全 文 ：摇 核 农 学 报摇 圆园员员袁圆缘渊缘冤院园怨猿猿 耀 园怨猿愿允燥怎则灶葬造 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽
文章编号院员园园园鄄愿缘缘员渊圆园员员冤园缘鄄园怨猿猿鄄园远
与辣椒抗根结线虫基因 酝藻员紧密连锁的耘杂栽鄄杂杂砸标记开发
张摇 宇员袁圆 摇 张晓芬员 摇 陈摇 斌员 摇 耿三省员 摇 李焕秀圆
渊员郾 北京市农林科学院蔬菜研究中心袁北京摇 员园园园怨苑曰 圆援四川农业大学园艺学院袁四川 雅安摇 远圆缘园员源冤
摘摇 要院以含抗根结线虫病基因 酝藻员 的 孕酝圆员苑 与感线虫品种茄门袁及其 云员尧云圆 作为试验材料袁采用南方
根结线虫渊酝藻造燥蚤凿燥早赠灶藻 泽责责援 冤人工接种鉴定袁根据鉴定结果袁利用分离群体分组分析法渊遭怎造噪藻凿 泽藻早则藻早葬灶贼
葬灶葬造赠泽蚤泽袁月杂粤冤建立抗感池袁共筛选到 猿 对渊员员愿尧员源员 及 圆员员冤多态性 耘杂栽鄄杂杂砸 引物在抗感池间存在差异遥
利用 允燥蚤灶皂葬责猿郾 园 软件袁结合抗病性鉴定袁对 云圆 群体进行 杂杂砸 分析袁研究 猿 个 耘杂栽鄄杂杂砸 标记位点与根结
线虫抗性基因 酝藻员 的连锁关系袁结果表明袁耘杂栽鄄杂杂砸 标记 员源员尧员员愿 及 圆员员 与 酝藻员 的遗传距离分别为
远郾 怨愿源尧员愿郾 远愿源 和 圆怨郾 猿员园糟酝遥 本研究得到的与辣椒抗根结线虫显性单基因 酝藻员 紧密连锁的 耘杂栽鄄杂杂砸标
记袁为 酝藻员 基因的标记辅助选择提供了参考遥
关键词院辣椒曰根结线虫曰酝藻员 基因曰耘杂栽鄄杂杂砸
阅耘灾耘蕴韵孕酝耘晕栽 韵云 耘杂栽鄄杂杂砸 酝粤砸运耘砸杂 蕴陨晕运耘阅 栽韵 酝耘员袁 粤
晕耘酝粤栽韵阅耘杂 砸耘杂陨杂栽粤晕悦耘 郧耘晕耘 陨晕 孕耘孕孕耘砸
在匀粤晕郧 再怎员袁圆 摇 在匀粤晕郧 载蚤葬燥鄄枣藻灶员 摇 悦匀耘晕 月蚤灶员 摇 郧耘晕郧 杂葬灶鄄泽澡藻灶早员 摇 蕴陨 匀怎葬灶鄄曾蚤怎圆
渊员郾 月藻蚤躁蚤灶早 灾藻早藻贼葬遭造藻 砸藻泽藻葬则糟澡 悦藻灶贼藻则袁 月藻蚤躁蚤灶早摇 员园园园怨苑曰
圆郾 匀燥则贼蚤糟怎造贼怎则藻 悦燥造造藻早藻袁 杂蚤糟澡怎葬灶 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠袁 再葬爷葬灶袁 杂蚤糟澡怎葬灶摇 远圆缘园员源冤
粤遭泽贼则葬糟贼院陨灶 贼澡蚤泽 泽贼怎凿赠袁 憎藻 蚤灶增藻泽贼蚤早葬贼藻凿 贼澡藻 则藻泽蚤泽贼葬灶糟藻 贼燥 酝藻造燥蚤凿燥早赠灶藻 泽责责 憎蚤贼澡 葬则贼蚤枣蚤糟葬造 蚤灶燥糟怎造葬贼蚤燥灶 泽赠泽贼藻皂泽 葬皂燥灶早 云圆造蚤灶藻泽 凿藻则蚤增藻则藻凿 枣则燥皂 泽怎泽糟藻责贼蚤遭造藻 增葬则蚤藻贼赠 匝蚤藻皂藻灶 葬灶凿 则藻泽蚤泽贼葬灶贼 增葬则蚤藻贼赠 孕酝圆员苑 糟葬则则蚤藻凿 灶藻皂葬贼燥凿藻泽 则藻泽蚤泽贼葬灶糟藻 早藻灶藻 酝藻员袁 憎蚤贼澡
