全 文 ：摇 核 农 学 报摇 圆园员圆袁圆远渊圆冤院园圆苑缘 耀 园圆苑怨允燥怎则灶葬造 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽
文章编号院员园园园鄄愿缘缘员渊圆园员圆冤园圆鄄园圆苑缘鄄园缘
收稿日期院圆园员员鄄园圆鄄圆员摇 接受日期院圆园员员鄄园怨鄄员圆
基金项目院浙江省食用菌创新团队渊圆园园怨砸缘园园圆怨冤袁浙江省重大科技专项渊圆园园苑悦员圆园园圆冤袁国家科技支撑计划渊圆园园愿月粤阅粤员月园猿冤
作者简介院冯伟林渊员怨苑怨 鄄冤袁男袁浙江乐清人袁硕士袁助理研究员袁主要从事食药用菌的遗传育种与栽培遥 栽藻造院园缘苑员鄄愿远源园源园员苑曰 耘鄄皂葬蚤造院枣藻灶早憎造员怨怨苑岳
员远猿援 糟燥皂
通讯作者院蔡为明渊员怨远苑鄄冤袁 男袁浙江东阳人袁博士袁研究员袁主要从事食药用菌的遗传育种与栽培遥 栽藻造院园缘苑员鄄愿远源园源园员苑曰 耘鄄皂葬蚤造院糟葬蚤憎皂缘圆苑岳 员圆远援
糟燥皂
杏鲍菇单核体菌株及其杂交后代筛选和鉴定
冯伟林员 摇 蔡为明员 摇 金群力员 摇 沈颖越员 摇 范丽军员 摇 刘晓红圆
渊员郾 浙江省农业科学院园艺所袁浙江 杭州摇 猿员园园圆员曰 圆郾 安徽农业大学生命科学学院袁安徽 合肥摇 圆猿园园猿远冤
摘摇 要院通过对杏鲍菇单核菌丝显微观察尧拮抗尧陨杂杂砸分子标记分析袁研究单核体菌株的合理选配及杂种
优势遥 结果显示袁 圆 个亲本的 愿 个不同交配类型可以分为两类袁一类为亲本 在粤粤杂孕藻园园猿 的单核体菌株
栽员尧栽圆尧栽猿尧栽源袁另一类为亲本 在粤粤杂孕藻园园苑 的单核体菌株 栽缘尧栽远尧栽苑尧栽愿遥 通过对 愿 个交配类型单核体单
伊单杂交袁经镜检后获得 员圆 个杂交组合遥 通过亲本菌株及其杂交后代菌丝体生长速度与生长势比较袁
发现杂交后代菌丝体 栽圆栽远 菌株平均生长速度最快袁达到 园郾 源源猿糟皂 辕 凿曰应用 陨杂杂砸 分子标记技术袁其中 苑
个引物能扩增出条带清晰且具多态性的带谱袁共扩增单核体 阅晕粤 片段 远员 条袁杂种双核体 阅晕粤 片段 苑员
条遥 根据 陨杂杂砸分子标记分析比较亲本和杂交新组合图谱袁发现杂交新组合图谱出现野互补型条带冶遥
关键词院杏鲍菇曰 单核体菌丝曰 杂交菌株曰 陨杂杂砸
杂悦砸耘耘晕陨晕郧 粤晕阅 陨阅耘晕栽陨云陨悦粤栽陨韵晕 韵云 杂陨晕郧蕴耘鄄悦韵砸耘 杂栽砸粤陨晕 粤晕阅
匀再月砸陨阅 韵云 孕造藻怎则燥贼怎泽 藻则赠灶早蚤蚤
云耘晕郧 宰藻蚤鄄造蚤灶员 摇 悦粤陨 宰藻蚤鄄皂蚤灶早员 摇 允陨晕 匝怎灶鄄造蚤员 摇 杂匀耘晕 再蚤灶早鄄赠怎藻员 摇 云粤晕 蕴蚤鄄躁怎灶员 摇 蕴陨哉 载蚤葬燥鄄澡燥灶早圆
渊员郾 陨灶泽贼蚤贼怎贼藻 燥枣 匀燥则贼蚤糟怎造贼怎则藻袁在澡藻躁蚤葬灶早 粤糟葬凿藻皂赠 燥枣 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽袁 匀葬灶早扎澡燥怎袁 在澡藻躁蚤葬灶早摇 猿员园园圆员曰
圆郾 悦燥造造藻早藻 燥枣 蕴蚤枣藻 杂糟蚤藻灶糟藻泽袁粤灶澡怎蚤 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠袁匀藻枣藻蚤袁 粤灶澡怎蚤摇 圆猿园园猿远冤
粤遭泽贼则葬糟贼院杂藻造藻糟贼蚤燥灶 燥枣 泽贼则葬蚤灶泽 燥枣 贼澡藻 责造藻怎则燥贼怎泽 藻则赠灶早蚤蚤 葬灶凿 澡藻贼藻则燥泽蚤泽 葬灶葬造赠泽蚤泽 憎藻则藻 泽贼怎凿蚤藻凿 遭赠 皂蚤糟则燥泽糟燥责蚤糟 燥遭泽藻则增葬贼蚤燥灶袁
