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OPTIMUM TECHNOLOGICAL PARAMETERS FOR REGENERATION SYSTEM OF ENDOSPERM OF Actindia chinese CV. ‘JINTAO’

猕猴桃胚乳再生植株体系的优化



全 文 :摇 核 农 学 报摇 圆园员圆袁圆远渊圆冤院园圆缘苑 耀 园圆远员允燥怎则灶葬造 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽
文章编号院员园园园鄄愿缘缘员渊圆园员圆冤园圆鄄园圆缘苑鄄园缘
猕猴桃胚乳再生植株体系的优化
林摇 颖员袁圆 摇 龙自立员 摇 张摇 璐员 摇 叶庆富员 摇 刘永立员
渊员郾 浙江大学农业与生物技术学院袁浙江 杭州摇 猿员园园圆怨曰 圆郾 浙江省玉环县科学技术局袁浙江 玉环摇 猿员苑远园园冤
摘摇 要院以猕猴桃渊粤糟贼蚤灶凿蚤葬 糟澡蚤灶藻灶泽蚤泽冤金桃品种的胚乳为外植体袁探讨了培养基尧生长调节剂和蔗糖浓度
以及暗培养等条件对胚乳培养器官形成的影响遥 结果表明院圆袁源 原 阅对猕猴桃胚乳愈伤组织的诱导效果
显著曰在 圆园早 辕 蕴的蔗糖浓度条件下袁胚乳愈伤组织的器官分化效果最好曰暗培养可以促进胚乳愈伤组织
的生长和器官形成袁其中暗培养 苑凿效果最好遥
关键词院猕猴桃曰 愈伤组织曰 生长调节剂曰 胚乳培养
韵孕栽陨酝哉酝 栽耘悦匀晕韵蕴韵郧陨悦粤蕴 孕粤砸粤酝耘栽耘砸杂 云韵砸 砸耘郧耘晕耘砸粤栽陨韵晕
杂再杂栽耘酝 韵云 耘晕阅韵杂孕耘砸酝 韵云 粤糟贼蚤灶凿蚤葬 糟澡蚤灶藻泽藻 悦灾援 耶允陨晕栽粤韵爷
蕴陨晕 再蚤灶早员袁圆 摇 蕴韵晕郧 在蚤鄄造蚤员 摇 在匀粤晕郧 蕴怎员 摇 再耘 匝蚤灶早鄄枣怎员 摇 蕴陨哉 再燥灶早鄄造蚤员
渊员郾 悦燥造造藻早藻 燥枣 粤早则蚤糟怎造贼怎则藻 葬灶凿 月蚤燥贼藻糟澡灶燥造燥早赠袁 在澡藻躁蚤葬灶早 哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠袁 匀葬灶早扎澡燥怎袁 在澡藻躁蚤葬灶早摇 猿员园园圆怨曰
圆郾 杂糟蚤藻灶糟藻 葬灶凿 栽藻糟澡灶燥造燥早赠 月怎则藻葬怎 燥枣 再怎澡怎葬灶 悦燥怎灶贼赠袁 再怎澡怎葬灶袁 在澡藻躁蚤葬灶早摇 猿员苑远园园冤
粤遭泽贼则葬糟贼院粤 则藻早藻灶藻则葬贼蚤燥灶 责则燥贼燥糟燥造 枣燥则 糟怎造贼怎则藻凿 藻灶凿燥泽责藻则皂 燥枣 粤糟贼蚤灶蚤凿蚤葬 糟澡蚤灶藻灶泽蚤泽 憎藻则藻 泽藻贼 怎责 增蚤葬 燥则早葬灶燥早藻灶藻泽蚤泽 枣则燥皂 糟葬造造怎泽
贼蚤泽泽怎藻泽 凿藻则蚤增藻凿 枣则燥皂 藻灶凿燥泽责藻则皂 藻曾责造葬灶贼泽 燥枣 粤糟贼蚤灶蚤凿蚤葬 糟澡蚤灶藻灶泽蚤泽 耶 允蚤灶贼葬燥爷 蚤灶 增蚤贼则燥援 栽澡藻 藻枣枣藻糟贼泽 燥枣 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 皂藻凿蚤葬袁 责造葬灶贼
早则燥憎贼澡 则藻早怎造葬贼燥则泽袁 泽怎糟则燥泽藻 糟燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶泽 葬灶凿 凿葬则噪 贼则藻葬贼皂藻灶贼 燥灶 糟葬造造怎泽 蚤灶凿怎糟贼蚤燥灶 葬灶凿 泽澡燥燥贼 枣燥则皂葬贼蚤燥灶 憎藻则藻 泽贼怎凿蚤藻凿援 栽澡藻
