全 文 ：核 农 学 报摇 圆园员猿袁圆苑渊圆冤院园员愿愿 耀 园员怨远
允燥怎则灶葬造 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽
收稿日期院圆园员圆鄄园远鄄员源摇 接受日期院圆园员圆鄄园愿鄄圆员
基金项目院国家自然科学基金渊猿员员园园圆园缘冤袁国家科技支撑计划渊圆园员圆月粤运员苑月员猿冤袁青岛市公共领域科技支撑计划渊员员鄄圆鄄猿鄄圆缘鄄灶泽澡冤
作者简介院于丽娜渊员怨苑源鄄冤袁女袁辽宁鞍山人袁博士袁助理研究员袁研究方向为植物蛋白和活性肽开发遥 栽藻造院 园缘猿圆鄄愿苑远员缘远园员曰耘鄄皂葬蚤造院 造澡贼赠造灶园远圆远岳
赠葬澡燥燥援 糟燥皂援 糟灶
通讯作者院杨庆利渊员怨苑苑鄄冤袁男袁山东临沂人袁博士袁副研究员袁研究方向为花生综合利用遥 栽藻造院 园缘猿圆鄄愿苑远员员园愿苑曰耘鄄皂葬蚤造院 赠葬灶早择造源园苑岳 赠葬澡燥燥援 糟燥皂援 糟灶
文章编号院员园园园鄄愿缘缘员渊圆园员猿冤园圆鄄园员愿愿鄄园怨
花生抗氧化水解产物制备及其抗氧化活性研究
于丽娜摇 孙杰摇 刘少芳摇 朱凤摇 毕洁摇 张初署摇 杨庆利
渊山东省花生研究所袁山东 青岛摇 圆远远员园园冤
摘摇 要院研究花生抗氧化水解产物袁为进一步研究花生抗氧化肽提供理论基础遥 本研究运用 月燥曾鄄月藻澡灶噪藻灶
设计的响应面试验方法对花生抗氧化水解产物的制备工艺条件进行优化袁其最佳制备工艺条件为院经复
合多糖酶 渊灾蚤泽糟燥扎赠皂藻 蕴冤预处理的花生粕粉袁调节 责匀 值 愿郾 圆袁加入 源园园园哉窑早 原员底物的碱性蛋白酶
渊粤造糟葬造葬泽藻冤袁在 缘园郾 园益下酶解 怨源郾 园皂蚤灶遥 此工艺下制备的花生抗氧化水解产物对 员袁员 原二苯基苦基苯肼
渊阅孕孕匀冤清除率为 苑苑郾 猿愿豫 遥 花生抗氧化水解产物的抗氧化活性结果显示袁对 阅孕孕匀 自由基尧羟自由基尧
超氧阴离子自由基的清除率的 陨悦缘园值分别为 远郾 远缘尧园郾 缘远 和 苑郾 远苑皂早窑皂蕴 原员袁对铁离子和铜离子螯合率的
陨悦缘园值分别为 愿郾 园圆 和 员圆郾 猿怨皂早窑皂蕴 原员袁对脂质过氧化的抑制率的 陨悦缘园值为 愿郾 源缘皂早窑皂蕴 原员袁铁还原力和钼
还原力吸光值为 园郾 缘 时袁所需抗氧化水解产物浓度分别为 圆远郾 源园 和 源郾 缘怨皂早窑皂蕴 原员遥
关键词院复合多糖酶曰碱性蛋白酶曰花生抗氧化水解产物曰抗氧化活性
孕则藻责葬则葬贼蚤燥灶 葬灶凿 粤灶贼蚤燥曾蚤凿葬灶贼 粤糟贼蚤增蚤贼蚤藻泽 燥枣 孕藻葬灶怎贼 粤灶贼蚤燥曾蚤凿葬灶贼 匀赠凿则燥造赠泽葬贼藻
再哉 蕴蚤鄄灶葬摇 杂哉晕 允蚤藻摇 蕴陨哉 杂澡葬燥鄄枣葬灶早摇 在匀哉 云藻灶早摇 月陨 允蚤藻摇 在匀粤晕郧 悦澡怎鄄泽澡怎摇 再粤晕郧 匝蚤灶早鄄造蚤
渊杂澡葬灶凿燥灶早 孕藻葬灶怎贼 砸藻泽藻葬则糟澡 陨灶泽贼蚤贼怎贼藻袁 匝蚤灶早凿葬燥袁 杂澡葬灶凿燥灶早摇 圆远远员园园冤
粤遭泽贼则葬糟贼院栽澡藻 燥遭躁藻糟贼蚤增藻 燥枣 贼澡蚤泽 憎燥则噪 蚤泽 贼燥 泽贼怎凿赠 燥灶 贼澡藻 责藻葬灶怎贼 葬灶贼蚤燥曾蚤凿葬灶贼 澡赠凿则燥造赠泽葬贼藻 葬灶凿 贼燥 责则燥增蚤凿藻 葬 贼澡藻燥则藻贼蚤糟葬造 遭葬泽蚤泽 枣燥则 枣怎则贼澡藻则 蚤灶增藻泽贼蚤早葬贼蚤灶早
责藻葬灶怎贼 葬灶贼蚤燥曾蚤凿葬灶贼 责藻责贼蚤凿藻援 栽澡藻 贼藻糟澡灶燥造燥早蚤糟葬造 糟燥灶凿蚤贼蚤燥灶泽 憎藻则藻 燥责贼蚤皂蚤扎藻凿 遭赠 则藻泽责燥灶泽藻 泽怎则枣葬糟藻 皂藻贼澡燥凿燥造燥早赠 渊砸杂酝冤 遭葬泽藻凿 燥灶 贼澡藻 月燥曾鄄月藻澡灶噪藻灶
凿藻泽蚤早灶援 砸藻泽怎造贼泽 蚤灶凿蚤糟葬贼藻凿 贼澡葬贼 贼澡藻 员袁 员鄄凿蚤责澡藻灶赠造鄄圆鄄责蚤糟则赠造鄄澡赠凿则葬扎赠造 渊阅孕孕匀冤 枣则藻藻 则葬凿蚤糟葬造 泽糟葬增藻灶早蚤灶早 葬糟贼蚤增蚤贼赠 燥枣 责藻葬灶怎贼 澡赠凿则燥造赠泽葬贼藻 糟燥怎造凿 则藻葬糟澡
苑苑郾 猿愿豫 怎灶凿藻则 贼澡藻 枣燥造造燥憎蚤灶早 燥责贼蚤皂怎皂 糟燥灶凿蚤贼蚤燥灶泽院 蚤灶蚤贼蚤葬造 责匀 增葬造怎藻 燥枣 愿郾 圆袁 粤造糟葬造葬泽藻 凿燥泽葬早藻 燥枣 源园园园哉窑早 原员 泽怎遭泽贼则葬贼藻袁 则藻葬糟贼蚤燥灶 贼藻皂责藻则葬贼怎则藻 燥枣
缘园郾 园 毅悦袁 葬灶凿 蚤灶糟怎遭葬贼蚤燥灶 贼蚤皂藻 燥枣 怨源郾 园皂蚤灶援 栽澡藻 葬灶贼蚤燥曾蚤凿葬灶贼 葬糟贼蚤增蚤贼蚤藻泽 燥枣 责藻葬灶怎贼 澡赠凿则燥造赠泽葬贼藻 憎藻则藻 葬泽 枣燥造造燥憎泽援 栽澡藻 陨悦缘园 增葬造怎藻泽 枣燥则 泽糟葬增藻灶早蚤灶早 燥枣
阅孕孕匀袁 澡赠凿则燥曾赠造袁 葬灶凿 泽怎责藻则燥曾蚤凿藻 葬灶蚤燥灶 枣则藻藻 则葬凿蚤糟葬造泽 憎藻则藻 远郾 远缘皂早窑皂蕴 原员袁 园郾 缘远皂早窑皂蕴 原员袁 葬灶凿 苑郾 远苑皂早窑皂蕴 原员袁 则藻泽责藻糟贼蚤增藻造赠曰 云燥则 蚤则燥灶 葬灶凿
糟燥责责藻则 蚤燥灶 糟澡藻造葬贼蚤灶早 则葬贼藻 憎藻则藻 愿郾 园圆皂早窑皂蕴 原员 葬灶凿 员圆郾 猿怨皂早窑皂蕴 原员袁 则藻泽责藻糟贼蚤增藻造赠曰 云燥则 蚤灶澡蚤遭蚤贼蚤燥灶 则葬贼藻 燥枣 葬灶贼蚤鄄造蚤责蚤凿 责藻则燥曾蚤凿葬贼蚤燥灶 葬糟贼蚤增蚤贼赠 憎葬泽
愿郾 源缘皂早窑皂蕴 原员 援 栽澡藻 则藻择怎蚤则藻凿 糟燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶泽 枣燥则 凿藻贼藻则皂蚤灶蚤灶早 蚤则燥灶 葬灶凿 皂燥造赠遭凿藻灶怎皂 则藻凿怎糟贼蚤燥灶 糟葬责葬糟蚤贼蚤藻泽 葬贼 葬遭泽燥则遭葬灶糟藻 园郾 缘 憎藻则藻 圆远郾 源园皂早窑
