法［７］。
１４ 土壤中芽孢菌的分离
从不同地点取地表层以下５～１０ｃｍ处的土样
５～６份，放入灭菌的袋中备用。制备土壤悬液，稀
释适宜的浓度，８５℃加热１０ｍｉｎ。取０２ｍＬ加热
稀释样涂布平板，２８℃培养２４ｈ，筛选不同菌体和
菌落芽孢菌［８］。
２ 结果与讨论
２１ 从土壤中分离的芽孢菌产酸研究
从土壤中分离出８０种菌落和菌体形态各异的
芽孢菌，分别与小菌混合发酵，选择１０种有代表性
的菌株进行报道，以巨大芽孢杆菌作对照，培养基
成分是优化后发酵培养基，振荡培养４４ｈ，取样分别
测定发酵液中２ＫＧＡ质量浓度，结果见图１。由图
１可见：从土壤中分离的芽孢菌对小菌的产酸都有
促进作用，Ｂ６０１菌株对小菌产酸的促使作用优于巨
大芽孢杆菌，而其他９株芽孢菌产酸能力明显不如
巨大芽孢杆菌。Ｂ６０１菌株作为伴生菌发酵４４ｈ，２
ＫＧＡ质量浓度达１０５２３ｍｇ／ｍＬ，而巨大芽孢杆菌
作为伴生菌２ＫＧＡ质量浓度仅８５２５ｍｇ／ｍＬ。０号
菌为巨大芽孢杆菌，１～１０号菌分别为 Ｂ６０１、Ｂ６０２、
Ｂ６０３、Ｂ６０４、Ｂ６０５、Ｂ６０６、Ｂ６０７、Ｂ６０８、Ｂ６０９和Ｂ６１０。
图１ 从土壤中分离的各株芽孢菌对小菌产酸的影响
Ｆｉｇ．１ Ｔｈｅｅｆｅｃｔｏｆｓｐｏｒｅｂａｃｔｅｒｉａｉｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍｓｏｉｌｏｎ
２ＫＧＡｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｏｆＫｖｕｌｇａｒｅ
２２ Ｂ６０１菌株与巨大芽孢杆菌对小菌生长及产酸
影响
培养基成分是优化后发酵培养基，振荡培养
４４ｈ，在摇瓶培养条件下芽孢杆菌Ｂ６０１和巨大芽孢
杆菌分别与小菌混菌培养，不同时间取样测定发酵
液中小菌活菌数与产生２ＫＧＡ质量浓度，结果见图
２和图３。由图２可见，在发酵早期芽孢杆菌 Ｂ６０１
作为伴生菌，小菌生长较为迅速，但到发酵后期，４４
ｈ以后小菌生长开始衰退。由图３可见，在发酵早
５２ 第１期 王 静等：一株芽孢杆菌在维生素Ｃ二步发酵中对小菌的促进作用
期芽孢杆菌Ｂ６０１作为伴生菌小菌产酸一直优于巨
大芽孢杆菌，直到发酵的终点，Ｂ６０１菌株作为伴生
菌发酵４４ｈ即达到发酵终点，在Ｌ－山梨糖质量浓
度１００ｇ／Ｌ下 Ｂ６０１菌株明显优于巨大芽孢杆菌。
作为伴生菌，与巨大芽孢杆菌相比，由图 ３可知，
Ｂ６０１菌株使底物Ｌ－山梨糖质量浓度提高了２５％，
发酵周期缩短了４ｈ。
图２ 发酵过程中小菌活菌数的变化
Ｆｉｇ．２ ＴｈｅｃｈａｎｇｅｓｏｆｔｈｅｎｕｍｂｅｒｏｆｖｉａｂｌｅＫｖｕｌｇａｒｅ
ｉｎｔｈｅｐｒｏｃｅｓｓｏｆｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ
图３ 发酵过程中小菌产酸情况
Ｆｉｇ．３ Ｔｈｅｃｈａｎｇｅｓｏｆ２ＫＧＡｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｏｆＫｖｕｌｇａｒｅ
ｉｎｔｈｅｐｒｏｃｅｓｓｏｆｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ
２３ 巨大芽孢杆菌与 Ｂ６０１菌株在发酵液中活菌
和芽孢数的研究
文献［１］报道，伴生菌对小菌的生长和产酸作
