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Callus Induction and Plant Regeneration of Prunus campanulata

福建山樱花愈伤组织的诱导及植株再生


为了建立福建山樱花植株再生体系,本文分别以福建山樱花外植体茎段和由茎段诱导出的腋芽的小叶为材料,探讨不同植物生长调节剂种类和浓度配比对福建山樱花愈伤组织诱导及植株再生的影响。结果表明:高浓度的2,4-D有利于福建山樱花愈伤组织诱导,茎段和小叶分别接种于MS+2,4-D 2.0mg·L-1和MS+2,4-D 2.0mg·L-1+BA 0.5mg·L-1,相应的愈伤组织诱导率为93.75%和91.30%。小叶诱导出的愈伤组织接种于MS+2,4-D 0.5mg·L-1+BA 2.0mg·L-1,不定芽分化率为60.7%。将不定芽转接入1/2 MS+BA 0.5mg·L-1 +IBA 0.1mg·L-1进行伸长培养,并在1/2 MS+IBA 0.6mg·L-1培养基中生根形成完整植株。此外,福建山樱花小叶愈伤组织接种于MS+2,4-D 0.1~0.5mg·L-1+BA 1.0mg·L-1,还可诱导出体细胞胚。


全 文 :摇 核 农 学 报摇 圆园员猿袁圆苑渊员园冤院员源员苑 耀 员源圆猿允燥怎则灶葬造 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽
收稿日期院圆园员猿鄄园员鄄员缘摇 接受日期院圆园员猿鄄园缘鄄员苑
基金项目院国家林业局 野怨源愿冶项目 渊圆园园远 原 源 原 缘圆冤袁福建省种苗科技攻关项目 咱闽林科 渊圆园园怨冤 源 号暂袁江西农业大学青年科学基金项目
渊匝晕圆园员员园猿冤
作者简介院邹娜袁女袁主要从事园林植物生物技术及遗传育种方面的研究遥 耘鄄皂葬蚤造院灶扎燥怎赠赠岳 员圆远援 糟燥皂
通讯作者院林思祖袁男袁教授袁主要从事森林培育研究遥 耘鄄皂葬蚤造院泽扎造蚤灶缘猿岳 员圆远援 糟燥皂
文章编号院员园园园鄄愿缘缘员渊圆园员猿冤员园鄄员源员苑鄄园苑
福建山樱花愈伤组织的诱导及植株再生
邹 娜员 摇 陈 璋圆 摇 林思祖猿 摇 林庆良源
渊员江西农业大学园林与艺术学院袁江西 南昌摇 猿猿园园源缘曰圆 福建省林木种苗总站袁福建 福州摇 猿缘园园园猿曰
猿 福建农林大学林学院袁福建 福州摇 猿缘园园园圆曰源福建农林大学农业部甘蔗遗传改良
重点开放实验室袁福建 福州摇 猿缘园园园圆冤
摘摇 要院为了建立福建山樱花植株再生体系袁本文分别以福建山樱花外植体茎段和由茎段诱导出的腋芽
的小叶为材料袁探讨不同植物生长调节剂种类和浓度配比对福建山樱花愈伤组织诱导及植株再生的影
响遥 结果表明院高浓度的 圆袁源 原 阅有利于福建山樱花愈伤组织诱导袁茎段和小叶分别接种于 酝杂 垣 圆袁源 原
阅 圆郾 园皂早窑蕴 原员和 酝杂 垣 圆袁源 原 阅 圆郾 园皂早窑蕴 原员 垣 月粤 园郾 缘皂早窑蕴 原员袁相应的愈伤组织诱导率为 怨猿郾 苑缘豫 和
怨员郾 猿园豫 遥 小叶诱导出的愈伤组织接种于 酝杂 垣 圆袁源 原 阅 园郾 缘皂早窑蕴 原员 垣 月粤 圆郾 园皂早窑蕴 原员袁不定芽分化率为
远园郾 苑豫 遥 将不定芽转接入 员 辕 圆 酝杂 垣 月粤 园郾 缘皂早窑蕴 原员 垣 陨月粤 园郾 员皂早窑蕴 原员进行伸长培养袁并在 员 辕 圆 酝杂 垣 陨月粤
园郾 远皂早窑蕴 原员培养基中生根形成完整植株遥 此外袁福建山樱花小叶愈伤组织接种于 酝杂 垣 圆袁源 原 阅 园郾 员 耀
园郾 缘皂早窑蕴 原员 垣 月粤 员郾 园皂早窑蕴 原员袁还可诱导出体细胞胚遥
关键词院福建山樱花曰组织培养曰愈伤组织诱导曰植株再生曰体细胞胚