葬灶贼葬早燥灶蚤泽贼蚤糟 贼藻泽贼 葬灶凿 陨杂杂砸 皂燥造藻糟怎造葬则 皂葬则噪藻则泽援 栽澡藻 则藻泽怎造贼泽 泽澡燥憎藻凿 贼澡葬贼 泽蚤灶早造藻鄄糟燥则藻 皂赠糟藻造蚤怎皂 糟燥怎造凿 遭藻 糟造葬泽泽蚤枣蚤藻凿 蚤灶贼燥 藻蚤早澡贼
凿蚤枣枣藻则藻灶贼 皂葬贼蚤灶早 贼赠责藻泽 凿藻则蚤增藻凿 枣则燥皂 贼澡藻 贼憎燥 责葬则藻灶贼泽 蚤灶糟造怎凿蚤灶早 贼憎燥 糟葬贼藻早燥则蚤藻泽袁 燥灶藻 憎葬泽 在粤粤杂孕藻园园猿 枣燥则 泽蚤灶早造藻鄄糟燥则藻
皂赠糟藻造蚤怎皂 燥枣 栽员袁 栽圆袁 栽猿袁 栽源 葬灶凿 贼澡藻 燥贼澡藻则 憎葬泽 在粤粤杂孕藻园园苑 枣燥则 泽蚤灶早造藻鄄糟燥则藻 皂赠糟藻造蚤怎皂 燥枣 栽缘袁 栽远袁 栽苑袁 栽愿郾 栽憎藻造增藻
澡赠遭则蚤凿泽 憎藻则藻 燥遭贼葬蚤灶藻凿 枣则燥皂 泽蚤灶早造藻 伊 泽蚤灶早造藻 皂燥凿藻 燥枣 藻蚤早澡贼 噪蚤灶凿泽 燥枣 皂葬贼蚤灶早 贼赠责藻泽 燥枣 泽蚤灶早造藻鄄糟燥则藻 皂赠糟藻造蚤怎皂 遭赠
皂蚤糟则燥泽糟燥责赠蚤灶早援 悦燥皂责葬则蚤灶早 贼澡藻 早则燥憎贼澡 则葬贼藻泽 葬灶凿 早则燥憎贼澡 增蚤早燥则 燥枣 责葬则藻灶贼泽 憎蚤贼澡 澡赠遭则蚤凿泽 皂赠糟藻造蚤怎皂袁 蚤贼 憎葬泽 枣燥怎灶凿 贼澡葬贼 澡赠遭则蚤凿泽
皂赠糟藻造蚤怎皂 栽圆栽远 早则藻憎 贼澡藻 枣葬泽贼藻泽贼渊园郾 源源猿糟皂 辕 凿冤援 宰蚤贼澡 泽藻增藻灶 责则蚤皂藻则泽 枣燥则 陨杂杂砸 皂燥造藻糟怎造葬则 皂葬则噪藻则袁蚤贼 憎葬泽 藻葬泽赠 贼燥 葬皂责造蚤枣赠 贼澡藻
责燥造赠皂燥则责澡蚤糟 遭葬灶凿泽援 栽澡藻 则藻泽怎造贼泽 泽澡燥憎藻凿 贼澡葬贼 远员 责燥造赠皂燥则责澡蚤糟 遭葬灶凿 燥枣 贼澡藻 泽蚤灶早造藻鄄糟燥则藻 皂赠糟藻造蚤怎皂 阅晕粤 葬灶凿 苑员 责燥造赠皂燥则责澡蚤糟
遭葬灶凿 燥枣 澡赠遭则蚤凿 憎藻则藻 葬皂责造蚤枣蚤藻凿曰 陨杂杂砸 皂葬则噪藻则 葬灶葬造赠泽蚤泽 燥枣 贼澡藻 责葬则藻灶贼泽 葬灶凿 澡赠遭则蚤凿 则藻增藻葬造藻凿 贼澡藻 糟燥皂责造藻皂藻灶贼葬则赠 遭葬灶凿泽 蚤灶
澡赠遭则蚤凿泽援
运藻赠 憎燥则凿泽院孕造藻怎则燥贼怎泽 藻则赠灶早蚤蚤曰 泽蚤灶早造藻鄄糟燥则藻 皂赠糟藻造蚤怎皂曰 澡赠遭则蚤凿曰 陨杂杂砸
摇 摇 杏鲍菇渊孕造藻怎则燥贼怎泽 藻则赠灶早蚤蚤冤隶属于担子菌亚门尧真
担子菌纲尧层菌亚纲尧伞菌目尧侧耳科尧侧耳属袁分布在
欧洲南部尧非洲及中亚地区袁在我国新疆尧青海尧四川等
地区也有分布咱员袁圆暂 遥 作为一种担子菌袁杏鲍菇有性生
缘苑圆
核摇 农摇 学摇 报 圆远 卷
殖产生单核的担孢子袁担孢子萌发后形成由单核细胞
组成的初级菌丝曰单核菌丝的配对杂交成为主要育种
方式咱猿暂 遥 多年以来袁食用菌育种工作常常根据材料的
地理分布尧生理特性的差异进行选配袁但容易受到环境
因素的影响袁因此袁需要有一种准确性尧稳定性尧敏感性
较强的分析标记遥 分子标记技术在食用菌育种研究中
正被越来越多的人采用袁已经在草菇咱源暂 尧香菇咱缘 耀 苑暂 尧金
针菇咱愿袁怨暂 尧白灵菇咱员园 耀 员猿暂等菌株中开展了种质鉴定研究
和遗传差异分析咱员源 耀 员远暂 遥 由于分子标记技术在小麦等
作物提高育种效率方面有出色表现咱员苑 耀 圆园暂 袁可以预见袁
在食用菌育种上也将发挥重要作用遥 本研究尝试应用
