全 文 ：摇 核 农 学 报摇 圆园员缘袁圆怨渊员员冤院圆员园猿 耀 圆员园怨允燥怎则灶葬造 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽
收稿日期院圆园员源鄄园怨鄄圆圆摇 接受日期院圆园员缘鄄园源鄄圆苑
基金项目院农业部行业科技专项要江淮分水岭特色优势作物产业关键技术研究与示范项目渊圆园员源园猿园猿怨冤
作者简介院李雅婷袁女袁主要从事药用植物生物技术育种研究遥 耘鄄皂葬蚤造院圆园员猿愿园源员愿员岳 灶躁葬怎援 藻凿怎援 糟灶
通讯作者院向增旭袁男袁副教授袁主要从事药用植物生物技术育种研究遥 耘鄄皂葬蚤造院扎曾曾蚤葬灶早岳 灶躁葬怎援 藻凿怎援 糟灶
文章编号院员园园园鄄愿缘缘员渊圆园员缘冤员员鄄圆员园猿鄄园苑
甜叶菊二倍体与同源四倍体生理特征及 粤云蕴孕分析
李雅婷摇 王红娟摇 向增旭
渊南京农业大学园艺学院中药材研究所袁江苏 南京摇 圆员园园怨缘冤
摘摇 要院为阐述甜叶菊同源四倍体与二倍体表观性状及光合特性的调控机理袁以甜叶菊同源四倍体及其
二倍体为材料袁对 圆 个倍性品种的形态特征尧光合特性及 粤云蕴孕 分子标记等进行比较研究遥 结果表明袁
甜叶菊四倍体植株茎干粗壮尧叶片加厚尧叶面积增大袁植株变矮曰甜叶菊四倍体植株叶片的净光合速率
渊孕灶冤尧气孔导度渊郧泽冤尧蒸腾速率渊栽则冤均显著高于二倍体袁且光补偿点渊蕴悦孕冤尧表观量子效率渊粤匝再冤和
悦韵圆 补偿点渊悦悦孕冤分别比其二倍体增加了 圆愿郾 远远豫 尧员 员愿员郾 愿员豫 尧员员郾 苑源豫 袁而光饱和点渊蕴杂孕冤尧暗呼吸速
率渊砸凿冤和羧化效率渊悦耘冤均显著低于二倍体曰在 粤云蕴孕水平上袁甜叶菊染色体加倍前后 阅晕粤碱基序列发
生了显著变化遥 二倍体和同源四倍体甜叶菊在表观形态和光合特性上的差异是 阅晕粤 多态性反映的结
果遥 本研究为甜叶菊倍性育种提供了参考遥
关键词院甜叶菊曰同源四倍体曰形态特征曰光合特性曰粤云蕴孕
阅韵陨院员园郾 员员愿远怨 辕 躁援 蚤泽泽灶援 员园园鄄愿缘缘员郾 圆园员缘郾 员员援 圆员园猿
摇 摇 多倍体育种是有效的育种技术之一袁广泛应用于
作物咱员暂 尧园艺咱圆暂及林木咱猿暂 遥 多倍体植株既扩大了其遗
传背景袁也丰富了种质资源遥 多倍体植株不仅在形态
特征方面发生了较大的变化袁如叶片增厚尧叶面积增
大尧茎干增粗尧生物量增大咱源 原 远暂 袁而且光合作用也有所
提高袁如张晓申等咱苑暂和宋安庆咱愿暂通过对四倍体泡桐和
刺槐及其二倍体的光合日变化进行研究袁发现四倍体
泡桐和刺槐光合能力均高于其亲本二倍体遥 杜琳
等咱怨暂和于永畅等咱员园暂分别应用光合响应曲线和 悦韵圆 响
应曲线比较了四倍体白桦和紫薇与其二倍体间光合特
性的差异袁结果表明白桦四倍体和紫薇四倍体的光合
利用能力均强于其亲本二倍体遥 多倍体随着染色体数
目的增加袁不同倍性材料的核质比尧基因的剂量效应尧
互作效应发生较大的变化袁使植株在形态特征尧生理指
标尧遗传特性等方面产生一系列的改变咱员员暂 遥 粤云蕴孕
渊葬皂责造蚤枣蚤藻凿 枣则葬早皂藻灶贼 造藻灶早贼澡 责燥造赠皂燥则责澡蚤泽皂冤结合了 砸云蕴孕
渊则藻泽贼则蚤糟贼蚤燥灶 枣则葬早皂藻灶贼 造藻灶早贼澡 责燥造赠皂燥则责澡蚤泽皂冤的稳定性和
孕悦砸技术的简便高效性袁同时又能克服 砸云蕴孕 带型少尧
信息量小袁以及 砸粤孕阅渊 则葬灶凿燥皂 葬皂责造蚤枣蚤藻凿 责燥造赠皂燥则责澡蚤糟
阅晕粤冤技术不稳定的缺点袁能检测整个基因组的遗传
变异咱员圆暂 袁是近几年发展起来的一种高效的分子标记技
术遥
甜叶菊渊杂贼藻增蚤葬 则藻遭葬怎凿蚤葬灶葬 月藻则贼燥灶蚤冤为菊科多年生
草本糖料作物袁原产于巴拉圭咱员猿暂 遥 它所含有的甜菊糖
甙的甜度是蔗糖的 圆缘园 倍 耀 猿园园 倍袁但所含热量仅是
蔗糖的 员 辕 猿园园咱员源 原 员缘暂 遥 现我国已成为甜叶菊主产区袁甜
叶菊叶提取物甜菊糖苷出口量占世界出口总量的
愿园豫 咱员远 原 员苑暂 遥 甜叶菊多倍体育种技术在国内已有一些
报道咱员愿 原 圆园暂 袁但对于甜叶菊四倍体形态特征及其生理特
性变异的分子遗传机制研究鲜见报道袁本试验通过对
甜叶菊四倍体及其二倍体植株的形态特征尧光合特性尧
阅晕粤碱基序列等方面的研究袁旨在为甜叶菊优势品种
的选育及其分子遗传机理奠定基础遥
员摇 材料与方法
员郾 员摇 材料
选取长势一致的一年生不同倍性的甜叶菊为试验
材料袁其同源四倍体渊由二倍体试管苗经秋水仙素离
体诱导获得冤及二倍体试管苗于 圆园员猿 年 远 月移栽于大
猿园员圆
核摇 农摇 学摇 报 圆怨 卷
田遥 本试验于 圆园员猿 年 远 月 原 圆园员源 年 愿 月在南京农业