皂蕴 原员 葬灶凿 源郾 缘怨皂早窑皂蕴 原员袁 则藻泽责藻糟贼蚤增藻造赠援
运藻赠 憎燥则凿泽院灾蚤泽糟燥扎赠皂藻 蕴曰 粤造糟葬造葬泽藻曰 孕藻葬灶怎贼 葬灶贼蚤燥曾蚤凿葬灶贼 澡赠凿则燥造赠泽葬贼藻曰 粤灶贼蚤燥曾蚤凿葬灶贼 葬糟贼蚤增蚤贼蚤藻泽
摇 摇 人的衰老和许多疾病与自由基有关袁食品在储运
过程中易发生脂质氧化变质袁因此袁需要抗氧化剂来清
除自由基和抑制脂质过氧化咱员暂 遥 由于合成抗氧化剂
对人体健康存在潜在危害袁人们逐渐把目光转向天然
抗氧化剂咱圆袁猿暂 遥 抗氧化肽具有清除各种自由基袁抑制
脂肪氧合酶活力和抑制脂质过氧化链式反应等抗氧化
功效袁能在一定程度上消除机体内多种生理功能障碍袁
延缓机体衰老袁减少各种老年性疾病发生曰还能阻止食
品氧化变质袁提高食品稳定性和延长食品贮藏期咱源暂 遥
因此袁抗氧化肽成为近年来食品科学尧营养学和预防医
愿愿员
摇 圆 期 花生抗氧化水解产物制备及其抗氧化活性研究
学等学科的研究热点之一遥
花生是世界上主要油料资源之一袁其蛋白质含量
为 圆缘豫 耀猿远豫 袁是一种营养价值较高的植物蛋白袁生
物价为 缘愿袁含 员愿 种氨基酸袁包括 愿 种必需氨基酸遥 花
生提取油脂后的副产品花生饼粕袁年产 猿园园 多万吨袁主
要用于加工饲料咱缘暂 袁资源未得到充分利用遥 如果对其
进一步深加工袁将会产生很大的经济及社会效益遥 酶
解花生饼粕制备抗氧化肽的研究及其产品开发不仅可
以充分利用花生蛋白资源袁而且可以拓展花生精深加
工的领域遥
员袁员鄄二苯基苦基苯肼渊阅孕孕匀冤自由基是一种很稳
定的以氮为中心的有机自由基袁它的稳定性主要来自
共振稳定作用的 猿 个苯环的空间障碍袁使夹在中间的
氮原子上不成对的电子不能发挥其应有的电子成对作
用遥 若受试物能清除它袁则提示受试物具有降低羟自
由基尧烷自由基或过氧自由基的有效浓度和打断脂质
过氧化链反应的作用咱远暂 遥 阅孕孕匀 自由基测定法具有灵
敏尧简便且重现性好等特点袁因此袁清除 阅孕孕匀 自由基
目前被作为评价物质是否具有抗氧化能力的指标之
一袁被广泛应用于抗氧化研究中咱苑暂 遥
在前期研究基础上袁本研究拟采用在复合多糖酶
渊灾蚤泽糟燥扎赠皂藻 蕴冤最适水解花生粕工艺条件下袁预先水解
花生粕袁再用碱性蛋白酶渊粤造糟葬造葬泽藻冤酶解制备花生抗氧
化水解产物遥 以酶解时间尧底物质量分数尧加酶量和初
始 责匀值为自变量袁阅孕孕匀 自由基清除率为因变量袁采
用响应面法优化制备工艺条件遥 这个优化工艺的建
立袁可以为今后深入研究花生抗氧化肽的分离尧纯化尧
氨基酸序列一级结构鉴定尧重组 阅晕粤法制备以及抗氧
化机理的探讨提供新的途径和理论基础遥
员摇 材料与方法
员郾 员摇 材料与试剂
冷榨花生粕购于山东天申生物蛋白有限公司曰
灾蚤泽糟燥扎赠皂藻 蕴渊员园园云月郧窑早 原员 冤尧粤造糟葬造葬泽藻 圆郾 源蕴渊圆园 万 哉窑
早 原员冤购于丹麦 晕燥增燥扎赠皂藻 公司曰阅孕孕匀 自由基购于美国
杂蚤早皂葬公司遥
员郾 圆摇 仪器与设备
云阅鄄员悦鄄缘园 冷冻干燥机袁北京博医康实验仪器有限
公司曰杂匀粤鄄月双功能水浴恒温振荡器袁 金坛市杰瑞尔
电器有限公司曰云耘圆园 实验室 责匀 计袁梅特勒鄄托利多仪
器有限公司曰悦砸圆圆郧域高速冷冻离心机袁日本匀陨栽粤悦匀陨
公司遥
员郾 猿摇 花生抗氧化水解产物制备工艺
取冷榨花生粕用蒸馏水配成一定质量分数的悬浮
液袁在超声波中超声溶解 猿园皂蚤灶遥 调节 责匀值到 缘郾 园袁加
入 愿云月郧窑早 原员花生粕粉的 灾蚤泽糟燥扎赠皂藻 蕴袁在 源缘益恒温水
浴振荡器中酶解 员圆园皂蚤灶遥 反应结束后袁 怨园益 灭酶
圆园皂蚤灶袁快速冷却到室温遥 调节 责匀 值袁加入 粤造糟葬造葬泽藻袁
在 缘园郾 园益的恒温水浴振荡器中酶解 怨源皂蚤灶遥 反应结束
后袁在 员园园益灭酶 员园皂蚤灶袁快速冷却到室温遥 在 猿园园园则窑
皂蚤灶 原员离心 员园皂蚤灶袁取上清液袁用蒸馏水定容至 员园园皂蕴袁
备用袁待测遥
员郾 源摇 花生抗氧化水解产物单因素试验
以酶解时间尧底物质量分数尧加酶量尧酶解温度尧酶
液初始 责匀值作为试验因素袁以 阅孕孕匀 自由基清除率
作为考察指标进行试验设计遥 每组试验进行 猿 次平行
试验袁取平均值作为试验结果遥
员郾 源郾 员摇 酶解时间摇 固定底物质量分数 远豫 尧酶液初始
责匀值 愿郾 园尧加酶量 猿圆园园哉窑早 原员底物尧酶解温度 缘园益袁改
变酶解时间 猿园尧远园尧怨园尧员圆园尧员缘园尧员愿园皂蚤灶袁研究酶解时
间对花生抗氧化水解产物清除 阅孕孕匀自由基的影响遥
员郾 源郾 圆摇 底物质量分数摇 固定酶液初始 责匀 值 愿郾 园尧加
酶量 猿圆园园哉窑早 原员 底物尧酶解温度 缘园益尧酶解时间
怨园皂蚤灶袁改变底物质量分数 圆郾 园豫 尧 源郾 园豫 尧 远郾 园豫 尧
愿郾 园豫 尧员园郾 园豫 尧员圆郾 园豫 袁研究底物质量分数对花生抗氧
化水解产物清除 阅孕孕匀自由基的影响遥
员郾 源郾 猿摇 加酶量 摇 固定底物质量分数 远豫 尧酶液初始
责匀值 愿郾 园尧酶解温度 缘园益尧酶解时间 怨园皂蚤灶袁改变加酶
量 愿园园尧员远园园尧猿圆园园尧源愿园园尧远源园园尧愿园园园哉窑早 原员底物袁研究
加酶量对花生抗氧化水解产物清除 阅孕孕匀自由基的影
响遥
员郾 源郾 源摇 酶解温度摇 固定底物质量分数 远豫 尧酶液初始