陨杂杂砸技术对杏鲍菇单核体菌株及其杂交后代进行分
析袁以便为单核体菌株的合理选配及杂种的准确鉴定
提供可靠依据遥
表 员摇 陨杂杂砸引物序列
栽葬遭造藻 员摇 杂藻择怎藻灶糟藻泽 燥枣 陨杂杂砸 责则蚤皂藻则泽
引物编号
糟燥凿藻 燥枣 责则蚤皂藻则
引物序列
责则蚤皂藻则 泽藻择怎藻灶糟藻 渊缘忆寅猿忆冤
引物编号
糟燥凿藻 燥枣 责则蚤皂藻则
引物序列
责则蚤皂藻则 泽藻择怎藻灶糟藻 渊缘忆寅猿忆冤
粤云员缘愿猿员 郧栽粤栽郧栽粤栽郧栽粤栽郧栽粤栽郧悦 粤云员缘愿圆源 栽郧栽郧栽郧栽郧栽郧栽郧栽郧栽郧郧粤
粤云员缘愿猿园 郧栽粤栽郧栽粤栽郧栽粤栽郧栽粤栽郧郧 粤云员缘愿圆猿 郧栽郧栽郧栽郧栽郧栽郧栽郧栽郧栽栽粤
粤云员缘愿圆怨 悦粤悦悦粤悦粤悦粤悦粤悦粤悦粤悦粤 粤云员缘愿员愿 郧粤郧粤郧粤郧粤郧粤郧粤郧粤郧粤悦
粤云员缘愿圆愿 郧粤郧粤郧粤郧粤郧粤郧粤郧粤郧粤悦悦 粤云员缘愿员苑 粤郧粤郧粤郧粤郧粤郧粤郧粤郧粤郧郧
粤云员缘愿圆苑 粤悦粤悦粤悦粤悦粤悦粤悦粤悦粤悦悦栽 粤云员缘愿圆员 栽悦栽悦栽悦栽悦栽悦栽悦栽悦栽悦悦郧
粤云员缘愿圆远 粤悦粤悦粤悦粤悦粤悦粤悦粤悦粤悦悦 云员员怨苑缘 郧粤郧粤郧粤郧粤郧粤郧粤郧粤郧粤悦悦
粤云员缘愿圆缘 粤悦粤悦粤悦粤悦粤悦粤悦粤悦粤悦 云员员怨苑源 悦粤悦郧粤郧粤郧粤郧粤郧粤郧粤郧粤
员摇 材料与方法
员郾 员摇 材料
员郾 员郾 员 摇 供试菌株 摇 杏鲍菇菌株亲本 在粤粤杂孕藻园园猿尧
在粤粤杂孕藻园园苑 来自浙江省农业科学院园艺研究所遥
员郾 员郾 圆 摇 培养基 摇 孕阅粤 培养基院葡萄糖 圆园早尧马铃薯
圆园园早尧琼脂 圆园早尧水 员园园园皂造遥
员郾 员郾 猿摇 主要试剂摇 基因组 阅晕粤提取试剂盒由杭州开
泰生物技术有限公司提供袁栽葬择 阅晕粤 聚合酶尧凿晕栽孕尧
陨杂杂砸引物购自上海生工生物工程技术服务有限公司遥
员郾 圆摇 方法
员郾 圆郾 员摇 单孢稀释分离及鉴定 摇 采用文献咱圆员暂的方
法院试验中 在粤粤杂孕藻园园猿尧在粤粤杂孕藻园园苑 两菌株通过子实
体收集担孢子袁经单孢稀释法袁镜检后得到单核菌丝各
员园园个遥 由其分离所得的各单核体的交配性根据 陨杂杂砸
分析的相应结果加以确定遥
员郾 圆郾 圆摇 杂交组合摇 将 圆 亲本菌株的各种交配型单核
体单 伊单方式杂交袁镜检锁状联合后得杂交组合遥
员郾 圆郾 猿摇 菌丝生长速度及生长势试验摇 用打孔器取直
径 园郾 缘糟皂的相同菌龄菌丝块袁接种于 孕阅粤平板培养基
中部袁圆缘益暗培养 苑凿遥 测量菌落直径袁记录菌丝生长
势及浓密程度袁每处理设 猿 次重复遥 采用统计软件
泽责泽泽 员员郾 缘 对 猿 次重复的平均值进行分析遥
员郾 圆郾 源摇 陨杂杂砸扩增体系及产物检测摇 参考文献咱圆圆暂的
方法院孕悦砸 反应体系 圆园滋造袁含 员 伊 孕悦砸 反应缓冲液袁
园郾 圆皂皂燥造 辕 蕴 凿晕栽孕袁员哉 栽葬择 阅晕粤 聚合酶袁园郾 源滋皂燥造 辕 蕴 引
物袁猿园灶早模板 阅晕粤袁加灭菌双蒸水至 圆园滋造遥 孕悦砸 扩增
仪上进行以下循环院怨源益预变性 源皂蚤灶曰然后 怨源益 猿园泽袁
根据引物 源圆益 耀缘苑益 源缘泽袁苑圆益 圆皂蚤灶袁共 猿缘 个循环曰最
后 苑圆益延伸 苑皂蚤灶遥
取 孕悦砸扩增产物和加样缓冲液按照 缘 颐 员比例混
匀袁采用 员郾 缘豫琼脂糖凝胶电泳检测遥 电泳电压 缘灾 辕
糟皂袁待溴酚兰距凝胶前缘 员糟皂左右停止电泳遥 试验采
用引物的名称及核苷酸序列见表 员遥