摇 摇 福建山樱花渊孕则怎灶怎泽 糟葬皂责葬灶怎造葬贼葬冤袁又名绯寒樱尧
钟花樱桃等袁是蔷薇科李属落叶小乔木袁早春先花后叶
渊花期 圆 原 源 月冤袁花紫色袁呈下垂性开展袁花萼钟筒状袁
自然分布于我国浙江尧福建尧台湾尧广东尧江西和广西等
地遥 福建山樱花具有开花早尧花期长尧抗逆性强和适应
性广等优点袁是珍稀的野生花木袁不仅是园林观赏及住
宅小区绿化美化的新宠袁同时还具有材用尧生态和食用
价值袁开发潜力很大咱员 原 源暂 遥 近年来袁随着国内乡土植物
资源开发利用的兴起袁福建山樱花已引起了园林科技
工作者的广泛关注袁并在其资源和群落结构调查尧遗传
多样性及繁殖技术等方面开展了大量的科学研
究咱圆 原 愿暂 遥 然而袁由于其经济价值开发较迟袁目前国内福
建山樱花新品种的开发还处于萌芽状态袁育成品种少袁
且花色也比较单调咱员袁猿暂 袁与此同时袁引进国外的日本樱
花等品种由于不适宜我国南方高温高湿的气候条件袁
存在病虫害发生严重尧更新周期短等问题袁已不能完全
满足市场需求咱员暂 遥 因此袁培育融入日本樱花及其他近
缘物种优良特性的福建山樱花新品种尧新类型袁具有十
分重要的意义遥 分子育种技术的快速发展为福建山樱
花品种改良提供了一条新途径袁但其前提基础是建立
稳定高效的植株再生体系遥 目前袁国外研究者通过直
接或间接的器官发生和体细胞胚发生途径袁在李属许
多种植物如碧桃 渊 孕则怎灶怎泽 责藻则泽蚤糟葬冤尧欧洲李 渊 孕则怎灶怎泽
凿燥皂藻泽贼蚤糟葬冤尧酸樱桃 渊孕则怎灶怎泽 糟藻则葬泽怎泽冤尧甜樱桃 渊孕则怎灶怎泽
葬增蚤怎皂 冤尧 野黑樱桃 渊 孕则怎灶怎泽 泽藻则燥贼蚤灶葬 冤尧 杏 渊 孕则怎灶怎泽
葬则皂藻灶蚤葬糟葬冤和梅渊孕则怎灶怎泽 皂怎皂藻冤等的植株再生上开展
研究咱怨 原 员源暂 袁并通过遗传转化获得了转基因植株咱员缘 原 员苑暂 遥
然而在观赏类樱花资源的植株再生和遗传转化方面的
研究较少袁且以福建山樱花渊孕则怎灶怎泽 糟葬皂责葬灶怎造葬贼葬冤等为
外植体的观赏类樱花资源还没有成功诱导出愈伤组织
或分化出再生植株咱员愿 原 员怨暂 遥 因此袁本研究分别以福建山
樱花外植体茎段和由茎段诱导出的腋芽的小叶为材
料袁试图通过愈伤组织诱导和不定芽及体细胞胚胎发
生途径袁建立理想尧高效和稳定的福建山樱花再生体
系袁为该树种在细胞水平上进行遗传操作及品种改良
奠定基础遥
苑员源员
核摇 农摇 学摇 报 圆苑 卷
员摇 材料与方法
员郾 员摇 供试材料
供试材料取自福建省闽侯桐口国有林场福建山樱
花种质资源库袁采集母树上当年生尧生长健壮尧无病虫
害的半木质化枝条遥
员郾 圆摇 试验方法
表 员摇 植物生长调节剂浓度及配比对福建山樱花外植体茎段和小叶愈伤组织诱导的影响
栽葬遭造藻 员摇 耘枣枣藻糟贼泽 燥枣 责造葬灶贼 早则燥憎贼澡 则藻早怎造葬贼燥则 燥灶 糟葬造造怎泽 蚤灶凿怎糟贼蚤燥灶 枣则燥皂 泽贼藻皂 泽藻糟贼蚤燥灶 葬灶凿 赠燥怎灶早 造藻葬枣 燥枣 孕则怎灶怎泽 糟葬皂责葬灶怎造葬贼葬
编号
晕燥援
圆袁源 原 阅 辕
渊皂早窑蕴 原员 冤
月粤 辕
渊皂早窑蕴 原员 冤
茎段诱导率
悦葬造造怎泽 蚤灶凿怎糟贼蚤燥灶
燥枣 泽贼藻皂
泽藻糟贼蚤燥灶 辕 豫
愈伤组织状态
杂贼葬贼怎泽 燥枣 糟葬造造怎泽
小叶诱导率
悦葬造造怎泽 蚤灶凿怎糟贼蚤燥灶
燥枣 赠燥怎灶早 造藻葬枣 辕 豫
愈伤组织状态
杂贼葬贼怎泽 燥枣 糟葬造造怎泽
员 园郾 缘 园 远园 遭 出愈量较多袁淡红色袁瘤状袁结构致密 园 糟 叶片绿色但没有愈伤组织发生
圆 员郾 园 园 愿苑郾 缘园 葬 出愈量多袁淡红色袁瘤状袁结构致密 圆园 遭 出愈量较少袁淡红色袁颗粒状袁较疏松
猿 圆郾 园 园 怨猿郾 苑缘 葬 出愈量多袁淡红色袁瘤状袁结构较致密 愿远郾 猿远 葬 出愈量多袁鲜红色袁颗粒状袁较疏松
