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Kinetics of ultrasonic assisted extraction of saponin from Dioscorea zingiberensis

盾叶薯蓣总皂苷超声提取及动力学



全 文 :第7卷第4期
2009年7月
生 物 加 工 过 程
ChineseJournalofBioprocessEngineering
Vol.7No.4
July2009
doi:10.3969/j.issn.1762-3678.2009.04.004
收稿日期:2008-10-13
基金项目:国家自然科学基金资助项目(20772077,10474061)
作者简介:牛春玲(1981—),女,内蒙古呼和浩特人,硕士,研究方向:生物物理学;吴胜举(联系人),副教授,Email:wushju@snnu.edu.cn
盾叶薯蓣总皂苷超声提取及动力学
牛春玲,吴胜举,沈壮志,郭树琴,郝长春
(陕西师范大学 物理学与信息技术学院,西安 710062)
摘 要:考察了乙醇体积分数、溶剂用量、超声时间、超声功率和超声频率对盾叶薯蓣总皂苷提取率的影响,研究了
以体积分数70%乙醇溶液或水作溶剂从盾叶薯蓣中超声提取总皂苷的动力学模型。结果表明,在扩散过程中超声
提取薯蓣总皂苷的动力学模型满足非定常扩散方程,相关系数为r=095,最佳超声时间为40min。
关键词:盾叶薯蓣;皂苷;提取;超声
中图分类号:Q943.1    文献标志码:A    文章编号:1672-3678(2009)04-0020-04
Kineticsofultrasonicassistedextractionofsaponinfrom
DioscoreazingiberensisC.H.Wright
NIUChunling,WUShengju,SHENZhuangzhi,GUOShuqin,HAOChangchun
(ColegeofPhysicsandInformationTechnology,ShaanxiNormalUniversity,Xi′an710062,China)
Abstract:Efectsofethanolconcentration,ratioofsolventtobiomass,ultrasonicprocessingtime,ultra
soundpower,andultrasoundfrequencyonextractionyieldofgrossthesaponinwereinvestigated.Water
andaqueousethanol(70%,v/v)wereusedtoextractsaponinfrom theDioscoreazingiberensis
C.H.Kineticsoftheultrasonicextractionwasdescribedasanunsteadystatedifusionmodel.Thelinear
corelationcoeficientrwas095.Theoptimalsonicationtimeofsaponinconcentrationintheextraction
liquidreached40min.
Keywords:Dioscoreazingiberensis;saponin;extraction;ultrasound
  盾叶薯蓣(DioscoreazingiberensisC.H.Wright),
为薯蓣属植物,其活性物质薯蓣皂苷元 (俗称皂素)
以皂苷的形式存在于根茎中,具有治疗冠心病、调节
新陈代谢、抗高血脂、抗癌等效果,是合成激素类药物
的重要原料[1-2]。从盾叶薯蓣中提取薯蓣皂素的方
法有直接酸水解法、发酵 酸水解法、酶解 酸水解法、
预分离纤维素淀粉法、超临界萃取法等。目前生产中
大部分企业采用直接酸水解法,该方法的缺点是酸和
萃取剂用量大,产生的废水废渣多,副产品淀粉和纤
维素无法回收等[3]。
针对以上存在的问题,笔者先利用超声提取法
从盾叶薯蓣中分离出总皂苷粗品,应用非定常扩散
模型模拟超声提取薯蓣总皂苷的动力学过程[4],对
其提取条件进行优化,再加酸水解提取薯蓣皂苷
元,由于纤维素、淀粉不参与水解和萃取过程,从而
大大降低了酸和萃取剂的用量,缓解了产生的废水
