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Effects of Irradiation on Volatile Compounds of Low Fat Mozzarella Cheese During Ripening

辐照对低脂Mozzarella干酪成熟过程中挥发性风味物质的影响



全 文 :  核 农 学 报  2014,28(1):0077 ~ 0084
Journal of Nuclear Agricultural Sciences
收稿日期:2012⁃12⁃26  接受日期:2013⁃05⁃06
基金项目:山西省科技攻关资助项目(20110311001 - 4)
作者简介:马玲,男,讲师,主要从事乳品与肉品科学研究。 E⁃mail:ml0359@ 163. com
通讯作者:杨华,女,副教授,主要从事肉品科学研究。 E⁃mail:sxndyh111@ 163. com
文章编号:1000⁃8551(2014)01⁃0077⁃08
辐照对低脂 Mozzarella干酪成熟过程中
挥发性风味物质的影响
马  玲1   郝教敏1   杨  华1   朱迎春1   杨珍平2
( 1 山西农业大学食品科学与工程学院,山西 太谷  030801;2 山西农业大学农学院,山西 太谷  030801)
摘  要:采取 0、1、3、5 kGy不同剂量辐照低脂 Mozzarella干酪,研究不同剂量辐照对其成熟过程中的理化
指标和挥发性风味化合物的影响。 结果表明:辐照对低脂 Mozzarella 干酪成熟过程中脂肪的含量、pH
值 4􀆰 6 SN、12% TCA SN有显著的影响(P < 0􀆰 05),对其它理化指标的影响均不显著(P < 0􀆰 05)。 不同
成熟期内,不同剂量辐照处理后对低脂 Mozzarella 干酪中挥发性风味化合物的影响不同,辐照对低脂
Mozzarella干酪中的酮类、酸类、醇类、酚类、酯类的种类和含量影响较大,5kGy 辐照后的影响大于其它
辐照剂量处理的,对其它挥发性化合物的影响较小,不同辐照剂量与挥发性化合物形成之间没有特定的
影响规律。
关键词:低脂 Mozzarella干酪;辐照;挥发性风味化合物;理化指标
DOI:10:11869 / j. issn. 100⁃8551. 2014. 01. 0077
    Mozzarella(莫兹瑞拉)干酪属硬质半硬质干酪,是
Pasta Filata(帕斯特 -费拉特)干酪中的重要成员,起
源于意大利,以其独特的可塑性和凝块在热水中的揉
捏处理而成为干酪家族中特殊的成员。 Mozzarella 干
酪属非霉菌成熟干酪,其风味物质主要是蛋白质在凝
乳酶以及发酵剂产生的各种酶的作用下降解以及脂肪
在脂酶的分解下形成的[1 - 2]。
辐照作为一种高效安全的冷杀菌技术,具有能耗
低、没有残留和污染等优点,在减少食物传播疾病的发
生率、降低农产品产后损耗、延长食品货架寿命等方面
具有明显的优越性。 对于辐照在干酪中的应用早有报
道,姜平等[3]研究发现辐照降低了 Provolone 干酪贮藏
过程中蛋白质的降解、增加了脂肪的氧化,在 3kGy 剂
量辐照处理可以保证干酪的品质。 刘会平等[4]研究
发现随着辐照剂量的增加 Provolone 干酪贮藏过程中
水分活度、溶解性氮质量分数、硬度、弹性和凝聚性呈
下降的趋势,酸价、过氧化值和 TBA 明显增加。 Rabie
等[5]研究发现 4kGy 辐照处理后贮藏 60d 的蓝纹干酪
中的组胺含量显著低于对照,而感官评价仍然良好。
       
Konteles 等[6] 研究发现 2􀆰 5 和 4􀆰 7kGy 辐照处理后
Feta干酪中的李斯特菌数量低于检测范围,而辐照处
理后对干酪的质构没有影响,4􀆰 7kGy 辐照后干酪的红
度增加,黄度和亮度降低,感官品质受到影响。 Velasco
等[7]研究发现,低于 3kGy 的辐照对干酪的物理化学
和感官特性的影响很小,引起干酪红度值的增加和黄
度值的降低,3kGy的辐照显著降低干酪的硬度和增加
干酪的凝聚性,而干酪的外观、色泽和风味等感官品质
仍然在消费者可接受的范围。 有关干酪中风味物质的
形成及影响因素国外做了大量相关的研究报道[8 - 12],
但辐照对干酪挥发性风味物质的影响,尤其是辐照对
低脂 Mozzarella 干酪挥发性风味物质的影响未见报
道。
本文主要采用同时蒸馏结合气质联机对不同剂量