源 园郾 缘 园郾 缘 源员郾 远苑 糟 出愈量少袁淡红色袁瘤状袁结构较致密 源郾 苑远 糟 出愈量较少袁淡红色袁颗粒状袁较疏松
缘 员郾 园 园郾 缘 缘园 遭糟 出愈量较多袁淡红色袁瘤状袁结构致密 愿源郾 远圆 葬 出愈量较多袁淡红色袁颗粒状袁较疏松
远 圆郾 园 园郾 缘 愿猿郾 猿猿 葬 出愈量多袁淡红色袁瘤状袁较致密 怨员郾 猿园 葬 出愈量多袁淡红色袁颗粒状袁较疏松
摇 摇 注院表中同列数据后标注的小写英文字母袁表示处理间差异显著渊孕 约 园郾 园缘冤遥 下同遥
晕燥贼藻院 灾葬造怎藻泽 憎蚤贼澡 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 造藻贼贼藻则泽 蚤灶 藻葬糟澡 糟燥造怎皂灶 皂藻葬灶 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼造赠 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 葬贼 孕 约 园郾 园缘 造藻增藻造援 栽澡藻 泽葬皂藻 葬泽 遭藻造燥憎援
员郾 圆郾 员摇 无菌外植体茎段及腋芽的获得摇 实验室内将
福建山樱花嫩枝袁去掉叶片及叶柄基部的羽毛状托叶袁
蘸洗衣粉仔细刷洗枝条表面袁并切成长 圆 耀 猿糟皂 带有
叶柄和芽心的茎段袁流水下冲洗 员园 皂蚤灶袁转入超净工作
台袁进行常规消毒咱圆园暂 袁获得用于愈伤组织诱导的无菌
外植体茎段遥 并将上述经过消毒灭菌的外植体茎段用
滤纸吸干水分后转入 酝杂 垣 月粤 猿郾 园皂早窑蕴 原员 垣 陨月粤
园郾 员皂早窑蕴 原员 垣 粤悦 园郾 缘 早援 蕴 原员诱导腋芽萌发渊图 员 原 葬冤遥
员郾 圆郾 圆摇 愈伤组织的诱导摇 外植体茎段愈伤组织诱导院
将外植体茎段沿中轴纵切成两半袁切口向下平放在表
员 所示愈伤组织诱导培养基表面遥 腋芽小叶愈伤组织
诱导院当腋芽生长至 猿 耀 源糟皂 高时袁取腋芽基部 圆 耀 猿
片完全展开的小叶袁在叶背面沿与主脉垂直方向横切
圆 耀 猿 刀袁但不切断袁叶背面朝下贴到不同愈伤组织诱
导培养基表面渊表 员冤遥
员郾 圆郾 猿摇 愈伤组织的分化及植株再生摇 将获得的愈伤
组织经增殖培养后转移到由不同浓度生长素 圆袁源 原 阅
渊园郾 员 耀 园郾 缘皂早窑蕴 原员 冤与细胞分裂素 月粤渊员郾 园 耀 圆郾 园皂早窑
蕴 原员冤和 运栽渊园 耀 员皂早窑蕴 原员 冤配比组成的培养基中渊表
圆冤袁进行不定芽分化试验遥 猿园 凿 后将不定芽连同基部
的愈伤组织转入壮苗培养基渊表 猿冤袁不定芽迅速伸长
长高遥 当苗高达到 圆 糟皂 时从基部切下袁转移到 员 辕 圆
酝杂 垣 陨月粤 园郾 远皂早窑蕴 原员进行生根培养遥
员郾 圆郾 源摇 体细胞胚胎发生途径摇 在进行福建山樱花愈
伤组织分化培养过程中袁还通过间接发生途径成功诱
导出福建山樱花体细胞胚胎遥
员郾 猿摇 生长条件
培养室温度 圆缘 依 员益袁光照强度 圆园园园造曾袁光周期
员圆澡 辕 凿遥 愈伤组织诱导先暗培养 员园凿袁然后再置正常光
照条件下培养袁愈伤组织增殖尧不定芽分化和体细胞胚
发生在光照条件下进行遥 愈伤组织诱导和不定芽的分
化均以 酝杂为基本培养基袁附加不同种类及浓度配比
的植物生长调节剂曰壮苗培养以 员 辕 圆酝杂 为基本培养
基袁采用正交试验设计方法筛选培养基中适宜的植物
生长调节剂种类及浓度遥 各培养基均添加琼脂 缘郾 远早窑
蕴 原员袁 蔗糖 猿园早窑蕴 原员袁责匀值 缘郾 愿袁员圆员益高压灭菌 圆园皂蚤灶遥
员郾 源摇 结果观察和数据分析
每个试验处理接种 员缘 耀 圆园 个外植体袁重复 猿 次曰
接种后对茎段和小叶形态变化和愈伤组织发生情况进
行观察记录袁并用数码相机拍摄外植体各阶段的形态