大学园艺学院中药系进行遥
员郾 圆摇 试验方法
员郾 圆郾 员摇 形态特征的观察摇 随机选取 缘 株不同倍性的
甜叶菊袁对其株高尧茎粗尧叶面积等形态指标进行测量袁
每株随机取 远 个叶片袁统计数据用于后续分析遥
员郾 圆郾 圆 摇 光合指标的测定 摇 圆园员源 年 苑 月中旬某晴天
渊苑院园园 原员苑院园园冤袁各选取 缘 株长势一致的 圆 种不同倍性
的甜叶菊袁使用 蕴陨 原 远源园园载栽 便携式光合仪渊蕴陨鄄悦韵砸 公
司袁哉杂粤冤测量第 源 耀 远 片功能叶光合生理参数的日变
化遥 在 怨院园园 原 员员院园园 分别测定光合作用光强响应曲线
和光合作用 悦韵圆 响应曲线袁设置叶室温度为 圆缘益袁光量
子通量密度渊孕孕云阅冤设定为 圆 园园园尧员 远园园尧员 圆园园尧员 园园园尧
愿园园尧 远园园尧 缘园园尧 源园园尧 猿园园尧 圆园园尧 员缘园尧 员园园尧 远园尧 猿园尧 园
滋皂燥造窑皂 原圆窑泽 原员遥悦韵圆 的浓度控制在 源园园 滋皂燥造窑皂燥造 原员袁测
定不同光强下叶片相应的净光合速率渊孕灶冤袁采用非直
线双曲线模型拟合 孕孕云阅鄄孕灶响应曲线袁并计算表观量子
效率渊粤匝再冤尧光饱和点渊蕴杂孕冤和光补偿点渊蕴悦孕冤遥 利用
闭合通路袁设定 悦韵圆 浓度为 员 远园园尧员 源园园尧员 圆园园尧员 园园园尧
愿园园尧远园园尧 源园园尧 猿缘园尧 猿园园尧 圆缘园尧 圆园园尧 员缘园尧 员园园尧 愿园尧 缘园尧 园
滋皂燥造窑皂燥造 原员袁光强控制在 愿园园 滋皂燥造窑皂 原圆窑泽 原员袁测定 孕灶鄄悦蚤
响应的各项数据袁通过拟合曲线计算羧化效率渊悦耘冤尧
悦韵圆 饱和点渊悦杂孕冤和 悦韵圆 补偿点渊悦悦孕冤袁同时测定相应
的气孔导度渊郧泽冤和胞间 悦韵圆 浓度渊悦蚤冤遥
员郾 圆郾 猿摇 粤云蕴孕 分子标记 摇 采用改良的 悦栽粤月 法咱圆员暂提
取不同倍性甜叶菊的叶片总 阅晕粤袁利用 粤云蕴孕的 圆缘 对
引物渊表 员冤进行 孕悦砸 扩增咱圆圆暂 袁 孕悦砸 扩增的体系为
渊圆园滋蕴冤院员园 伊 月怎枣枣藻则 圆滋蕴曰员园皂酝 凿晕栽孕泽 园郾 源滋蕴曰耘园园 园郾 缘
滋蕴 渊 圆园滋酝 冤曰 酝园园 园郾 缘滋蕴 渊 圆园滋酝 冤曰 缘哉 辕 滋蕴栽葬择 酶
园郾 圆滋蕴曰耘责则蚤皂藻则 员滋蕴 渊圆园滋酝冤曰酝责则蚤皂藻则 员滋蕴 渊圆园滋酝冤曰模板圆滋蕴曰加 凿凿匀圆韵 至 圆园滋蕴遥 孕悦砸 扩增程序为院怨源益预变
性 猿 皂蚤灶曰怨源益变性 源缘泽袁远缘益退火 猿缘泽 渊每循环降低
园郾 苑益冤袁苑圆益延伸 员 皂蚤灶袁猿缘 个循环曰怨源益变性 猿园 泽袁
缘远益退火 猿园泽袁苑圆益延伸 员 皂蚤灶曰圆猿 个循环遥 选择性扩
增产物采用 远豫聚丙烯酰胺凝胶电泳渊非变性胶冤袁电
泳结束后两步法银染显色咱圆猿暂 遥 对凝胶图谱中同一扩
增位点条带的有无进行统计分析遥
表 员摇 粤云蕴孕分析过程中所使用的接头和引物序列
栽葬遭造藻 员摇 杂藻择怎藻灶糟藻 燥枣 葬凿葬责贼藻则泽 葬灶凿 责则蚤皂藻则泽 怎泽藻凿 蚤灶 粤云蕴孕
接头与引物
粤凿葬责贼燥则 葬灶凿 责则蚤皂藻则 序列 杂藻择怎藻灶糟藻 渊缘忆 原 猿忆冤
引物
孕则蚤皂藻则 序列 杂藻择怎藻灶糟藻 渊缘忆 原 猿忆冤
耘糟燥砸 陨 葬凿葬责贼燥则 员 悦栽悦郧栽粤郧粤悦栽郧悦郧栽粤悦悦 耘愿远 郧粤悦栽郧悦郧栽粤悦悦粤粤栽栽悦栽悦栽
耘糟燥砸 陨 葬凿葬责贼燥则 圆 粤粤栽栽郧郧栽粤悦郧悦粤郧栽悦栽粤悦 酝源愿 郧粤栽郧粤郧栽悦悦栽郧粤郧栽粤粤悦粤悦
酝泽藻 陨 葬凿葬责贼燥则 员 郧粤悦郧粤栽郧粤郧栽悦悦栽郧粤郧 酝缘园 郧粤栽郧粤郧栽悦悦栽郧粤郧栽粤粤悦粤栽
酝泽藻 陨 葬凿葬责贼燥则 圆 栽粤悦栽悦粤郧郧粤悦栽悦粤栽 酝缘员 郧粤栽郧粤郧栽悦悦栽郧粤郧栽粤粤悦悦粤
耘园园 郧粤悦栽郧悦郧栽粤悦悦粤粤栽栽悦 酝缘源 郧粤栽郧粤郧栽悦悦栽郧粤郧栽粤粤悦悦栽
酝园园 郧粤栽郧粤郧栽悦悦栽郧粤郧栽粤粤 酝缘远 郧粤栽郧粤郧栽悦悦栽郧粤郧栽粤粤悦郧悦
耘猿远 郧粤悦栽郧悦郧栽粤悦悦粤粤栽栽悦粤悦悦 酝缘苑 郧粤栽郧粤郧栽悦悦栽郧粤郧栽粤粤悦郧郧
耘猿愿 郧粤悦栽郧悦郧栽粤悦悦粤粤栽栽悦粤悦栽 酝缘愿 郧粤栽郧粤郧栽悦悦栽郧粤郧栽粤粤悦郧栽
耘源员 郧粤悦栽郧悦郧栽粤悦悦粤粤栽栽悦粤郧郧 酝缘怨 郧粤栽郧粤郧栽悦悦栽郧粤郧栽粤粤悦栽粤
耘源圆 郧粤悦栽郧悦郧栽粤悦悦粤粤栽栽悦粤郧栽 酝远园 郧粤栽郧粤郧栽悦悦栽郧粤郧栽粤粤悦栽悦
耘源猿 郧粤悦栽郧悦郧栽粤悦悦粤粤栽栽悦粤栽粤 酝远员 郧粤栽郧粤郧栽悦悦栽郧粤郧栽粤粤悦栽郧