责匀值 愿郾 园尧加酶量 猿圆园园哉窑早 原员底物尧酶解时间 怨园皂蚤灶袁
改变酶解温度 源园尧源缘尧缘园尧缘缘尧远园尧远缘益袁研究酶解温度
对花生抗氧化水解产物清除 阅孕孕匀自由基的影响遥
员郾 源郾 缘摇 酶液初始 责匀 值摇 固定底物质量分数 远豫 尧加
酶量 猿圆园园哉窑早 原员 底物尧酶解温度 缘园益尧酶解时间
怨园皂蚤灶袁改变酶液初始 责匀 值 苑郾 园尧苑郾 缘尧愿郾 园尧愿郾 缘尧怨郾 园尧
怨郾 缘袁研究酶液初始 责匀值对花生抗氧化水解产物清除
阅孕孕匀自由基的影响遥
员郾 缘 摇 响应面 摇 渊 砸藻泽责燥灶泽藻 泽怎则枣葬糟藻 皂藻贼澡燥凿燥造燥早赠袁
砸杂酝冤设计试验
在单因素试验基础上袁固定酶解温度 缘园益袁以酶
解时间渊载员袁皂蚤灶冤尧底物质量分数渊载圆袁豫 冤尧加酶量渊载猿袁
哉窑早 原员底物冤和酶液初始 责匀 值渊载源 冤源 个因素为自变
量袁运用 月燥曾鄄月藻灶澡灶噪藻灶 试验设计袁进行 源 因素 猿 水平
的响应面分析试验袁以 阅孕孕匀 自由基清除率作为响应
怨愿员
核摇 农摇 学摇 报 圆苑 卷
变量渊再冤遥 响应面试验设计因素水平及编码见表 员遥
试验设计与分析采用 阅藻泽蚤早灶鄄藻曾责藻则贼渊愿郾 园冤软件遥
表 员摇 响应面试验设计因素水平及编码
栽葬遭造藻 员摇 阅藻泽蚤早灶 燥枣 砸杂酝 藻曾责藻则蚤皂藻灶贼葬造 枣葬糟贼燥则泽 葬灶凿 糟燥凿藻泽
因素
云葬糟贼燥则
编码
晕燥援
水平 蕴藻增藻造
原 员 园 员
酶解时间渊皂蚤灶 原员 冤 载员 远园 怨园 员圆园
底物质量分数 辕 豫 载圆 愿 员园 员圆
加酶量渊哉窑早 原员底物冤 载猿 圆源园园 猿圆园园 源园园园
酶液初始 责匀值 载源 苑郾 缘 愿郾 园 愿郾 缘
员郾 远摇 抗氧化活性测定方法
清除超氧阴离子自由基的测定袁参照李彦杰等咱愿暂
的方法袁清除羟自由基的测定尧钼还原力的测定袁参照
再怎 等咱怨暂的方法袁清除 阅孕孕匀 自由基的测定袁参照崔莉
等咱员园暂的方法袁铁还原力的测定尧铁离子螯合力的测定袁
抗脂质体过氧化活性的测定袁参照 再怎等咱员员暂的方法袁铜
离子螯合力的测定袁参照 宰燥灶早 等咱员圆暂的方法遥
圆摇 结果与分析
圆郾 员摇 单因素试验结果
圆郾 员郾 员摇 酶解时间对花生抗氧化水解产物清除 阅孕孕匀
自由基的影响摇 酶解时间对花生抗氧化水解产物清除
阅孕孕匀自由基的影响如图 员 所示遥 在 猿园 耀 远园皂蚤灶 反应
时间内袁随酶解时间的延长袁花生抗氧化水解产物清除
阅孕孕匀自由基的清除率变化不大曰当酶解时间超过
远园皂蚤灶后袁花生抗氧化水解产物清除 阅孕孕匀 自由基的
清除率快速升高袁在 怨园皂蚤灶出现最大清除率曰继续延长
酶解时间袁清除率降低遥 粤造糟葬造葬泽藻 是一种深度内切水
解蛋白酶袁随着酶解时间的延长袁花生蛋白质被逐步水
解为较小的肽段袁由于这些肽段含有特定的氨基酸残
基袁从而具有强自由基清除率袁所以袁酶解液的 阅孕孕匀
自由基清除率增加遥 但是袁随着水解的进行袁酶解液中
的肽段将进一步被水解而失去那些特定的氨基酸残
基袁进而丧失清除自由基活性遥 因此袁酶解液的 阅孕孕匀
自由基清除率随着酶解时间呈现先不变后升高再降低
的趋势遥
圆郾 员郾 圆摇 底物质量分数对花生抗氧化水解产物清除
阅孕孕匀自由基的影响摇 图 圆 为底物质量分数对花生抗
氧化水解产物清除 阅孕孕匀自由基的影响作用图遥 底物
质量分数在 圆郾 园豫 耀愿郾 园豫范围时袁花生抗氧化水解产
物对 阅孕孕匀自由基的清除率逐渐增加遥 当底物质量分
数较低时袁底物分子与酶分子结合的几率低袁影响酶促
反应的进行袁酶解液中得到的有活性的肽类较少袁所以
图 员摇 酶解时间对花生抗氧化水解
产物清除 阅孕孕匀自由基的影响
云蚤早援 员摇 耘枣枣藻糟贼 燥枣 蚤灶糟怎遭葬贼蚤燥灶 贼蚤皂藻 燥灶 阅孕孕匀 枣则藻藻
则葬凿蚤糟葬造 泽糟葬增藻灶早蚤灶早 葬糟贼蚤增蚤贼赠 燥枣 责藻葬灶怎贼 澡赠凿则燥造赠泽葬贼藻
抗氧化活性较低遥 随着底物质量分数的增加袁酶与底
物接触得充分袁肽键断裂得多袁得到具有抗氧化活性的
肽类相对较多袁则抗氧化活性升高袁直至取得最大值遥
当底物质量分数继续增加时袁清除率下降遥 这是因为
底物质量分数较大时袁高浓度的蛋白可能与蛋白酶形
成无活性的中间产物袁从而抑制了酶解反应袁使得清除
率下降遥
图 圆摇 底物质量分数对花生抗氧化
水解产物清除 阅孕孕匀自由基的影响
云蚤早援 圆摇 耘枣枣藻糟贼 燥枣 泽怎遭泽贼则葬贼藻 皂葬泽泽 枣则葬糟贼蚤燥灶 燥灶 阅孕孕匀
枣则藻藻 则葬凿蚤糟葬造 泽糟葬增藻灶早蚤灶早 葬糟贼蚤增蚤贼赠 燥枣 责藻葬灶怎贼 澡赠凿则燥造赠泽葬贼藻
圆郾 员郾 猿摇 加酶量对花生抗氧化水解产物清除 阅孕孕匀 自
由基的影响 摇 加酶量对花生抗氧化水解产物清除
阅孕孕匀自由基的影响见图 猿遥 在加酶量为 愿园园 耀 猿圆园园哉
窑早 原员底物范围时袁花生抗氧化水解产物对 阅孕孕匀 自由
基的清除率随着加酶量的增加而升高遥 当底物质量分
数一定时袁酶量增加可以提高酶与底物的结合效率袁从
而促进酶解反应进行袁生成的具有抗氧化活性的肽类
增加袁则清除率升高袁在加酶量为 猿圆园园哉窑早 原员底物时出
现最大清除率遥 当加酶量超过 猿圆园园哉窑早 原员底物袁清除
率呈现缓慢下降趋势遥 当加酶量达到一定程度以后袁
随着酶浓度的增加袁过量的蛋白酶分子抑制了中间产
物向酶解反应终产物的转化袁使得具有抗氧化活性的
园怨员