变化袁圆园凿后统计裸眼可见出愈叶片和茎段数渊愈伤组
织大于 圆皂皂以上的小叶和茎段数量冤并计算愈伤组织
诱导率渊表 员冤遥 将获得的愈伤组织继代增殖培养 圆园 凿
左右袁转移到分化培养基上观察愈伤组织的生长变化
情况袁源园 凿后统计愈伤组织分化和体细胞胚发生情况
渊表 圆冤遥 将分化出的芽团进行切割并转移到壮苗培养
基中袁第 源园 天统计不同培养基上芽苗增殖系数尧苗高
大于 园郾 缘糟皂 和 员郾 园糟皂 的苗数渊表 猿冤遥 愈伤组织诱导
率 越生成愈伤组织的外植体数 辕接种外植体总数曰分化
率 越分化出芽的愈伤组织块数 辕接种愈伤组织总块数曰
愿员源员
摇 员园 期 福建山樱花愈伤组织的诱导及植株再生
摇 摇 摇 摇 表 圆摇 植物生长调节剂对福建山樱花小叶和茎段诱导的愈伤组织不定芽分化的影响
栽葬遭造藻 圆摇 耘枣枣藻糟贼泽 燥枣 责造葬灶贼 早则燥憎贼澡 则藻早怎造葬贼燥则 燥灶 凿蚤枣枣藻则藻灶贼蚤葬贼蚤燥灶 燥枣 葬凿增藻灶贼蚤贼蚤燥怎泽 遭怎凿泽 枣则燥皂 造藻葬枣 葬灶凿 泽贼藻皂 泽藻糟贼蚤燥灶 糟葬造造怎泽
编号
晕燥援
运栽 辕
渊皂早窑蕴 原员 冤
月粤 辕
渊皂早窑蕴 原员 冤
圆袁源 原 阅 辕
渊皂早窑蕴 原员 冤
小叶愈伤组织分化率
砸藻早藻灶藻则葬贼蚤燥灶 责藻则糟藻灶贼葬早藻 燥枣
造藻葬枣 糟葬造造怎泽 辕 豫
茎段愈伤组织分化率
砸藻早藻灶藻则葬贼蚤燥灶 责藻则糟藻灶贼葬早藻 燥枣
泽贼藻皂 泽藻糟贼蚤燥灶 糟葬造造怎泽 辕 豫
员 园 员郾 园 园郾 缘 员远郾 苑 遭糟 园
圆 园 员郾 园 园郾 员 员圆郾 缘 遭糟 园
猿 园 圆郾 园 园郾 缘 远园郾 苑 葬 园
源 园 圆郾 园 园郾 员 圆苑郾 猿 遭 园
缘 员郾 园 员郾 园 园郾 缘 园 凿 园
远 员郾 园 员郾 园 园郾 员 园 凿 园
苑 员郾 园 圆郾 园 园郾 缘 园 凿 园
愿 员郾 园 圆郾 园 园郾 员 员猿郾 猿 遭糟 园
噪员 圆缘郾 猿猿 圆缘郾 员猿 员愿郾 缘园 栽 越 员员猿郾 愿
噪圆 猿郾 员猿 猿郾 猿猿 怨郾 怨缘 砸排序院运栽 跃 月粤 跃圆袁源 原 阅
砸 圆圆郾 圆 圆员郾 愿 愿郾 缘缘
摇 摇 注院栽为小叶愈伤组织分化率总和袁噪为各因素水平平均值袁砸为各因素水平极差遥
晕燥贼藻院 栽 越 栽燥贼葬造 责藻则糟藻灶贼葬早藻 燥枣 葬凿增藻灶贼蚤贼蚤燥怎泽 遭怎凿泽 凿蚤枣枣藻则藻灶贼蚤葬贼蚤燥灶 枣则燥皂 赠燥怎灶早 造藻葬枣 糟葬造造怎泽 燥枣 孕则怎灶怎泽 糟葬皂责葬灶怎造葬贼葬袁 噪员 袁 噪圆 越 栽澡藻 葬增藻则葬早藻 则藻早藻灶藻则葬贼蚤燥灶 责藻则糟藻灶贼葬早藻
燥枣 造藻增藻造 员 葬灶凿 造藻增藻造 圆 燥枣 藻葬糟澡 责造葬灶贼 早则燥憎贼澡 则藻早怎造葬贼燥则 燥灶 葬凿增藻灶贼蚤贼蚤燥怎泽 遭怎凿泽 凿蚤枣枣藻则藻灶贼蚤葬贼蚤燥灶袁 砸 越 栽澡藻 凿蚤枣枣藻则藻灶糟藻 遭藻贼憎藻藻灶 噪员 葬灶凿 噪圆 援
体胚诱导率 越诱导出体胚的愈伤组织块数 辕接种愈伤
组织总块数遥 应用 耘曾糟藻造 圆园园猿 进行数据处理袁数据的
差异显著性分析采用 杂孕杂杂 员猿郾 园袁图片由 孕澡燥贼燥泽澡燥责 排
版遥
圆摇 结果与分析
圆郾 员摇 植物生长调节剂浓度配比对福建山樱花茎段和
小叶愈伤组织诱导的影响
腋芽小叶在接种后 苑 凿 开始出现皱褶袁叶边缘向
远轴面卷曲翘起曰员源 凿 后袁切口及叶柄略微膨大袁叶片
变硬变脆袁并逐渐有少量鲜红色愈伤组织形成曰小叶愈
伤组织多发生在叶柄以及叶脉切口处袁为淡红色的颗
粒尧细小尧质地较疏松尧生长旺盛渊图 员 原 遭冤曰茎段则在
接触培养基的切口处逐渐生长出愈伤组织袁为红色尧致
密尧坚硬的颗粒状突起渊图 员 原 糟冤遥
就茎段而言袁单独使用 圆袁源 原 阅 对愈伤组织就有