耘源源 郧粤悦栽郧悦郧栽粤悦悦粤粤栽栽悦粤栽悦 酝远圆 郧粤栽郧粤郧栽悦悦栽郧粤郧栽粤粤悦栽栽
耘源缘 郧粤悦栽郧悦郧栽粤悦悦粤粤栽栽悦粤栽郧 酝远猿 郧粤栽郧粤郧栽悦悦栽郧粤郧栽粤粤郧粤粤
耘源远 郧粤悦栽郧悦郧栽粤悦悦粤粤栽栽悦粤栽栽 酝远源 郧粤栽郧粤郧栽悦悦栽郧粤郧栽粤粤郧粤悦
耘源苑 郧粤悦栽郧悦郧栽粤悦悦粤粤栽栽悦悦粤粤 酝远缘 郧粤栽郧粤郧栽悦悦栽郧粤郧栽粤粤郧粤郧
耘源愿 郧粤悦栽郧悦郧栽粤悦悦粤粤栽栽悦悦粤悦 酝远远 郧粤栽郧粤郧栽悦悦栽郧粤郧栽粤粤郧粤栽
耘缘园 郧粤悦栽郧悦郧栽粤悦悦粤粤栽栽悦悦粤栽 酝苑圆 郧粤栽郧粤郧栽悦悦栽郧粤郧栽粤粤郧郧悦
耘苑缘 郧粤悦栽郧悦郧栽粤悦悦粤粤栽栽悦郧栽粤 酝愿猿 郧粤栽郧粤郧栽悦悦栽郧粤郧栽粤粤栽悦粤
耘苑远 郧粤悦栽郧悦郧栽粤悦悦粤粤栽栽悦郧栽悦 酝愿源 郧粤栽郧粤郧栽悦悦栽郧粤郧栽粤粤栽悦悦
耘苑愿 郧粤悦栽郧悦郧栽粤悦悦粤粤栽栽悦郧栽栽 酝愿缘 郧粤栽郧粤郧栽悦悦栽郧粤郧栽粤粤栽悦郧
耘愿源 郧粤悦栽郧悦郧栽粤悦悦粤粤栽栽悦栽悦悦 酝愿远 郧粤栽郧粤郧栽悦悦栽郧粤郧栽粤粤栽悦栽
耘愿缘 郧粤悦栽郧悦郧栽粤悦悦粤粤栽栽悦栽悦郧
源园员圆
摇 员员 期 甜叶菊二倍体与同源四倍体生理特征及 粤云蕴孕分析
圆摇 结果与分析
圆郾 员摇 形态特征比较
图 员摇 圆 个甜叶菊品种光合作用特征参数日变化
云蚤早援 员摇 阅蚤怎则灶葬造 增葬则蚤葬贼蚤燥灶 燥枣 责澡燥贼燥泽赠灶贼澡藻贼蚤糟 糟澡葬则葬糟贼藻则蚤泽贼蚤糟 责葬则葬皂藻贼藻则泽 燥枣 贼澡藻 贼憎燥 增葬则蚤藻贼蚤藻泽 燥枣 杂贼藻增蚤葬 砸藻遭葬怎凿蚤葬灶葬 月藻则贼燥灶蚤
表 圆摇 甜叶菊四倍体与二倍体形态指标的比较
栽葬遭造藻 圆摇 悦燥皂责葬则蚤泽燥灶 燥灶 贼澡藻 酝燥则责澡燥造燥早蚤糟葬造 蚤灶凿藻曾 燥枣 凿蚤责造燥蚤凿 葬灶凿 贼藻贼则葬责造燥蚤凿 杂贼藻增蚤葬 砸藻遭葬怎凿蚤葬灶葬 月藻则贼燥灶蚤
种类
栽赠责藻
株高
孕造葬灶贼 澡藻蚤早澡贼 辕 糟皂
茎粗
杂贼藻皂 凿蚤葬皂藻贼藻则 辕 皂皂
叶厚
蕴藻葬枣 贼澡蚤糟噪灶藻泽泽 辕 皂皂
叶长
蕴藻葬枣 造藻灶早贼澡 辕 糟皂
叶宽
蕴藻葬枣 憎蚤凿贼澡 辕 糟皂
叶面积
蕴藻葬枣 葬则藻葬 辕 糟皂圆
二倍体
阅蚤责造燥蚤凿 远员郾 远苑 依 员郾 源缘葬 猿猿郾 源苑 依 猿郾 圆愿葬 圆郾 远缘 依 园郾 园圆葬 远郾 园愿 依 园郾 源缘葬 圆郾 猿苑 依 园郾 员怨葬 怨郾 苑怨 依 员郾 猿员葬
四倍体
粤怎贼燥贼藻贼则葬造责造燥蚤凿 圆怨郾 远苑 依 员郾 源缘遭 缘猿郾 猿苑 依 远郾 远苑遭 缘郾 园缘 依 园郾 圆圆遭 苑郾 圆愿 依 园郾 远园遭 圆郾 苑猿 依 园郾 圆员遭 员猿郾 员 依 员郾 怨源遭
摇 摇 注院同列不同小写字母表示在 园郾 园缘 水平上具有显著性遥 下同遥
晕燥贼藻院蕴燥憎藻则糟葬泽藻 造藻贼贼藻则泽 蚤灶 贼澡藻 泽葬皂藻 糟燥造怎皂灶 皂藻葬灶 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼 凿蚤枣枣藻则藻灶糟藻 葬贼 园郾 园缘 造藻增藻造援 栽澡藻 泽葬皂藻 葬泽 枣燥造造燥憎蚤灶早援
摇 摇 圆 种不同倍性甜叶菊的形态指标测量结果见表 员袁
四倍体甜叶菊植株的平均株高为 圆怨郾 远苑糟皂袁而二倍体
株高渊远员郾 远苑糟皂冤显著高于四倍体遥 四倍体植株的茎
粗尧叶厚均显著高于二倍体袁并且呈二倍关系袁叶长尧叶
宽尧叶面积与二倍体相比分别增加了 员怨郾 苑豫 尧员缘郾 员豫 尧
猿猿郾 愿豫 遥 表明多倍体具有植株矮小尧茎粗尧叶片肥厚尧
叶面积大等特征遥
圆郾 圆摇 光合特性
圆郾 圆郾 员摇 甜叶菊四倍体与二倍体光合速率日变化摇 甜
叶菊四倍体植株的净光合速率渊孕灶冤尧气孔导度渊郧泽冤尧
蒸腾速率渊栽则冤及胞间 悦韵圆 浓度渊悦蚤冤等均显著高于二
倍体植株渊图 员冤袁其中 孕灶 和 郧泽 的日变化趋势基本一
致袁呈双峰曲线袁孕灶 受气孔调节的影响袁两者呈正相
关遥 在 员缘院园园 时四倍体植株的 孕灶尧郧泽尧栽则均上升袁而二
倍体植株却下降袁这可能与不同倍性植株的叶片微观
结构有关遥 随着时间的推移袁甜叶菊四倍体与二倍体
缘园员圆
核摇 农摇 学摇 报 圆怨 卷
植株的 悦蚤逐渐增大袁在 员猿院园园 以后袁二倍体植株的 悦蚤
仍然呈上升趋势袁而四倍体植株的 悦蚤 逐渐下降袁这可
能与四倍体甜叶菊气孔导度渊郧泽冤逐渐下降有关遥
圆郾 圆郾 圆摇 甜叶菊四倍体与二倍体植株叶片的光响应曲
线摇 四倍体与二倍体甜叶菊叶片的净光合速率都随着
光强的增加明显增大袁当光照强度达到一定程度时袁