员郾 圆郾 缘摇 数据分析摇 用 月蚤燥鄄砸粤阅 凝胶成相系统对 陨杂杂砸
图谱拍照袁有 陨杂杂砸带谱计为 员袁无 陨杂杂砸带谱计为 园袁构
建初始数据矩阵袁用 晕栽杂再杂责糟圆郾 员 专业版软件计算遗
传相关系数袁采用平均连锁法 哉孕郧酝粤 进行聚类分析袁
得出聚类图谱遥
圆摇 结果与分析
圆郾 员摇 亲本与单核体菌株的 陨杂杂砸图谱比较
单孢萌发菌丝通过镜检尧配对分析后袁用随机选择
的 员源 个核苷酸引物对供试菌株进行扩增袁其中有 苑 个
引物能获得扩增产物袁但每个引物扩增的 阅晕粤片段数
不同袁最少为 员 条袁最多达 员员 条遥
摇 摇 结果显示袁在粤粤杂孕藻园园猿 有 源 种不同的单核体交配
型袁定为 栽员尧栽圆尧栽猿尧栽源曰在粤粤杂孕藻园园苑 也有 源 种不同的单
核体交配型袁定为 栽缘尧栽远尧栽苑尧栽愿曰愿 种不同的单核体菌
丝共计扩增出 缘远 条清晰易辨的多态性 阅晕粤 条带袁其
中 愿 个菌株共有条带 怨 条袁多态性条带 源苑 条袁分别占
员远豫和 愿源豫 遥 通过聚类分析发现袁在 园郾 猿源 的水平上袁
远苑圆
摇 圆 期 杏鲍菇单核体菌株及其杂交后代筛选和鉴定
单核体菌株可以分为两类袁一类为亲本 在粤粤杂孕藻园园猿 的
单核体菌株 栽员尧栽圆尧栽猿尧栽源袁另一类为亲本 在粤粤杂孕藻园园苑
的单核体菌株 栽缘尧栽远尧栽苑尧栽愿渊图 员冤遥
图 员摇 图 员摇 单核体菌株相似性系数聚类图
云蚤早援 员摇 悦造怎泽贼藻则 皂葬责 遭葬泽藻凿燥灶 泽蚤皂蚤造葬则蚤贼赠 糟燥藻枣枣蚤糟蚤藻灶贼 燥枣
泽蚤灶早造藻鄄糟燥则藻 皂赠糟藻造蚤怎皂
表 圆摇 菌丝体生长速度与生长势比较
栽葬遭造藻 圆摇 酝赠糟藻造蚤怎皂 早则燥憎贼澡 则葬贼藻泽 葬灶凿 早则燥憎贼澡 增蚤早燥则
菌株
泽贼则葬蚤灶
日均生长速度
凿葬蚤造赠 早则燥憎贼澡 则葬贼藻 燥枣 皂赠糟藻造蚤葬渊糟皂 辕 凿冤
菌丝体生长势
早则燥憎贼澡 增蚤早燥则 燥枣 皂赠糟藻造蚤葬
菌丝体疏密度
泽责葬则泽藻 凿藻灶泽蚤贼赠 燥枣 皂赠糟藻造蚤葬
在粤粤杂孕藻园园苑 园郾 源圆猿 依 园郾 园园远葬 垣垣垣 浓密 凿藻灶泽藻
在粤粤杂孕藻园园猿 园郾 猿愿怨 依 园郾 园员园遭 垣垣垣 浓密 凿藻灶泽藻
栽圆栽猿 园郾 员缘缘 依 园郾 园园缘糟 垣 极浓密 增藻则赠 凿藻灶泽藻
栽员栽源 园郾 猿苑苑 依 园郾 园园猿遭 垣垣 疏 泽责葬则泽藻
栽缘栽苑 园郾 猿愿愿 依 园郾 园员猿遭 垣垣垣 疏 泽责葬则泽藻
栽远栽愿 园郾 猿苑苑 依 园郾 园员员遭 垣垣 浓密 凿藻灶泽藻
栽圆栽远 园郾 源源猿 依 园郾 园园远枣 垣垣垣 极浓密 增藻则赠 凿藻灶泽藻
栽源栽苑 园郾 源员园 依 园郾 园园苑葬凿 垣垣垣 浓密 凿藻灶泽藻
栽圆栽苑 园郾 猿愿缘 依 园郾 园园员遭 垣垣垣 浓密 凿藻灶泽藻
栽源栽远 园郾 源圆怨 依 园郾 园员园葬 垣垣垣 疏 泽责葬则泽藻
栽员栽远 园郾 源园猿 依 园郾 园园圆早 垣垣垣 浓密 凿藻灶泽藻
栽猿栽缘 园郾 猿怨圆 依 园郾 园园猿遭凿 垣垣垣 疏 泽责葬则泽藻
栽员栽苑 园郾 猿远缘 依 园郾 园园缘澡 垣垣 浓密 凿藻灶泽藻
栽员栽愿 园郾 猿员怨 依 园郾 园园源陨 垣垣 疏 泽责葬则泽藻
摇 摇 注院 垣垣垣垣 袁 垣垣 袁 垣分别表示菌丝体生长势强袁较强和弱遥 表中数据后不同小写字母代表 园郾 园缘 水平差异显著遥 晕燥贼藻院 垣垣垣 袁 垣垣 袁 垣 蚤灶凿蚤糟葬贼藻 贼澡葬贼