辐照低脂 Mozzarella干酪在贮藏过程中所产生的挥发
性的风味物质进行分离、鉴定,通过对比分析初步阐明
不同剂量辐照对低脂 Mozzarella 干酪成熟过程中挥发
性风味物质形成的影响,为辐照在低脂 Mozzarella 干
酪中的应用提供理论参考。
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核  农  学  报 28 卷
1  试验材料与仪器设备
1􀆰 1  试验材料
新鲜牛乳,来源于山西农业大学牧站,密度
1􀆰 030g·mL - 1,干物质 11􀆰 05% ,蛋白含量 3􀆰 03% ,酪蛋
白含量 2􀆰 27% ,将脂肪标准化至 1􀆰 5% 。
唾液链球菌嗜热亚种 ( Streptococcus salivarius
subsp. thermophilus)保加利亚乳杆菌德氏亚种(CH9
和 Lactobacillus delbrueckil subsp. bulgaricus) LB,山西
农业大学畜产品实验室提供。 凝乳酶 Stamix 1150,
35000RU·g - 1, CHR HANSEN 公司。
乳酸、碳酸氢钠、无水硫酸钠、盐酸,分析纯。 无水
乙醚、壬烷,色谱纯。
1􀆰 2  主要仪器与设备
自制干酪槽(加工量为 2L),干酪刀,干酪模具
DZQ400 - 2D 单室真空包装机(温州市鼎力包装
机械制造有限公司),DL⁃CJ - 2F 医疗型洁净工作台
(北京东联哈尔仪器制造有限公司),精密酸度计
pH211(上海雷兹仪器有限公司),HPP - 9272 恒温培
养箱 (北京东联哈尔仪器制造有限公司), Likens⁃
Nickerson 同步蒸馏萃取仪 (博美仪器有限公司),
Agilent GC6890 - MS5973N气相色谱质谱联用仪 美国
(配全自动进样器,MDS化学工作站和 NIST98 标准谱
库)。
2  试验方法
2􀆰 1  Mozzarella干酪制造
原料乳→过滤→标准化(脂肪标准化到 1􀆰 5% )→
巴氏杀菌(63℃,30min)→ 冷却(至 36℃)→ 加发酵
剂(体积分数 0􀆰 5%的 CH9 和 LB 组成的混合发酵剂,
比例 1 ∶ 1)→ 加凝乳酶(添加体积分数为 0􀆰 3%的由
1%食盐水配成的 1%的酶溶液)→ 凝乳(30min)→ 切
割 → 加热收缩(温度由 36℃缓慢升到 38℃) → 排乳
清(pH值 6􀆰 3)→ 堆酿(pH 值 5􀆰 25)→ 加盐揉合(加
盐量为 1􀆰 8% )→ 热烫、拉伸(80℃,8%食盐水)→ 冷
却 → 真空包装 → 成熟(4℃)
将包装好的低脂 Mozzarella 干酪采用60Co - γ 进
行辐照,剂量为 0、1、3、5kGy,然后将样品在 4℃下贮
藏。
2􀆰 2  低脂 Mozzarella 干酪挥发性化合物的分离和浓

通过液相同步蒸馏萃取仪对干酪中的挥发性物质
进行提取。 在样品瓶中加入 150g 低脂 Mozzarella 干
酪,加入 150 mL 重蒸馏水;在溶剂瓶中加入 30 mL 乙
醚,并加入 1%的稀硫酸溶液 7􀆰 5mL,样品瓶中加入
40μg壬烷作为内标[8,13]。 同时加热水浴锅进行蒸馏,
蒸馏时间 2􀆰 5h。 将所得的样品用碳酸氢钠中和,直至
不产生气泡止,用适量的无水硫酸钠干燥后,在 - 20℃
的冰箱中过夜,然后将浓缩液用氮气吹扫,浓缩到
0􀆰 4mL左右时停止。 所得样品贮藏于 - 20℃的冰箱中
备用。
2􀆰 3  挥发性化合物的 GC⁃MS分析
取 1μL上述浓缩液注入到 GC 中,挥发性风味物
质在 HP -5 色谱柱(30m × 0􀆰 25mm i. d × 0􀆰 25μm)
上完成分离。 以氦气为载气,流速是 1mL·min - 1。 整
个色谱运行过程中进样口温度维持在 220℃,进样时
以不分流方式进样。 程序升温条件如下:首先以 35℃
加热 10min,然后以 3℃·min - 1的速率升温至 100℃保
持 10min,再以 5℃·min - 1的升温速率升至 200℃保持
10min,最后以 10℃·min - 1的升温速率升至终了温度
240℃,保持 10 min。 GC⁃MS 的接口温度采用 270℃,
以电子轰击方式、能量为 70ev 进行 MS 运行,压力为
1650V,数据以 30 ~ 300amu 的扫描范围进行收集,通
过比较挥发性风味物质的质谱数据与计算机标准谱图
库 NIST 98 中的数据以及与以前文献报道过的成分相