废渣对环境的污染,同时也为回收淀粉和纤维素等
副产品提供了可能。本研究对超声提取总皂苷及
其动力学模型进行实验研究,对进一步优化提取皂
苷元的影响因素有重要意义。
1 材料与方法
1.1 仪器与试药
JY 92I型超声细胞破碎机 宁波新芝生物科
技股份有限公司;TU 1810型紫外 可见分光光度
计 北京普析通用仪器有限公司。
薯蓣皂苷标品购于上海融禾医药制品有限公
司;盾叶薯蓣购于西安药材市场。
1.2 提取方法
精确称取10g盾叶薯蓣粉末,加入乙醇溶液中,
将容器固定于反应架上,启动超声波细胞破碎机进
行提取,改变乙醇体积分数、溶剂用量、超声时间、
超声功率、超声频率等因素,提取完毕后抽滤、浓
缩,回收溶剂得浸膏。将浸膏加水悬浮,置分液漏
斗中,加入石油醚充分振摇萃取至石油醚层无色,
弃去石油醚相,水相加入2倍量的水饱和正丁醇溶
液萃取,重复3次,合并萃取液,再用正丁醇饱和过
的水洗涤萃取液,减压回收正丁醇,取少量浸膏溶
于甲醇溶液中用于检测含量[5]。
1.3 薯蓣总皂苷的分析
据文献[6],称取薯蓣皂苷对照品,用甲醇溶解,
配制成质量浓度为01mg/mL的对照液,分别移取
04、08、12、16和20mL上述溶液置于具塞试管
内挥干溶剂,再分别依次加入02mL5%香草醛 冰
醋酸溶液和08mL高氯酸,混匀、密塞,置60℃恒温
水浴中显色15min后取出,立即冰水冷却5min后各加
入冰醋酸40mL摇匀,静置10min,以试剂空白为参
比,用紫外 可见分光光度计于波长547nm处测薯蓣
皂苷对照品吸光度。以薯蓣皂苷质量浓度(ρ)为横坐
标、吸光度为纵坐标,绘制薯蓣皂苷标准曲线,其线性
方程为 A=001108ρ-001112,相关系数r=09999。
总皂苷提取率=提取液中皂苷质量(g)所用盾叶薯蓣粉末量(g)×100%
14 超声提取动力学模型
超声提取生物活性物质满足非定常扩散
模型[7]:

q0
=(1-b)e-kt (1)
其线性变换为
lnqq0
=ln(1-b)-kt (2)
式中:b为洗涤参数;k为慢萃取参数;q为提取过程中
从原料中提取出的提取物质量(g);q0为提取物在原料
中的理论质量(g);t为提取时间(min)。
2 结果与讨论
2.1 乙醇体积分数对总皂苷提取率的影响
在试样中加入100mL不同体积分数的乙醇溶
液连续超声提取40min,超声功率400W,超声频率
20kHz,考察不同乙醇体积分数对总皂苷提取率的
影响,结果见图1。由图1可知,随乙醇体积分数的
增加,总皂苷的提取率是先增大后减小。因为乙醇
体积分数较低时,一些亲水性蛋白质、淀粉和部分
多糖及其他水溶性杂质会溶于溶剂中,给后续的操
作带来困难;而乙醇体积分数太高时,可使植物细
胞蛋白质很快凝固,妨碍乙醇向植物细胞内渗透,
影响浸出。故确定最佳乙醇体积分数为70%。
图1 乙醇体积分数对提取率的影响
Fig.1 Efectsofethanolvolumeratio
extractionyield
2.2 液固比对总皂苷提取率的影响
在试样中加入体积分数70%乙醇溶液连续超
声提取40min,超声功率400W,超声频率20kHz,考
察不同液固比对总皂苷提取率的影响,结果见图2。
随着溶剂用量的增加,总皂苷提取率的变化幅度不
大。因此从保证提取效果、减小溶剂用量和降低浓
缩负荷等方面考虑,确定液固比为10∶1(mL/g)。
图2 液固比对提取率的影响
Fig.2 Efectsofliquidtosolidratioonextractionyield
12 第4期 牛春玲等:盾叶薯蓣总皂苷超声提取及动力学
2.3 超声时间对总皂苷提取率的影响
在试样中加入100mL体积分数 70%的乙醇溶
液连续超声提取,超声功率400W,超声频率
20kHz,考察不同超声时间对总皂苷提取率的影响,
结果见图3。由图3可知,超声时间在40min内,总
皂苷提取率随时间的延长而增大,这是由于随超声
时间的延长,细胞的破裂越来越完全。当超过
40min,细胞内大量不溶物及黏液质等混入提取液
中,使溶液中杂质增多,黏度增大,从而影响了有效
成分的溶出。综合考虑超声40min为提取效果最
佳点。
图3 超声时间对提取率的影响
Fig.3 Efectsofultrasonictimeonextractionyield
2.4 超声功率对总皂苷提取率的影响