用与芽孢的释放有关，本实验在混菌条件下培养，
培养基成分是优化后发酵培养基，振荡培养５２ｈ，
不同时间取样测定芽孢杆菌 Ｂ６０１与巨大芽孢杆
菌活菌数与芽孢数，结果见图４和图５。由图４可
见，在发酵的不同阶段巨大芽孢杆菌的活菌数明
显多于芽孢杆菌 Ｂ６０１，但由图５可见，在发酵不同
阶段芽孢杆菌 Ｂ２００６产生的芽孢数明显多于巨大
芽孢杆菌，这说明小菌的生长和产酸与芽孢数的
释放成正比。
图４ 在混合培养中作为伴生菌芽孢杆菌Ｂ６０１和
巨大芽孢杆菌活菌数的变化
Ｆｉｇ．４ ＴｈｅｃｈａｎｇｅｓｏｆｔｈｅｎｕｍｂｅｒｏｆｖｉａｂｌｅＢ６０１ｓｔｒａｉｎ
ａｎｄＢｍｅｇａｔｅｒｉｕｍａｓｓｏｃｉａｔｅｄｉｎｔｈｅｍｉｘｅｄ
ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ
图５ 在混合发酵中Ｂ６０１菌株和巨大芽孢
杆菌的芽孢数变化
Ｆｉｇ．５ ＴｈｅｃｈａｎｇｅｓｏｆｔｈｅｎｕｍｂｅｒｏｆｓｐｏｒｅｓｏｆＢ６０１
ｓｔｒａｉｎａｎｄＢｍｅｇａｔｅｒｉｕｍａｓｓｏｃｉａｔｅｄｉｎｔｈｅ
ｍｉｘｅｄｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ
２４ Ｂ６０１新型菌系发酵条件优化研究
通过Ｂ６０１菌株与巨大芽孢杆菌（Ｂｍｅｇａｅｒｉｕｍ）
对小菌促进作用的比较，发现Ｂ６０１菌株优势明显优
于巨大芽孢杆菌。维生素Ｃ二步混菌发酵过程中，影
响最终发酵结果的因素很多，在对新型菌系研究过程
中，选择了以下几个因素：山梨糖、尿素、玉米浆、培养
温度和培养液的ｐＨ，进行单因素初步研究。通过对
发酵条件的初步探索，以确定最佳发酵条件，提高发
酵的生产效率。
２４１ 山梨糖质量浓度对新型伴生菌系影响
维生素Ｃ二步混合菌发酵体系，过高山梨糖质
量浓度抑制小菌的生长和产酸。在新型伴生菌系
中，山梨糖的质量浓度分为６０、８０、１００和１２０ｇ／Ｌ，培
养基成分是优化后发酵培养基，振荡培养４４ｈ，取样
测定２ＫＧＡ的质量浓度，结果见图６。由图６可见，
山梨糖质量浓度高于１００ｇ／Ｌ，则２ＫＧＡ含量降低，
６２ 生 物 加 工 过 程 第７卷
同时产酸率也下降，因此１００ｇ／Ｌ山梨糖为最适质
量浓度。
图６ 山梨糖质量浓度对新型伴生菌系的影响
Ｆｉｇ．６ Ｔｈｅｅｆｅｃｔｏｆｔｈｅｓｏｒｂｏｓｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ
ｏｎｔｈｅｎｅｗｂａｃｔｅｒｉａａｓｓｏｃｉａｔｅｄｓｙｓｔｅｍ
２４２ 尿素浓度对新型伴生菌系的影响
在微生物的生长过程中尿素不仅作为 Ｎ源，而
且也作为一种生理碱调节微生物生长的 ｐＨ环境。
本实验选取不同质量浓度的尿素分别进行培养，培
养基成分是优化后发酵培养基，振荡培养４４ｈ，取样
测定２ＫＧＡ的质量浓度，结果如图７所示。当尿素
质量浓度为６ｇ／Ｌ，对小菌产酸起到很好的促进作
用，如低于６ｇ／Ｌ，反应未到终点尿素已消耗完，对小
菌起不到很好的促进作用，高于６ｇ／Ｌ对小菌的产
酸也没有太好的促进作用，所以选择６ｇ／Ｌ作为小
菌的最适尿素质量浓度。
图７ 尿素质量浓度对新型伴生菌系的影响
Ｆｉｇ．７ Ｔｈｅｅｆｅｃｔｏｆｔｈｅｕｒｅａｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ
ｏｎｔｈｅｎｅｗｓｔｒａｉｎａｓｓｏｃｉａｔｅｄｓｙｓｔｅｍ
２４３ 玉米浆浓度对新型伴生菌系的影响
选用不同质量浓度的玉米浆进行实验，培养基
成分是优化后发酵培养基，振荡培养４４ｈ，取样测定
２ＫＧＡ的质量浓度，结果如图８所示。玉米浆在１０
ｇ／Ｌ的质量浓度时已可满足大菌生长和小菌产酸的
营养需求，过高的浓度对小菌产酸没有明显抑制，
最终选取玉米浆的质量浓度为１０ｇ／Ｌ。
图８ 玉米浆质量浓度对新型伴生菌系的影响
Ｆｉｇ．８ Ｔｈｅｅｆｅｃｔｏｆｔｈｅｃｏｒｎｓｔｅｅｐｌｉｑｕｏｒｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ
ｏｎｔｈｅｎｅｗｓｔｒａｉｎａｓｓｏｃｉａｔｅｄｓｙｓｔｅｍ
２４４ ｐＨ对新型伴生菌系的影响
用６ｍｏｌ／ＬＮａＯＨ和 ＨＣｌ溶液来调节 ｐＨ，培养
液ｐＨ分别为５０、６０、６８、７５和８０，培养基成分
是优化后发酵培养基，振荡培养４４ｈ，取样测定 ２
ＫＧＡ的质量浓度，结果如图９所示。当 ｐＨ为６８
时，产生２ＫＧＡ的效果最好。
图９ 培养ｐＨ对新型伴生菌系的影响
Ｆｉｇ．９ ＴｈｅｅｆｅｃｔｏｆｐＨｖａｌｕｅｏｎｔｈｅｎｅｗ
ｓｔｒａｉｎａｓｓｏｃｉａｔｅｄｓｙｓｔｅｍ
图１０ 培养温度对新型伴生菌系的影响
Ｆｉｇ．１０ Ｔｈｅｅｆｅｃｔｏｆｔｈｅｃｕｌｔｕｒｅｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ
ｏｎｔｈｅｎｅｗｓｔｒａｉｎａｓｓｏｃｉａｔｅｄｓｙｓｔｅｍ
２４５ 培养温度对新型伴生菌系的影响
分别在２５、２８、３０、３２和３５℃的条件下进行培
养，培养基成分是优化后发酵培养基，振荡培养４４ｈ，
取样测定 ２ＫＧＡ的质量浓度，结果如图 １０所示。
７２ 第１期 王 静等：一株芽孢杆菌在维生素Ｃ二步发酵中对小菌的促进作用
３０℃产酸效果最好，温度低于３０℃，小菌生长较慢，
温度低于２８℃，抑制了小菌生长。
３ 结 论
１）通过比较巨大芽孢杆菌与土壤中芽孢杆菌
Ｂ６０１菌株之间对小菌生长和产酸的影响，发现
Ｂ６０１菌株促进小菌的生长和产酸优于巨大芽孢杆
菌。证实了芽孢杆菌促使小菌生长同时伴随着小
菌产酸的增加。Ｂ６０１作为伴生菌，发酵４４ｈ时２
ＫＧＡ质量浓度达到１０５２３ｍｇ／ｍＬ，而巨大芽孢杆
菌酸体系下其质量浓度仅７５２５ｍｇ／ｍＬ，如用 Ｂ６０１
菌株作为伴生菌，Ｌ－山梨糖质量浓度可提高到１００
ｍｇ／ｍＬ，即以 Ｂ６０１菌株可提高小菌的抗逆性，使底
物Ｌ山梨糖浓度提高。
２）比较２株伴生菌在混合菌中的生长与芽孢
数，发现巨大芽孢杆菌的活菌多于 Ｂ６０１菌株，但
Ｂ６０１菌株的芽孢数多于巨大芽孢杆菌。此结论可
证实，小菌的生长与产酸确实与芽孢的释放有关。
３）通过对新型伴生菌系发酵条件优化，得到最
适发酵条件，分别为山梨糖１００ｇ／Ｌ、尿素６ｇ／Ｌ、玉
米浆１０ｇ／Ｌ、ｐＨ６８、培养温度３０℃。作为伴生菌，
与巨大芽孢杆菌相比，其发酵周期缩短４ｈ，底物浓
度提高了２５％，尿素质量浓度下降了５０％，玉米浆
浓度下降了 ３３％，温度提高了 ２℃。结果表明以
Ｂ６０１作为伴生菌，提高了发酵效率。
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