摇 圆 期 花生抗氧化水解产物制备及其抗氧化活性研究
肽类相对较少袁则清除率下降遥 另外袁过量的蛋白酶分
子还会与生成的肽类结合袁将其水解为氨基酸袁则抗氧
化活性降低遥
图 猿摇 加酶量对花生抗氧化水解
产物清除 阅孕孕匀自由基的影响
云蚤早援 猿摇 耘枣枣藻糟贼 燥枣 藻灶扎赠皂藻 凿燥泽葬早藻 燥灶 阅孕孕匀
枣则藻藻 则葬凿蚤糟葬造 泽糟葬增藻灶早蚤灶早 葬糟贼蚤增蚤贼赠 燥枣 责藻葬灶怎贼 澡赠凿则燥造赠泽葬贼藻
圆郾 员郾 源摇 酶解温度对花生抗氧化水解产物清除 阅孕孕匀
自由基的影响摇 图 源 为酶解温度对花生抗氧化水解产
物清除 阅孕孕匀 自由基的影响作用图遥 在 源园 耀 缘园益范
围内袁随着温度的升高袁花生抗氧化水解产物对 阅孕孕匀
自由基的清除率增加袁在温度为 缘园益时袁清除率出现
最大值遥 酶促反应与大多数化学反应一样袁当温度升
高时袁酶促反应速率加快袁则酶解反应产物生成量增
加袁抗氧化活性增大遥 当温度大于 缘园益时袁花生抗氧
化水解产物对 阅孕孕匀 自由基的清除率下降并趋于稳
定遥 酶为特定的蛋白质袁只有在适宜的温度下袁酶才能
保持其最佳的活性构象遥 当温度超过一定范围时袁酶
分子吸收过多能量袁使得酶蛋白的结构发生改变袁造成
酶活性降低甚至丧失催化能力遥 因此袁选择具有最高
阅孕孕匀自由基清除活性的酶解温度 缘园益袁作为响应面
试验的固定酶解温度遥
图 源摇 酶解温度对花生抗氧化水解
产物清除 阅孕孕匀自由基的影响
云蚤早援 源摇 耘枣枣藻糟贼 燥枣 则藻葬糟贼蚤燥灶 贼藻皂责藻则葬贼怎则藻 燥灶 阅孕孕匀
枣则藻藻 则葬凿蚤糟葬造 泽糟葬增藻灶早蚤灶早 葬糟贼蚤增蚤贼赠 燥枣 责藻葬灶怎贼 澡赠凿则燥造赠泽葬贼藻
圆郾 员郾 缘摇 酶液初始 责匀 值对花生抗氧化水解产物清除
阅孕孕匀自由基的影响 摇 责匀 值对花生抗氧化水解产物
清除 阅孕孕匀 自由基的影响如图 缘 所示遥 在 责匀苑郾 园 耀
苑郾 缘 范围内袁花生抗氧化水解产物对 阅孕孕匀 自由基清
除率增加袁在 责匀苑郾 缘 时清除率出现最大值曰当 责匀值大
于 苑郾 缘 时袁清除率呈现下降趋势遥 蛋白酶的催化作用袁
需要一定的 责匀 条件袁只有在特定的 责匀 条件下袁酶蛋
白的构象和底物花生蛋白的构象才能处于稳定状态袁
才能促进酶分子与底物分子的结合以及酶催化底物转
变为产物遥 粤造糟葬造葬泽藻 是一种碱性蛋白酶袁当 责匀 值为
苑郾 园 时袁可能影响维持酶分子空间结构的有关基团解
离袁从而影响了酶活性部位的构象袁进而影响与底物的
结合或催化袁导致酶解产物较少袁自由基清除活性较
低遥 当 责匀 值在 苑郾 缘 耀 怨郾 缘 之间时袁粤造糟葬造葬泽藻 虽然在此
责匀值范围内能保持一定的空间构象袁但该 责匀 值范围
可能会影响花生蛋白的解离状态袁从而影响了酶与底
物的结合和酶对底物的催化袁则清除率下降遥 试验选
择 责匀苑郾 缘 耀 愿郾 缘 为响应面试验水平范围遥
图 缘摇 初始 责匀值对花生抗氧化水解
产物清除 阅孕孕匀自由基的影响
云蚤早援 缘摇 耘枣枣藻糟贼 燥枣 蚤灶蚤贼蚤葬造 责匀 增葬造怎藻 燥灶 阅孕孕匀
枣则藻藻 则葬凿蚤糟葬造 泽糟葬增藻灶早蚤灶早 葬糟贼蚤增蚤贼赠 燥枣 责藻葬灶怎贼 澡赠凿则燥造赠泽葬贼藻
圆郾 圆摇 响应面设计结果分析
圆郾 圆郾 员摇 模型的建立与显著性分析摇 根据 砸杂酝 设计袁
选取 圆怨 个试验点袁表 圆 为 砸杂酝 设计及 阅孕孕匀 自由基
清除率试验值与预测值遥 对表 圆 结果进行二次多项式
回归拟合袁获得预测相应值与酶解时间渊载员 冤尧底物质
量分数渊载圆冤尧加酶量渊载猿冤和初始 责匀 值渊载源 冤的二次回
归方程袁如下院
再 越远源郾 远园 垣 园郾 远员载员 垣 苑郾 员员 载圆 垣 猿郾 员愿 载猿 原 园郾 缘怨
载源 垣 园郾 苑缘 载员 载圆 原 园郾 缘员 载员 载猿 原 员郾 圆猿 载员 载源 原 员郾 猿远 载圆
载猿 垣 员郾 愿愿 载圆载源 垣 员郾 怨怨 载猿 载源 原 员郾 远员 载圆员 垣 圆郾 愿源 载圆圆 垣
园郾 苑园 载圆猿 原 源郾 园员 载圆源
对该模型方程进行方差分析袁结果见表 猿遥 该模
型极显著渊孕 约 园郾 园园员冤袁表明该方程对试验结果的拟合
情况良好袁因此可以用该回归方程对试验真实值进行
员怨员
核摇 农摇 学摇 报 圆苑 卷
分析 和 预 测遥 模 型 的 校 正 决 定 系 数 渊 粤凿躁怎泽贼藻凿
糟燥藻枣枣蚤糟蚤藻灶贼 燥枣 凿藻贼藻则皂蚤灶葬贼蚤燥灶袁 砸粤凿躁 圆冤为 园郾 怨圆猿缘袁表明大约
有 怨圆豫的清除率变异分布在所研究的 源 个相关因素
中袁其总变异度仅有 愿豫不能用该模型来解释遥 模型
的相关系数渊悦燥则则藻造葬贼蚤燥灶 糟燥藻枣枣蚤糟蚤藻灶贼袁砸冤为 园郾 怨愿园苑袁表明
清除率的预测值和试验值之间具有高度的相关性遥 失
拟项 孕 越 园郾 员员猿愿 跃 园郾 园缘袁表明方程的拟合不足检验不
显著袁二次响应面回归方程能够很好的拟合本实验所
得的结果袁自变量与响应值之间线性关系显著袁该模型
可用于清除率的理论预测遥 同时袁模型的变异系数
渊悦燥藻枣枣蚤糟蚤藻灶贼 燥枣 增葬则蚤葬贼蚤燥灶袁 悦灾冤仅为 圆郾 远源豫 袁也表明方程
拟合度较好遥
表 圆摇 砸杂酝设计及结果
栽葬遭造藻 圆摇 砸杂酝 藻曾责藻则蚤皂藻灶贼 凿藻泽蚤早灶 葬灶凿 则藻泽怎造贼泽
序号
晕怎皂遭藻则 载员 渊皂蚤灶冤 载圆 渊豫 冤
载猿
渊哉窑早 原员底物 哉窑早 原员 泽怎遭泽贼则葬贼藻冤 载源