葬凿凿蚤贼蚤燥灶 燥枣 圆袁源鄄阅 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼造赠 蚤灶糟则藻葬泽藻凿 责藻则糟藻灶贼葬早藻 燥枣 糟葬造造蚤 枣燥则皂葬贼蚤燥灶 枣燥则皂 贼澡藻 藻灶凿燥泽责藻则皂 藻曾责造葬灶贼泽援 粤凿凿蚤贼蚤燥灶 燥枣 圆园早 辕 蕴 燥枣
泽怎糟则燥泽藻 则藻泽怎造贼藻凿 蚤灶 遭藻贼贼藻则 燥则早葬灶燥早藻灶藻泽蚤泽 枣燥则皂袁 藻灶凿燥泽责藻则皂 糟葬造造怎泽援 阅葬则噪 糟怎造贼怎则藻 糟燥怎造凿 责则燥皂燥贼藻 贼澡藻 早则燥憎贼澡 燥枣 藻灶凿燥泽责藻则皂
糟葬造造怎泽 葬灶凿 燥则早葬灶 枣燥则皂葬贼蚤燥灶袁 葬灶凿 贼澡藻 遭藻泽贼 藻枣枣蚤糟蚤藻灶糟赠 憎葬泽 燥遭贼葬蚤灶藻凿 葬枣贼藻则 苑凿 燥枣 糟怎造贼怎则藻 蚤灶 贼澡藻 凿葬则噪援
运藻赠 憎燥则凿泽院粤糟贼蚤灶蚤凿蚤葬 糟澡蚤灶藻灶泽蚤泽曰 糟葬造造怎泽 贼蚤泽泽怎藻泽曰 早则燥憎贼澡 则藻早怎造葬贼燥则曰 藻灶凿燥泽责藻则皂 糟怎造贼怎则藻
收稿日期院圆园员员鄄园苑鄄园苑摇 接受日期院圆园员员鄄员园鄄圆源
基金项目院浙江省自然科学基金项目渊再猿园愿园圆园圆冤
作者简介院林摇 颖渊员怨远苑鄄冤袁男袁浙江台州人袁大学本科袁农艺师袁主要从事果树研究与推广工作遥 栽藻造院 园缘苑远鄄愿苑猿缘圆缘苑怨曰耘鄄皂葬蚤造院 造蚤灶赠缘缘远苑岳 员远猿援 糟燥皂
通讯作者院刘永立渊员怨缘怨鄄冤袁男袁黑龙江兰西人袁博士袁教授袁研究方向为果树育种遥 栽藻造院 员猿猿怨缘苑员员猿员圆曰 耘鄄皂葬蚤造院 造蚤怎赠燥灶早造蚤岳 扎躁怎援 藻凿怎援 糟灶
叶庆富渊员怨远猿鄄冤袁男袁浙江衢州人袁博士袁教授袁研究方向为植物诱变育种遥 耘鄄皂葬蚤造院择枣赠藻岳 扎躁怎援 藻凿怎援 糟灶
摇 摇 胚乳培养是常用的倍性育种手段遥 被子植物胚乳
是双受精作用的产物袁属于三倍体组织袁因此通过对植
物种子成熟胚乳或未成熟胚乳的离体培养袁可能筛选
得到一些重要的新种质材料袁对以营养繁殖为主的果
树而言具有重要的育种价值遥 胚乳培养在葡萄咱员暂 尧柑
橘咱圆袁 猿暂 尧柿树咱源袁 缘暂 尧枇杷咱远暂 尧杨桃咱苑暂 尧枣咱愿暂 尧西番莲咱怨暂 尧银
杏咱员园暂等果树的研究中有着广泛的应用袁并得到了无核
无籽的育种材料袁同时还可以改良水果的某些食用品
质遥
猕猴桃是一种营养丰富的水果袁具有很高的经济价
值和药用价值遥 由于猕猴桃果实中种子过多袁大大影响
其食用品质遥 为获得猕猴桃无籽或少籽的材料袁前人对
猕猴桃进行了胚乳培养的研究咱员员 耀 员猿暂 袁但对猕猴桃胚乳
组织再生过程中体系优化的研究尚未见报道遥 金桃是
我国育成的猕猴桃优良品种袁在意大利等国有广泛的推
广袁其商品性状优良袁在目前的国际市场中具有较好的
竞争力遥 本文以金桃猕猴桃种子的胚乳为试验材料袁通
过器官发生途径诱导形成不定芽袁探讨了培养基尧植物
生长调节剂和不同浓度蔗糖以及暗培养时间对不定芽
形成的影响袁以求建立一个高效的适合猕猴桃胚乳培养
苑缘圆
核摇 农摇 学摇 报 圆远 卷
的再生系统袁为胚乳再生植株改良和选育猕猴桃新品种
提供技术参数袁并应用流式细胞仪鉴定了胚乳愈伤组织
诱导得到的植株染色体倍性遥
员摇 材料和方法
员郾 员摇 材料及其处理
选取猕猴桃 粤糟贼蚤灶蚤凿蚤葬 糟澡蚤灶藻灶泽蚤泽 品种金桃渊圆灶 越 源曾