葬则贼蚤枣蚤糟蚤葬造 酝藻造燥蚤凿燥早赠灶藻 泽责责援 蚤灶燥糟怎造葬贼蚤燥灶 泽赠泽贼藻皂泽援 月葬泽藻凿 燥灶 贼澡藻 责澡藻灶燥贼赠责藻袁 憎藻 糟燥灶泽贼则怎糟贼藻凿 葬 则藻泽蚤泽贼葬灶糟藻 遭怎造噪 葬灶凿 葬
泽怎泽糟藻责贼蚤遭造藻 遭怎造噪泽 贼燥 泽糟则藻藻灶 燥怎贼 贼澡藻 造蚤灶噪葬早藻 皂葬则噪藻则泽援 哉泽蚤灶早 耘杂栽鄄杂杂砸 贼藻糟澡灶燥造燥早赠袁 贼澡藻 糟燥皂遭蚤灶葬贼蚤燥灶 责则蚤皂藻则泽 员员愿袁 员源员 葬灶凿
圆员员 憎藻则藻 泽澡燥憎灶 贼燥 遭藻 造蚤灶噪藻凿 贼燥 酝藻员援 云怎则贼澡藻则皂燥则藻袁 憎蚤贼澡 藻曾责燥灶凿蚤灶早 责燥责怎造葬贼蚤燥灶袁 贼澡藻 贼澡则藻藻 皂葬则噪藻则泽 憎藻则藻 皂葬责责藻凿 贼燥 贼澡藻
造燥糟怎泽 憎蚤贼澡 早藻灶藻贼蚤糟 凿蚤泽贼葬灶糟藻泽 燥枣 远郾 怨愿源袁 员愿郾 远愿源 葬灶凿 圆怨郾 猿员园糟酝袁 则藻泽责藻糟贼蚤增藻造赠 怎泽蚤灶早 允燥蚤灶皂葬责猿郾 园 泽燥枣贼憎葬则藻援 陨凿藻灶贼蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 燥枣
耘杂栽鄄杂杂砸 皂燥造藻糟怎造葬则 皂葬则噪藻则泽 造蚤灶噪藻凿 贼燥 贼澡藻 凿燥皂蚤灶葬灶贼 则藻泽蚤泽贼葬灶贼 早藻灶藻 酝藻员 造葬蚤凿 造葬赠蚤灶早 贼澡藻 枣燥怎灶凿葬贼蚤燥灶 枣燥则 则藻泽蚤泽贼葬灶糟藻 遭则藻藻凿蚤灶早援
运藻赠 憎燥则凿泽院责藻责责藻则曰则燥燥贼 原 噪灶燥贼 灶藻皂葬贼燥凿藻曰 酝藻员曰耘杂栽鄄杂杂砸
收稿日期院圆园员园鄄员员鄄园愿摇 接受日期院圆园员员鄄园员鄄园缘
基金项目院国家野愿远猿冶项目渊圆园园远粤粤员园园员园愿冤袁国家科技支撑计划渊圆园园怨月粤阅月愿月园员冤袁北京市科技计划渊阅园愿园苑园缘园园远怨园愿园猿冤袁北京市常规育种财政
专项
作者简介院张摇 宇渊员怨愿缘鄄冤袁女袁四川德阳人袁硕士研究生袁研究方向为蔬菜生物技术与遗传育种遥 耘鄄皂葬蚤造院扎澡葬灶早赠怎援 遭造葬糟噪岳 早皂葬蚤造援 糟燥皂
通讯作者院耿三省渊员怨远远鄄冤袁男袁河南新乡人袁研究员袁研究方向为甜辣椒遗传育种遥 栽藻造院园员园鄄缘员缘园猿园园苑曰 耘鄄皂葬蚤造院早藻灶早泽葬灶泽澡藻灶早岳 灶藻则糟增援 燥则早
摇 摇 根结线虫是辣椒的主要病虫害之一袁其危害日趋
严重遥 我国对辣椒抗根结线虫的研究起步较晚袁在病
原学尧病理学以及分子生物学等方面都还处于起步阶
段遥 在国外袁辣椒抗根结线虫育种研究始于 圆园 世纪中
叶袁酝葬曾贼蚤灶于 员怨源愿 年首次报道了辣椒品种对根结线虫
的抗性袁标志着辣椒抗根结线虫育种的开始咱员暂 遥 现有
研究结果表明袁辣椒属中存在多个抗线虫病基因袁这些
基因的来源尧抗谱范围尧对温度的稳定性和抗病机制各
不相同遥 匀葬则藻等咱圆暂将他发现的第一个抗线虫基因命
名为 晕遥 匀藻灶凿赠 等咱猿暂 通过 阅匀 群体袁在 孕酝圆员苑 和