孕灶趋于稳定状态渊图 圆 左冤遥 由表 猿 可知袁甜叶菊四倍
体叶片的光补偿点渊蕴悦孕冤和光合量子效率渊粤匝再冤分
别为 员远郾 源猿滋皂燥造窑皂 原圆窑泽 原员和 园郾 圆愿圆袁显著高于二倍体
渊蕴悦孕为 员圆郾 苑苑滋皂燥造窑皂 原圆窑泽 原员袁粤韵再为 园郾 园圆圆冤袁由此可
见袁甜叶菊四倍体对光能的利用能力优于二倍体遥 四
倍体光饱和点 渊 蕴杂孕冤 和暗呼吸速率 渊 砸凿冤 分别为
员 源源园郾 怨苑滋皂燥造窑皂 原圆窑泽 原员尧员郾 猿愿滋皂燥造窑皂 原圆窑泽 原员袁显著低于
二倍体 渊 蕴杂孕 为 员 怨苑源郾 缘圆滋皂燥造窑皂 原圆窑泽 原员袁 砸凿 为
源郾 猿远滋皂燥造窑皂 原圆窑泽 原员 冤袁说明甜叶菊四倍体积累同化产
物的能力较二倍体强遥
图 圆摇 圆 个甜叶菊品种的光响应曲线渊孕灶鄄孕孕云阅冤和 悦韵圆 响应曲线渊孕灶鄄悦蚤冤
云蚤早援 圆摇 蕴蚤早澡贼 则藻泽责燥灶泽藻 糟怎则增藻 渊孕灶鄄孕孕云阅冤 葬灶凿 悦韵圆 则藻泽责燥灶泽藻 糟怎则增藻 渊孕灶鄄悦蚤冤 燥枣 贼澡藻 贼憎燥 增葬则蚤藻贼蚤藻泽 燥枣 杂贼藻增蚤葬 砸藻遭葬怎凿蚤葬灶葬 月藻则贼燥灶蚤
表 猿摇 甜叶菊四倍体与二倍体光合特性指标比较
栽葬遭造藻 猿摇 悦燥皂责葬则蚤泽燥灶 燥灶 贼澡藻 孕澡燥贼燥泽赠灶贼澡藻贼蚤糟 悦澡葬则葬糟贼藻则蚤泽贼蚤糟泽 蚤灶凿藻曾 燥枣 凿蚤责造燥蚤凿 葬灶凿 贼藻贼则葬责造燥蚤凿 杂贼藻增蚤葬 砸藻遭葬怎凿蚤葬灶葬 月藻则贼燥灶蚤
种类
栽赠责藻
光补偿点 蕴悦孕
蕴蚤早澡贼 糟燥皂责藻灶泽葬贼蚤燥灶
责燥蚤灶贼 辕
渊滋皂燥造窑皂 原圆窑泽 原员 冤
光饱和点 蕴杂孕
蕴蚤早澡贼 泽葬贼怎则葬贼蚤燥灶
责燥蚤灶贼 辕
渊滋皂燥造窑皂 原圆窑泽 原员 冤
光合量子效率 粤匝再
栽澡藻 葬责责葬则藻灶贼
择怎葬灶贼怎皂
藻枣枣蚤糟蚤藻灶糟赠
悦韵圆 补偿点 悦悦孕悦韵圆 糟燥皂责藻灶泽葬贼蚤燥灶责燥蚤灶贼 辕
渊滋皂燥造窑皂燥造 原员 冤
羧化效率 悦耘
悦葬则遭燥曾赠造葬贼蚤燥灶
藻枣枣蚤糟蚤藻灶糟赠
暗呼吸速率 砸凿
阅葬则噪 则藻泽责蚤则葬贼蚤燥灶
则葬贼藻 辕
渊滋皂燥造窑皂 原圆窑泽 原员 冤
二倍体
阅蚤责造燥蚤凿 员圆郾 苑苑 依 员郾 远源葬 员怨苑源郾 缘圆 依 员郾 员缘葬 园郾 园圆圆 依 园郾 园员葬 怨苑郾 猿园 依 源郾 员圆葬 园郾 园圆园 依 园郾 园园葬 源郾 猿远 依 园郾 远远葬
四倍体
粤怎贼燥贼藻贼则葬造责造燥蚤凿 员远郾 源猿 依 圆郾 苑猿遭 员源源园郾 怨苑 依 员郾 源愿遭 园郾 圆愿圆 依 园郾 园苑遭 员园愿郾 苑圆 依 圆郾 园怨遭 园郾 园员远 依 园郾 园园遭 员郾 猿愿 依 园郾 园怨遭
圆郾 圆郾 猿摇 甜叶菊四倍体与二倍体植株的 悦韵圆 响应曲线
摇 由图 圆 右图可知袁悦蚤在 园 耀 圆园园滋皂燥造窑皂燥造 原员范围内袁圆
个甜叶菊品种叶片的 孕灶 随 悦蚤 浓度的升高而上升袁且
两者差异不大袁当 悦蚤 大于 圆园园滋皂燥造窑皂燥造 原员时袁随着 悦蚤
值的增大袁二倍体甜叶菊的 孕灶 显著高于四倍体植株遥
通过拟合曲线方程可得甜叶菊四倍体与二倍体叶片的
悦悦孕 分别为 员园愿郾 苑圆尧 怨苑郾 猿园滋皂燥造窑皂燥造 原员袁 悦耘 分别为
园郾 园员远 和 园郾 园圆园渊表 猿冤遥 四倍体甜叶菊的 悦悦孕 高于二
倍体袁表明其对低浓度 悦韵圆 的利用率高于二倍体甜叶
菊袁而 悦耘低于二倍体袁说明四倍体甜叶菊 砸怎月孕 羧化
酶的量或活性比二倍体的弱遥
圆郾 猿摇 粤云蕴孕分析
选用 圆缘 对 粤云蕴孕 引物对 圆 个不同倍性的甜叶菊
进行多态性分析遥 图 猿 显示袁由于引物组合的不同袁扩
增的条带数和条带类型有差异渊粤尧月冤袁圆缘 对引物扩增
的 远愿员 条带中袁共有条带为 源愿猿 条袁多态性带为 员怨愿
条袁多态性占 圆怨郾 园苑豫 袁说明甜叶菊四倍体与二倍体之
间某些 阅晕粤片段发生了显著变化遥
猿摇 讨论
猿郾 员摇 染色体加倍对甜叶菊植株形态特征和光合特性
的影响
多倍化通常引起植物高度尧叶片大小及厚度尧气孔
远园员圆
摇 员员 期 甜叶菊二倍体与同源四倍体生理特征及 粤云蕴孕分析
注院粤院四倍体增加的条带曰月院四倍体缺失的条带遥
晕燥贼藻院粤院 栽澡藻 蚤灶糟则藻葬泽藻凿 遭葬灶凿泽 蚤灶 贼澡藻 贼藻贼则葬责造燥蚤凿 皂葬贼藻则蚤葬造援 月院 栽澡藻 凿蚤泽葬责责藻葬则藻凿 遭葬灶凿泽 蚤灶 贼澡藻 贼藻贼则葬责造燥蚤凿 皂葬贼藻则蚤葬造援
图 猿摇 甜叶菊二倍体及其同源四倍体部分 粤云蕴孕扩增结果