在试样中加入100mL体积分数70%的乙醇溶
液连续超声提取40min,超声频率20kHz,考察不同
超声功率对总皂苷提取率的影响,结果见图4。实
验结果表明:超声功率对提取率有较大影响,输出
功率增大有利于液体中空化泡的形成,从而有利于
总皂苷的溶出。输出功率增大到400W后,提取率
有所下降,因此选择超声功率400W。
图4 超声功率对提取率的影响
Fig.4 Efectsofultrasonicpoweronextractionyield
2.5 超声频率对总皂苷提取率的影响
在试样中加入100mL体积分数70%的乙醇溶
液连续超声提取40min,超声功率400W,考察不同
超声频率对总皂苷提取率的影响,当超声频率分别
为2026、3148、3921kHz时,皂苷提取率分别为
693%、697%和 721%,实验结果表明随着频率
的增加,有效成分的浸出是增加的,在实验所用的
频率中存在1个最佳值,这主要是由于高频率致使
空化泡的崩溃次数增加,空化所导致的多种机械效
应也增强,但在一定条件下频率可增加的幅度是有
限的,况且频率升高时,声波在传播的过程中衰减
也随之增大,且频率升高将导致空化的阈值升高,
空化的效果减弱,因此频率不宜过高。
2.6 超声提取机理的分析
取10g试样加入100mL体积分数70%的乙醇溶
液或水,超声功率400W,超声频率20kHz,连续超声
时间选择5、10、20、40、80min,考察薯蓣总皂苷提取
率随提取时间的变化,结果如图5所示。从图5中能
够明显看出超声提取过程的2个机理:洗涤过程,在
提取刚开始总皂苷在提取液中的浓度迅速增加;慢萃
取 (大约10min以后),提取物浓度增加缓慢。超声
在液体中传播时产生的空化效应,是集中声场能量并
迅速释放的一系列动力学过程。伴随空化产生的强
大剪切力效应能使植物细胞壁破裂,使细胞更容易释
放内溶物而增大传质速率;声空化的湍流效应、微扰
效应和界面效应,强化了微孔扩散,促使液 固之间发
生分子的相互渗透,从而促进了中药有效成分的溶
解,加快了有效成分进入介质,并与介质充分混合。
由实验可得超声提取的最佳时间约为40min。以
70%乙醇作溶剂提取薯蓣总皂苷的效果要比水作溶
剂提取的效果好,这是因为盾叶薯蓣中的蛋白质、淀
粉、可溶性多糖等杂质在水中容易被浸出,造成溶液
浓度增加,形成黏度较大的料浆,影响了超声波的作
用效果,而体积分数70%乙醇可以减少大量杂质的
浸出,提高了薯蓣总皂苷的提取率。
图5 总皂苷提取质量浓度随超声时间的变化
Fig.5 VariationoftheconcentrationofESintheliquidextr
actwithincreasingsonicationtimeduringextraction
22 生 物 加 工 过 程   第7卷 
2.7 超声提取动力学
把实验所得数据代入14给出的超声提取动力
学方程中,其线性变换如图6所示。由图6可知,在
洗涤过程中实验数据是非线性的,而在慢萃取阶段
实验数据线性关系较好,相关系数 r=095,对慢萃
取阶段的实验数据进行线性回归,得以体积分数
70%乙醇作溶剂超声提薯蓣总皂苷的参数值为 b=
0324,k=252×10-3min-1,而以水作溶剂的提取
参数值为 b=0357,k=451×10-3min-1,由此可
知动力学参数值与提取溶剂有关。
图6 基于动力学模型的线性变换
Fig.6 Linearizedformsofkineticsequations
3 结 论
超声提取盾叶薯蓣总皂苷与传统提取方法相
比,由于超声空化效应促使液 固之间发生分子的相
互渗透,促进了中药有效成分的溶解,加快了有效
成分进入介质,并与介质充分混合,因此其提取效
率较高,又由于超声提取具有节能、减少环境污染
等优点,故在工业上的推广有着很大的可行性。
盾叶薯蓣总皂苷的超声提取很好地符合了非定
常扩散模型,说明非定常扩散模型适合于超声提取薯
蓣总皂苷,实验表明最佳的超声时间为40min,以体
积分数70%乙醇作溶剂提取总皂苷要优于水作溶剂
的提取。本研究所建立动力学模型不仅有助于理解
超声提取过程,而且对于控制和优化参数都有很重要
的意义。
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32 第4期 牛春玲等:盾叶薯蓣总皂苷超声提取及动力学