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In vitro Propagation of Senecio cineraria cv. Silver Dust

细裂银叶菊叶的组织培养繁殖研究



全 文 :热带亚热带植物学报 2004,12(5):471-472
Journal ofTropical and SubtropicalBotany
细裂银叶菊叶的组织培养繁殖研究
龚 伟, 胡庭兴,宫渊波,余 峥,王米力,辜云杰
(四川农业大学林学园艺学院,四川 稚安 625014)
摘要 :以细裂银叶菊叶片为材料,进行愈伤组织的诱导、分化培养及生根诱导培养。结果表明:叶片愈伤组织的诱导以
MS+2,4一D 2 mg L。+BA l mg L。 +NAA 0.1 mg L一。培养基较好:分化培养以MS t BA 0.5 mg L-。+NAA 0.1 mg L。为
好;生根诱导以 1/2MS+NAA 0.0l mg L-。效果最好。
关键词:细裂银叶菊;组织培养:植株再生
中图分类号:Q943.1 文献标识码:A 文章编号:l005—3395(2004)05—047l一02
In vitro Propagation of Senecio cineraria cV Silver Dust
GONG Wei,HU Ting-xing,GONG Yuan-bo,YU Zheng,WANG Mi-1 i,GU Yun-j ie
(Colege of Forestry and Horticulture,Swhuan Agricuhural University,Ya’an 625014,China)
Abstract:The leaves ofSenecio cineraria CV.Silver Dust were used to study the callus induction,shoots induction
and rooting. It was shown that MS medium supplemented with 2 mg L~2,4一D+I mg L~BA+0.1 mg L。 NAA was
good for callus induction,while MS medium containing 0.5 mg L~BA+0.1 mg L~NAA,half-strength MS medium
containing 0.0 1 mg L NAA gave best results for shoot induction and for rooting.respectively.
Key words:Senecio cineraria CV.Silver Dust;Tissue culture;Plant regeneration
细裂银叶菊(Senecio cineraria CV.Silver Dust)为
菊科千里光属,是一种重要的园林观叶植物。其株
高约 l5—30 cm,叶厚,叶缘呈不规则深裂或浅裂,全
株密被白色绒毛,犹如皑皑 白雪披被,属观叶植物
中叶色最独特的一种,观赏价值较高,颇受喜爱Ⅲ。
目前,细裂银叶菊主要靠播种和扦插繁殖,受季节
和材料限制而导致繁殖系数低、速度较慢 ,不能满
足市场的需求。采用组织培养方式可能是获得优质
细裂银叶菊苗木的有效途径之一,而有关细裂银叶
菊叶的组织培养尚未见报道。本文用细裂银叶菊叶
进行愈伤组织诱导、植株再生研究,为细裂银叶菊
快繁提供科学资料。
灵的混合液漂洗 l0一l5 min,流水冲洗 1 h。在无菌条
件下,用 75%酒精消毒 0.5 rain,0.1%升汞(HgCl2)处
理 6 min左右,无菌水冲洗 5-6次后,将叶片切成大
小为0.5 cm×O.5 cm—1.0 cm×1.0 cm的小块,接种于
愈伤组织诱导培养基上,40 d后统计诱导率。把诱导
出的愈伤组织接种于分化培养基上培养,观察其分
化与增殖情况。将所获的健壮无根单苗接种于生根
培养基上诱导生根,30 d后统计生根情况。
以 MS为基本培养基,生长调节剂采用 2,4.D、
BA和 NAA,每种培养基均附含 O.7%的琼脂和 3%
的蔗糖(其中生根培养基为 1.5%1,pH 5.8—6.0。培养
条件 :培养 室温 度为 25±2。C,光照强度 1 500—
2 000 lx,光照 12 h d~。
1材料和方法
2结果和分析
供试材料为盆栽细裂银叶菊,在 2月下旬,选