云蚤早援 猿摇 孕葬则贼 燥枣 粤云蕴孕 葬皂责造蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 责则燥凿怎糟贼泽 燥枣 凿蚤责造燥蚤凿 葬灶凿 贼藻贼则葬责造燥蚤凿 杂贼藻增蚤葬 砸藻遭葬怎凿蚤葬灶葬 月藻则贼燥灶蚤
和细胞大小及数量尧抗逆性咱圆源 原 圆缘暂等方面的变异遥 本研
究对甜叶菊四倍体与二倍体的植株高度尧茎粗尧叶片大
小及厚度进行了观测袁甜叶菊同源四倍体表现出了明
显的植株矮壮尧叶片变大尧变厚尧颜色浓绿等特征遥 其
他表型的变化还需进一步观测遥
光合作用被称为野地球上最重要的化学反应冶袁对
植物的进化和发展有重要影响咱圆远暂 遥 自然条件下植物
光合作用的日变化曲线大体上有 圆 种类型袁一种是单
峰型曰另一种是双峰型咱圆苑暂 遥 本研究中袁甜叶菊叶片的
孕灶日变化呈双峰曲线袁最高峰值出现在 怨院园园袁员员院园园
进入野午休冶袁甜叶菊光合出现野午休冶的现象可能是中
午光合机构吸收的光能超过了光合作用所能利用的
量袁而产生了光抑制咱圆愿暂 遥 本试验中四倍体甜叶菊 孕灶
的日变化值明显高于二倍体袁此结论与在水稻咱圆怨暂 尧高
粱咱猿园暂 尧甜菜咱猿员暂等作物上的研究结果一致遥 宋安庆咱愿暂
研究四倍体刺槐与刺槐日变化差异袁发现 孕灶 与 郧泽尧栽则
呈正相关袁本试验中袁甜叶菊四倍体与二倍体的 孕灶 与
郧泽尧栽则呈正相关袁与 悦蚤呈负相关遥
响应曲线中出现的表观量子效率渊粤匝再冤尧羧化效
率渊悦耘冤尧光补偿点渊蕴悦孕冤尧光饱和点渊蕴杂孕冤尧悦韵圆 补偿
点渊悦悦孕冤尧暗呼吸速率渊砸凿冤等多个重要参数袁能反映
出环境条件及植物自身生理状况对光合作用效率的影
响咱猿圆暂 遥 在光响应曲线中袁粤匝再 是光合作用光能转化
最大效率的度量值袁粤匝再 与光能的利用效率呈正相
关遥 蕴悦孕反映了植物利用弱光的能力袁蕴杂孕 反映植物
利用强光的能力咱猿猿暂 遥 本试验显示袁四倍体甜叶菊的
蕴悦孕和 粤阅再高于二倍体袁蕴杂孕 则低于二倍体袁说明四
倍体甜叶菊利用弱光的能力强于二倍体遥 四倍体甜叶
菊的 砸凿显著低于二倍体袁反映出四倍体同化产物的
积累能力高于二倍体遥 悦韵圆 是光合作用的主要原料袁
其浓度大小直接影响光合效率遥 本试验中袁在一定的
悦韵圆 浓度范围内袁随着 悦韵圆 浓度的升高袁甜叶菊四倍
体与二倍体的净光合速率均呈上升趋势袁这可能是
悦韵圆 浓度的升高增加了 砸怎月孕悦葬泽藻的底物浓度袁并促进
其活性袁使光呼吸降低袁净光合速率升高遥 四倍体甜叶
菊的 悦耘较二倍体低袁表明其激活 砸怎月孕酶的能力低于
二倍体袁但其 悦悦孕 显著高于二倍体袁说明甜叶菊四倍
体能有效的利用低浓度的 悦韵圆遥
猿郾 圆摇 甜叶菊四倍体与二倍体遗传差异分析
同源四倍体与其二倍体在形态特征尧生理指标等
苑园员圆
核摇 农摇 学摇 报 圆怨 卷
方面存在差异的根本原因是四倍体的基因表达水平发
生了变化咱猿源 原 猿远暂 遥 杨岚等咱猿苑暂 采用 酝杂粤孕 渊皂藻贼澡赠造葬贼蚤燥灶
泽藻灶泽贼蚤增藻 葬皂责造蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 责燥造赠皂燥则责澡蚤泽皂冤技术对甜叶菊同源
四倍体与二倍体的表观遗传进行研究后发现两者
阅晕粤甲基敏感多态性差异不大袁四倍体甜叶菊仅有极
少部分 阅晕粤 甲基化减少和单链甲基化增加的现象遥
为了进一步探究甜叶菊同源四倍体的遗传变异机理袁
采用 粤云蕴孕技术发现甜叶菊二倍体经人工加倍后基因
组结构发生了显著性变化袁这一结论与 蕴藻藻 等咱猿愿暂和王
卓伟等咱猿怨暂在同源四倍体拟南芥和桑树的基因表达研
究中得到的试验结果类似遥
源摇 结论
本试验从形态特征尧光合特性和分子遗传特性等
方面对甜叶菊四倍体与二倍体进行研究袁发现甜叶菊
四倍体与二倍体在形态特征上存在显著差异袁且甜叶
菊四倍体具有有效利用弱光和低 悦韵圆 的能力袁能够更
好地适应逆境遥 分子标记分析结果表明袁甜叶菊二倍
体人工加倍后 阅晕粤 碱基序列发生了显著变化遥 甜叶
菊四倍体和二倍体形态指标和光合特性等差异显著袁
这可能与甜叶菊二倍体经人工加倍后出现特异性基因
序列有关袁而对于这些发生变异的碱基序列对甜叶菊
四倍体植株表观性状和光合特性的调控机理袁还有待
进一步研究遥
参考文献院
咱 员 暂摇 王凤宝袁付金锋袁董立峰援 秋水仙素与 阅酝杂韵 诱导豌豆同源四倍
体咱允暂 援核农学报袁圆园园怨袁圆猿渊圆冤院圆园猿 原 圆园愿
咱 圆 暂 摇 曾爱松袁华秀红袁张云霞袁宋立晓袁高兵袁严继勇援四倍体青花菜小
孢子培养及胚胎发育途径研究咱允暂 援核农学报袁圆园员源袁圆愿渊愿冤院员猿缘愿
原 员猿远源