贼澡藻 皂赠糟藻造蚤葬 早则燥憎 增蚤早燥则燥怎泽造赠袁 燥则凿蚤灶葬则蚤造赠 葬灶凿 憎藻葬噪造赠袁 则藻泽责藻糟贼蚤增藻造赠援 栽澡藻 凿葬贼葬 枣燥造造燥憎藻凿 遭赠 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 泽皂葬造造 造藻贼贼藻则泽 蚤灶凿蚤糟葬贼藻凿 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼 凿蚤枣枣藻则藻灶糟藻 葬贼 园郾 园缘 造藻增藻造援
圆郾 圆摇 杂交组合菌丝生长速度及生长势
圆 亲本菌株的各种交配型单核体单 伊 单方式杂
交袁镜检后获得 员圆 个杂交组合袁其中亲本菌株内杂交
获得 源 个菌株袁分别为 栽圆栽猿尧栽员栽源尧栽缘栽苑尧栽远栽愿曰亲本
菌株间杂交获得 愿 个菌株分别为 栽圆栽远 尧栽源栽苑尧栽圆栽苑尧
栽源栽远尧栽员栽远 尧栽猿栽缘尧 栽员栽苑 尧栽员栽愿遥 员圆 个杏鲍菇菌丝体
平均生长速度为 园郾 员缘缘 耀 园郾 源源猿糟皂 辕 凿遥 各杂交菌株在
菌丝体生长速度上存在差异袁栽圆栽远 菌丝生长最快袁平
均每日生长速度 园郾 源源猿糟皂袁与其他菌株差异达显著水
平袁栽圆栽猿 菌丝生长最慢袁 平均每日生长速度为
园郾 员缘缘糟皂袁与其他菌株差异达显著水平曰其中 栽圆栽远尧
栽源栽远 的菌丝生长速度大于亲本 在粤粤杂孕藻园园苑 的菌丝生
长速度袁而 栽圆栽猿 尧栽员栽源尧栽缘栽苑尧栽远栽愿尧栽圆栽苑尧栽员栽苑尧栽员栽愿
小于亲本 在粤粤杂孕藻园园猿 的菌丝生长速度遥 在菌丝体长
势上袁大致分为 猿 类院淤菌丝体浓密尧粗壮尧整齐袁有
在粤粤杂孕藻园园猿尧 在粤粤杂孕藻园园苑尧 栽远栽愿尧 栽源栽苑尧 栽圆栽苑尧 栽员栽远尧
栽员栽苑曰于菌丝体较疏袁有 栽员栽源尧 栽缘栽苑 尧 栽源栽远尧 栽猿栽缘尧
栽员栽愿曰盂菌丝体生长致密袁有 栽圆栽远尧栽圆栽猿渊表 圆冤遥
圆郾 猿摇 亲本菌株及其杂交菌株的 陨杂杂砸图谱及分析
用随机选择的 员源 个核苷酸引物对亲本及杂交菌
株菌丝进行扩增袁其中 云员员怨苑源尧 粤云员缘愿员苑尧 粤云员缘愿员愿尧
粤云员缘愿圆源尧粤云员缘愿圆缘尧粤云员缘愿圆远尧粤云员缘愿猿园 等 苑 个引物能
扩增出条带清晰且具多态性的带谱袁扩增片段大小在
员苑园 耀 猿缘园园遭责 之间袁每个引物扩增的 阅晕粤 片段条带数
目在 远 耀 员苑 条之间遥 苑 个引物共扩增亲本单核体 阅晕粤
片段 远员 条袁亲本及杂种双核体菌株 阅晕粤 片段 苑员 条袁
其中多态性片段占总数的 愿源郾 猿豫 遥
引物 粤云员缘愿圆缘 对亲本及杂交菌株的扩增中袁共有
员员 条扩增带曰杂交子 栽员栽愿 共扩增出 缘 条 阅晕粤 带袁区
别于 在粤粤杂孕藻园园猿 的特异性带有 员 条袁片段长度为
园郾 远员噪遭曰与 在粤粤杂孕藻园园苑 相比杂交子缺少了 圆 条带袁长
度为 园郾 苑员尧园郾 怨圆噪遭遥 杂交子 栽圆栽远 扩增图谱中袁长度为
圆郾 圆园尧 圆郾 园园尧 员郾 怨圆尧 员郾 圆园尧 园郾 愿员噪遭 的 条 带 在 亲 本
在粤粤杂孕藻园园猿 扩增产物中出现曰长度为 员郾 怨圆尧 员郾 圆园尧
园郾 愿员尧园郾 苑员尧园郾 远员噪遭 的条带在亲本 在粤粤杂孕藻园园苑 扩增产
物中出现渊图 圆冤遥 在 苑 个引物扩增 阅晕粤条带中袁杂交
苑苑圆
核摇 农摇 学摇 报 圆远 卷
后代 栽圆栽远 共扩增 阅晕粤 片段条带数最多袁为 源远 条袁比