对照,对低脂 Mozzarella 干酪中的挥发性风味物质进
行定性、半定量分析[13 - 15],以匹配度确定化合物的名
称,匹配度在 70%以上的被确定为低脂 Mozzarella 干
酪中的挥发性风味物质。 挥发性化合物的含量用每
100g低脂 Mozzarella干酪中的 μg等量壬烷数表示。
2􀆰 4  理化指标的测定
水分含量采用烘干恒重法测定,pH 值 4􀆰 6 SN 和
12% TCA SN含量采用凯氏微量定氮法进行测定,脂肪
含量按照 Schimd⁃Bondzynski⁃Ratzlaff法,先将干酪用盐
酸分解,接着用酸性酒精溶液和乙醚、石油醚将脂肪抽
出,令溶剂蒸发,称量其残留物的重量来测定,NaCl 含
量用硝酸银滴定法测定,pH值通过酸度计测定干酪的
提取液。
2􀆰 5  数据分析
采用 Excel 2003 数据作图,采用 SPSS做显著性分
析。
3  结果与分析
3􀆰 1  辐照对低脂Mozzarella干酪理化指标的影响
不同剂量辐照处理后对低脂 Mozzarella 干酪在贮
87
  1 期 辐照对低脂 Mozzarella干酪成熟过程中挥发性风味物质的影响
        表 1  辐照对低脂Mozzarella干酪理化指标的影响
Table 1  Effects of irradiation on the physicochemical indexes of low fat Mozzarella cheese
成熟时间
Ripening days / d 指标 Indexes
辐照剂量 Irradiation dose / kGy
0 1 3 5
10 水分含量 / % 52. 28 ± 1. 49a 51. 72 ± 1. 58a 52. 08 ± 1. 36a 51. 97 ± 1. 82a
脂肪含量 / % 12. 46 ± 0. 25a 11. 84 ± 0. 34a 10. 67 ± 0. 48b 10. 75 ± 0. 35b
pH4. 6 SN / % 4. 95 ± 0. 18a 4. 27 ± 0. 15b 3. 95 ± 0. 23b 3. 16 ± 0. 14c
12% TCA SN / % 2. 18 ± 0. 11a 1. 57 ± 0. 13b 1. 25 ± 0. 16bc 0. 95 ± 0. 08c
S / M / % 2. 75 ± 0. 18a 2. 62 ± 0. 27a 2. 84 ± 0. 21a 2. 65 ± 0. 28a
pH 5. 17 ± 0. 35a 5. 07 ± 0. 42a 4. 92 ± 0. 37a 4. 96 ± 0. 27b
30 水分含量 / % 51. 67 ± 1. 24a 51. 06 ± 1. 37a 51. 28 ± 0. 98a 50. 95 ± 1. 72a
脂肪含量 / % 11. 86 ± 0. 18a 10. 58 ± 0. 29b 9. 94 ± 0. 19c 9. 78 ± 0. 27c
pH4. 6 SN / % 7. 83 ± 0. 22a 6. 25 ± 0. 18b 5. 34 ± 0. 31c 4. 28 ± 0. 18d
12% TCA SN / % 3. 86 ± 0. 16a 3. 17 ± 0. 27b 2. 81 ± 0. 23b 1. 67 ± 0. 17c
S / M / % 2. 93 ± 0. 08a 2. 89 ± 0. 11a 3. 05 ± 0. 21a 2. 93 ± 0. 16a
pH 5. 11 ± 0. 27a 4. 91 ± 0. 34a 4. 89 ± 0. 30a 5. 03 ± 0. 19a
50 水分含量 / % 50. 82 ± 0. 98a 50. 27 ± 1. 38a 50. 08 ± 1. 67a 50. 12 ± 1. 55a
脂肪含量 / % 10. 37 ± 0. 35a 9. 68 ± 0. 28b 9. 26 ± 0. 57b 8. 18 ± 0. 46c
pH4. 6 SN / % 9. 58 ± 0. 32a 8. 37 ± 0. 25b 6. 24 ± 0. 37c 5. 08 ± 0. 55d
12% TCA SN / % 5. 21 ± 0. 56a 4. 65 ± 0. 31b 4. 26 ± 0. 43b 3. 22 ± 0. 28c
S / M / % 3. 36 ± 0. 29a 3. 12 ± 0. 18a 3. 25 ± 0. 20a 3. 41 ± 0. 15a