越员员远袁 中华猕猴桃黄瓤袁意大利产冤的果实袁用自来水
冲洗 猿园皂蚤灶袁再用 苑缘豫 酒精灭菌处理 员皂蚤灶袁然后用
园郾 圆豫匀早悦造圆 灭菌处理 圆园皂蚤灶袁再用无菌水冲洗 猿 次遥
无菌条件下取出种子袁剥去种皮并去掉胚袁接种在培养
基中遥 培养基为 员 辕 圆酝杂 附加琼脂粉 缘早 辕 蕴尧蔗糖 圆园早 辕
蕴袁用 园郾 员皂燥造 辕 蕴的 匀悦造 或者 晕葬韵匀 调整 责匀 值至 缘郾 愿袁
在 员圆员益渊员郾 圆噪早 辕 糟皂圆冤高压灭菌 圆园皂蚤灶遥
员郾 圆摇 方法
员郾 圆郾 员摇 植物生长调节剂对愈伤组织和器官形成的影
响摇 取金桃猕猴桃的去胚胚乳为外植体袁接种到分别
含有 晕粤粤 园尧员尧圆皂早 辕 蕴或 圆袁源鄄阅 园尧园郾 缘尧员郾 园皂早 辕 蕴和 月粤
园郾 缘尧员尧猿皂早 辕 蕴组合的愈伤组织诱导培养基渊猿园皂造冤上袁
以探讨不同植物生长调节剂种类与浓度对猕猴桃胚乳
愈伤组织形成的影响遥
以 晕粤粤 园尧园郾 员尧园郾 缘滋皂燥造 辕 蕴 和 月粤 园尧员尧缘尧员园滋皂燥造 辕
蕴 进行组合袁探讨不同植物生长调节剂种类与浓度对
胚乳愈伤组织中器官形成的影响遥
员郾 圆郾 圆摇 培养基对器官形成的影响摇 取 猿园凿 的猕猴桃
胚乳愈伤组织作为外植体袁分别接种到 酝杂尧员 辕 圆酝杂 和
月缘猿 种培养基上袁均附加 园郾 员滋皂燥造 辕 蕴 晕粤粤 和 缘滋皂燥造 辕 蕴月粤及 圆园早 辕 蕴 蔗糖袁直接置于光下培养袁探讨基本培养
基对器官形成的影响遥
员郾 圆郾 猿摇 糖浓度对愈伤组织分化的影响 摇 同上取 猿园凿
的猕猴桃胚乳愈伤组织作为外植体袁接种到 员 辕 圆酝杂 垣
园郾 员滋皂燥造 辕 蕴 晕粤粤 垣缘滋皂燥造 辕 蕴 月粤的再生培养基中袁附加
不同浓度的蔗糖渊员园尧圆园尧猿园尧源园尧缘园早 辕 蕴冤袁猿园凿 后观察胚
乳愈伤组织的分化情况袁探讨蔗糖浓度对器官形成的
影响遥
员郾 圆郾 源摇 暗培养处理摇 同上取 猿园凿 的猕猴桃胚乳愈伤
组织作为外植体袁接种到 员 辕 圆酝杂 垣 园郾 员滋皂燥造 辕 蕴 晕粤粤 垣
缘滋皂燥造 辕 蕴 月粤 垣圆园早 辕 蕴 蔗糖的再生培养基上袁进行不同
时间渊园尧苑尧员源 和 圆员凿冤的暗培养后转入光培养袁探讨暗
培养时间对器官形成的影响遥
员郾 猿摇 培养条件
以上处理培养条件均为院圆缘益袁日光灯照明的 员远 辕
愿澡的光周期袁光照强度 源园滋皂燥造窑皂 原圆窑泽 原员遥
员郾 源摇 倍性鉴定
取约 圆糟皂圆 的不定芽苗顶部叶为多倍体检测材料遥
加入到 员皂造 园益的提取液 员园皂皂燥造 辕 蕴 酝早杂韵源 垣 缘园皂皂燥造 辕蕴 运悦造 垣 缘皂皂燥造 辕 蕴 匀耘孕耘杂 垣园郾 圆缘豫 栽则蚤贼燥灶载 原员园园 垣 员豫
孕灾孕 原猿园 渊宰 辕 灾冤冤中袁 在培养皿中用锋利的刀片快速
将叶片切碎袁 溶液用 猿园园 目尼龙网过滤至离心管中袁
猿园园园则 辕 皂蚤灶离心 缘皂蚤灶袁 弃上清袁加入 月阅染色液 源园园滋造袁
以实生金桃植株叶片为对照袁采用 月阅 云粤悦杂 悦葬造蚤遭怎则流
式细胞仪进行倍性鉴定遥
员郾 缘摇 数据统计及分析
以上每个处理 猿 次重复袁每次重复 员缘 个外植体遥
培养 猿园凿时和 源缘凿时统计胚乳愈伤组织形成情况袁源缘凿
时统计不定芽和不定根的数量遥 试验结果均采用平均
值表示袁并运用 阅孕杂苑郾 园缘 软件进行统计学分析遥