猿猿怨
核摇 农摇 学摇 报 圆缘 卷
孕酝远愿苑 中共发现了 缘 个抗病显性基因渊酝藻员 耀 酝藻缘冤袁
悦葬责燥则葬造蚤灶燥等咱源暂已将它们定位在辣椒的 孕怨 染色体袁阅蚤
灾蚤贼燥等咱缘暂在几个野生辣椒材料中也发现了数个抗根结
线虫病基因袁但没有命名遥
培育抗性品种是防治根结线虫最有效的方法袁但
常规育种周期长袁而利用分子标记辅助育种则大大提
高了育种速度遥 耘杂栽鄄杂杂砸 作为一种新型分子标记袁来
自表达基因袁除具备传统基因组来源的 杂杂砸 标记所有
优势外袁还可能与基因功能具有直接或间接关系袁从而
强化了 杂杂砸标记在遗传研究中的应用遥 耘杂栽鄄杂杂砸标记
已在众多植物种类中得到了证实和应用咱远袁苑暂 袁辣椒
耘杂栽鄄杂杂砸标记也有一些被开发咱愿袁怨暂 遥 耘杂栽鄄杂杂砸 标记来
源于基因组编码序列将更有利于连锁基因的研究咱员园暂 袁
因此加快与根结线虫基因紧密连锁的 耘杂栽鄄杂杂砸 标记
的开发和利用袁有利于推进我国抗根结线虫病辣椒的
育种进程遥
员摇 材料与方法
员郾 员摇 材料准备
试验以含有南方根结线虫抗性基因 酝藻员 的辣椒
孕酝圆员苑 和高感线虫的甜椒茄门为双亲袁构建 云员尧云圆 群
体遥 种子经浸种催芽袁待露白后播于育苗盘中袁以灭菌
营养土为栽培基质遥 待幼苗长至 源 耀 缘 片真叶时袁移栽
到 员员糟皂 伊 员员糟皂营养钵中袁每钵 员 株袁以灭菌的细砂草
炭混合土渊灾颐 灾 越 圆颐 员冤为培养基质袁置于植物培养箱中
培养遥 培养箱控制条件为院白天渊圆缘 依 园郾 缘冤益袁夜间温
渊圆园 依 园郾 缘冤益袁湿度 远园豫 耀苑园豫 袁光照 员远澡袁黑暗 愿澡遥
员郾 圆摇 南方根结线虫卵悬浮液制备
从南方根结线虫发病严重的北京密云县收集感病
明显尧长有大量根瘤的黄瓜病根袁制备南方根结线虫卵
悬浮液咱员员袁员圆暂 遥 在 宰蚤造凿 酝葬噪则燥泽噪燥责 酝源员园 立体解剖镜下
计数虫卵袁将溶液稀释至 员园园园 卵 辕 皂造袁源益保存备用袁
圆源澡内进行接种处理遥
员郾 猿摇 苗期人工接种
幼苗移栽 员园凿 后进行人工接种袁每钵接种 圆园园园
卵遥 接种前袁先将营养钵浇透水曰接种时袁在幼苗根际
土壤对扎 圆 个孔袁约 员 耀 圆糟皂 深袁将线虫卵悬浮液均匀
注入袁每钵 圆皂造遥 接种后袁植物培养箱内条件调整为院
温度渊圆圆 依 园郾 缘冤益袁湿度 远园豫 耀苑园豫 袁光照不变遥 每 苑凿
浇水 员 次袁保证根系水分不能过多咱员员袁员圆暂 遥
员郾 源摇 抗性鉴定
人工接种 愿 周后袁将植株根部土壤轻轻掰开袁小心
取出根袁清洗干净袁调查根结数袁每份材料根结数计数
猿 次袁统计结果取其平均值遥 分级标准以及病级指
数咱员猿袁员源暂为院员 级院植株根部没有根瘤形成曰圆 级院根部形
成 员 耀 猿 个根瘤曰猿 级院根部形成 源 耀 员圆 个根瘤曰源 级院根
部形成 员猿 耀 圆缘 个根瘤曰缘 级院根部形成 圆远 耀 猿愿 个根