比较好的诱导效果袁而且诱导率随着 圆袁源 原 阅 浓度的
增加而增大遥 当 圆袁源 原 阅 浓度为 圆郾 园皂早窑蕴 原员时诱导率
达 怨猿郾 苑缘豫 渊编号 猿冤袁分别比 园郾 缘皂早窑蕴 原员和 员郾 园皂早窑蕴 原员
圆袁源 原 阅时诱导率提高 缘远郾 圆缘豫和 苑郾 员源豫 渊编号 员 和编
号 圆冤遥 然而袁圆袁源 原 阅与 月粤的配合使用对福建山樱花
茎段愈伤组织的诱导表现出一定的抑制效应遥 因此茎
段愈伤组织诱导的适宜培养基配方为院酝杂 垣 圆袁源 原 阅
圆郾 园皂早窑蕴 原员渊编号 猿冤袁并且该配方还可以用于茎段愈
伤组织的增殖和保存遥
就叶片而言袁愈伤组织的诱导率也是随着培养基
中 圆袁源 原 阅浓度的增加而增大袁而且较高浓度的 圆袁源 原
阅与 月粤配合使用对叶片愈伤组织的诱导效果更好遥
在 圆袁源 原 阅浓度为 圆郾 园皂早窑蕴 原员的培养基中添加 园郾 缘皂早窑
蕴 原员 月粤袁诱导率达 怨员郾 猿园豫 渊编号 远冤袁比 员郾 园皂早窑蕴 原员的
圆袁源 原 阅提高 苑郾 愿怨豫 渊编号 缘冤袁比单独使用 圆郾 园皂早窑蕴 原员
圆袁源 原 阅时提高 缘郾 苑圆豫 渊编号 猿冤遥 因此叶片愈伤组织
诱导的适宜培养基配方为院酝杂 垣圆袁源 原 阅 圆郾 园皂早窑蕴 原员 垣
月粤 园郾 缘皂早窑蕴 原员渊编号 远冤袁而且在该配方中培养的愈伤
组织袁在之后的继代增殖过程中能较好地保持愈伤组
织原有状态并成功分化出不定芽遥
圆郾 圆摇 不定芽分化
将获得的愈伤组织进行增殖并切割转移到分化培
养基上袁源 周后小叶愈伤组织上长出少量小的绿色愈
伤组织袁结构密实袁而且生长缓慢遥 这些小的绿色愈伤
组织逐渐分化出绿色芽点袁再生出小芽袁源园 凿 后再生
不定芽数逐渐增加并逐渐形成密集从生芽团渊图 员 原
凿冤遥 而茎段愈伤组织在各分化培养基中均未分化出
不定芽袁并随着培养时间的延长逐渐变褐死亡遥
由表 圆 可以看出袁除了不同类型外植体诱导出的
愈伤组织对不定芽分化有决定性影响外袁培养基中植
物生长调节剂的种类和浓度水平也是影响愈伤组织芽
怨员源员
核摇 农摇 学摇 报 圆苑 卷
分化的重要因素遥 在供试的 愿 种培养基中袁有 缘 种渊编
号 员 耀编号 源尧编号 愿冤都可以使叶片愈伤组织分化出
不定芽袁最高分化率达 远园郾 苑豫 袁最低分化率为 员圆郾 缘豫 遥
极差分析表明 运栽对愈伤组织不定芽分化率的影响最
大袁月粤次之袁圆袁源 原 阅的作用最小遥 从不同植物生长调
节剂浓度水平渊噪员尧噪圆冤来看袁培养基中添加 员郾 园皂早窑蕴 原员运栽可使平均分化率由 圆怨郾 猿园豫下降到 猿郾 猿猿豫 袁而 月粤
浓度由 员郾 园皂早窑蕴 原员增加到 圆郾 园皂早窑蕴 原员袁可提高分化率
圆源远郾 怨怨豫 袁圆袁源 原 阅 浓度从 园郾 员皂早窑蕴 原员增加到 园郾 缘皂早窑
蕴 原员袁分化率提高 源缘郾 苑员豫 袁说明 运栽对福建山樱花愈伤
组织不定芽分化起抑制效应袁而较高浓度的 月粤和 圆袁源
原 阅有利于不定芽的分化遥 综合各因素最优水平袁福
建山樱花腋芽小叶愈伤组织不定芽分化较佳培养基组
合为 酝杂 垣 月粤 圆郾 园皂早窑蕴 原员 垣 圆袁源 原 阅 园郾 缘皂早窑蕴 原员袁即编
号 猿遥
表 猿摇 植物生长调节剂对福建山樱花不定芽增殖及伸长培养的影响
栽葬遭造藻 猿摇 耘枣枣藻糟贼泽 燥枣 责造葬灶贼 早则燥憎贼澡 则藻早怎造葬贼燥则 燥灶 葬凿增藻灶贼蚤贼蚤燥怎泽 遭怎凿泽 皂怎造贼蚤责造蚤糟葬贼蚤燥灶 葬灶凿 藻造燥灶早葬贼蚤燥灶 燥枣 孕则怎灶怎泽 糟葬皂责葬灶怎造葬贼葬
编号
晕燥援
孕造葬灶贼 早则燥憎贼澡 则藻早怎造葬贼燥则 辕 渊皂早窑蕴 原员 冤
月粤 陨月粤
增殖倍数
酝怎造贼蚤责造蚤糟葬贼蚤燥灶 贼蚤皂藻泽
高度 园郾 缘 糟皂以上苗数