圆摇 结果与分析
圆郾 员摇 植物生长调节剂对猕猴桃胚乳愈伤组织形成的
影响
接种 员园凿后袁胚乳开始表现出显著变化袁在切口处
出现少量的乳白色或淡黄色瘤状疣点遥 愈伤组织首先
从切口处产生并不断增大袁颜色为乳白色或淡黄色袁质
地较疏松遥 生长素和细胞分裂素对猕猴桃胚乳愈伤组
织的诱导有显著的影响渊表 员冤遥 在含有 圆袁源 原 阅的培
表 员摇 植物生长调节剂对猕猴桃胚乳愈伤组织诱导的影响
栽葬遭造藻 员摇 耘枣枣藻糟贼泽 燥枣 责造葬灶贼 早则燥憎贼澡 则藻早怎造葬贼燥则泽 燥灶 糟葬造造怎泽
蚤灶凿怎糟贼蚤燥灶 枣则燥皂 藻灶凿燥泽责藻则皂 燥枣 粤糟贼蚤灶蚤凿蚤葬
植物生长调节剂
责造葬灶贼 早则燥憎贼澡 则藻早怎造葬贼燥则泽
晕粤粤
渊皂早 辕 蕴冤
圆袁源 原 阅
渊皂早 辕 蕴冤
月粤
渊皂早 辕 蕴冤
外植体数量
灶怎皂遭藻则 燥枣
藻曾责造葬灶贼泽
愈伤组织形成率
则葬贼藻 燥枣 糟葬造造怎泽
蚤灶凿怎糟贼蚤燥灶渊豫 冤
园 园 园 源缘 园郾 园园园 园郾 缘 园郾 缘 源缘 圆圆郾 圆圆糟凿藻园 园郾 缘 员 源缘 圆源郾 源源遭糟凿园 园郾 缘 猿 源缘 圆园郾 园园糟凿藻园 员 园郾 缘 源缘 猿缘郾 缘缘遭糟凿园 员 员 源缘 源园郾 园园遭园 员 猿 源缘 苑员郾 员员葬员 园 园郾 缘 源缘 员猿郾 猿猿凿藻员 园 员 源缘 员缘郾 缘远凿藻员 园 猿 源缘 员缘郾 缘远凿藻圆 园 园郾 缘 源缘 员员郾 员员藻圆 园 员 源缘 圆圆郾 圆圆糟凿藻圆 园 猿 源缘 员苑郾 苑愿凿藻
摇 摇 注院数据为接种 源缘凿后统计袁 均为平均值曰同列数据后不同小写字
母表示处理间在 缘豫水平上差异显著渊邓肯式多重分析冤袁下表同遥
摇 摇 晕燥贼藻院 阅葬贼葬 憎藻则藻 皂藻葬灶 葬灶凿 贼葬噪藻灶 葬枣贼藻则 糟怎造贼怎则藻凿 源缘凿曰 阅葬贼葬泽 枣燥造造燥憎藻凿 遭赠
凿蚤枣枣藻则藻灶贼 造燥憎藻则糟葬泽藻 造藻贼贼藻则泽 蚤灶 贼澡藻 泽葬皂藻 糟燥造怎皂灶 皂藻葬灶 灶燥 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼 凿蚤枣枣藻则藻灶糟藻
葬贼 缘豫 造藻增藻造 渊阅怎灶糟葬灶爷泽 皂怎造贼蚤责造藻 则葬灶早藻 贼藻泽贼冤 援 栽澡藻 泽葬皂藻 葬泽 枣燥造造燥憎蚤灶早 贼葬遭造藻泽援
愿缘圆
摇 圆 期 猕猴桃胚乳再生植株体系的优化
养基中袁接种后 员园凿袁愈伤组织增殖旺盛袁仍为乳白色
或淡黄色曰但在 源缘凿后袁愈伤组织的增殖速度下降并趋
于稳定袁而此种愈伤组织保持于原培养基或转入同样
培养基中袁它们无器官分化袁并在转入新培养基初期有
一定的增殖效应遥
对比 圆袁源 原 阅 和 晕粤粤 对胚乳愈伤组织的诱导作
用袁发现 圆袁源 原 阅对胚乳愈伤组织的诱导效果较显著袁
并且其诱导的愈伤组织增殖能力强袁而且不分化遥 在
圆袁源 原 阅 与 月粤 组合中袁月粤 高浓度组渊猿皂早 辕 蕴冤胚乳愈
伤组织的诱导率较高袁而低 月粤 浓度下渊园郾 缘皂早 辕 蕴 和
员皂早 辕 蕴冤袁诱导率较低遥
圆郾 圆摇 植物生长调节剂对胚乳愈伤组织分化的影响
在含有 圆袁源 原 阅 的培养基上袁胚乳愈伤组织不分
化遥 胚乳愈伤组织在转入分化培养后出现了明显增
大袁但培养 缘凿 后袁增殖作用下降并趋于稳定遥 在 员园凿
左右袁组织块开始转绿袁愈伤组织质地从较疏松转为致