瘤曰远 级院根部形成 猿怨 耀 缘园 个根瘤曰苑 级院根部形成 缘员
耀 远缘 个根瘤曰愿 级院根部形成 远远 耀 愿园 个根瘤曰怨 级院根
部形成 愿员 个以上根瘤遥
根结指数渊郧陨冤 越 撞渊病级 伊各级植株数冤 辕总植株
数遥 高抗渊匀砸冤院员臆郧陨臆圆郾 怨曰中抗渊酝砸冤院猿郾 园 约 郧陨臆
源郾 园曰抗病渊砸冤院源郾 员 约 郧陨臆源郾 怨曰感病渊 杂冤院缘郾 园 约 郧陨臆
远郾 怨曰高感渊匀杂冤院苑郾 园 约 郧陨臆怨郾 园遥
员郾 缘摇 模板 阅晕粤的提取
采用 栽陨粤晕郧耘晕新型植物基因组 阅晕粤提取试剂盒
提取基因组 阅晕粤袁阅晕粤 检测在 阅再悦孕 原 猿员阅晕 型水平
电泳槽上进行袁凝胶成像系统成像分析袁紫外分光光度
计测定 阅晕粤原液浓度袁 原 圆园益保存遥
员郾 远摇 月杂粤分池
依据 月杂粤原则咱员缘暂 袁选取 员园 株对根结线虫高抗和
员园 株对根结线虫高感的 云圆 单株袁分别以等量 阅晕粤 混
合建立抗病池 月砸 和感病池 月杂遥
员郾 苑摇 引物筛选
以双亲 阅晕粤为模板袁对 猿缘苑 对 耘杂栽鄄杂杂砸引物进行
多态性引物筛选遥 再以抗病池 月砸 和感病池 月杂 为模
板袁利用在亲本间表现稳定的多态性引物进行多态性
分析袁最后挑选在池中稳定性好且易于识别差异的引
物袁对 云圆 代群体进行分子标记分析袁以检测 杂杂砸 标记
与抗病基因的连锁程度遥 耘杂栽鄄杂杂砸 扩增反应体系
渊员圆郾 缘滋造冤为院员 伊 孕悦砸 遭怎枣枣藻则袁圆园灶早 模板 阅晕粤袁员郾 园皂皂燥造 辕
蕴 酝早悦造圆袁员园园滋皂燥造 辕 蕴 凿晕栽孕泽袁上下游引物各 员远园灶皂燥造 辕 蕴袁
园郾 缘哉 栽葬择 酶遥 孕悦砸 反应在东胜龙 耘阅悦 原 愿员园 型 孕悦砸
扩增仪上进行袁反应程序为院怨源益预变性 源皂蚤灶曰怨源益变
性 猿园泽袁源愿益 耀远园益复性 员皂蚤灶袁苑圆益延伸 员皂蚤灶袁猿缘 个循
环曰苑圆益再延伸 缘皂蚤灶遥
员郾 愿摇 电泳检测
愿豫非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测 孕悦砸 扩增产
物袁扩增产物中加入 圆滋造 远 伊 蕴燥葬凿蚤灶早 遭怎枣枣藻则袁上样 远滋造袁
恒压 员远园灾袁电泳 圆澡袁硝酸银染色袁统计分析扩增产物
的多态性遥
员郾 怨摇 带型统计与连锁分析
与母本带型相同者记为野 葬冶袁与父本带型相同者
记为野遭冶袁杂合带型记为野澡冶袁模糊不清或者丢失的带
记为野 原 冶遥 用 允燥蚤灶酝葬责猿郾 园 软件进行 酝藻员 基因与 耘杂栽鄄
杂杂砸标记位点间的连锁分析遥
源猿怨
摇 缘 期 与辣椒抗根结线虫基因 酝藻员 紧密连锁的 耘杂栽鄄杂杂砸标记开发
圆摇 结果与分析
圆郾 员摇 辣椒抗根结线虫接种鉴定结果
由于接种后部分植株死亡袁故 孕酝圆员苑尧茄门尧云员 代
及 云圆 代最终的鉴定植株数分别为 员远尧员怨尧员圆尧圆苑员 株渊表员冤遥 参照根结指数及分级标准袁分析得到各材料的根结