再 渊试验值
粤糟贼怎葬造 增葬造怎藻泽冤 渊豫 冤
再爷 渊预测值
孕则藻凿蚤糟贼藻凿 增葬造怎藻泽冤 渊豫 冤
员 远园 愿 猿圆园园 愿 缘远郾 员缘 缘愿郾 愿远
圆 员圆园 愿 猿圆园园 愿 缘愿郾 缘圆 缘愿郾 缘愿
猿 远园 员圆 猿圆园园 愿 苑园郾 缘猿 苑员郾 缘愿
源 员圆园 员圆 猿圆园园 愿 苑缘郾 怨 苑源郾 猿
缘 怨园 员园 圆源园园 苑郾 缘 远园郾 圆源 远园郾 远怨
远 怨园 员园 源园园园 苑郾 缘 远员郾 缘源 远猿郾 园苑
苑 怨园 员园 圆源园园 愿郾 缘 缘缘郾 怨源 缘缘郾 缘猿
愿 怨园 员园 源园园园 愿郾 缘 远缘郾 圆员 远缘郾 愿苑
怨 远园 员园 猿圆园园 苑郾 缘 缘怨郾 远猿 缘苑郾 苑猿
员园 员圆园 员园 猿圆园园 苑郾 缘 远园郾 缘怨 远员郾 源员
员员 远园 员园 猿圆园园 愿郾 缘 远园郾 猿 缘怨郾 园员
员圆 员圆园 员园 猿圆园园 愿郾 缘 缘远郾 猿缘 缘苑郾 苑苑
员猿 怨园 愿 圆源园园 愿 缘缘郾 苑圆 缘远郾 源怨
员源 怨园 员圆 圆源园园 愿 苑源郾 员员 苑猿郾 源猿
员缘 怨园 愿 源园园园 愿 远缘郾 猿愿 远缘郾 缘苑
员远 怨园 员圆 源园园园 愿 苑愿郾 猿缘 苑苑郾 园苑
员苑 远园 员园 圆源园园 愿 缘怨郾 源员 缘怨郾 猿怨
员愿 员圆园 员园 圆源园园 愿 远员郾 苑圆 远员郾 远猿
员怨 远园 员园 源园园园 愿 远苑郾 圆怨 远远郾 苑苑
圆园 员圆园 员园 源园园园 愿 远苑郾 缘愿 远远郾 怨苑
圆员 怨园 愿 猿圆园园 苑郾 缘 远园郾 苑苑 缘愿郾 苑怨
圆圆 怨园 员圆 猿圆园园 苑郾 缘 远愿郾 员员 远怨郾 圆缘
圆猿 怨园 愿 猿圆园园 愿郾 缘 缘缘郾 远员 缘猿郾 愿缘
圆源 怨园 员圆 猿圆园园 愿郾 缘 苑园郾 源缘 苑员郾 愿猿
圆缘 怨园 员园 猿圆园园 愿 远源郾 怨员 远源郾 远
圆远 怨园 员园 猿圆园园 愿 远缘郾 园源 远源郾 远
圆苑 怨园 员园 猿圆园园 愿 远猿郾 猿圆 远源郾 远
圆愿 怨园 员园 猿圆园园 愿 远猿郾 愿愿 远源郾 远
圆怨 怨园 员园 猿圆园园 愿 远缘郾 愿猿 远源郾 远
表 猿摇 回归模型方差分析
栽葬遭造藻 猿摇 灾葬则蚤葬灶糟藻 葬灶葬造赠泽蚤泽 燥枣 则藻早则藻泽泽蚤燥灶 皂燥凿藻造
方差来源
杂燥怎则糟藻
平方和
杂杂
自由度
凿枣
均方
酝藻葬灶 泽择怎葬则藻
云值
云 增葬造怎藻 孕则燥遭 跃 云
模型 酝燥凿藻造 怨怨苑郾 猿猿源缘 员源 苑员郾 圆猿愿圆 圆缘郾 员猿猿怨 约 园郾 园园园员
残差 砸藻泽蚤凿怎葬造 猿怨郾 远愿园怨 员源 圆郾 愿猿源源 原 原
失拟项 蕴葬糟噪 燥枣 枣蚤贼 猿缘郾 苑圆员远 员园 猿郾 缘苑圆圆 猿郾 远园愿怨 园郾 员员猿愿
纯误差 孕怎则藻 藻则则燥则 猿郾 怨缘怨猿 源 园郾 怨愿怨愿 原 原
总和 悦燥则 贼燥贼葬造 员园猿苑郾 园员缘园 圆愿 原 原 原
砸圆 越 园郾 怨远员苑曰摇 砸粤凿躁 圆 越 园郾 怨圆猿缘曰摇 悦灾渊豫 冤 越 圆郾 远源员源曰摇 砸孕则藻凿 圆 越 园郾 怨圆猿缘曰摇 粤凿藻择 孕则藻糟蚤泽蚤燥灶 越 员怨郾 员愿员员
摇 摇 二次模型中回归系数的显著性检验见表 源遥 因素
载圆和 载猿对 阅孕孕匀 清除效果的线性效应极显著曰因素
载圆 圆和 载源 圆对 阅孕孕匀清除效果的曲面效应极显著袁载员 圆对
阅孕孕匀清除效果的曲面效应显著曰 载圆 载源和 载猿 载源对
圆怨员
摇 圆 期 花生抗氧化水解产物制备及其抗氧化活性研究
阅孕孕匀清除效果的交互影响显著袁表明试验因素对响
应值不是简单的线性关系袁二次项对响应值也有很大
的关系袁交互项影响也显著遥 比较响应面模型二次多
项式方程中一次项的方差的大小袁可以判断影响因素
的主次顺序遥 各因素对 阅孕孕匀清除效果影响程度大小
为 载圆 跃 载猿 跃 载员 跃 载源袁即底物质量分数 跃加酶量 跃酶解
时间 跃初始 责匀值遥
表 源摇 回归方程系数显著性检验
栽葬遭造藻 源摇 杂蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶糟藻 贼藻泽贼 枣燥则 则藻早则藻泽泽蚤燥灶 糟燥藻枣枣蚤糟蚤藻灶贼
因素
云葬糟贼燥则
回归系数
悦燥藻枣枣蚤糟蚤藻灶贼 藻泽贼蚤皂葬贼藻
自由度
凿枣
标准误差
杂耘
怨缘豫置信下限
怨缘豫 悦陨造燥憎
怨缘豫置信上限
怨缘豫 悦陨澡蚤早澡
云值
云 增葬造怎藻
孕则燥遭 跃
云
蚤灶贼藻则糟藻责贼 远缘郾 缘怨远园 员 园郾 苑缘圆怨 远圆郾 怨愿员圆 远远郾 圆员园愿 圆缘郾 员猿猿怨 约 园郾 园园园员
载员 园郾 远员圆缘 员 园郾 源愿远园 原 园郾 源圆怨怨 员郾 远缘源怨 员郾 缘愿愿猿 园郾 圆圆愿圆
载圆 苑郾 员园愿猿 员 园郾 源愿远园 远郾 园远远园 愿郾 员缘园苑 圆员猿郾 怨圆缘愿 约 园郾 园园园员
载猿 猿郾 员愿源圆 员 园郾 源愿远园 圆郾 员源员愿 源郾 圆圆远缘 源圆郾 怨圆缘怨 约 园郾 园园园员
载源 原 园郾 缘愿缘园 员 园郾 源愿远园 原 员郾 远圆苑源 园郾 源缘苑源 员郾 源源愿怨 园郾 圆源愿苑
载员 载圆 园郾 苑缘园园 员 园郾 愿源员愿 原 员郾 园缘缘源 圆郾 缘缘缘源 园郾 苑怨猿愿 园郾 猿愿愿园
载员 载猿 原 园郾 缘园缘 员 园郾 愿源员愿 原 圆郾 猿员园源 员郾 猿园园源 园郾 猿缘怨怨 园郾 缘缘愿员