晕怎皂遭藻则泽 燥枣 澡蚤早澡藻则
贼澡葬灶 园郾 缘 糟皂
高度 员郾 园 糟皂以上苗数
晕怎皂遭藻则泽 燥枣 澡蚤早澡藻则
贼澡葬灶 员郾 园 糟皂
员 圆郾 园 园郾 员 源郾 园葬 园糟 园糟
圆 圆郾 园 园郾 缘 源郾 园葬 圆遭糟 园糟
猿 圆郾 园 员郾 园 源郾 圆葬 猿遭糟 园糟
源 员郾 园 园郾 员 缘郾 源葬 园糟 园糟
缘 员郾 园 园郾 缘 猿郾 愿葬 源葬遭糟 园糟
远 员郾 园 员郾 园 猿郾 远葬 苑葬 源遭
苑 园郾 缘 园郾 员 猿郾 圆葬 愿葬 远葬
愿 园郾 缘 园郾 缘 猿郾 圆葬 远葬遭 园糟
怨 园郾 缘 员郾 园 猿郾 园葬 源葬遭糟 园糟
圆郾 猿摇 壮苗培养及生根诱导
将所获得的丛生芽团切成每块大小为 园郾 缘糟皂 伊
园郾 缘糟皂左右袁接种于表 猿 所示壮苗培养基渊编号 员 原
怨冤遥 培养约 圆 周后袁丛生芽团体积不断增大袁组培苗
茎芽逐渐长高袁茎变粗尧叶片增大尧叶色浓绿渊图 员 原
藻冤遥 试验结果表明渊表 猿冤袁较高浓度的 月粤渊圆郾 园皂早窑
蕴 原员冤对不定芽的增殖具有明显的促进作用袁但不利于
芽的增高生长袁适当降低 月粤 的浓度并增加 陨月粤 的含
量可显著提高福建山樱花壮苗率袁如编号 苑院员 辕 圆 酝杂 垣
月粤 园郾 缘皂早窑蕴 原员 垣 陨月粤 园郾 员皂早窑蕴 原员和编号 远院员 辕 圆 酝杂 垣
月粤 员郾 园皂早窑蕴 原员 垣 陨月粤 员郾 园皂早窑蕴 原员遥
切取壮苗培养基上高度约 员郾 园 糟皂的组培苗袁接种
在生根培养基 员 辕 圆酝杂 垣 陨月粤 园郾 远皂早窑蕴 原员 垣蔗糖 员缘 早窑
蕴 原员中遥 接种初期先暗培养 源 凿 之后置正常光照条件
下袁约 苑 凿在根部出现不定根原始体突起袁到第 圆园 天
有 怨圆豫以上无菌苗生根袁不定根数平均可达 远 条袁平
均根长 员郾 缘 耀 圆郾 园糟皂 渊图 员 原 枣冤遥 经室内炼苗后移植于
装有蛭石和珍珠岩混合基质的营养钵中袁移栽注意保
湿保温袁成活率在 怨愿豫以上遥
圆郾 源摇 福建山樱花体细胞胚胎发生
在进行愈伤组织分化不定芽的过程中袁发现接种
于编号为 员尧圆 和 远 的培养基上的愈伤组织还通过间接
发生途径诱导出胚性愈伤组织渊图 员 原 早冤袁猿 种培养基
上的愈伤组织体细胞胚诱导率分别为 圆园豫 尧缘郾 猿豫和
苑郾 苑豫 遥 将所获得的胚性愈伤组织接种于培养基 酝杂 垣
月粤 圆郾 园皂早窑蕴 原员 垣 圆袁源 原 阅 园郾 圆皂早窑蕴 原员可进行体细胞胚
的大量增殖培养 渊图 员 原 澡冤袁继代周期为 圆园 凿遥 诱导
形成的胚性结构转入 酝杂 垣 月粤 员郾 园皂早窑蕴 原员 垣 陨月粤
园郾 员皂早窑蕴 原员培养基上袁置于光照条件下进行培养袁 员园 凿
后呈现明显的发育状态袁由白色逐渐转为浅绿色袁继而
转为翠绿色袁开始转向植株萌发阶段遥
猿摇 讨论
外植体类型对福建山樱花愈伤组织的诱导和植株
再生起决定性作用遥 在本试验条件下袁以腋芽小叶为
外植体材料成功获得了福建山樱花再生植株和体细胞
胚袁而茎段最终未成功分化出不定芽遥 究其原因袁植物
愈伤组织的诱导及植株再生能力除了与外植体类型不
园圆源员
摇 员园 期 福建山樱花愈伤组织的诱导及植株再生
同有关外咱员源袁圆员 原 圆圆暂 袁也可能与所采用材料的生理状态有
关袁小叶是来自茎段离体培养条件下萌发的腋芽袁与直
接来自母树的成熟器官渊茎段冤相比袁生理状态较幼袁
再生能力较强咱员园袁圆猿 原 圆源暂 遥 另外袁还有可能是用于茎段愈
伤组织增殖及不定芽分化的植物生长调节剂的种类和
浓度配比不适宜袁有待进一步深入研究遥
植物生长调节剂的种类及浓度配比对李属
渊孕则怎灶怎泽冤植物离体培养的形态建成起着十分关键的调
控作用咱员员袁员猿袁圆缘暂 遥 虽然添加适宜浓度的 圆袁源 原 阅袁福建山