指数渊郧陨冤院抗病亲本 孕酝圆员苑 及 云员 代均为 员袁属于高抗
渊见图版 员及图版 猿冤曰感病亲本茄门为 愿郾 远袁为高感渊见
图版 圆冤曰云圆 群体平均为 猿郾 远袁为中抗遥 从表 员可以看出袁
高感品种茄门死亡率最高袁为 圆园郾 愿猿豫袁云圆 群体死亡率
为 源郾 怨员豫袁而抗性亲本 孕酝圆员苑 与 云员 代均没有死亡株曰
其中在 云圆 群体中袁表现抗病的有 员怨苑 株渊见图版 源冤袁感
病有 苑源株渊见图版 缘冤袁抗感比为 圆郾 苑颐 员袁 字圆园郾 园缘袁员 越 园郾 远缘 约猿郾 愿源袁符合单显性基因 猿颐 员的理论分离比例遥
表 员摇 辣椒抗根结线虫接种鉴定结果分析
栽葬遭造藻 员摇 栽澡藻 则藻泽怎造贼 燥枣 贼澡藻 晕藻皂葬贼燥凿藻 则藻泽蚤泽贼葬灶糟藻 蚤凿藻灶贼蚤枣蚤藻凿 蚤灶 糟葬责泽蚤糟怎皂
指标 蚤灶凿藻曾 材料 皂葬贼藻则蚤葬造孕酝圆员苑 茄门 匝蚤藻皂藻灶 云员 云圆
接种数 晕燥援 燥枣 蚤灶燥糟怎造葬贼藻凿 责造葬灶贼泽 员远 圆源 员圆 圆愿源
鉴定数 晕燥援 燥枣 蚤凿藻灶贼蚤枣蚤藻凿 责造葬灶贼泽 员远 员怨 员圆 圆苑员
死亡数渊率冤 凿藻葬贼澡 灶怎皂遭藻则 渊则葬贼藻冤 园 缘渊圆园郾 愿猿豫 冤 园 员源渊源郾 怨员豫 冤
根结指数渊郧陨冤 早葬造造 蚤灶凿藻曾 员 愿郾 远 员 猿郾 远
臆源 级渊抗冤 臆早则葬凿藻 枣燥怎则渊则藻泽蚤泽贼葬灶糟藻冤 员远 园 员圆 员怨苑
高抗 澡蚤早澡 则藻泽蚤泽贼葬灶糟藻渊匀砸冤 员园园豫 园 员园园豫 苑圆郾 远怨豫
逸缘 级渊感冤 逸早则葬凿藻 枣蚤增藻渊泽怎泽糟藻责贼蚤遭造藻冤 园 员怨 园 苑源
高感 澡蚤早澡 泽怎泽糟藻责贼蚤遭造藻渊匀杂冤 园 员园园豫 园 圆苑郾 猿员豫
圆郾 圆摇 基因组 阅晕粤提取与检测
取 源滋造 阅晕粤 原液经 园郾 愿豫琼脂糖凝胶电泳检测
渊图 员冤袁结果显示袁该试剂盒提取的 阅晕粤 溶液袁砸晕粤
去除较好袁基因组 阅晕粤 比较完整袁可用于 杂杂砸 分析试
验遥 用紫外分光光度计测定 阅晕粤原液浓度袁统一稀释
为 圆缘灶早 辕 滋造袁分装后 原圆园益保存备用遥
图 员摇 部分 云圆 辣椒单株 阅晕粤提取结果
云蚤早援 员摇 孕葬则贼泽 早藻灶燥皂蚤糟 阅晕粤 燥枣 云圆 责造葬灶贼泽
圆郾 猿摇 亲本与抗感池间多态性引物筛选
从设计的 猿缘苑 对 耘杂栽鄄杂杂砸 引物中最终筛选出 苑缘
对在双亲间表现多态性的引物遥 根据抗性鉴定结果袁
以抗感池为模板袁对在亲本间表现多态性的引物进一
步进行筛选袁筛选到 员员愿尧员源员尧圆员员 等 猿 对 耘杂栽鄄杂杂砸 引
物能在抗感池中扩增出与亲本相同且稳定的多态性条
带渊表 圆尧图 圆冤遥
表 圆摇 辣椒 云圆 群体抗感池间多态性引物筛选结果
栽葬遭造藻 圆摇 孕燥造赠皂燥则责澡蚤糟 责则蚤皂藻则泽 泽澡燥憎藻凿 遭藻贼憎藻藻灶 则藻泽蚤泽贼葬灶糟藻 责燥燥造 葬灶凿 泽怎泽糟藻责贼蚤遭造藻 责燥燥造 燥枣 贼澡藻 云圆 泽藻早则藻早葬贼蚤燥灶 责燥责怎造葬贼蚤燥灶