取植株生长健壮,无病虫害的幼嫩叶片。将叶片用 2.1愈伤组织的诱导
自来水冲洗数次后,用含 1%的洗衣粉和 1%的消洗 将叶片接种于愈伤组织诱导培养基上培养。
收稿 日期 :2003—06—17 接受 日期 :2003—10—08
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热带亚热带植物学报 第 12卷
12 d后叶片边缘便开始膨大形成黄白色的愈伤组织;
30 d后愈伤组织开始迅速生长,40 d时在培养基(1)
MS+2,4一D 1 mgL一 +BA 0.5mgL一 +NAA 0.1 mgL‘ :
(2)MS+24一D 1 mgL +BA 1 mgL- +NAAO.1 mgL~;
(3)MS+2,4一D 2 mg L‘ +BA 0.5 mg L‘ +NAA
0.1 mg L‘ 和(4)MS+2,4一D 2 mg L‘ +BA 1 mg L +
NAA 0.1 mg L 中的诱导率分别为 35.2%、42.7%、
67.4%、86.3%;前两种培养基中的愈伤组织生长较
慢且较小;后两种中的生长较快且较大。
可以看出,培养基中附加不同浓度的 2.4一D、
BA与 NAA,愈伤组织的诱导率以及生长速度和大
小均有一定的差异,随着 2,4一D和 BA浓度的升高
其诱导率逐渐升高,而且愈伤组织的生长速度也随之
加快 。2.0 mg L’2,4一D、1.0 mg L。BA与 0.1 mg L。
NAA组合对叶片的愈伤组织诱导率最高,且生长
迅速,疏松成颗粒状。
2.2丛生芽的诱导 一
将诱导出的愈伤组织转入增殖培养基上培养,
愈伤组织继续增大,20 d后,黄 白色的愈伤组织逐
渐转绿,分化出丛生芽。待愈伤组织完全分化出丛生
芽后,分成芽数相近的芽丛进行增殖培养。芽生长与
分化较迅速,30 d可继代一次,在培养基(4)MS+BA
0.5 mg L~+NAA 0.1 mg L一;(5)MS+BA 1.0 mg L。+
NAA 0.1 mg L- ;(6)MS+BA 1.5 mg L +NAA
0.1 mgL 中的增殖倍数(只统计苗高大于 1.0 cm的
芽)分别为 9.2、4.5、0;培养基(4)上的丛生芽分化的
芽多且生长适中,而培养基(5)和(6)上的芽少且矮
小。
可看出,随着 BA浓度的增加,芽的增殖倍数却
下降,说明高浓度的BA抑制了丛生芽的形成和芽
的高径生长。0.5 mg L。的BA有利于愈伤组织的生
长和分化,产生的有效苗也最多。
2.3不定根的诱导
将生长健壮的无根单苗接种于生根培养基上,
6 d后芽苗基部开始膨大突起,12 d后开始形成白
色小根。在 1/2MS或 1/2MS分别附加 0.0l、0.05、
0.1 mg L。NAA的培养基上诱导生根 ,30 d后生根
率分别为 81.3%、87.5%、78.2%、75.1%;平均根数分
别为 4.3条、5.2条、3.7条、3.4条。在不含 NAA或
含0.O1 mg L。NAA的培养基上的不定根整齐均匀,
含 0.05和 0.1 mg L。NAA的培养基上的不定根生
长慢且不均匀。
可以看出,0—0.1 mgL。的NAA均能诱导生根,
且生根率都在 75%以上。但不同浓度的NAA对根的
诱导有一定的差异。当NAA浓度为 0.O1 mgL一时,
对无根单芽的生根诱导效果最好,并且生根较快,
根多,整齐而均匀。
2.4试管苗的移栽
将生根瓶苗,在温室大棚 中保湿预培养 2 d
后,洗去根部培养基,移栽到富含有机质的营养袋
中,用地膜覆盖保湿 30 d后,统计其成活率,结果达
90%以上 。
3结论
本试验 以细裂银叶菊叶片为外植体在 MS+
2,4一D 2 mg L。+BA l mg L。+NAA 0.1 mg L。培养基
中进 行愈伤 组织的诱导 ,40 d后的诱导率 可达
86.3%;分化培养中将芽丛在 MS+BA 0.5 mg L。+
NAA0.1 mgL。上培养,30 d可继代一次,增殖倍数
可达 9.2倍;将健壮的无根单芽接种于 1/2MS+
NAA 0.O1 mgL。上进行生根诱导,30 d生根率可达
87.5%,且根多、生根整齐,生根苗移栽成活率高,生
长正常。本试验研究结果符合组培快繁的要求,可
以进行大规模的工厂化生产。
参考文献
[1]薛聪贤.景观植物实用图鉴 6观叶植物 225种 [M].杭州:浙江
科学技术出版社.2000.
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