pH 5. 06 ± 0. 17a 5. 22 ± 0. 23a 4. 97 ± 0. 35a 4. 88 ± 0. 19a
    注:表中不同小写字母表示同一测定指标不同辐照处理间的差异显著(P < 0􀆰 05)。
Note:Different letters in the same column mean significant differences(P < 0􀆰 05) .
图 1  辐照对成熟 10d低脂Mozzarella干酪中的挥发性风味化合物种类的影响
Fig. 1  Effect of irradiation on varieties of volatile compounds in Mazzarella cheese ripening for 10 days
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核  农  学  报 28 卷
图 2  辐照对成熟 30d低脂Mozzarella干酪中的挥发性风味化合物种类的影响
Fig. 2  Effect of irradiation on varieties of volatile compounds in Mazzarella cheese ripening for 30 days
图 3  辐照对成熟 50d低脂Mozzarella干酪中的挥发性风味化合物种类的影响
Fig. 3  Effect of irradiation on varieties of volatile compounds in Mazzarella cheese ripening for 50 days
藏过程中理化指标的影响如表 1,在同一成熟期,0 ~
5kGy辐照处理低脂 Mozzarella干酪的脂肪含量、pH值
4􀆰 6 SN 和 12% TCA SN 等随着辐照剂量的增加而降
低,并且各处理剂量间存在显著的差异(P < 0􀆰 05),与
刘会平等[3]、姜平等[4]研究的结果相一致。 而水分含
量、S / M 和 pH 指标之间差异不显著(P > 0􀆰 05),与
Spyros Konteles等[6]的结论一致。
3􀆰 2  辐照对低脂 Mozzarella 干酪挥发性风味物质种
类的影响
不同剂量辐照对成熟 10、30、50d 低脂 Mozzarella
干酪中挥发性风味化合物种类的影响如图 1、图 2、
图 3。成熟 10d时,未辐照干酪中的挥发性化合物为 29
种,而辐照处理后种类数呈减少的趋势,5kGy 辐照处
理后种类数减少为 26。 成熟 30d 时,挥发性化合物的
种类数较成熟 10d 时有所增加,未辐照的达到 34 种,
其它剂量辐照处理后种类数接近未辐照处理组。 成熟
50d时,挥发性化合物的种类数较成熟 30d 变化不大,
经不同剂量辐照处理后种类数呈增加的趋势。
3􀆰 3  辐照对低脂 Mozzarella 干酪挥发性风味物质含
量的影响
不同剂量辐照对成熟 10、30、50d 低脂 Mozzarella
08
  1 期 辐照对低脂 Mozzarella干酪成熟过程中挥发性风味物质的影响
图 4  辐照对成熟 10d低脂Mozzarella干酪中的挥发性风味化合物含量的影响
Fig. 4  Effect of irradiation on contents of volatile compounds in Mazzarella cheese ripening for 10 days
图 5  辐照对成熟 30d低脂Mozzarella干酪中的挥发性风味化合物含量的影响
Fig. 5  Effect of irradiation on contents of volatile compounds in Mazzarella cheese ripening for 30 days
干酪中挥发性风味化合物含量的影响如图 4、图 5、图
6。 成熟 10d时,不同剂量辐照处理与未辐照组相比挥
发性风味物质的总含量变化不大,经 5kGy 辐照处理
后酮类物质的含量降低为 5􀆰 964% ,酸类和酯类物质
的含量增加,分别为 4􀆰 836% 、1􀆰 462% 。 成熟 30d 时,
挥发性风味物质的含量较成熟 10d 时增加,不同剂量
辐照处理较未辐照组变化明显,辐照处理后低脂
Mozzarella干酪中醛类、酮类、醇类物质的含量下降,