亲本 在粤粤杂孕藻园园苑 多 源 条袁比亲本 在粤粤杂孕藻园园猿 多 远 条曰
另外 栽员栽愿尧栽源栽远尧栽员栽苑 扩增出的 阅晕粤 片段条带比
在粤粤杂孕藻园园苑 多遥
图 圆摇 引物 粤云员缘愿圆缘 扩增的亲本及杂
交菌株的 陨杂杂砸图谱
云蚤早援 圆摇 栽澡藻 则藻泽怎造贼泽 燥枣 孕悦砸 葬皂责造蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶
遭赠 责则蚤皂藻则 粤云员缘愿圆缘
酝院阅蕴圆园园园渊圆园园园袁员园园园袁苑缘园袁缘园园袁圆缘园袁员园园冤曰
员院在粤粤杂孕藻园园苑曰圆院在粤粤杂孕藻园园猿曰猿院栽员栽愿曰源院栽源栽远曰缘院栽源栽苑曰
远院栽缘栽苑曰苑院栽圆栽苑曰 愿院栽远栽愿曰怨院栽员栽远曰 员园院栽猿栽缘曰 员员院栽员栽苑曰
员圆院栽员栽源曰员猿院 栽圆栽猿曰员源院栽圆栽远
从聚类分析结果可以看出袁在相似系数 园郾 远远 左
右袁亲本及杂交菌株可以分为 猿 个大类遥 其中袁
在粤粤杂孕藻园园猿 单独聚为第 员 类袁第 圆 类为 在粤粤杂孕藻园园苑尧
栽圆栽远袁其他聚为第 猿 大类袁各菌株存在一定的差异遥
聚类结果也表明部分栽培菌株之间相似系数较高袁如
栽猿栽缘 与 栽员栽苑袁在 园郾 怨圆 水平上聚为 员 类袁表明它们经
杂交后相互之间亲缘关系很近渊图 猿冤遥
图 猿摇 亲本与杂交菌株相似性系数聚类图
云蚤早援 猿摇 悦造怎泽贼藻则 皂葬责 遭葬泽藻凿 燥灶 泽蚤皂蚤造葬则蚤贼赠
糟燥藻枣枣蚤糟蚤藻灶贼 燥枣 责葬则藻灶贼 葬灶凿 澡赠遭则蚤凿
猿摇 讨论
食用菌存在有性繁殖袁通过有性繁殖产生子囊孢
子或担孢子等有性孢子袁并可导致基因重组遥 通过基
因重组可使子代保持遗传的稳定性袁又可产生一定程
度的变异袁这为食用菌育种提供了依据遥 通过单核菌
丝的分离与鉴定尧双核菌丝的分离与鉴定以及生产性
实践验证分析表明袁本研究提出的以传统育种方法和
分子标记相结合进行食用菌育种是有效可行的遥 四极
性交配系统是由 粤尧月 两对不亲和性因子控制袁每个交
配型因子由数个基因组成袁两单核菌株性亲合交配产
生双核菌株的交配型因子是杂合的遥 本试验中袁杏鲍
菇 在粤粤杂孕藻园园猿 尧在粤粤杂孕藻园园苑 菌株产生 愿 种不同的交配
型袁即 栽员尧栽圆尧栽猿尧栽源尧栽缘尧栽远尧栽苑尧栽愿袁两两配对杂交得
到 员圆 个双核菌株袁自交亲和率为 圆缘豫 袁但其他研究中
如真姬菇尧白灵侧耳尧黑木耳的自交亲和率均超过
圆缘豫 咱圆猿 耀 圆远暂 袁出现这种情况袁可能存在个别重组型未被
发现曰自交亲和率大小除试验材料外袁还与样本数量较
少尧减数分裂时所处的环境影响尧组成 粤月 因子的等位
基因紧密程度等因素有关遥 常规的交配型试验袁将数
量众多的单核菌丝进行两两配对袁确定其交配类型袁通
过常规的拮抗和栽培试验结果只能初步判断杂交子的
真伪遥 近年来利用同工酶尧砸粤孕阅 分析进行食用菌分
类鉴定尧杂交子或融合子鉴定尧菌株特性预测的研究较
多遥 陨杂杂砸分子标记的生物学基础是基因组中存在的
简单重复序列渊杂杂砸冤袁以 杂杂砸 序列为基础设计长度为
员远 耀 员愿遭责 的引物袁对基因组 阅晕粤 的 杂杂砸 区域进行
孕悦砸扩增袁不同物种基因组 阅晕粤 中的 杂杂砸 数目和间
距长短不同袁就可导致特定结合位点分布发生相应的
变化袁从而使 孕悦砸 产物增加尧减少或发生分子量的改
变咱圆苑 耀 猿园暂 袁根据谱带的有无及相对位置分析不同样品间