载员 载源 原 员郾 圆圆苑缘 员 园郾 愿源员愿 原 猿郾 园猿圆怨 园郾 缘苑苑怨 圆郾 员圆远源 园郾 员远远愿
载圆 载猿 原 员郾 猿缘缘园 员 园郾 愿源员愿 原 猿郾 员远园源 园郾 源缘园源 圆郾 缘怨员员 园郾 员圆怨愿
载圆 载源 员郾 愿苑缘园 员 园郾 愿源员愿 园郾 园远怨远 猿郾 远愿园源 源郾 怨远员缘 园郾 园源圆愿
载猿 载源 员郾 怨怨圆缘 员 园郾 愿源员愿 园郾 员愿苑员 猿郾 苑怨苑怨 缘郾 远园圆愿 园郾 园猿圆怨
载员 圆 原 员郾 远员园员 员 园郾 远远员园 原 猿郾 园圆苑怨 原 园郾 员怨圆猿 缘郾 怨猿圆苑 园郾 园圆愿愿
载圆 圆 圆郾 愿源猿苑 员 园郾 远远员园 员郾 源圆缘怨 源郾 圆远员源 员愿郾 缘园远园 园郾 园园园苑
载猿 圆 园郾 苑园源怨 员 园郾 远远员园 原 园郾 苑员圆怨 圆郾 员圆圆苑 员郾 员猿苑圆 园郾 猿园源猿
载源 圆 原 源郾 园员猿愿 员 园郾 远远员园 原 缘郾 源猿员远 原 圆郾 缘怨远员 猿远郾 愿苑园员 约 园郾 园园园员
摇 摇 注院孕臆园郾 园缘袁影响显著曰孕臆园郾 园员袁影响高度显著曰孕臆园郾 园园员袁影响极显著曰孕 跃 园郾 园缘袁影响不显著遥
晕燥贼藻院 云葬糟贼燥则泽 枣燥怎灶凿 贼燥 澡葬增藻 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼 藻枣枣藻糟贼泽 燥灶 贼澡藻 泽糟葬增藻灶早蚤灶早 则葬贼藻 燥枣 阅孕孕匀 枣则藻藻 则葬凿蚤糟葬造 渊孕臆园郾 园缘冤曰 匀葬增藻 澡蚤早澡造赠 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼 藻枣枣藻糟贼泽 燥灶 贼澡藻 泽糟葬增藻灶早蚤灶早
则葬贼藻 燥枣 阅孕孕匀 枣则藻藻 则葬凿蚤糟葬造 渊孕臆园郾 园员冤曰 匀葬增藻 藻曾贼则藻皂藻造赠 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼 藻枣枣藻糟贼泽 燥灶 贼澡藻 泽糟葬增藻灶早蚤灶早 则葬贼藻 燥枣 阅孕孕匀 枣则藻藻 则葬凿蚤糟葬造 渊孕臆园郾 园园员冤曰 匀葬增藻 灶燥 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼 藻枣枣藻糟贼
燥灶 贼澡藻 泽糟葬增藻灶早蚤灶早 则葬贼藻 燥枣 阅孕孕匀 枣则藻藻 则葬凿蚤糟葬造 渊孕 跃 园郾 园缘冤 援
圆郾 圆郾 圆摇 响应面直观分析 摇 由 阅孕孕匀 清除率响应面模
型回归方程也可以分析出袁在影响 阅孕孕匀 清除效果的
因素中袁酶解时间尧底物质量分数尧加酶量与清除率呈
正相关袁初始 责匀 值与清除率呈负相关遥 图 远 为酶解
时间尧底物质量分数尧加酶量尧初始 责匀 值 源 个因素交
互影响对响应值的响应面分析图遥 图 远鄄葬 表明酶解时
间与底物质量分数对清除率的影响遥 从中可以看出袁
底物质量分数一定时袁清除率随酶解时间的延长而增
加袁在酶解时间 怨源皂蚤灶左右达到最大值后缓慢下降曰而
酶解时间一定时袁清除率随底物质量分数增加而增大袁
变化幅度较大袁说明两者交互作用影响不大袁但是底物
质量分数相比于酶解时间对清除率的影响较大遥 从图
远鄄遭可以看出袁加酶量一定时袁清除率随酶解时间延长
先大幅度增加而后缓慢减小曰而酶解时间一定时袁清除
率随加酶量的增大而增加袁且变化幅度大袁说明两者交
互影响不大袁但是加酶量相比于酶解时间对清除率的
影响较大遥 从图 远鄄糟 可知袁初始 责匀 值一定时袁清除率
随酶解时间延长先增加而后缓慢减小曰而酶解时间一
定时袁清除率随初始 责匀 值先大幅度增大而后缓慢减
小袁说明两者交互影响不大遥 图 远鄄凿 可以得到袁加酶量
一定时袁清除率随底物质量分数的增大而增加袁变化趋
势比较明显曰而底物质量分数一定时袁清除率随加酶量
的增加而缓慢增大袁说明两者交互影响不大遥 从图 远鄄藻
可知袁初始 责匀值一定时袁清除率随底物质量分数的增
加而大幅度增大曰当底物质量分数一定时袁清除率随初
始 责匀值的增加呈现先大幅增大再减小趋势袁说明两
者交互影响大袁且底物质量分数比初始 责匀 值对清除
率的影响较大遥 同样从图 远鄄枣 可以得到袁加酶量与初
始 责匀值交互作用对清除率的影响大袁且加酶量比初
始 责匀值对清除率的影响较大遥
圆郾 圆郾 猿摇 最优工艺条件的确定摇 对实验模型进行典型
性分析袁获得 粤造糟葬造葬泽藻 酶解制备花生抗氧化水解产物
最优条件为酶解时间 怨猿郾 缘远皂蚤灶尧 底物质量分数
员圆郾 园园豫 尧加酶量 猿怨怨怨郾 怨怨哉窑早 原员 底物尧初始 责匀 值
愿郾 圆园袁清除率理论值为 苑苑郾 苑苑豫 遥
为检验响应面方法的可行性袁并综合考虑实际操
作的便利性袁将工艺参数修正为院酶解时间 怨源皂蚤灶尧底
物质量分数 员圆豫 尧加酶量 源园园园哉窑早 原员底物尧初始 责匀 值
愿郾 圆园 进行 粤造糟葬造葬泽藻酶解制备花生抗氧化水解产物的试
验遥 猿 次平行试验得到的平均清除率为 苑苑郾 猿愿豫 依
猿怨员
核摇 农摇 学摇 报 圆苑 卷
图 远摇 各因素对 阅孕孕匀清除率影响的趋势图
云蚤早援 远摇 耘枣枣藻糟贼泽 燥枣 增葬则蚤燥怎泽 枣葬糟贼燥则泽 燥灶 阅孕孕匀 枣则藻藻 则葬凿蚤糟葬造 泽糟葬增藻灶早蚤灶早 葬糟贼蚤增蚤贼蚤藻泽
注院葬院载员和 载圆 尧遭院载员和 载猿 尧糟院载员和 载源 尧凿院载圆和 载猿 尧藻院载圆和 载源 尧枣院载猿和 载源的交互影响