密遥 猿园凿左右在不同分化培养基上出现了不同的器官
分化袁只是在不同培养基中愈伤组织的分化频率和平
均每个外植体的芽数不同袁猿园凿 耀 源缘凿 是愈伤组织分化
的高峰遥 远园凿时袁分化的不定芽逐渐形成完整的小植
株袁植株的叶片较小袁颜色深绿袁节间较短遥
猕猴桃胚乳愈伤组织在分化过程中袁在不含 月粤
或较低浓度 月粤渊员滋皂燥造 辕 蕴冤的培养基上袁没有出现不定
芽的分化渊表 圆冤遥 月粤浓度为 缘滋皂燥造 辕 蕴时袁有明显促进
不定芽分化的作用遥 同时袁高浓度的 晕粤粤渊园郾 缘滋皂燥造 辕
蕴冤对不定芽的分化有较明显的抑制作用遥
猕猴桃愈伤组织形成不定根的过程相对容易遥 在
低浓度 晕粤粤和 月粤 下袁其不定根的发生较多曰过高浓
度的 月粤和 晕粤粤添加袁不定根形成明显受到抑制遥
表 圆摇 植物生长调节剂对猕猴桃胚乳愈伤组织分化的影响
栽葬遭造藻 圆摇 耘枣枣藻糟贼泽 燥枣 责造葬灶贼 早则燥憎贼澡 则藻早怎造葬贼燥则泽 燥灶 燥则早葬灶 枣燥则皂葬贼蚤燥灶 枣则燥皂 贼澡藻 糟葬造造怎泽 凿藻则蚤增藻凿 枣则燥皂 藻灶凿燥泽责藻则皂 燥枣 粤糟贼蚤灶蚤凿蚤葬
植物生长调节剂
责造葬灶贼 早则燥憎贼澡 则藻早怎造葬贼燥则泽
晕粤粤
渊滋皂燥造 辕 蕴冤
月粤
渊滋皂燥造 辕 蕴冤
外植体数
灶怎皂遭藻则 燥枣 藻曾责造葬灶贼泽
不定芽分化率
则葬贼藻 燥枣 泽澡燥燥贼
枣燥则皂葬贼蚤燥灶 渊豫 冤
平均不定芽数
灶怎皂遭藻则 燥枣 泽澡燥燥贼
责藻则 藻曾责造葬灶贼
不定根分化率
则葬贼藻 燥枣 则燥燥贼
枣燥则皂葬贼蚤燥灶渊豫 冤
平均不定根数
灶怎皂遭藻则 燥枣 则燥燥贼
责藻则 藻曾责造葬灶贼
园 园 圆源 园郾 园园 园郾 园园 园郾 园园 园郾 园园
园郾 员 员 圆源 园郾 园园 园郾 园园 缘园郾 园园葬 圆郾 员苑 依 员郾 员怨葬
园郾 员 缘 圆源 圆怨郾 员苑葬 圆郾 苑员 依 园郾 苑远葬 猿猿郾 猿猿葬 圆郾 苑缘 依 园郾 苑员葬
园郾 员 员园 圆源 圆缘郾 园园葬 圆郾 远苑 依 员郾 园猿葬 员远郾 远苑葬 猿郾 园园 依 园郾 愿圆葬
园郾 缘 员 圆源 园郾 园园 园郾 园园 圆怨郾 员苑葬 圆郾 员源 依 员郾 园苑葬
园郾 缘 缘 圆源 愿郾 猿猿遭 员 依 园郾 园园遭 猿猿郾 猿猿葬 员郾 远猿 依 园郾 苑源葬
园郾 缘 员园 圆源 园郾 园园 园郾 园园 愿郾 猿猿遭 圆郾 缘园 依 园郾 苑员葬
圆郾 猿摇 培养基种类对猕猴桃胚乳愈伤组织分化的影响
酝杂尧员 辕 圆酝杂和 月缘 猿 种不同基本培养基对猕猴桃胚
乳愈伤组织的分化有影响遥 将 猿园凿 左右的猕猴桃胚乳
愈伤组织转入含 园郾 员滋皂燥造 辕 蕴 晕粤粤 垣 缘滋皂燥造 辕 蕴 月粤 垣圆园早 辕
蕴蔗糖的 猿种基本培养基中培养 源缘凿后袁金桃胚乳愈伤
组织在 酝杂和 员 辕 圆酝杂培养基中都有较高的器官分化率袁
而在 月缘 培养基中分化率低曰就不定芽和不定根的发生
频率而言袁其在 员 辕 圆酝杂 中最高遥 这可能与 晕匀 垣源 辕 晕韵 原猿
比例和盐浓度有关遥 基本培养基不仅影响不定芽形成
率袁而且影响器官形成的数量渊表 猿冤遥 最高的平均不定
芽数渊圆郾 愿猿个 辕外植体冤也是出现在 员 辕 圆酝杂 培养基上遥
因此袁对不定芽形成而言袁员 辕 圆酝杂 效果最好遥 员 辕 圆酝杂 较