樱花腋芽小叶和茎段均可成功诱导出愈伤组织袁但单
独使用 圆袁源 原 阅袁福建山樱花小叶愈伤组织的诱导率较
低袁而且诱导出的愈伤组织在继代保存及再生过程中
老化的时间早袁极容易褐变死亡袁不适宜后期植株再
生曰适宜浓度的 圆袁源 原 阅和 远 原 月粤配合使用袁可以提高
福建山樱花腋芽小叶出愈率和出愈量袁而且诱导出的
愈伤组织生活力旺盛袁植株再生率高渊表 员 和表 圆冤遥
研究过程中还发现袁在光照培养条件下进行福建山樱
花叶片和茎段愈伤组织诱导袁在接种初期切口周围褐
化现象严重袁不利于愈伤组织生长曰但暗培养时间过
长袁诱导出的愈伤组织在继代增殖及分化过程中容易
发生褐变现象袁不利于不定芽的分化遥 这说明环境因
子特别是光照确实对植物愈伤组织的生长发育和形态
构成具有一定的调控作用咱圆猿 原 圆远暂 遥 福建山樱花较适宜
的光照培养条件是院在愈伤组织诱导初期置于黑暗条
件下培养 苑 耀 员园 凿袁然后转入光照条件下进行愈伤组织
的继代增殖及植株再生培养遥
本研究以福建山樱花茎段为外植体诱导出腋芽袁
再用腋芽的小叶进行愈伤组织诱导及植株再生袁一方
面可以避免直接采用高度分化的母树叶片或茎段作为
外植体袁接种后污染率及褐变程度很高袁而且脱分化形
成的愈伤组织也往往极易变褐死亡或植株再生困难
渊表 圆冤遥 如黄守印等咱员愿暂以野生樱花的叶片和叶柄为
外植体袁进行愈伤组织的诱导及增殖培养袁最终也未成
功分化出不定芽遥 另一方面袁腋芽增殖植株具有遗传
上比较稳定尧自发变异频率低和再生植株粗壮等优点袁
与丛生芽相比袁通过腋芽诱导可保持母本优良性状袁目
前成功应用于商品化培养的树木也大多采用的是腋芽
增殖途径咱圆远 原 圆苑暂 遥 本试验还通过间接体胚发生途径成
功诱导并增殖了大量的福建山樱花体细胞胚遥 体细胞
胚因具有再生速度快尧繁殖系数大和遗传稳定性强等
优点袁而且可用于遗传转化并通过体胚发生途径获得
转基因植株咱圆员袁圆愿暂 袁对该树种后续相关研究具有重要意
义遥
注院葬援福建山樱花腋芽诱导曰 遭援 小叶愈伤组织诱导曰 糟援 茎段外
植体愈伤组织诱导曰 凿援 从小叶诱导出的愈伤组织中分化不定
芽曰 藻援不定芽的伸长生长曰 枣援无菌苗生根曰 早援从小叶愈伤组织中
摇 摇 诱导出体细胞胚 澡援 体细胞胚胎的增殖遥
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图 员摇 福建山樱花愈伤组织的诱导及植株再生
云蚤早援 员摇 悦葬造造怎泽 陨灶凿怎糟贼蚤燥灶 葬灶凿 孕造葬灶贼
砸藻早藻灶藻则葬贼蚤燥灶 燥枣 孕则怎灶怎泽 糟葬皂责葬灶怎造葬贼葬
源摇 结论
本研究首次成功建立了福建山樱花植株再生体系
和体细胞胚胎发生途径袁主要是通过茎段诱导出腋芽尧
再以腋芽的小叶为外植体袁通过不同植物生长调节物
质种类与浓度配比诱导愈伤组织并进行不定芽的分化
和植株再生等过程遥 以茎段为外植体袁操作流程简单袁
虽可成功诱导出愈伤组织并增殖袁但植株的再生困难袁
最终未能成功分化出不定芽遥 福建山樱花植株再生体
系技术路线为院将外植体茎段接种于 酝杂 垣 月粤 猿郾 园皂早窑
蕴 原员 垣 陨月粤 园郾 员皂早窑蕴 原员 垣 粤悦 园郾 缘 早窑蕴 原员诱导腋芽萌发袁
取腋芽小叶接种于 酝杂 垣 圆袁源 原 阅 圆郾 园皂早窑蕴 原员 垣 月粤
园郾 缘皂早窑蕴 原员进行愈伤组织的诱导袁将获得的愈伤组织
转入分化培养基 酝杂 垣 月粤 圆郾 园 皂早援 蕴 原员 垣 圆袁源 原 阅 园郾 缘
皂早援 蕴 原员袁并将所得的丛生芽转入 员 辕 圆 酝杂 垣 月粤 园郾 缘皂早窑
蕴 原员 垣 陨月粤 园郾 员皂早窑蕴 原员进行壮苗培养后袁接入培养基 员 辕
员圆源员
核摇 农摇 学摇 报 圆苑 卷