编号
糟燥凿藻
上游引物 渊缘忆寅猿忆冤枣燥则憎葬则凿 责则蚤皂藻则渊缘忆寅猿忆冤
下游引物 渊缘忆寅猿忆冤则藻增藻则泽藻 责则蚤皂藻则渊缘忆寅猿忆冤
孕酝圆员苑 辕 月砸渊遭责冤
茄门 辕 月杂渊遭责冤 云员
员员愿 悦悦粤悦粤粤悦郧粤粤栽郧郧悦粤粤粤悦 栽悦粤栽郧郧郧粤郧粤粤栽郧郧悦栽悦粤 抑员苑愿 抑员愿员 杂合带 澡赠遭则蚤凿 遭葬灶凿
员源员 郧粤悦郧悦悦郧粤郧郧粤悦栽粤栽郧粤栽 郧粤栽粤悦栽悦悦郧栽郧悦悦悦粤郧粤栽 抑圆源园 抑圆源缘 杂合带 澡赠遭则蚤凿 遭葬灶凿
圆员员 粤郧粤郧栽栽粤栽栽郧郧郧粤粤郧粤栽栽郧 粤粤悦悦郧粤粤郧栽栽悦郧栽粤郧粤粤郧 抑圆源缘 抑圆源怨 杂合带 澡赠遭则蚤凿 遭葬灶凿
圆郾 源摇 与辣椒抗根结线虫 酝藻员 基因连锁的 耘杂栽鄄杂杂砸
标记筛选
圆郾 源郾 员摇 云圆 群体中 耘杂栽鄄杂杂砸标记分布摇 利用筛选到的猿 对引物 员员愿尧员源员 及 圆员员 分别对 云圆 代群体进行 耘杂栽鄄
杂杂砸分析袁重复 猿 次后袁猿 对引物的扩增结果均稳定袁
且条带差异明显渊图 猿冤遥 运用 允燥蚤灶皂葬责猿郾 园 软件分析 猿
个 耘杂栽鄄杂杂砸 标 记 在 云圆 代 群 体 中 的 分 布 情 况渊表 猿冤遥 摇 摇 摇
缘猿怨
核摇 农摇 学摇 报 圆缘 卷
图 圆摇 多态性引物 员员愿渊粤冤尧员源员渊月冤在亲本及 云员尧抗感池 阅晕粤的扩增结果
云蚤早援 圆摇 粤皂责造蚤枣蚤藻凿 蚤灶 孕酝袁孕云袁云员袁月砸袁月杂 怎泽蚤灶早 责燥造赠皂燥则责澡蚤糟 责则蚤皂藻则泽 员员愿渊粤冤袁员源员渊月冤
孕云院母本 孕酝圆员苑曰 孕酝院父本茄门曰 云员 院孕酝圆员苑 伊茄门曰月砸院抗池曰 月杂院感池
孕云院 枣藻皂葬造藻 责葬则藻灶贼 孕酝圆员苑曰 孕酝院 皂葬造藻 责葬则藻灶贼 匝蚤藻皂藻灶曰 云员 院 孕酝圆员苑 伊 匝蚤藻皂藻灶曰 月砸院 则藻泽蚤泽贼葬灶糟藻 责燥燥造曰 月杂院 泽怎泽糟藻责贼蚤遭造藻 责燥燥造
图 猿摇 引物 员源员 对父母本及 云圆 群体部分单株 阅晕粤的扩增结果
云蚤早援 源摇 孕悦砸 葬皂责造蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 憎蚤贼澡 责则蚤皂藻则 员源员 蚤灶 责葬则藻灶贼泽 葬灶凿 云圆 蚤灶凿蚤增蚤凿怎葬造泽
表 猿摇 根结线虫抗性基因 酝藻员 与 耘杂栽鄄杂杂砸标记上 云圆 群体的基因型分析栽葬遭造藻 猿摇 郧藻灶藻贼蚤糟 葬灶葬造赠泽蚤泽 燥枣 耘杂栽鄄杂杂砸 皂葬则噪藻则泽 葬灶凿 酝藻员 燥灶 云圆 责燥责怎造葬贼蚤燥灶
位点
造燥糟怎泽
标记分布 皂葬则噪藻则 凿蚤泽贼则蚤遭怎贼蚤燥灶
葬 澡 遭 糟 凿 原
字圆 测验
字圆 鄄贼藻曾贼
自由度
凿枣
显著性
泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼
分类
糟造葬泽泽藻泽
酝藻员 园 园 苑源 园 员怨苑 园 园郾 远缘 员 鄢鄢 咱遭院凿暂
员员愿 苑缘 员圆员 远苑 园 园 愿 圆郾 圆 圆 鄢 咱葬院澡院遭暂
员源员 苑远 员员愿 苑员 园 园 远 猿郾 源 圆 鄢 咱葬院澡院遭暂
圆员员 远员 员员员 愿圆 园 园 员苑 苑郾 缘 圆 鄢鄢 咱葬院澡院遭暂
摇 摇 鄢袁鄢鄢分别表示 孕 约 园郾 园缘 和 孕 约 园郾 园员渊字圆园郾 园缘袁 员 越 猿郾 愿源袁 字圆园郾 园员袁 员 越 远郾 远猿曰 字圆园郾 园缘袁 圆 越 缘郾 怨怨袁 字圆园郾 园员袁圆 越 怨郾 圆员冤遥 葬院与母本渊抗冤同型的等位基因曰糟院与母本不
同型的等位基因曰遭院与父本渊感冤同型的等位基因曰凿院与父本不同型的等位基因曰澡院杂合基因型遥
鄢袁鄢鄢泽澡燥憎 孕 约 园郾 园缘 葬灶凿 孕 约 园郾 园员 渊字圆园郾 园缘袁员 越 猿郾 愿源袁字圆园郾 园员袁员 越 远郾 远猿袁 字圆园郾 园缘袁圆 越 缘郾 怨怨袁 字圆园郾 园员袁圆 越 怨郾 圆员冤袁则藻泽责藻糟贼蚤增藻造赠援 葬院 葬泽 澡燥皂燥扎赠早燥怎泽 枣燥则 贼澡藻 葬造造藻造藻 枣则燥皂 贼澡藻
枣藻皂葬造藻 责葬则藻灶贼渊砸冤曰 糟院 灶燥贼 葬 澡燥皂燥扎赠早燥贼藻 枣燥则 葬造造藻造藻 葬曰 遭院 葬泽 澡燥皂燥扎赠早燥怎泽 枣燥则 葬造造藻造藻 枣则燥皂 贼澡藻 皂葬造藻 责葬则藻灶贼渊杂冤曰 凿院 灶燥贼 葬 澡燥皂燥扎赠早燥贼藻 枣燥则 葬造造藻造藻 遭曰 澡院 葬泽 澡藻贼藻则燥扎赠早燥贼藻
早藻灶燥贼赠责藻援
圆郾 源郾 圆摇 酝藻员 基因与 耘杂栽鄄杂杂砸 标记的连锁分析摇 利用
允燥蚤灶皂葬责猿郾 园 软件分析 猿 个 耘杂栽鄄杂杂砸 位点 渊员源员尧员员愿尧
圆员员冤与酝藻员 的连锁情况遥结果显示袁耘杂栽鄄杂杂砸位点 员源员
与根结线虫抗性基因 酝藻员 紧密连锁袁其重组率 则藻糟 越
远郾 怨源豫 袁遗传距离为 远郾 怨愿源糟酝渊图 源冤曰位点 员员愿 与 酝藻员
的重组率 则藻糟 越 员苑郾 愿远豫 袁遗传距离为 员愿郾 远愿源糟酝曰位点
圆员员 与 酝藻员 重组率 则藻糟 越 圆远郾 猿远豫 袁 遗传距离为
圆怨郾 猿员园糟酝遥 其中 耘杂栽鄄杂杂砸 标记 员源员 与 员员愿 分别位于
酝藻员的两侧遥 耘杂栽鄄杂杂砸标记 圆员员 与 酝藻员 间虽然遗传距
离较大袁约为 猿园糟酝袁但也可能与 酝藻员 存在连锁关系遥
猿摇 讨论
辣椒对根结线虫的抗性多为显性单基因控制遥 国
内外针对辣椒根结线虫抗性分子标记研究并不多遥
悦葬责燥则葬造蚤灶燥等咱源袁员远袁员苑暂将多个 酝藻基因定位在同一连锁群
孕怨 染色体上袁并用 砸粤孕阅尧粤云蕴孕 构建了 酝藻 基因的遗
传图谱袁分别获得了与 酝藻员尧酝藻猿尧酝藻源 紧密连锁的分子
标记遥 宰葬灶早等咱员愿暂采用 月杂粤 原 粤云蕴孕分析袁筛选到与根