低的盐浓度和 员颐 员的 晕匀 垣源 辕 晕韵 原猿 有利于不定芽和不定
根的形成遥
表 猿摇 不同培养基对猕猴桃胚乳愈伤组织分化的影响
栽葬遭造藻 猿摇 耘枣枣藻糟贼泽 燥枣 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 皂藻凿蚤葬 燥灶 燥则早葬灶 枣燥则皂葬贼蚤燥灶 枣则燥皂 贼澡藻 糟葬造造怎泽 凿藻则蚤增藻凿 枣则燥皂 藻灶凿燥泽责藻则皂 燥枣 粤糟贼蚤灶蚤凿蚤葬
培养基
皂藻凿蚤葬
外植体数
灶怎皂遭藻则 燥枣 藻曾责造葬灶贼泽
不定芽分化率
则葬贼藻 燥枣 泽澡燥燥贼
枣燥则皂葬贼蚤燥灶渊豫 冤
平均不定芽数
灶怎皂遭藻则 燥枣 泽澡燥燥贼 责藻则
藻曾责造葬灶贼
不定根分化率
则葬贼藻 燥枣 则燥燥贼
枣燥则皂葬贼蚤燥灶渊豫 冤
平均不定根数
灶怎皂遭藻则 燥枣 则燥燥贼
责藻则 藻曾责造葬灶贼
酝杂 员愿 猿猿郾 猿猿 员郾 远苑 依 园郾 愿圆 葬 猿愿郾 愿怨 圆郾 园园 依 园郾 愿圆 葬
员 辕 圆酝杂 员愿 猿猿郾 猿猿 圆郾 愿猿 依 园郾 苑缘 葬 猿猿郾 猿猿 圆郾 愿猿 依 员郾 猿猿 葬
月缘 员员 怨郾 园怨 圆郾 园园 依 园郾 园园 葬 怨郾 园怨 圆郾 园园 依 园郾 园园葬
怨缘圆
核摇 农摇 学摇 报 圆远 卷
圆郾 源摇 蔗糖浓度对猕猴桃胚乳愈伤组织分化的影响
蔗糖浓度对猕猴桃胚乳愈伤组织的器官分化有显
著的影响渊表 源冤遥 在 圆园早 辕 蕴 的蔗糖浓度下袁猕猴桃金
桃胚乳愈伤组织均有较好的分化效果遥 而随着蔗糖浓
度的升高袁胚乳愈伤组织的分化作用受到抑制袁说明较
高浓度渊猿园尧源园 和 缘园早 辕 蕴冤的蔗糖不利于其器官形成袁
可能是培养基中渗透压不适从而影响了器官的分化遥
表 源摇 蔗糖浓度对猕猴桃胚乳愈伤组织分化的影响
栽葬遭造藻 源摇 耘枣枣藻糟贼泽 燥枣 泽怎糟则燥泽藻 糟燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶 燥灶 燥则早葬灶 枣燥则皂葬贼蚤燥灶 枣则燥皂 贼澡藻 糟葬造造怎泽 凿藻则蚤增藻凿 枣则燥皂 藻灶凿燥泽责藻则皂 燥枣 粤糟贼蚤灶蚤凿蚤葬
蔗糖浓度
泽怎糟则燥泽藻
糟燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶渊早 辕 蕴冤
外植体数
灶怎皂遭藻则 燥枣
藻曾责造葬灶贼泽
不定芽分化率
则葬贼藻 燥枣 泽澡燥燥贼
枣燥则皂葬贼蚤燥灶渊豫 冤
平均不定芽数
灶怎皂遭藻则 燥枣 泽澡燥燥贼
责藻则 藻曾责造葬灶贼
不定根分化率
则葬贼藻 燥枣 则燥燥贼
枣燥则皂葬贼蚤燥灶渊豫 冤
平均不定根数
灶怎皂遭藻则 燥枣 则燥燥贼
责藻则 藻曾责造葬灶贼
员园 员圆 员远郾 远苑 遭 圆郾 园园 依 园郾 园园 葬 猿猿郾 猿猿 遭 猿郾 苑缘 依 园郾 缘园 葬
圆园 员愿 猿猿郾 猿猿 葬 圆郾 愿猿 依 园郾 苑缘 葬 猿猿郾 猿猿 遭 圆郾 愿猿 依 员郾 猿猿 葬遭
猿园 员愿 缘郾 缘远 糟 员郾 园园 依 园郾 园园 葬 圆圆郾 圆圆 糟 员郾 苑缘 依 园郾 缘园 遭
源园 员愿 缘郾 缘远 糟 员郾 园园 依 园郾 园园 葬 远员郾 员员 葬 圆郾 圆苑 依 员郾 园员 遭
缘园 员苑 园郾 园园 园郾 园园 源员郾 员愿 葬 猿郾 园园 依 园郾 愿圆 葬遭