咱 猿 暂 摇 石乐袁张平冬袁毛彦科袁董春波袁索玉静袁康向阳援高温处理诱导染
色体加倍获得白杨杂种多倍体咱允暂 援核农学报袁圆园员圆袁圆远渊愿冤院员员员愿
原 员员圆猿
咱 源 暂摇 砸燥皂藻则燥 原 粤则葬灶凿葬 砸袁月燥灶凿葬凿葬 月 砸袁杂赠增藻则贼藻泽灶 允 孕袁郧则燥泽泽藻则 允 宰援 蕴藻葬枣
糟澡葬则葬糟贼藻则蚤泽贼蚤糟泽 葬灶凿 灶藻贼 早葬泽 藻曾糟澡葬灶早藻 燥枣 凿蚤责造燥蚤凿 葬灶凿 葬怎贼燥贼藻贼则葬责造燥蚤凿
糟蚤贼则怎泽 咱允暂 援 粤灶灶葬造泽 燥枣 月燥贼葬灶赠袁员怨怨苑袁苑怨渊圆冤院员缘猿 原 员远园
咱 缘 暂摇 宰葬则灶藻则 阅 粤袁运怎 酝 杂 月袁耘凿憎葬则凿泽 郧 耘袁孕澡燥贼燥泽赠灶贼澡藻泽蚤泽袁造藻葬枣 葬灶葬贼燥皂赠袁
葬灶凿 糟藻造造怎造葬则鄄糟燥灶泽贼蚤贼怎藻灶贼泽 蚤灶 贼澡藻 责燥造赠责造燥蚤凿赠 悦源 早则葬泽泽 孕葬灶蚤糟怎皂 增蚤则早葬贼怎皂
咱允暂 援 孕造葬灶贼 孕澡赠泽蚤燥造燥早赠袁员怨愿苑袁愿源渊圆冤院源远员 原 源远远
咱 远 暂摇 载蚤燥灶早 再 悦袁 蕴蚤 云 酝袁 在澡葬灶早 栽援 孕藻则枣燥则皂葬灶糟藻 燥枣 憎澡藻葬贼 糟则燥责泽 憎蚤贼澡
凿蚤枣枣藻则藻灶贼 糟澡则燥皂燥泽燥皂藻 责造燥蚤凿赠院则燥燥贼鄄泽燥怎则糟藻凿 泽蚤早灶葬造泽袁凿则燥怎早澡贼 贼燥造藻则葬灶糟藻袁
葬灶凿 赠蚤藻造凿 孕藻则枣燥则皂葬灶糟藻咱允暂 援 孕造葬灶贼袁圆园园远袁圆渊圆源冤院苑员园 原 苑员愿
咱 苑 暂摇 张晓申袁翟晓巧袁赵振利援 不同种四倍体泡桐光合特性的研究
咱允暂 援河南农业大学学报袁圆园员猿袁 源苑渊源冤院源园园 原 源园源
咱 愿 暂摇 宋庆安援四倍体刺槐与刺槐光合速率日变化差异咱 允暂 援湖南林业
科技袁圆园员圆袁怨渊员冤院员源 原 员远
咱 怨 暂 摇 杜琳袁李永存袁穆怀志袁张添咏袁刘菲菲袁黄海娇袁刘桂丰援 四倍体
与二倍体白桦的光合特性比较咱允暂 援东北林业大学学报袁圆园员员袁猿怨
渊圆冤院员 原 源
咱员园暂摇 于永畅袁王厚新袁李承秀袁孙忠奎袁牛田袁孙芳袁王长宪袁张林援四倍
体与二倍体紫薇光合特性研究咱 允暂 援 中国农学通报袁 圆园员猿袁 圆怨
渊圆圆冤院员园 原 员源
咱员员暂摇 张晓青袁陈劲枫袁雷春袁陈龙正袁钱春桃袁刁卫平援不同倍性黄瓜遗
传差异的 粤云蕴孕分析咱允暂 援西北植物学报袁圆园园远袁圆远 渊员员冤院圆圆远缘 原
圆圆远怨
咱员圆暂摇 陈亮袁梁春阳袁孙传清袁金德敏袁姜廷波袁王斌袁王象坤援 粤云蕴孕 和
砸云蕴孕标记检测水稻亲本遗传多样性比较研究咱 允暂 援 中国农业科
学袁圆园园圆袁猿缘渊远冤院缘愿怨 原 缘怨缘
咱员猿暂摇 黄应森袁陆荣刚援 甜菊栽培技术咱酝暂援 南京院江苏科学技术出版
社袁员怨愿员
咱员源暂摇 赵秀玲援我国甜味剂甜菊糖苷发展状况咱 允暂 援中国调味品袁 圆园园怨袁
猿源渊缘冤院员员园 原 员员猿
咱员缘暂摇 倪万潮袁郭书巧援甜菊醇糖苷生物合成及关键酶研究进展咱允暂 援生
物技术通报袁圆园园愿袁渊圆冤院源愿 原 缘猿
咱员远暂摇 舒世珍援新糖料作物要要要甜叶菊在京试种成功咱 允暂 援 农业科技通
讯袁员怨苑怨袁渊圆冤院员怨
咱员苑暂摇 舒世珍援甜菊引种三十年咱允暂 援中国种业袁圆园员园袁渊远冤院圆员 原 圆猿
咱员愿暂摇 王波袁崔广荣袁何克勤袁胡能兵袁林平袁张子学援甜叶菊多倍体离体
诱导技术体系的建立咱 允暂 援 热带作物学报袁圆园员员袁猿圆渊怨冤院员苑员员 原
员苑员源
咱员怨暂摇 李红杨袁杨岚袁向增旭援甜叶菊同源四倍体诱导及鉴定咱 允暂 援西北
植物学报袁圆园员圆袁猿圆渊愿冤院员远怨圆 原 员远怨苑
咱圆园暂摇 彭程袁张路路袁叶超袁佘庆梅袁杨成林袁周明亮袁马想想袁赵阳袁崔广
荣援低浓度秋水仙素离体诱导甜叶菊多倍体技术体系的建立
咱允暂 援 圆园员源袁猿缘渊源冤院远苑猿 原 远苑苑
咱圆员暂摇 酝怎则则葬赠 酝 郧袁 栽澡燥皂责泽燥灶 宰 云援 砸葬责蚤凿 蚤泽燥造葬贼蚤燥灶 燥枣 澡蚤早澡 皂燥造藻糟怎造葬则
憎藻蚤早澡贼 责造葬灶贼 阅晕粤咱 允暂援 晕怎糟造藻蚤糟 粤糟蚤凿泽 砸藻泽藻葬则糟澡袁 员怨愿园袁 愿 渊员怨冤院
源猿圆员 原 源猿圆远
咱圆圆暂摇 灾燥泽 孕袁 匀燥早藻则泽 砸袁 月造藻藻噪藻则 酝袁 砸藻蚤躁葬灶泽 酝袁 匀燥则灶藻泽 酝袁 云则蚤躁贼藻则泽 粤袁
孕燥贼 允袁 孕藻造藻皂葬灶 允袁 运怎蚤责藻则 酝袁 在葬遭藻葬怎 酝援 粤云蕴孕院 葬 灶藻憎 贼藻糟澡蚤择怎藻 枣燥则
阅晕粤 枣蚤灶早藻则责则蚤灶贼蚤灶早 咱 允暂 援 晕怎糟造藻蚤糟 粤糟蚤凿泽 砸藻泽藻葬则糟澡袁员怨怨缘袁圆猿 渊圆员冤院
源源园苑 原 源源员源