结线虫抗性基因 晕 基因紧密连锁的 粤云蕴孕 标记袁并进
远猿怨
允燥怎则灶葬造 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽
圆园员员袁圆缘渊缘冤院园怨猿猿 耀 园怨猿愿
图 源摇 与 酝藻员 基因连锁的 耘杂栽鄄杂杂砸标记位点
云蚤早援 源摇 耘杂栽鄄杂杂砸 皂葬则噪藻则泽 造蚤灶噪藻凿 贼燥 酝藻员 早藻灶藻
一步将该标记转化为 杂悦粤砸标记遥
杂杂砸分子标记稳定可靠尧操作简单遥 耘杂栽鄄杂杂砸 是
基于 耘杂栽 序列开发的 杂杂砸 标记袁与基因组 杂杂砸 相比袁
其来源于基因组编码序列袁更有利于连锁基因的研究
工作袁能对决定重要表型性状的等位基因进行直接鉴
定遥 如果发现与有益性状连锁的 耘杂栽鄄杂杂砸 标记袁那么
这一标记很可能是该性状的直接影响因子遥 本研究得
出的 猿 个 耘杂栽鄄杂杂砸 标记 员源员尧员员愿尧圆员员袁与 酝藻员 基因的
遗传距离分别为 远郾 怨糟酝尧员愿郾 苑糟酝尧圆怨郾 猿糟酝袁其中 员源员 与
员员愿 分别位于 酝藻员 基因的两侧袁且 员源员 与 酝藻员 基因紧
密连锁遥 推断标记 员源员尧员员愿 与酝藻员 基因都属于一个连
锁群袁而标记 圆员员 由于与 酝藻员 基因的遗传距离较大袁
是否能定位在 孕怨 连锁群袁有待进一步的试验分析遥
耘杂栽鄄杂杂砸与传统分子标记相比有一个显著特征就
是其等位基因的变异可能会使基因的功能发生改变袁这
一特征也使得 耘杂栽鄄杂杂砸在功能标记的开发尧种质功能多
样性的评价及功能遗传图谱的绘制等应用上更有价值遥
当前袁抗性遗传育种是辣椒遗传育种工作的重点袁因此
积极开发与辣椒不同抗病基因紧密连锁的 耘杂栽鄄杂杂砸标
记袁必将有效地推动辣椒遗传育种研究的发展遥
本研究得到的 耘杂栽鄄杂杂砸 标记稳定袁可用于辣椒对
根结线虫抗性的初步筛选鉴定袁为分子标记辅助选择
抗根结线虫材料提供参考遥
参考文献院
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开发咱允暂 援分子植物育种袁 圆园园愿袁远渊远冤院员圆员怨 原 员圆圆圆
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图版 员摇 母本 孕酝圆员苑渊抗病冤
悦澡葬则贼 员摇 酝燥贼澡藻则 孕酝圆员苑渊砸藻泽蚤泽贼葬灶糟藻冤
摇 摇
图版 圆摇 父本茄门渊感病冤
悦澡葬则贼 圆摇 云葬贼澡藻则 匝蚤藻皂藻灶 渊杂怎泽糟藻责贼冤
图版 猿摇 云员
悦澡葬则贼 猿摇 云员渊孕酝圆员苑 伊 匝蚤藻皂藻灶冤
摇 摇
图版 源摇 云圆渊抗病冤
悦澡葬则贼 源摇 栽澡藻 则藻泽蚤泽贼葬灶贼 责造葬灶贼 燥枣 云圆 责燥责怎造葬贼蚤燥灶
摇 摇
图版 缘摇 云圆渊感病冤
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愿猿怨