圆酝杂 垣 陨月粤 园郾 远皂早窑蕴 原员十蔗糖 员缘早窑蕴 原员诱导生根袁即可
获得叶片再生完整植株遥 小叶愈伤组织接种于 酝杂 垣
圆袁源 原 阅 园郾 员 耀 园郾 缘皂早窑蕴 原员 垣 月粤 员郾 园皂早窑蕴 原员袁可诱导出
体细胞胚遥 本研究为福建山樱花以及其他樱花品种高
效离体再生系统的建立和遗传改良提供了一种思路和
技术途径遥
参考文献院
咱 员 暂摇 吕月良袁陈樟袁施季森援福建山樱花研究现状尧开发前景与育种策
略咱允暂 援南京林业大学学报院自然科学版袁圆园园远 袁猿园渊员冤院员员缘 原 员员愿
咱 圆 暂 摇 陈璋袁吕月良袁吴文心援福建山樱花观赏特征与开花生物学特性
的初步研究咱允暂 援福建热作科技袁圆园员员袁猿远渊猿冤院员 原 缘
咱 猿 暂 摇 魏云华袁林魁袁林清援福建山樱花研究现状及其园林应用咱 允暂 援 安
徽农学通报袁圆园员员袁员苑渊员怨冤院员猿远 原 员猿苑
咱 源 暂摇 邹军援福建山樱花生物学特性及其轻基质网袋容器苗生产技术
咱允暂 援福建农业科技袁圆园员圆袁渊远冤院远怨 原 苑园
咱 缘 暂摇 许克福袁王贤荣袁阎道良袁阎道良袁伊贤贵援 钟花樱野生群落的生
态特征咱允暂 援南京林业大学学报院自然科学版袁圆园园源袁圆愿渊远冤院员员员 原
员员源
咱 远 暂摇 吕月良袁陈璋袁施季森袁黄宇翔袁刘金燕袁谢建丽援福建山樱花不定
芽诱导和植株再生规模化繁殖试验咱允暂 援南京林业大学学报渊自
然科学版冤袁圆园园远袁猿园渊猿冤院员园缘 原 员园愿
咱 苑 暂 摇 陈璋援影响福建山樱花嫁接成活率的若干因素咱 允暂 援福建农林大
学学报院自然科学版袁圆园园苑袁猿远渊远冤院缘愿员 原 缘愿源
咱 愿 暂 摇 邹娜袁徐楠袁曹光球袁林思祖袁林庆良援 福建山樱花试管苗生根条
件的优化咱允暂 援江西农业学报袁圆园园愿袁圆园渊源冤院圆远 原 圆怨
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咱员愿暂摇 黄守印袁池井存袁苏淑欣袁尚文艳袁任艳平袁周爱华援雾灵樱花体细
胞愈伤组织诱导与分化的研究咱 允暂 援 承德民族职业技术学院学
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咱圆园暂摇 徐楠援福建山樱花组织培养技术研究咱阅暂援福州院福建农林大学袁
圆园园愿袁圆员 原 圆猿
咱圆员暂摇 范国强袁翟晓巧袁马新业袁黎明援 两种基因型泡桐体细胞胚胎发
生及植株再生咱允暂 援核农学报袁圆园园缘袁员怨渊源冤院圆苑源 原 圆苑愿
咱圆圆暂摇 余桂红袁柏文娟袁马鸿翔袁张旭袁易金鑫援 海蓬子愈伤组织的诱导
及植株再生咱允暂 援核农学报袁圆园员园袁圆源渊圆冤院圆远怨 原 圆苑缘
咱圆猿暂摇 孙源蔚袁李果果袁姚延兴袁李国怀援中国李 晕怎遭蚤葬灶葬 胚性愈伤组织
诱导及植株再生咱允暂 援果树学报袁 圆园员员袁圆愿渊员冤院 源圆 原 源缘
咱圆源暂摇 袁雪袁钟雄辉袁李晓昕袁辛海波袁连青龙袁义鸣放援铁炮百合的胚性
愈伤组织诱导和植株再生咱 允暂 援 核农学报袁圆园员圆袁圆远渊猿冤院源缘源 原
源远园袁源苑苑
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咱圆远暂摇 高莉萍袁包满珠援 月季耶萨蔓莎爷愈伤组织的诱导及植株再生
咱允暂 援园艺学报袁圆园园缘袁猿圆渊猿冤院缘猿源 原 缘猿远
咱圆苑暂摇 沈海龙援植物组织培养咱酝暂援北京院中国林业出版社袁 圆园园缘院 远远 原
苑苑
咱圆愿暂摇 姜云天袁陈艳秋袁朱俊义袁李玉梅袁曲柏宏援 日本臭菘体细胞胚胎
发生及植株再生体系的建立咱允暂 援核农学报袁圆园园怨袁圆猿渊员冤院愿缘 原 愿怨
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