咱圆猿暂摇 许绍斌袁陶玉芬袁杨昭庆袁褚嘉佑援简单快速的 阅晕粤 银染和胶保
存方法咱允暂 援遗传袁圆园园圆袁圆源渊猿冤院猿猿缘 原 猿猿远
咱圆源暂摇 常金华袁 任清袁 罗耀武援 人工诱变四倍体玫瑰香葡萄的倍性鉴
定咱允暂 援 核农学报袁 圆园园猿袁员苑渊猿冤院圆圆员 原 圆圆源
咱圆缘暂摇 阅憎蚤增藻凿蚤 晕 运袁 杂蚤噪凿葬则 粤 运袁 允燥造造赠 酝 杂援 悦燥造糟澡蚤糟蚤灶藻鄄蚤灶凿怎糟藻凿
皂燥灶燥藻糟蚤燥怎泽 皂怎贼葬灶贼 蚤灶 皂怎造遭藻则则赠咱允暂 援 悦怎则则藻灶贼 杂糟蚤藻灶糟藻袁 员怨怨愿袁缘苑渊源冤院
圆园愿 原 圆员园
咱圆远暂摇 王忠援植物生理学咱酝暂援北京院中国农业出版社袁圆园园园院员圆员
咱圆苑暂摇 王仁雷袁 华春袁 刘友良援 盐胁迫对水稻光合特性的影响咱 允暂 援 南
京农业大学学报袁 圆园园圆袁 圆缘渊源冤院员员 原 员源
咱圆愿暂摇 朱万泽袁王金锡袁薛建辉袁鄢武先援 四川桤木光合生理特性研究
咱允暂 援西南林学院学报袁圆园园员袁圆员渊源冤院员怨远 原 圆园源
咱圆怨暂摇 李德全袁高辉远袁孟庆伟援 植物生理学咱酝暂援 北京院中国农业科学
技术出版社袁圆园园源院远远 原 员园远
咱猿园暂摇 蒋观敏袁罗耀武袁李喆浩援 同源四倍体高粱不育系和保持系的生
愿园员圆
允燥怎则灶葬造 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽
圆园员缘袁圆怨渊员员冤院圆员园猿 耀 圆员园怨
物学及生理特性研究咱允暂 援作物学报袁圆园园园袁 圆远渊源冤院源源源 原 源源愿
咱猿员暂 摇 高妙真袁赵景义袁徐宝荣袁崔杰援 二尧四倍体甜菜生物学特性的研
究咱允暂 援中国甜菜糖业袁员怨怨苑袁渊员冤院愿 原 员圆
咱猿圆暂 摇 粤灶泽藻造皂蚤 杂袁悦澡蚤藻泽蚤 酝袁郧蚤葬灶灶蚤灶蚤 酝援 耘泽贼蚤皂葬贼蚤燥灶 燥枣 酝藻凿蚤贼藻则则葬灶藻葬灶 枣燥则藻泽贼
贼则葬灶泽责蚤则葬贼蚤燥灶 葬灶凿 责澡燥贼燥泽赠灶贼澡藻泽蚤泽 贼澡则燥怎早澡 贼澡藻 怎泽藻 燥枣 葬灶 藻糟燥泽赠泽贼藻皂
泽蚤皂怎造葬贼蚤燥灶 皂燥凿藻造 凿则蚤增藻灶 遭赠 则藻皂燥贼藻造赠 泽藻灶泽藻凿 凿葬贼葬咱允暂 援 郧造燥遭葬造 耘糟燥造燥早赠
月蚤燥早藻燥早则葬责澡赠袁圆园园源袁员猿渊源冤院猿苑员 原 猿愿园
咱猿猿暂 摇 伍维模袁李志军袁罗青红袁韩路援土壤水分胁迫对胡杨灰叶胡杨光
合作用院光响应特性的影响咱允暂 援林业科学袁圆园园苑袁源猿渊缘冤院猿园 原 猿缘
咱猿源暂 摇 砸燥凿则蚤凿怎藻扎 酝 孕袁 悦藻则增蚤早灶蚤 郧 阅 蕴袁 匝怎葬则蚤灶 悦 蕴袁 韵则贼蚤扎 允 孕 粤援
云则藻择怎藻灶糟蚤藻泽 葬灶凿 增葬则蚤葬贼蚤燥灶 蚤灶 糟赠贼燥泽蚤灶藻 皂藻贼澡赠造葬贼蚤燥灶 责葬贼贼藻则灶泽 蚤灶 凿蚤责造燥蚤凿
葬灶凿 贼藻贼则葬责造燥蚤凿 糟赠贼燥贼赠责藻泽 燥枣 孕葬泽责葬造怎皂 灶燥贼葬贼怎皂 咱 允 暂 援 月蚤燥造燥早蚤葬
孕造葬灶贼葬则怎皂袁圆园员圆袁缘远院圆苑远 原 圆愿圆
咱猿缘暂 摇 翟晓巧袁 张晓申袁 范国强援 毛泡桐二倍体及其同源四倍体的
粤云蕴孕和 酝杂粤孕 分析咱 允暂 援 中南林业科技大学学报袁 圆园员源袁 猿源
渊员冤院愿怨 原 怨猿
咱猿远暂摇 再葬灶早 孕 酝袁 匀怎葬灶早 匝 悦袁 匝蚤灶 郧 再袁 在澡葬燥 杂 孕袁 在澡燥怎 允 郧援 阅蚤枣枣藻则藻灶贼
凿则燥怎早澡贼鄄泽贼则藻泽泽 则藻泽责燥灶泽藻泽 蚤灶 责澡燥贼燥泽赠灶贼澡藻泽蚤泽 葬灶凿 则藻葬糟贼蚤增藻 燥曾赠早藻灶
皂藻贼葬遭燥造蚤泽皂 遭藻贼憎藻藻灶 葬怎贼燥贼藻贼则葬责造燥蚤凿 葬灶凿 凿蚤责造燥蚤凿 则蚤糟藻 咱 允 暂 援
孕澡燥贼燥泽赠灶贼澡藻贼蚤糟葬袁圆园员源袁缘圆渊圆冤院员怨猿 原 圆园圆
咱猿苑暂摇 杨岚袁李红袁向增旭援二倍体和同源四倍体甜叶菊的 阅晕粤 甲基化
差异分析咱允暂 援核农学报袁圆园员猿袁圆苑渊愿冤院员员圆缘 原 员员猿园
咱猿愿暂摇 蕴藻藻 匀 杂袁 悦澡藻灶 在 允援 孕则燥贼藻蚤灶鄄糟燥凿蚤灶早 早藻灶藻泽 葬则藻 藻责蚤早藻灶藻贼蚤糟葬造造赠
则藻早怎造葬贼藻凿 蚤灶 粤则葬遭蚤凿燥责泽蚤泽 责燥造赠责造燥蚤凿泽 咱 允 暂 援 孕则燥糟藻藻凿蚤灶早泽 晕葬贼蚤燥灶葬造
粤糟葬凿藻皂赠 燥枣 杂糟蚤藻灶糟藻泽 哉杂粤袁 圆园园员袁怨愿渊员圆冤院远苑缘猿 原 远苑缘愿
咱猿怨暂摇 王卓伟袁 余茂德袁 鲁成援 桑树二倍体及人工诱导的同源四倍体
遗传差异的 粤云蕴孕分析咱 允暂 援 植物学通报袁 圆园园圆袁员怨渊圆冤院员怨源 原
圆园园