圆郾 缘摇 暗处理对猕猴桃愈伤组织器官形成的影响
试验发现袁适当的暗培养处理能促进猕猴桃胚乳
愈伤组织的生长曰但在暗培养条件下袁猕猴桃胚乳愈伤
组织都没有不定芽形成遥 当暗处理结束后转入光下
缘凿左右袁胚乳愈伤组织的颜色由白色或淡黄色逐渐加
深袁然后转绿遥 一般经过暗处理后袁胚乳愈伤组织在转
入光下 员园凿左右开始出现器官分化遥
表 缘摇 暗培养时间对猕猴桃胚乳愈伤组织分化的影响
栽葬遭造藻 缘摇 耘枣枣藻糟贼泽 燥枣 凿葬则噪 贼则藻葬贼皂藻灶贼 燥灶 燥则早葬灶 枣燥则皂葬贼蚤燥灶 枣则燥皂 贼澡藻 糟葬造造怎泽 凿藻则蚤增藻凿 枣则燥皂 藻灶凿燥泽责藻则皂 燥枣 粤糟贼蚤灶蚤凿蚤葬
暗培养时间
凿葬则噪 糟怎造贼怎则藻 贼蚤皂藻 渊凿冤
外植体数
灶怎皂遭藻则 燥枣 藻曾责造葬灶贼泽
不定芽分化率
则葬贼藻 燥枣 泽澡燥燥贼
枣燥则皂葬贼蚤燥灶渊豫 冤
平均不定芽数
灶怎皂遭藻则 燥枣 泽澡燥燥贼
责藻则 藻曾责造葬灶贼
不定根分化率
则葬贼藻 燥枣 则燥燥贼
枣燥则皂葬贼蚤燥灶渊豫 冤
平均不定根数
灶怎皂遭藻则 燥枣 则燥燥贼
责藻则 藻曾责造葬灶贼
园 员愿 猿猿郾 猿猿 遭 圆郾 愿猿 依 园郾 苑缘 葬 猿猿郾 猿猿 遭 圆郾 猿猿 依 员郾 园猿 葬遭
苑 员愿 远员郾 员员 葬 猿郾 愿圆 依 员郾 源园 葬 缘缘郾 缘缘 葬 猿郾 远园 依 员郾 员苑 葬
员源 圆园 圆缘郾 园园 遭 圆郾 园园 依 员郾 圆圆 葬 圆缘郾 园园 遭 圆郾 园园 依 园郾 苑员 遭
圆员 员愿 员员郾 员员 糟 圆郾 园园 依 员郾 源员 葬 员远郾 远苑 糟 员郾 猿猿 依 园郾 缘愿 遭
图 员摇 胚乳培养再生植株及种子实生苗细胞核 阅晕粤 含量比较
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摇 摇 如表 缘 所示袁暗培养 苑凿后转入光下培养的效果最
好袁此时猕猴桃胚乳愈伤组织的分化率和平均不定芽
数都有较大的提高袁分化率为 远员郾 员员豫 袁平均不定芽数
为 猿郾 愿圆 个遥 但随着暗培养时间的增加袁胚乳愈伤组织
活性下降袁组织块生长停止袁其不定芽的分化率也开始
下降遥
圆郾 远摇 胚乳愈伤组织诱导苗的倍性鉴定
应用流式细胞仪袁以来源于种子实生植株的叶片
为对照袁鉴定了胚乳愈伤诱导再生植株的倍性遥 如图
员 所示袁再生植株与对照植株存在三倍性关系遥 图 员 原
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粤为猕猴桃金桃胚乳培养再生植株渊猿晕冤袁其峰值出现
点为 远远郾 园源袁图 员 原 月 为实生苗对照 渊圆晕冤袁峰值为
源源郾 远怨袁恰为三倍性和二倍性关系遥
猿摇 讨论
本试验中植物生长调节剂对猕猴桃胚乳愈伤组织
的诱导有显著效果遥 在使用的 猿 种植物生长调节剂
中袁圆袁源 原 阅 的诱导效果最为显著袁诱导得到的愈伤组
织的增殖能力旺盛袁而分化能力较弱袁这同以前的报道
相似咱员圆暂 袁可能是 圆袁源 原 阅在细胞团内残留袁抑制了愈伤
组织向胚状体或不定芽的分化遥 因此袁经 圆袁源 原 阅 诱
导得到猕猴桃胚乳愈伤组织后袁要提高愈伤组织的不
定芽再生能力袁需要经过一个无 圆袁源 原 阅 参与的分化
诱导过程遥 在猕猴桃胚乳愈伤组织的分化过程中袁没
有加入水解酪蛋白渊悦匀冤或水解乳蛋白渊蕴匀冤之类的有