5kGy辐照处理后含量最低分别为 1􀆰 387% 、12􀆰 465%
和 6􀆰 824% ,而酸类、酯类及其它类物质的含量增加,
5kGy 辐照处理后的含量最高分别达到 7􀆰 253% 、
8􀆰 341%和 2􀆰 654% ,而 3 kGy 处理的酚类物质含量最
高为 23􀆰 167% 。 成熟 50d 时,烃类、酸类、醇类和酯类
较成熟 30d时减少,其它化合物的含量有所增加,辐照
处理后醛类、酮类、醇类、酚类物质的含量都降低,5
kGy 处理后最低分别为 5􀆰 247% 、18􀆰 654% 、0􀆰 768% 、
22􀆰 045% ,而酸类和酯类物质的含量增加,同样 5 kGy
处理后含量最高分别为 0􀆰 921% 、5􀆰 127% 。
4  讨论
干酪的成熟是一个缓慢而又复杂的过程,在这一
18
核  农  学  报 28 卷
图 6  辐照对成熟 50d低脂Mozzarella干酪中的挥发性风味化合物含量的影响
Fig. 6  Effect of irradiation on contents of volatile compounds in Mazzarella cheese ripening for 50 days
过程中伴随着一系列的生化反应,其中最主要的是蛋
白降解反应和脂肪分解反应,反应形成了包括酸、醛、
酮、酯、内酯、酚、醇、醚、烃类、氨基酸、吡喃、呋喃、吡
咯、吡啶等化合物,使干酪凝块由相对比较淡的风味形
成独特的风味[1 - 2]。 各种干酪由于使用发酵剂菌种、
凝乳酶的类型、加工工艺、成熟条件的不同,其风味有
很大的差异。 对于非霉菌成熟的 Mozzarella 干酪,其
风味主要是蛋白在一系列酶的作用下降解形成的,由
脂肪降解形成的甲基酮等也很重要。
本研究中成熟 10d 时辐照对低脂 Mozzarella 干酪
中的挥发性风味物质的影响较小与干酪中脂肪含量相
对较低有关,而随着成熟的进行,辐照对挥发性风味物
质的影响较大,特别是 5kGy处理剂量。 与 Rabie 等[5]
发现在 4kGy 以上或 6kGy 辐照处理的蓝纹干酪贮藏
60d 后感官滋味显著降低,随成熟时间的延长并伴随
辛辣的刺激味道,很可能与辐照引起脂肪的氧化有关
相似。 Konteles等 [6]发现 1􀆰 0 和 2􀆰 5kGy 辐照处理不
会引起干酪的风味变化,而 4􀆰 7kGy 处理干酪的感官
评分最低。 与本研究发现 5kGy 处理对干酪中的风味
物质的影响较大相似。 辐照处理后对低脂 Mozzarella
干酪中酮类、酸类、酚类、醇类、酯类等挥发性风味物质
的种类和含量的影响较大,对其它种类的挥发性风味
化合物影响不大,这很可能与不同类型的挥发性风味
物质的形成有关,也与辐照对低脂 Mozzarella 干酪基
质中的微生物的数量的影响、辐照引起脂肪和蛋白的
氧化有关。 脂肪氧化形成的自由基是脂质过氧化物的
前体,是脂肪氧化形成的重要产物,随着氧化的进一步
进行形成了烷烃、烯烃、醛类、酮类、醇类、酸类[6]。 脂
类氧化是产生醛类的主要原因,如直链的醛类—己醛、
辛醛和壬醛等主要来自不饱和脂肪酸的氧化分
解[16 - 17]。 在肉类风味中,酮类一般由美拉德反应生
成,也可能经由脂类降解、氧化或其进一步反应产
生[18]。 本研究发现经辐照处理后,促进了低脂
Mozzarella干酪中脂肪的分解,所以由脂肪降解而形成
的酸、酮、醇、酯等物质的种类和含量受到了影响。 据
汪晓明等[19]分析由于辐照的作用,食品中的脂肪氧化
后并经过一系列的反应最终形成小分子挥发性物质,
如醛、酮、酸、醇氧化物或聚合成聚合物。 于海等[20]发
现辐照后发酵香肠中的酸类、酮类和醇类等风味物质
的含量增加了。 同时,辐照处理降低了低脂 Mozzarella
干酪中乳酸菌的数量,高剂量辐照对其的影响更大,而
乳酸菌的数量及其所产生的胞内和胞外蛋白酶、肽酶
对蛋白的降解及风味化合物的形成也至关重要,因而
高剂量辐照对低脂 Mozzarella 干酪中的挥发性风味物
质的种类和含量的影响较大。
酯类主要是通过对醇类和酸类的酯化反应形成
的,辐照处理对酯类物质的影响,表现在辐照产生的游
离脂肪酸的量增加,因而构成酯类物质的底物增加,从
而酯类物质的量增加。 而辐照处理后尽管降低了低脂
Mozzarella干酪中微生物的数量,由微生物蛋白酶和肽
酶降解蛋白及肽类而形成的酸类、醇类、醛类和醇类受
到影响,所以,最终低脂 Mozzarella 干酪中的挥发性风
味物质的量是蛋白降解和脂肪分解以及经过一系列反