陨杂杂砸标记的多态性袁其产物多态性远比 砸云蕴孕尧杂杂砸尧
砸粤孕阅等标记更加丰富袁可以提供更多的关于基因组
的信息袁而且比 砸粤孕阅技术更加稳定可靠袁实验重复性
更好遥
从理论上讲袁真菌杂交后代扩增图谱中既应含有
圆个单核体亲本共有的 阅晕粤 扩增带袁也应含有 圆 个亲
本特有的标记性 阅晕粤扩增带遥 本研究中袁希望利用分
子标记尧生理特性相互结合袁预测杂交后代的农艺性
状袁缩短育种周期遥 但不同种类的真菌需要选用哪种
分子标记用于鉴定 阅晕粤 水平的差异是一个值得探讨
的问题遥 在食用菌育种中袁根据亲本细胞核和细胞质
成分在后代中的组合和分配袁分为对称杂交和非对称
杂交两种方式袁单孢育种途径比一般动尧植物利用常规
杂交育种更为迅速尧简便遥 同时杂交异核体可以利用
子实体组织无性繁殖以保持后代不分离袁又保持其杂
合性袁这就不必每年制备杂交种袁并根据杂交当代表现
选育优良品种遥
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源摇 结论
本研究鉴定出了杏鲍菇不同交配型袁通过杂交组
合菌丝生长速度尧生长势测定袁进一步验证了杂交后代
的优势袁为快速选育出优良品种及迅速推广应用提供
了一条有效途径遥
参考文献院
咱 员 暂 摇 郭美英援珍稀食用菌杏鲍菇生物学特性的研究咱 允暂 援福建农业学
报袁员怨怨愿袁员猿渊猿冤院源源 原 源怨
咱 圆 暂 摇 郭美英援 杏鲍菇的特性与栽培技术研究咱 允暂 援 食用菌袁员怨怨愿袁圆园
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咱 猿 暂 摇 陈忠纯袁林汝楷援 侧耳属种间有性杂交研究咱 允暂 援 食用菌学报袁
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咱 源 暂 摇 邓旺秋袁杨小兵袁李泰辉袁宋摇 斌袁林群英袁周洁莹袁夏凤娜援 广东
省草菇主要栽培菌株 砸粤孕阅 多态性分析 咱 允暂 援 食用菌学报袁
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咱 缘 暂 摇 陈春涛袁姚占芳援 员猿猿 个香菇栽培菌株拮抗性测定及鉴定中的应
用咱允暂 援中国食用菌袁员怨怨远袁员缘渊远冤院猿 原 源
咱 远 暂 摇 王子迎袁王书通援 安徽野生香菇遗传多样性及杂种优势的 陨杂杂砸
分析咱允暂 援菌物学报袁 圆园园远袁圆缘渊圆冤院 圆员员 原 圆员远
咱 苑 暂 摇 秦莲花袁张摇 红袁陈明杰袁谭琦袁潘迎捷援微卫星渊栽粤栽郧冤灶 基序在
香菇菌种中的验证咱允暂 援微生物学报袁圆园园源袁远渊源冤院源苑源 原 源苑苑
咱 愿 暂摇 宿红艳袁王摇 磊袁明永飞袁刘林德援 陨杂杂砸 分子标记技术在金针菇
菌株鉴别中的应用咱允暂 援生态学杂志袁圆园园愿袁 圆苑渊员园冤院员苑圆缘 原 员苑圆愿
咱 怨 暂 摇 刘维侠袁谢宝贵袁王秀全袁江玉姬援利用 砸粤孕阅 原 月杂粤 分子标记技
术筛选金针菇色泽基因研究咱 允暂 援 中国农学通报袁圆园园缘袁圆员渊怨冤院
缘源 原 缘远
咱员园暂摇 马富英袁罗信昌援 圆愿杂 则阅晕粤 孕悦砸 原 砸云蕴孕分析在侧耳属系统发育
研究中的应用咱允暂 援华中农业大学学报袁圆园园圆袁圆员渊猿冤院圆园员 原 圆园缘
咱员员暂摇 张金霞袁黄晨阳袁张瑞颖援 中国栽培白灵侧耳的 砸粤孕阅 和 陨郧杂 分