机物袁也能诱导出苗袁可见该类有机物对猕猴桃的胚乳
培养并不是绝对必需的遥
糖类是植物组织培养过程中不可缺少的营养成
分袁糖的不同种类和不同浓度是影响植物胚乳培养成
功与否的关键之一遥 糖类不仅是培养基中主要的碳
源袁也是培养基中重要的渗透调节物质袁对胚乳植株的
诱导有重要作用遥 蔗糖是组织培养中常用的糖类袁研
究发现高浓度的蔗糖能使生长下降咱员源暂 遥 本试验发现袁
圆园早 辕 蕴的蔗糖浓度条件下袁猕猴桃胚乳愈伤组织的器
官分化效果最好袁而随着蔗糖浓度的增加袁猕猴桃胚乳
愈伤组织的分化受到明显抑制袁不利于其器官分化遥
推测可能与胚乳是一种均质的薄壁细胞组织袁完全没
有维管成分的分化袁在较低的渗透压环境下其生理功
能能正常进行曰但当培养基中的渗透压过大时袁将影响
其细胞内电解质平衡导致其生理功能受阻袁影响到其
分化作用遥 毕静华等咱员缘暂在野生阔叶猕猴桃离体再生
过程中袁也发现 圆园早 辕 蕴 的蔗糖浓度对其器官形成有显
著促进效果袁当蔗糖浓度大于 猿园早 辕 蕴后袁其分化效果明
显下降遥
本试验结果表明袁暗培养预处理可以促进猕猴桃胚
乳愈伤组织的生长和器官形成袁其中暗培养 苑凿 效果最
好遥 暗培养处理对不定芽再生的影响在其他植物中也
有报道咱员远暂 袁其原因可能是在暗培养条件下袁生长素的降
解过程较慢咱员苑暂 袁有助于调节外植体内生长素和细胞分
裂素之间的比例袁从而有助于猕猴桃胚乳愈伤组织的器
官形成遥 黑暗条件下袁由细胞分裂素调控的叶绿素合成
相关 皂砸晕粤合成显著减少咱员愿暂 袁在愈伤组织的不同区域
中植物光敏色素的分布存在差异咱员怨暂 袁这可能是影响愈
伤组织分化的重要因素遥 而在愈伤组织中促进细胞增
殖的乙二醛酶 原 员 活性下降咱圆园暂 袁使得其增殖作用下降袁
也是可能促进愈伤组织器官形成的重要原因遥
源摇 结论
在猕猴桃金桃的胚乳愈伤组织诱导过程中袁圆袁源 原
阅的诱导作用最显著袁培养基 员 辕 圆酝杂 垣 员皂早 辕 蕴 圆袁源 原 阅
垣 猿皂早 辕 蕴 月粤 垣 圆园早 辕 蕴 蔗糖是最佳的诱导培养基遥 从
愈伤组织分化不定芽袁需要一个不含 圆袁源 原 阅 的培养
过程遥 而在诱导不定芽分化过程中袁高浓度的 晕粤粤对
不定芽分化有一定抑制作用袁当 月粤 浓度为 缘滋皂燥造 辕 蕴
时袁最适合不定芽的分化遥 同时低浓度的蔗糖渊圆园早 辕
蕴冤和适当时间的暗培养渊苑凿冤能显著促进不定芽的形
成遥 对不定芽的分化而言袁胚乳愈伤组织暗培养 苑凿
后袁在 员 辕 圆酝杂 垣 园郾 员滋皂燥造 辕 蕴 晕粤粤 垣 缘滋皂燥造 辕 蕴 月粤 垣 圆园
早 辕 蕴蔗糖的培养基上分化率最高遥
参考文献院
咱 员 暂摇 赵胜建援三倍体无核葡萄育种途径及研究展望咱 允暂 援河北农业科
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源愿 原 缘员
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咱员圆暂摇 桂耀林袁徐延玉袁顾淑荣袁刘淑琼援猕猴桃胚乳培养中的胚胎发生
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细胞的保护作用及其机制咱 允暂 援 齐鲁医学杂志袁 圆园园缘袁 圆园渊缘冤院
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