应而形成的总和。 酮类中的甲基酮就是通过脂肪降解
28
  1 期 辐照对低脂 Mozzarella干酪成熟过程中挥发性风味物质的影响
形成的脂肪酸转化而形成的,因而由辐照引起脂肪的
氧化也影响酮类的形成。 对脂肪的分解有促进作用的
辐照对酮类物质的形成有很大的影响。
5  结论
辐照处理显著降低了低脂 Mozzarella 干酪成熟过
程中脂肪的含量、pH 值 4􀆰 6 SN、12% TCA SN,对其它
理化指标的影响均不显著(P > 0􀆰 05)。 不同剂量辐照
处理对低脂 Mozzarella干酪中的挥发性风味物质的种
类和含量都有一定的影响,成熟 10d 时,影响较小,而
随着成熟的进行,辐照对其影响较大。 整个成熟过程
中,5kGy辐照处理对低脂 Mozzarella干酪中的酮类、酸
类、醇类、酚类、酯类的种类和含量影响较大,不同辐照
剂量与挥发性化合物形成之间没有特定的影响规律。
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Journal of Nuclear Agricultural Sciences
2014,28(1):0077 ~ 0084
Effects of Irradiation on Volatile Compounds of
Low Fat Mozzarella Cheese During Ripening
MA Ling1   HAO Jiao⁃min1   YANG Hua1   ZHU Ying⁃chun1   YANG Zheng⁃ping2
( 1College of Food Science and Engineering,Shanxi Agricultural University, Taigu, Shanxi  030801;
2College of agriculture,Shanxi Agricultural University, Taigu, Shanxi  030801)
Abstract:Low fat Mozzarella cheeses were made and irradiated by 60Co - γ of different doses of 0, 1, 3 and 5kGy,
indexes of physicochemical and volatile compounds were determined in order to search the influence of irradiation on the
quality of low fat Mozzarella cheese. The results showed that there were significant differences on the fat content, pH4􀆰 6
SN and 12% TCA SN between irradiated cheese and CK, but no significant changes on the other indexes. The effects of
irradiation on the volatile compounds was variously with different ripening periods, kinds and contents of keton acid,
alcohol, phenol and ester changed more with irradiated treat, and the influence of 5kGy more greater than the other
doses, but the irradiation had less effection on the other volatile compounds, there was no corresponding relationship
between doses of irradiation and formation of volatile compounds.
Key words:Low fat Mozzarella cheese; Irradiation; Volatile compounds; Physicochemical indexes
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