晕燥贼藻院 葬院 载员 葬灶凿 载圆 袁 遭院 载员 葬灶凿 载猿 袁 糟院 载员 葬灶凿 载源 袁 凿院 载圆 葬灶凿 载猿 袁 藻院 载圆 袁 葬灶凿 载源 袁 枣院 载猿 葬灶凿 载源
园郾 员远豫 袁与理论值相差不大袁说明该模型与实际情况拟
合较好袁验证了所预测模型的正确性遥 因此袁响应面法
对 粤造糟葬造葬泽藻 酶解制备花生抗氧化水解产物工艺的条件
的参数优化是可行的袁得到的工艺条件具有实际应用
价值遥
圆郾 猿摇 抗氧化活性结果
通常情况下袁用于评价体外抗氧化活性的方法有
四类咱员猿暂 院渊员冤清除自由基法渊清除 阅孕孕匀 自由基尧清除
羟自由基尧清除超氧阴离子自由基等冤曰渊圆冤还原力法
渊铁还原力尧钼还原力等冤曰渊猿冤金属离子螯合力法渊铁
离子螯合力尧铜离子螯合力等冤曰渊源冤脂质物质过氧化
抑制能力法 渊抑制亚油酸过氧化尧抗脂质体过氧化
等冤遥 复合多糖酶渊灾蚤泽糟燥扎赠皂藻 蕴冤预处理花生粕粉袁再
用 粤造糟葬造葬泽藻 酶解得到的花生抗氧化水解产物袁进行抗
氧化活性试验袁结果见表 缘遥 由表 缘 可知袁抗氧化水解
产物具有清除自由基尧金属离子螯合尧抗脂质过氧化和
还原能力 源 种抗氧化活性遥
猿摇 讨论
猿郾 员摇 花生抗氧化水解产物的制备
目前袁花生抗氧化水解产物的制备方法袁如
粤造糟葬造葬泽藻 水解花生分离蛋白咱员源 原 员远暂 尧粤造糟葬造葬泽藻 和复合蛋
白酶 渊 孕则燥贼葬皂藻曾冤 水解花生蛋白粉咱员苑暂 尧风味蛋白酶
渊云造葬增燥怎则扎赠皂藻冤和 粤造糟葬造葬泽藻复合酶水解花生蛋白粉咱员愿暂 袁
通常先用碱溶酸沉法从花生粕中制备花生分离蛋白袁
源怨员
摇 圆 期 花生抗氧化水解产物制备及其抗氧化活性研究
摇 摇 摇 表 缘摇 抗氧化活性结果
栽葬遭造藻 缘摇 砸藻泽怎造贼泽 燥枣 葬灶贼蚤燥曾蚤凿葬灶贼 葬糟贼蚤增蚤贼蚤藻泽
回归方程 砸藻早则藻泽泽蚤燥灶 藻择怎葬贼蚤燥灶 砸圆 陨悦缘园 渊皂早窑皂蕴 原员 冤
阅孕孕匀自由基清除率
阅孕孕匀 枣则藻藻 则葬凿蚤糟葬造 泽糟葬增藻灶早蚤灶早 葬糟贼蚤增蚤贼赠 赠 越 原 园郾 员怨圆愿曾圆 垣 愿郾 远苑园员曾 垣 员郾 园怨圆远 园郾 怨怨怨源 远郾 远缘
羟自由基清除率
匀赠凿则燥曾赠造 枣则藻藻 则葬凿蚤糟葬造 泽糟葬增藻灶早蚤灶早 葬糟贼蚤增蚤贼赠 赠 越 原 园郾 园园园园远 曾圆 垣 园郾 员员员愿圆 曾 垣 远郾 圆怨愿苑远 园郾 怨怨怨员 园郾 缘远
超氧阴离子自由基清除率
杂怎责藻则燥曾蚤凿藻 葬灶蚤燥灶 枣则藻藻 则葬凿蚤糟葬造 泽糟葬增藻灶早蚤灶早 葬糟贼蚤增蚤贼赠 赠 越 原 园郾 员愿园怨曾圆 垣 愿郾 圆愿猿源曾 原 园郾 猿圆缘怨 园郾 怨怨怨员 苑郾 远苑
铁离子螯合率 陨则燥灶 蚤燥灶 糟澡藻造葬贼蚤燥灶 赠 越 原 园郾 员员源员曾圆 垣 苑郾 猿远愿猿曾 原 员郾 苑愿员员 园郾 怨怨怨圆 愿郾 园圆
铜离子螯合率 悦燥责责藻则 蚤燥灶 糟澡藻造葬贼蚤燥灶 赠 越 原 园郾 园猿苑猿曾圆 垣 源郾 愿员源猿曾 原 猿郾 怨猿源猿 园郾 怨怨愿愿 员圆郾 猿怨
抗脂质体过氧化抑制率
粤灶贼蚤鄄造蚤责蚤凿 责藻则燥曾蚤凿葬贼蚤燥灶 葬糟贼蚤增蚤贼赠 赠 越 原 园郾 园缘怨苑曾圆 垣 远郾 缘源远远曾 原 员郾 园猿圆圆 园郾 怨怨愿远 愿郾 源缘
铁还原力 陨则燥灶 则藻凿怎糟贼蚤燥灶 糟葬责葬糟蚤贼赠 赠 越 园郾 园员怨猿曾 原 园郾 园园怨远 园郾 怨怨愿源 圆远郾 源园
钼还原力 酝燥造赠遭凿藻灶怎皂 则藻凿怎糟贼蚤燥灶 糟葬责葬糟蚤贼赠 赠 越 园郾 园怨缘曾 垣 园郾 园远猿苑 园郾 怨怨苑怨 源郾 缘怨
再由分离蛋白经酶水解制备花生抗氧化水解产物遥 这
种方法操作繁琐袁需要大量的酸碱处理花生粕袁不但增
加后续酶解过程的成本袁还会影响环境安全袁且碱溶酸
沉法存在许多弊端遥 花生中 怨园豫的蛋白属于盐溶性
蛋白袁在较高的碱浓度下才能得到高得率的花生分离
蛋白袁这样不仅容易引起蛋白变性及水解袁还会使非蛋
白成分溶出袁降低分离蛋白纯度和抗氧化水解产物提
取率遥 碱溶酸沉过程中袁蛋白质易发生胱赖反应和美
拉德反应咱员怨暂 袁不仅降低蛋白的营养价值袁还会影响蛋
白酶对蛋白的水解效率以及终产物的抗氧化活性遥 因
此袁有必要寻找一种用蛋白酶直接水解花生粕即可得
到花生抗氧化水解产物的方法遥
灾蚤泽糟燥扎赠皂藻 蕴 是一种非淀粉复合糖酶袁对纤维素尧
半纤维素尧茁鄄葡聚糖尧木聚糖尧阿拉伯聚糖等多种成分
均有降解作用遥 它能有效地降解细胞壁纤维组织袁增
加细胞内容物渊如蛋白质冤的释放遥 国外在制备米糠
蛋白尧燕麦蛋白等过程中已有应用 灾蚤泽糟燥扎赠皂藻 蕴进行辅
助提取的报道咱圆园 袁圆员暂 遥 因此袁可以应用 灾蚤泽糟燥扎赠皂藻 蕴 预
先处理花生粕袁使花生细胞壁组织降解袁从而更多的花
生蛋白质溶出到溶液中袁以此来替代碱溶过程袁再用蛋
白酶酶解制备花生抗氧化水解产物遥 这样既可以避免
使用大量的化学试剂袁起到环境友好作用袁又可以在温
和的条件下进行反应遥 高明侠等咱圆圆暂用胰蛋白酶和风
味酶分步水解花生粕袁得到的酶解液具有抗氧化活性遥
匀憎葬灶早等咱圆猿暂用 藻泽责藻则葬泽藻水解脱脂花生饼袁其水解产物
的 阅孕孕匀自由基清除活性和金属离子螯合活性较大遥
可见袁由花生饼粕直接制备花生抗氧化水解产物是可
行的遥
猿郾 圆摇 花生抗氧化水解产物的抗氧化活性
在 猿 个清除自由基试验中袁抗氧化水解产物清除