粤灶葬造赠泽蚤泽 燥灶 孕澡赠泽蚤燥造燥早蚤糟葬造 悦澡葬则葬糟贼藻则蚤泽贼蚤糟泽 葬灶凿 粤云蕴孕 燥枣 阅蚤责造燥蚤凿
葬灶凿 粤怎贼燥贼藻贼则葬责造燥蚤凿 燥枣 杂贼藻增蚤葬 砸藻遭葬怎凿蚤葬灶葬 月藻则贼燥灶蚤
蕴陨 再葬贼蚤灶早摇 宰粤晕郧 匀燥灶早躁怎葬灶摇 载陨粤晕郧 在藻灶早曾怎
渊悦燥造造藻早藻 燥枣 匀燥则贼蚤糟怎造贼怎则藻袁 晕葬灶躁蚤灶早 粤早则蚤糟怎造贼怎则藻 哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠袁 晕葬灶躁蚤灶早袁允蚤葬灶早泽怎摇 圆员园园怨缘冤
粤遭泽贼则葬糟贼院陨灶 燥则凿藻则 贼燥 蚤造造怎泽贼则葬贼藻 贼澡藻 皂藻糟澡葬灶蚤泽皂 燥枣 葬责责葬则藻灶贼 贼则葬蚤贼泽 葬灶凿 责澡燥贼燥泽赠灶贼澡藻贼蚤糟 糟澡葬则葬糟贼藻则蚤泽贼蚤糟泽 燥枣 杂贼藻增蚤葬 砸藻遭葬怎凿蚤葬灶葬
月藻则贼燥灶蚤 葬怎贼燥贼藻贼则葬责造燥蚤凿 葬灶凿 凿蚤责造燥蚤凿袁 贼澡藻 凿蚤责造燥蚤凿 杂贼藻增蚤葬 砸藻遭葬怎凿蚤葬灶葬 月藻则贼燥灶蚤 葬灶凿 葬怎贼燥贼藻贼则葬责造燥蚤凿 杂贼藻增蚤葬 砸藻遭葬怎凿蚤葬灶葬 月藻则贼燥灶蚤
憎藻则藻 泽贼怎凿蚤藻凿 遭赠 皂燥则责澡燥造燥早蚤糟葬造 糟澡葬则葬糟贼藻则蚤泽贼蚤糟泽袁 责澡燥贼燥泽赠灶贼澡藻贼蚤糟 糟澡葬则葬糟贼藻则蚤泽贼蚤糟泽 葬灶凿 粤云蕴孕 皂燥造藻糟怎造葬则 皂葬则噪藻则援 栽澡藻 则藻泽怎造贼
泽澡燥憎藻凿 贼澡葬贼 杂贼藻增蚤葬 贼藻贼则葬责造燥蚤凿 责造葬灶贼 泽贼藻皂泽 遭藻糟葬皂藻 泽贼燥怎贼袁 造藻葬枣 憎葬泽 贼澡蚤糟噪藻灶蚤灶早袁 造藻葬枣 葬则藻葬 蚤灶糟则藻葬泽藻凿 葬灶凿 责造葬灶贼 遭藻糟葬皂藻
泽澡燥则贼藻则援 栽澡藻 责澡燥贼燥泽赠灶贼澡藻贼蚤糟 糟澡葬则葬糟贼藻则蚤泽贼蚤糟泽袁 泽怎糟澡 葬泽 灶藻贼 责澡燥贼燥泽赠灶贼澡藻贼蚤糟 则葬贼藻 渊 孕灶 冤袁 泽贼燥皂葬贼葬造 糟燥灶凿怎糟贼葬灶糟藻 渊 郧泽冤袁
贼则葬灶泽责蚤则葬贼蚤燥灶 则葬贼藻 渊 栽则冤袁 憎藻则藻 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼造赠 澡蚤早澡藻则 贼澡葬灶 贼澡葬贼 燥枣 凿蚤责造燥蚤凿援 栽澡藻 泽贼藻增蚤葬 贼藻贼则葬责造燥蚤凿 造蚤早澡贼 糟燥皂责藻灶泽葬贼蚤燥灶 责燥蚤灶贼
渊蕴悦孕冤袁 葬责责葬则藻灶贼 择怎葬灶贼怎皂 藻枣枣蚤糟蚤藻灶糟赠 渊粤匝再冤 葬灶凿 悦韵圆 糟燥皂责藻灶泽葬贼蚤燥灶 责燥蚤灶贼 渊悦悦孕冤 憎藻则藻 则藻泽责藻糟贼蚤增藻造赠 蚤灶糟则藻葬泽藻凿 遭赠 圆愿援远远豫 袁员 员愿员援 愿员豫 袁员员援 苑源豫 贼澡葬灶 贼澡藻 凿蚤责造燥蚤凿袁 憎澡蚤造藻 蚤贼泽 造蚤早澡贼 泽葬贼怎则葬贼蚤燥灶 责燥蚤灶贼 渊 蕴杂孕冤袁 凿葬则噪 则藻泽责蚤则葬贼蚤燥灶 则葬贼藻 渊砸凿冤 葬灶凿
糟葬则遭燥曾赠造葬贼蚤燥灶 藻枣枣蚤糟蚤藻灶糟赠 渊悦耘冤 憎藻则藻 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼造赠 造燥憎藻则 贼澡葬灶 贼澡葬贼 燥枣 凿蚤责造燥蚤凿援 陨灶 贼澡藻 造藻增藻造 燥枣 粤云蕴孕袁 阅晕粤 泽藻择怎藻灶糟藻 憎葬泽
糟澡葬灶早藻凿 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼造赠 葬枣贼藻则 泽贼藻增蚤葬 凿蚤责造燥蚤凿 糟澡则燥皂燥泽燥皂藻 凿燥怎遭造蚤灶早援 栽澡藻 凿蚤枣枣藻则藻灶糟藻泽 燥枣 葬责责葬则藻灶贼 皂燥则责澡燥造燥早赠 葬灶凿
责澡燥贼燥泽赠灶贼澡藻贼蚤糟 糟澡葬则葬糟贼藻则蚤泽贼蚤糟泽 遭藻贼憎藻藻灶 凿蚤责造燥蚤凿 葬灶凿 葬怎贼燥贼藻贼则葬责造燥蚤凿 泽贼藻增蚤葬 则藻泽怎造贼藻凿 枣则燥皂 阅晕粤 责燥造赠皂燥则责澡蚤泽皂泽援 栽澡蚤泽 泽贼怎凿赠
造葬赠泽 贼澡藻 枣燥怎灶凿葬贼蚤燥灶 枣燥则 贼澡藻 责怎则责燥泽藻 燥枣 则藻早怎造葬贼蚤灶早 皂藻糟澡葬灶蚤泽皂 燥枣 杂贼藻增蚤葬 砸藻遭葬怎凿蚤葬灶葬 月藻则贼燥灶蚤 责造燥蚤凿赠 遭则藻藻凿蚤灶早 葬灶凿 责燥造赠责造燥蚤凿
早藻灶藻 燥灶 贼澡藻 葬责责葬则藻灶贼 糟澡葬则葬糟贼藻则泽 葬灶凿 责澡赠泽蚤燥造燥早蚤糟葬造 糟澡葬则葬糟贼藻则蚤泽贼蚤糟泽援
运藻赠憎燥则凿泽院杂贼藻增蚤葬 砸藻遭葬灶怎凿蚤葬灶葬 月藻则贼燥灶蚤袁 葬怎贼燥贼藻贼则葬责造燥蚤凿袁 皂燥则责澡燥造燥早蚤糟葬造 糟澡葬则葬糟贼藻则蚤泽贼蚤糟泽袁 责澡燥贼燥泽赠灶贼澡藻贼蚤糟 糟澡葬则葬糟贼藻则蚤泽贼蚤糟泽袁
粤云蕴孕
怨园员圆