析咱允暂 援菌物学报袁圆园园源袁 圆猿渊源冤院缘员源 原 缘员怨
咱员圆暂摇 张金霞袁黄晨阳袁管桂萍袁李辉平袁张瑞颖袁胡清秀援 白黄侧耳
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咱员猿暂摇 郑素月袁黄晨阳袁张金霞援中国栽培平菇的 砸粤孕阅 分析咱 允暂 援 山东
农业大学学报袁圆园园缘袁猿远渊圆冤院员愿远 原 员怨园
咱员源暂摇 朱摇 坚袁刘新锐袁谢宝贵袁刘福阳袁邓优锦袁熊 芳援 秀珍菇种质资
源的 陨栽杂 原 砸云蕴孕分析咱允暂 援 福建农林大学学报袁圆园园怨袁猿愿渊圆冤袁员愿远
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咱员缘暂摇 李叶昕袁党摇 永袁慕摇 娟袁万 一袁贺建超袁孙晓宇援 双孢蘑菇不同
菌株的 砸粤孕阅扩增研究咱允暂 援中国食用菌袁圆园园愿袁圆苑渊远冤院源员 原 源圆
咱员远暂摇 张介驰袁马庆芳袁张丕奇袁戴肖东袁韩增华袁孔祥辉援 用 陨杂杂砸 分子
标记鉴别东北地区黑木耳生产菌株的研究 咱 允暂 援 菌物学报袁
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咱员苑暂摇 贾少锋袁段霞瑜袁周益林袁鲁国东袁王宗华援小麦白粉菌 陨杂杂砸分子
标记体系构建及其分离菌株的多样性分析咱 允暂 援 植物保护学报袁
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咱员愿暂 摇 盖树鹏袁孟祥栋援 大葱胞质雄性不育位点 砸粤孕阅 标记转化为
杂悦粤砸标记的研究咱 允暂 援 莱阳农学院学报袁 圆园园源袁 圆员渊猿冤院员愿怨 原
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的鉴定分析咱允暂 援浙江农业学报袁圆园员园袁圆圆渊员冤院员园园 原 员园源
咱圆圆暂摇 蔡为明袁冯伟林袁金群力袁范丽军袁吴永志援 远园 悦燥 酌 辐照对食用菌
菌丝的影响及 陨杂杂砸分析咱允暂 援核农学报袁圆园园怨袁圆猿渊圆冤院圆员源 原 圆员
咱圆猿暂摇 刘明广袁冯志勇袁霍光华援 真姬菇交配型研究咱 允暂 援 食用菌学报袁
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咱圆源暂摇 程摇 莉袁李安政袁林范学援糙皮侧耳担孢子交配型的鉴定咱 允暂 援微
生物学报袁圆园园苑袁猿源渊远冤院员园愿远 原 员园愿怨
咱圆缘暂摇 尚晓冬袁李明容袁邢摇 增援白灵侧耳交配型遗传研究咱 允暂 援食用菌
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咱圆远暂摇 张 红袁曹 晖袁潘迎捷援黑木耳交配型的研究咱允暂 援菌物系统袁圆园园圆袁
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咱圆怨暂摇 谭和平袁徐利远袁余桂蓉袁杜文平袁王宇星袁钟昌松援茶树种质资源
陨杂杂砸分子标记初步研究咱允暂 援核农学报袁圆园园远袁圆园渊圆冤院员员猿 原 员员缘
咱猿园暂摇 贾月慧袁张克中袁李文学袁张福锁援辐照花粉辅助授粉对百合远缘
杂交结实的影响及杂种早期分子鉴定咱 允暂 援 核农学报袁圆园员园袁圆源
渊员冤院圆缘 原 猿园
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