羟自由基的活性最显著遥 羟自由基是化学性质最活泼
的活性氧袁反应速度极快袁它带有一个不成对电子袁是
对人体毒性最大的自由基袁可以与活细胞中的糖尧氨基
酸尧磷脂尧核苷和有机酸等各种分子发生反应而造成损
害咱圆源暂 遥 抗氧化水解产物表现出强的清除羟自由基的
能力袁提示抗氧化水解产物能够作为功能食品原料保
护人体健康遥 一般地袁游离金属离子袁如院云藻圆 垣 尧悦怎 垣
等袁可催化 匀圆韵圆产生极活泼的羟自由基袁含组氨酸肽
通过螯合这些过渡金属起到抗氧化作用遥 组氨酸上有
琢鄄氨基尧羧基和活性侧链基团咪唑基袁琢鄄氨基和羧基与
金属离子可形成五元环袁琢鄄氨基和咪唑基与金属离子
可形成六元环袁羧基和咪唑基与金属离子可形成七元
环咱圆缘暂 遥 此外袁肽链中的酸性氨基酸侧链羧基与金属离
子互作可钝化金属离子的氧化作用袁减弱自由基链反
应袁达到抗氧化效果遥 脂质中的多不饱和脂肪酸由于
含有多个双键而化学性质活泼袁最易受自由基的破坏
发生过氧化反应遥 这种反应是自由基连锁反应遥 只需
要少数几个自由基引发剂就能导致数以千计的分子发
生自由基反应遥 在反应中袁一个不饱和脂肪酸的氢过
氧化物通过与自由基 砸窑发生反应袁以夺取氢袁接着产
生双键重排袁吸收氧形成五元氧环最后导致键断裂反
应形成丙二醛咱圆远暂 遥 花生抗氧化水解产物对脂质过氧
化具有一定的抑制作用袁表现出抗氧化活性遥 还原力
与抗氧化活性存在极大的相关性袁还原力越强袁表明被
测样品的抗氧化活性越好遥 花生抗氧化水解产物能降
低 云藻灶贼燥灶 反应中 云藻圆 垣和钼蓝反应中 酝怎源 垣的浓度袁可
以预防氧化损伤袁进而预防一些心血管疾病的发生遥
源摇 结论
通过单因素和响应面设计试验方法袁 采用
灾蚤泽糟燥扎赠皂藻 蕴预处理袁再用 粤造糟葬造葬泽藻酶解花生粕粉袁得到
缘怨员
允燥怎则灶葬造 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽
圆园员猿袁圆苑渊圆冤院园员愿愿 耀 园员怨远
制备花生抗氧化水解产物的最佳制备工艺曰花生抗氧
化水解产物具有清除自由基尧螯合金属离子尧抑制脂质
过氧化和还原能力 源 种抗氧化活性曰该方法简化了制
备工艺袁缩短了反应时间袁环境友好遥 以花生抗氧化水
解产物为原料袁可以进一步对花生抗氧化肽纯品的分
离尧氨基酸序列和结构分析尧重组 阅晕粤 技术合成以及
构效关系进行研究遥
参考文献院
咱 员 暂 摇 灾葬造噪燥 酝袁 蕴藻蚤遭枣则蚤贼扎 阅袁 酝燥灶糟燥造 允袁 悦则燥灶蚤灶 酝 栽 阅袁 酝葬扎怎则 酝袁 栽藻造泽藻则
允援 云则藻藻 则葬凿蚤糟葬造泽 葬灶凿 葬灶贼蚤燥曾蚤凿葬灶贼泽 蚤灶 灶燥则皂葬造 责澡赠泽蚤燥造燥早蚤糟葬造 枣怎灶糟贼蚤燥灶泽
葬灶凿 澡怎皂葬灶 凿蚤泽藻葬泽藻 咱允暂 援 栽澡藻 陨灶贼藻则灶葬贼蚤燥灶葬造 允燥怎则灶葬造 燥枣 月蚤燥糟澡藻皂蚤泽贼则赠 驭
悦藻造造 月蚤燥造燥早赠袁 圆园园苑袁 猿怨渊员冤院 源源 原 愿源
咱 圆 暂 摇 匀怎泽泽葬蚤灶 匀 匀袁 月葬遭蚤糟 郧袁 阅怎则泽贼 栽袁 宰则蚤早澡贼 允 杂袁 云造怎藻则葬则怎 酝袁
悦澡蚤糟澡蚤则葬怎 粤袁 悦澡藻责藻造藻增 蕴 蕴援 阅藻增藻造燥责皂藻灶贼 燥枣 灶燥增藻造 葬灶贼蚤燥曾蚤凿葬灶贼泽院
凿藻泽蚤早灶袁 泽赠灶贼澡藻泽蚤泽袁 葬灶凿 则藻葬糟贼蚤增蚤贼赠 咱 允 暂 援 栽澡藻 允燥怎则灶葬造 燥枣 韵则早葬灶蚤糟
悦澡藻皂蚤泽贼则赠袁 圆园园猿袁 远愿渊员愿冤院 苑园圆猿 原 苑园猿圆
咱 猿 暂 摇 张摇 捷袁 丁韩英袁 戚向阳袁 袁勇军援枯草芽孢杆菌 再 原 远 产抗菌
肽的体外抗氧化效果研究咱 允暂 援 核农学报袁 圆园员员袁 圆缘渊猿冤院 缘员愿 原
缘圆圆
咱 源 暂 摇 匝蚤葬灶 在 允袁 允怎灶早 宰 运袁 运蚤皂 杂 运援 云则藻藻 则葬凿蚤糟葬造 泽糟葬增藻灶早蚤灶早 葬糟贼蚤增蚤贼赠 燥枣 葬
灶燥增藻造 葬灶贼蚤燥曾蚤凿葬贼蚤增藻 责藻责贼蚤凿藻 责怎则蚤枣蚤藻凿 枣则燥皂 澡赠凿则燥造赠泽葬贼藻 燥枣 遭怎造造枣则燥早 泽噪蚤灶袁
砸葬灶葬 糟葬贼藻泽遭藻蚤葬灶葬 杂澡葬憎 咱 允暂 援 月蚤燥则藻泽燥怎则糟藻 栽藻糟澡灶燥造燥早赠袁 圆园园愿袁 怨怨
渊远冤院 员远怨园 原 员远怨愿
咱 缘 暂 摇 郧蚤则皂葬 酝袁 栽葬皂蚤则 月袁 阅藻泽泽蚤藻 栽援 耘枣枣藻糟贼泽 燥枣 则藻责造葬糟蚤灶早 责藻葬灶怎贼 泽藻藻凿 糟葬噪藻
憎蚤贼澡 遭则藻憎藻则赠 凿则蚤藻凿 赠藻葬泽贼 燥灶 造葬赠蚤灶早 责藻则枣燥则皂葬灶糟藻袁 藻早早 择怎葬造蚤贼赠 葬灶凿
糟葬则糟葬泽泽 糟澡葬则葬糟贼藻则蚤泽贼蚤糟泽 燥枣 则澡燥凿藻 蚤泽造葬灶凿 则藻凿 糟澡蚤糟噪藻灶 咱允暂 援 陨灶贼藻则灶葬贼蚤燥灶葬造
允燥怎则灶葬造 燥枣 孕燥怎造贼则赠 杂糟蚤藻灶糟藻泽袁 圆园员圆袁 员员渊员冤院 远缘 原 苑圆
咱 远 暂 摇 匀怎葬灶早 阅 允袁 韵怎 月 载袁 孕则蚤燥则 砸 蕴援 栽澡藻 糟澡藻皂蚤泽贼则赠 遭藻澡蚤灶凿 葬灶贼蚤燥曾蚤凿葬灶贼
糟葬责葬糟蚤贼赠 葬泽泽葬赠泽 咱 允暂 援 允燥怎则灶葬造 燥枣 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 葬灶凿 云燥燥凿 悦澡藻皂蚤泽贼则赠袁
圆园园缘袁 缘猿渊远冤院 员愿源员 原 员愿缘远
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